專利名稱：一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種山茱萸的發(fā)酵加工新方法，特別涉及利用山茱萸提取熊 果酸的方法，屬于食品化學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
山茱萸為山茱萸禾斗植物Co272M 0/7Yci/7a7j's Sieb. et Zucc，是一種重要 的野生資源，果其肉味酸、澀，微溫，歸肝腎經(jīng)，有補益肝腎、澀精固脫的 功效，主治眩暈耳鳴、腰膝酸痛、陽痿遺精、遺尿尿頻、大汗虛脫、內(nèi)熱消 渴，是中醫(yī)臨床常用的名貴傳統(tǒng)抗衰老藥物之一。山茱萸在我國浙江、河南、 山西、四川等地均有分布和栽培，資源豐富，市場廣闊，其市場開發(fā)經(jīng)濟效 益可觀。
熊果酸是山茱萸果實中一種重要化學(xué)成分，平均含量0.234%。熊果酸具 有廣泛的生物活性，包括抗癌、對肝的損傷保護、抗炎、抗菌、抗氧化等， 是山茱萸果實中的主要活性成分之一，其提取工藝研究及新用途開發(fā)是本領(lǐng) 域研究的熱點。
在山茱萸中多糖也是重要的活性物質(zhì)，含量較高。在制備以熊果酸為主 要活性成分的山茱萸提取物中，多糖的去除是重要的步驟，目前多采用大孔 樹脂層析等方法；但該種層析方法，不易于工廠化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，該方法具有成本低、工藝簡單、易于工業(yè)化生產(chǎn)、環(huán)境友好等特點。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種含熊果酸的山茱萸提取物的制 備方法，包括以下步驟
1) 、將山茱萸粉與水相混合，然后接種山茱萸粉重量2% 4%的葡萄酒
酵母菌進行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為25 35'C，發(fā)酵時間4d 8d;得發(fā)酵液；
2) 、在發(fā)酵液中加入蒸餾水后于50 7(TC水浴0.5 2h，然后在50 70'C 和30 40KHZ的頻率下超聲波處理1 3次，每次的超聲波處理時間為10 20min;
3) 、過濾步驟2)的所得物，在所得的濾渣中加入體積濃度為75% 95% 乙醇，于40 60。C和30 40KHZ的頻率下超聲波萃取5 15min;然后抽濾濃 縮，得濃縮液；
4) 、濃縮液用石油醚萃取，取下層液進行濃縮和干燥，得到含熊果酸的 山茱萸提取物。
作為本發(fā)明的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法的改進步驟l)中每 g山茱萸粉溶于0.5 3ml水中。
作為本發(fā)明的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法的進一步改進步驟
1) 中搖床發(fā)酵的轉(zhuǎn)速為110rpm 150rpm。
作為本發(fā)明的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法的進一步改進步驟
2) 中的蒸餾水與步驟l)中的山茱萸粉的體積重量比為20 60ml/g。
作為本發(fā)明的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法的進一步改進步驟
3) 中的乙醇與步驟l)中的山茱萸粉的體積重量比為20 60ml/g。
作為本發(fā)明的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法的進一步改進步驟4)中石油醚與濃縮液的體積1 2: 3。
在本發(fā)明中，葡萄酒酵母菌可選用Saccharomyces cerevisiae
ATCC26497 ， Saccharomyces cerevisiae ATCC9080 ， 或Saccharomyces
cerevisiae CICC1012等葡萄酒酵母菌。
本發(fā)明最終所得的含熊果酸的山茱萸提取物為片狀固體。 本發(fā)明屬于一種山茱萸的發(fā)酵加工新方法，其技術(shù)方案主要是①利用
了葡萄酒酵母菌發(fā)酵除糖，從而除去原料山茱萸中的可溶性糖；②利用熊果
酸溶于乙醇不溶于水、石油醚的性質(zhì)，采用水及石油醚除雜，從而提高產(chǎn)品
中熊果酸的純度。
在本發(fā)明中，步驟l)中發(fā)酵容器的容量選用反應(yīng)體系體積的2 4倍。 本發(fā)明的方法與傳統(tǒng)方法相比較，優(yōu)點在于-
(1) 本發(fā)明采用發(fā)酵法除糖，方法簡便，易于操作；且能將多糖物質(zhì)通 過發(fā)酵轉(zhuǎn)化為本工藝可利用的酒精；由于酒精可回收利用，因此本發(fā)明的方 法環(huán)境友好，無污染，還能降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明所得的含熊果酸的山茱萸 提取物主要用于保健食品開發(fā)領(lǐng)域。
現(xiàn)有技術(shù)中的大孔樹脂除糖法雖然也能夠達到較好的除糖效果，但層析 技術(shù)是目前大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)上不易操作的，且在食品工業(yè)方面要求極嚴格； 因此不適于生產(chǎn)含熊果酸的山茱萸提取物。
(2) 本發(fā)明較傳統(tǒng)的層析除糖技術(shù)更易于工業(yè)化操作。
(4) 本發(fā)明以廉價、無毒的乙醇為萃取劑，且酒精可以循環(huán)使用，降低 了生產(chǎn)成本。
(5) 本在發(fā)明中過濾步驟2)的所得物后，所得的濾液中含有少量酒精，可回收利用；能進一步降低生產(chǎn)成本。
(6)本發(fā)明在二次除雜過程中使用石油醚，其極性小，沸點低，除雜效 果明顯，容易分離，不易殘留。
具體實施例方式
實施例l、 一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，依次進行以下步驟-
1) 、取山茱萸粉45g與25ml水均勻混合，然后接種1.5g的葡萄酒酵母菌進 行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為27。C，搖床轉(zhuǎn)速120rpm，發(fā)酵時間6d;得發(fā)酵液。
2) 、在發(fā)酵液中加入2500ml蒸餾水，5(TC水浴lh;然后在50。C下超聲波 (頻率:30 40KHZ)處理2次，每次處理15min。
3) 、過濾步驟2)的所得物，棄去濾液(此濾液中含有酒精，可回收利用)； 在所得的濾渣中加入2500ml體積濃度為95。/。乙醇，于50。C超聲波(頻率30 40KHZ)萃取10min。然后，將所得的溶液過濾，棄去濾渣；將濾液75 85°。 減壓濃縮，直至為250ml;得濃縮液。
4) 、將上述濃縮液均勻分裝入兩個250ml分液漏斗中；對每個分液漏斗均 進行如下操作加入63ml石油醚，搖勻，靜置10min，棄去上層液，所得下層 液60'C減壓濃縮至糊狀，所得糊狀液體8(TC減壓干燥4h，得1.08g為片狀固體 的山茱萸提取物。
該山茱萸提取物中，熊果酸含量為10%。
實施例2、 一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，依次進行以下步驟: 1)、取山茱萸粉60g加入100ml水均勻混合，然后接種2.0g的葡萄酒酵母 菌進行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為3(TC，搖床轉(zhuǎn)速145rpm，發(fā)酵時間4d;得發(fā)酵液。
2) 、在發(fā)酵液中加入3000ml蒸餾水，60。C水浴0.5h;然后在6(TC下超聲 波(頻率30 40KHZ)處理2次，每次處理15min。
3) 、過濾步驟2)的所得物，棄去濾液；在所得的濾渣中加入3000ml體積 濃度為95%乙醇，于60。C超聲波(頻率30 40KHZ)萃取10min。然后，將 所得的溶液過濾，棄去濾渣；將濾液75'C減壓濃縮，直至為300ml;得濃縮液。
4) 、將上述濃縮液均勻分裝入兩個250ml分液漏斗中；對每個分液漏斗均 進行如下操作加入82ml石油醚，搖勻，靜置10min，棄去上層液，所得下層 液6(TC減壓濃縮至糊狀，所得糊狀液體80。C減壓干燥4h，得1.3g為片狀固體 的山茱萸提取物。
該山茱萸提取物中，熊果酸含量為10.2%。
實施例3、一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，依次進行以下步驟
1) 、取山茱萸粉75g加入130ml水均勻混合，然后接種2.5g的葡萄酒酵母 菌進行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為35'C，搖床轉(zhuǎn)速130rpm，發(fā)酵時間8d;得發(fā)酵液。
2) 、在發(fā)酵液中加入3500ml蒸餾水，60"C水浴2h;然后在7(TC下超聲波 (頻率:30 40KHZ)處理2次，每次處理15min。
3) 、過濾步驟2)的所得物，棄去濾液；在所得的濾渣中加入2500ml體積 濃度為85%乙醇，于55。C超聲波(頻率30 40KHZ)萃取10min。然后，將 所得的溶液過濾，棄去濾渣；將濾液75"C減壓濃縮，直至為250ml;得濃縮液。
4) 、將上述濃縮液均勻分裝入兩個250ml分液漏斗中；對每個分液漏斗均進行如下操作加入80ml石油醚，搖勻，靜置10min，棄去上層液，所得下層 液6(TC減壓濃縮至糊狀，所得糊狀液體8(TC減壓干燥4h，得1.4g為片狀固體 的山茱萸提取物。
該山茱萸提取物中，熊果酸含量為10%。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實施例。 顯然，本發(fā)明不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認為是本發(fā)明 的保護范圍。
權(quán)利要求
1、一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是包括以下步驟1)、將山茱萸粉與水相混合，然后接種山茱萸粉重量2％～4％的葡萄酒酵母菌進行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為25～35℃，發(fā)酵時間4d～8d；得發(fā)酵液；2)、在發(fā)酵液中加入蒸餾水后于50～70℃水浴0.5～2h，然后在50～70℃和30～40KHZ的頻率下超聲波處理1～3次，每次的超聲波處理時間為10～20min；3)、過濾步驟2)的所得物，在所得的濾渣中加入體積濃度為75％～95％乙醇，于40～60℃和30～40KHZ的頻率下超聲波萃取5～15min；然后抽濾濃縮，得濃縮液；4)、濃縮液用石油醚萃取，取下層液進行濃縮和干燥，得到含熊果酸的山茱萸提取物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是: 所述步驟l)中每g山茱萸粉溶于0.5 3ml水中。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是: 所述步驟l)中搖床發(fā)酵的轉(zhuǎn)速為110rpm 150rpm。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是: 所述步驟2)中的蒸餾水與步驟l)中的山茱萸粉的體積重量比為20 60ml/g。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是: 所述步驟3)中的乙醇與步驟l)中的山茱萸粉的體積重量比為20 60ml/g。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，其特征是: 所述步驟4)中石油醚與濃縮液的體積1 2: 3。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含熊果酸的山茱萸提取物的制備方法，包括以下步驟1)將山茱萸粉與水相混合，然后接種葡萄酒酵母菌進行搖床發(fā)酵，得發(fā)酵液；2)在發(fā)酵液中加入蒸餾水后水浴，然后進行超聲波處理；3)過濾步驟2)的所得物，在所得的濾渣中加入乙醇進行超聲波萃?。蝗缓蟪闉V濃縮，得濃縮液；4)濃縮液用石油醚萃取，取下層液進行濃縮和干燥，得到含熊果酸的山茱萸提取物。采用本發(fā)明的方法制備含熊果酸的山茱萸提取物，具有成本低、工藝簡單、易于工業(yè)化生產(chǎn)、環(huán)境友好等特點。
文檔編號C12P33/00GK101422502SQ20081016283
公開日2009年5月6日 申請日期2008年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月11日
發(fā)明者于海寧, 何國慶, 徐春根, 沈生榮, 胥伯濤, 暉 阮 申請人:浙江大學(xué)