專利名稱：：阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基、檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基、檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種微生物的檢測(cè)方法及所用的組合物。
背景技術(shù)：
：食品微生物安全是食品安全中的重中之重，阪崎腸桿菌05)^ero力s"ersahzah'力是乳制品中新發(fā)現(xiàn)的引起廣泛關(guān)注的一種致病菌。1961年，兩位英國科學(xué)家首次報(bào)道2例由阪崎腸桿菌引起的腦膜炎病例，隨后相繼在美國、希臘、荷蘭、冰島、加拿大、比利時(shí)等國家報(bào)道了新生兒阪崎腸桿菌感染事件。由此可見，由阪崎腸桿菌引發(fā)的嬰兒、早產(chǎn)兒腦膜炎、敗血癥及壞死性結(jié)腸炎散發(fā)和暴發(fā)的病例已在全球范圍內(nèi)相繼出現(xiàn)，在特定情況下，由阪崎腸桿菌引發(fā)疾病而致死的病例可高達(dá)40%50%。多份研究報(bào)告表明嬰兒配方奶粉是當(dāng)前發(fā)現(xiàn)致嬰兒、早產(chǎn)兒腦膜炎、敗血癥和壞死性結(jié)腸炎的主要感染渠道，故已引起世界各國政府部門的重視。繼美國FDA2002年從惠氏嬰兒配方奶粉中檢出阪崎腸桿菌后，2002年9月，香港從德國"美樂寶"奶粉中也檢出含有阪崎腸桿菌，2003年美國美贊臣公司又主動(dòng)召回在美國生產(chǎn)的一批檢出極微量阪崎腸桿菌的罐裝早產(chǎn)兒特殊配方奶粉。此后，配方奶粉中阪崎腸桿菌污染問題成為世界矚目的焦點(diǎn)。我國最近也先后從進(jìn)口和國產(chǎn)嬰幼兒配方奶粉中檢出了阪崎腸桿菌。2001年7月，福建省疾病預(yù)防控制中心從一箱進(jìn)口利樂包純牛奶中檢測(cè)到阪崎腸桿菌；2004年4月，我國安徽省阜陽地區(qū)連續(xù)發(fā)生了與"劣質(zhì)奶粉"有關(guān)的嬰兒營養(yǎng)狀況不良甚至導(dǎo)致死亡事件的報(bào)道，引起了國務(wù)院及相關(guān)部門的極大關(guān)注。2004年2月，世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織就嬰兒配方奶粉含阪崎腸桿菌這課題，共同召開專家會(huì)議。2004年3月在美國華盛頓召開的國際食品衛(wèi)生法典委員會(huì)第36次會(huì)議，也對(duì)阪崎腸桿菌的危險(xiǎn)性給予了特別的關(guān)注。WHO的代表介紹了FA0/WH0有關(guān)嬰幼兒配方食品中阪崎腸桿菌會(huì)議的討論情況，大會(huì)通過由加拿大牽頭組成起草工作組，修訂嬰幼兒食品的國際衛(wèi)生操作規(guī)范，并制定阪崎腸桿菌及相關(guān)微生物的標(biāo)準(zhǔn)。嬰兒是父母、國家未來的希望，每一個(gè)出生的嬰兒幾乎都需要喝奶粉，良好的嬰兒奶粉有助于嬰兒的健康成長。因此，對(duì)這種致病菌的監(jiān)測(cè)和檢驗(yàn)就顯得越來越重要。為有效控制病原的發(fā)生和擴(kuò)散，準(zhǔn)確及時(shí)的檢測(cè)手段是預(yù)防和控制阪崎腸桿菌傳播的關(guān)鍵。目前，阪崎腸桿菌傳統(tǒng)的檢測(cè)方法需要分離培養(yǎng)、鏡檢觀察、生化鑒定等多個(gè)步驟，檢測(cè)周期長，整個(gè)過程大約6-7天，且操作復(fù)雜，已不能滿足食品中病原菌快速檢測(cè)的現(xiàn)實(shí)需要，而且當(dāng)有其它的腸道菌群存在時(shí)會(huì)影響阪崎腸桿菌在傳統(tǒng)結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中的檢出。近年來，快速檢驗(yàn)法中的PCR法、金標(biāo)試紙法、免疫法和特異性的顯色生化鑒定技術(shù)等快速檢驗(yàn)方法，已在不斷得到擴(kuò)大應(yīng)用，使阪崎腸桿菌的快速檢測(cè)有了很大發(fā)展。但是這些技術(shù)也存在一定缺陷，如技術(shù)要求高，設(shè)備操作復(fù)雜，需要專業(yè)的技術(shù)人員進(jìn)行操作，以及檢測(cè)費(fèi)用昂貴等。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明旨在提供一種成本低廉并能快速檢測(cè)出阪崎腸桿菌的顯色培養(yǎng)基。本發(fā)明還提供了一種含有上述培養(yǎng)基的阪崎腸桿菌檢測(cè)試劑盒，以及使用檢測(cè)試劑盒檢測(cè)阪崎腸桿菌的方法。所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，其配方為蛋白胨820g、牛肉膏粉47g、氯化鈉47g、膽鹽1.02.0g、瓊脂1220g、顯色底物X-a-glucopyranoside0.050.5g、Na2C030.010.04g、檸檬酸鐵銨0.32.0g、硫代硫酸鈉0.32.0g。上述顯色培養(yǎng)基較優(yōu)選的配方為蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊脂15g、顯色底物X-a-glucopyranosideO.lg、Na2C030.02g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉1.0g。所述的阪崎腸桿菌檢測(cè)試劑盒，其組成為上述阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基、增菌液A和增菌液B。其中，增菌液A為高壓滅菌處理的緩沖蛋白胨水培養(yǎng)基(BP);增菌液B為高壓滅菌處理的改良月桂基硫酸鹽胰蛋白月^]湯(mLST)。所述的檢測(cè)阪崎腸桿菌的方法，其特征在于包括以下步驟'(1)制備顯色平板每1000mL蒸餾水或去離子水中加入29.6660.54g阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，攪拌加熱煮沸至完全溶解，12rC高壓滅菌15min，待冷至405(TC，倒平板，備用；(2)—步增菌將樣品置于增菌液A中，混合均勻后37。C培養(yǎng)16-20h;(3)二步增菌取一步增菌液lmL加入到9mL增菌液B中，混合均勻后44。C培養(yǎng)22-26h;(4)接種培養(yǎng)將二步增菌液接種顯色平板上，37。C培養(yǎng)22-26h;(5)結(jié)果分析若顯色平板上出現(xiàn)光滑、略突起、直徑13mm、邊緣整齊的藍(lán)綠色菌落，說明該樣品存在阪崎腸桿菌。本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足，從生物化學(xué)的角度出發(fā)，利用細(xì)菌特異性酶對(duì)其進(jìn)行快速檢測(cè)。首先，在分析阪崎腸桿菌特異性生化反應(yīng)的基礎(chǔ)上，篩選出細(xì)菌特異性酶，然后通過在分離培養(yǎng)基上加入細(xì)菌特異性酶的顯色底物，研制出顯色培養(yǎng)基，直接根據(jù)菌落顏色就可對(duì)菌株作出鑒定，同時(shí)結(jié)合高效的樣本前處理技術(shù)，建立特異性顯色生化檢測(cè)方法，用于阪崎腸桿菌的快速診斷和監(jiān)控，可大大節(jié)省檢測(cè)成本和時(shí)間，具有更廣泛的應(yīng)用前景。本發(fā)明通過篩選阪崎腸桿菌特異性酶及顯色底物，開發(fā)了阪崎腸桿菌的顯色培養(yǎng)基，克服了己有顯色培養(yǎng)基價(jià)格昂貴和傳統(tǒng)培養(yǎng)基特異性差等缺點(diǎn)；并通過對(duì)比各種標(biāo)準(zhǔn)方法的樣本前處理技術(shù)，建立了一套系統(tǒng)的阪崎腸桿菌顯色生化快速檢測(cè)方法，提高了檢測(cè)效率；所建立的阪崎腸桿菌顯色生化快速檢測(cè)方法，可對(duì)食品和環(huán)境中阪崎腸桿菌進(jìn)行全面、系統(tǒng)、準(zhǔn)確的檢測(cè)和鑒定，為微生物快速檢測(cè)提供了新的途徑。本發(fā)明所述的試劑盒配置簡單，檢測(cè)方法檢測(cè)靈敏度高，周期短、可操作性強(qiáng)、適用于處理大通量的樣本、易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，可以廣泛推廣應(yīng)用到食品衛(wèi)生等領(lǐng)域。具體實(shí)施方式實(shí)施例1:本發(fā)明所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基特異性的驗(yàn)證1、阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基的配制稱取39.62g阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(含蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊脂15g、顯色底物Xtglucopyranoside(Apoloscientific,BIMB1190)0.lg、N&C0:,0.02g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉1.0g)，加入1000mL蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，12rC高壓滅菌15min，待冷至405(TC，倒平板，備用；2、接種阪崎腸桿菌、普通變型桿菌(/^Wei/sraJ^^h)、奇異變形桿菌(尸.歷J'raZ)j7is)、銅綠假單胞菌(T^eyob歷orasserL^i"osay1、大腸桿菌(f5"c/en'c力is、鼠傷寒沙門氏菌(Sa2/zd/7e7Jstj^/n'yzwri"/z7)、粘質(zhì)沙雷伯氏菌(Serrah's/sarcesce/is")、糞腸球菌(6Yre/^ococc〃s/aecsh's)、金黃色葡萄球菌(分，Ar7ococciAa〃化M)在營養(yǎng)瓊脂復(fù)蘇24h后，分別劃線接種上述顯色培養(yǎng)基平板，37。C培養(yǎng)1824h。3、結(jié)果及分析阪崎腸桿菌在顯色平板上均出現(xiàn)藍(lán)綠色菌落，奇異變形桿菌和大腸桿菌在顯色平板上均出現(xiàn)無色菌落，普通變形桿菌和沙門氏菌在顯色平板上均出現(xiàn)灰黑色菌落，銅綠假單胞菌在顯色平板上出現(xiàn)黃綠色菌落，粘質(zhì)沙雷伯氏菌、糞腸球菌、金黃色葡萄球菌在顯色平板上均無生長現(xiàn)象，說明阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基具有較高的特異性。實(shí)施例2:本發(fā)明所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基靈敏度及特異性的驗(yàn)證1、阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基的配制稱取39.62g阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(含蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊脂15g、顯色底物X-a-glucopyranoside(Apoloscientific，BIMB1190)0.lg、Na2C030.02g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉1.0g)，加入1000mL蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，12rC高壓滅菌15min，待冷至405(TC，倒平板，備用；2、接種阪崎腸桿菌ATCC51329、HK7402、普通變形桿菌CMCC(B)49027、奇異變形桿菌CMCC(B)49005、銅綠假單胞菌ATCC9027、ATCC27853、大腸桿菌ATCC25922、鼠傷寒沙門氏菌CMCC(B)50115、粘質(zhì)沙雷伯氏菌HK7121、糞6腸球菌ATCC29212、金黃色葡萄球菌ATCC6538在營養(yǎng)瓊脂復(fù)蘇，37。C培養(yǎng)1824h。按以下菌種的組合，分別用接種環(huán)挑取1環(huán)，加入到10mL0.85%生理鹽水中配成原液，然后進(jìn)行10倍梯度稀釋，取10—51(T濃度混合菌液各0.lmL，分別涂布上述顯色培養(yǎng)基平板(簡稱HK阪)、國外OXOID公司的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(簡稱OX阪)，37。C培養(yǎng)1824h。菌種組合1)阪崎腸桿菌ATCC51329十鼠傷寒沙門氏菌CMCC(B)50115+粘質(zhì)沙雷伯氏菌HK7121+金黃色葡萄球菌ATCC6538+銅綠假單胞菌ATCC9027+大腸桿菌ATCC259222)阪崎腸桿菌HK7402+奇異變形桿菌CMCC(B)49005+普通變形桿菌CMCC(B)49027+糞腸球菌ATCC29212+銅綠假單胞菌ATCC278533、結(jié)果及分析混合菌液涂布各平板靈敏度試驗(yàn)結(jié)果如表1，表明本發(fā)明所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基與國外品牌的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板的阪崎腸桿菌檢出率沒有顯著差異，二種培養(yǎng)基可以達(dá)到相同的檢測(cè)限?；旌暇和坎几髌桨逄禺愋栽囼?yàn)結(jié)果如表2，在本發(fā)明所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板上阪崎腸桿菌仍呈特殊的藍(lán)綠色菌落，其他腸道菌受抑或呈現(xiàn)灰黑色、淡黃色或呈無色菌落。表明其他腸道菌基本不影響阪崎腸桿菌的檢測(cè)，顯色培養(yǎng)基對(duì)阪崎腸桿菌的特異性高。表1二種組合中的阪崎腸桿菌在各培養(yǎng)基上的靈敏度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2二種組合中各種菌在各培養(yǎng)基上的特異性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>阪崎腸桿菌菌落特征藍(lán)綠色藍(lán)綠色阪崎腸桿菌ATCC5132930300藍(lán)綠色藍(lán)綠色阪崎腸桿菌HK740230300藍(lán)綠色藍(lán)綠色鼠傷寒沙門氏菌CMCC(B)5011530300灰黑色灰黑色大腸桿菌ATCC2592230300淡黃色淡黃色普通變形桿菌CMCC(B)4902730300灰黑色灰黑色奇異變形桿菌CMCC(B)4900530300灰黑色灰黑色銅綠假單胞菌ATCC902730300無色無色銅綠假單胞菌ATCC2785330300黃綠黃綠粘質(zhì)沙雷伯氏菌服71215000受抑制受抑制糞腸球菌ATCC292125000受抑制受抑制金黃色葡萄球菌ATCC65385000受抑制受抑制實(shí)施例3:人工污染樣品中阪崎腸桿菌的檢測(cè)1、制備顯色平板稱取39.62g顯色培養(yǎng)基干粉(含蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊月旨15g、顯色底物X-a-glucopy環(huán)oside(Apoloscientific，BIMB1190)0.lg、Na2CO:i0.02g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉1.Og)，加入1000mL蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，121。C高壓滅菌15min，待冷至4050。C，倒平板，備用；2、前增菌4種奶粉樣品各稱取8份，每份100g，無菌操作分別將4份樣品加到含有900mLBP增菌液的三角瓶中，其中3份添加三種濃度阪崎腸桿菌；另外4份樣品分別加到含有900mL無菌水的三角瓶中，其中3份添加三種濃度阪崎腸桿菌，模擬實(shí)際樣品混合均勻，37'C培養(yǎng)1620h。3、選擇性增菌各取lmL樣品前增菌液分別加入到9mLmLST(前增菌液為BP)/9mLEE(前增菌液為無菌水)中進(jìn)行二次增菌，44。C/37。C培養(yǎng)1620h。4、接種培養(yǎng)各取1環(huán)二次增菌液，劃線接種顯色培養(yǎng)基平板，37。C培養(yǎng)2226h，觀察記錄菌落顏色和形態(tài)。5、結(jié)果觀察和分析顯色培養(yǎng)基的對(duì)人工污染樣品的檢測(cè)結(jié)果見表4。未添加阪崎腸桿菌的樣品增菌后在顯色平板上無藍(lán)綠色菌落，有無色菌落生長；添加阪崎腸桿菌的樣品增菌后在顯色平板上呈現(xiàn)光滑、略突起、直徑13mm、邊緣整齊的藍(lán)綠色菌落。HKM阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基和OXOID阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基對(duì)人工污染樣品中阪崎腸桿菌的檢出率沒有差異，二種培養(yǎng)基可以達(dá)到相同的檢測(cè)限，對(duì)4份奶粉用BP—mLST增菌體系，檢測(cè)靈敏度均可以達(dá)到l10cfu，而且競爭性抑制了奶粉中雜菌的生長；而用無菌水一EE增菌體系，對(duì)伊利奶粉和三鹿奶粉檢測(cè)靈敏度均為<10210:iCfu/100g奶粉，且無法抑制奶粉中本身雜菌的生長。說明BP—mLST增菌體系優(yōu)于無菌水一EE增菌體系。檢測(cè)過程中，前增菌需18h，選擇性增菌18h，顯色平板培養(yǎng)24h，陽性結(jié)果時(shí)間最長需60h。按本發(fā)明所述的檢測(cè)方法對(duì)阪崎腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度可以達(dá)到110cfu。表4人工污染樣品中阪崎腸桿菌的檢測(cè)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例4:豆奶中阪崎腸桿菌的檢測(cè)1、制備顯色平板稱取39.62g顯色培養(yǎng)基干粉(含蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊月旨15g、顯色底物X-a-glucopyr細(xì)side(Apoloscientific，B頂B1190)0.lg、Na2C0:i0.02g、檸檬酸鐵銨1.Og、硫代硫酸鈉1.0g)，加入1000mL蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，121。C高壓滅菌15min，待冷至4050。C，倒平板，備用；2、前增菌在無菌條件下，量取100mL豆奶，無菌操作將樣品加到含有900mLBP增菌液的三角瓶中，37。C培養(yǎng)1620h。3、選擇性增菌取lmL樣品前增菌液加入到9mLmLST中進(jìn)行二次增菌，44'C培養(yǎng)2226h。4、接種培養(yǎng)取1環(huán)二次增菌液，劃線接種顯色培養(yǎng)基，37。C培養(yǎng)1824h，觀察記錄菌落大小、顏色和形態(tài)。以阪崎腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株劃線接種顯色培養(yǎng)基作對(duì)照，對(duì)比分析檢測(cè)結(jié)果。5、結(jié)果分析顯色平板上呈現(xiàn)光滑、略突起、直徑l3mm、邊緣整齊的藍(lán)綠色菌落，菌落顏色和形態(tài)與標(biāo)準(zhǔn)菌株相符，說明豆奶樣品中存在阪崎腸桿菌。實(shí)施例5:實(shí)際樣品中阪崎腸桿菌的檢測(cè)從全國超市購買318份奶粉樣品，按本發(fā)明所述的檢測(cè)方法對(duì)阪崎腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)陽性樣本用梅理埃API鑒定試劑條進(jìn)行驗(yàn)證。本發(fā)明所述的檢測(cè)法樣本一BP前增菌18lr~mLST選擇性增菌18h—?jiǎng)澗€接種本發(fā)明所述的顯色培養(yǎng)基(服阪)一直接觀察有無藍(lán)綠色菌落。以API鑒定和測(cè)序比對(duì)為標(biāo)準(zhǔn)判定最終結(jié)果。與最終結(jié)果相比，本發(fā)明所述的檢測(cè)法檢出試驗(yàn)的陽性分離率、敏感性、特異性和符合率分別按下列公式進(jìn)行計(jì)算。陽性分離率=陽性數(shù)/被檢總數(shù)真陽性數(shù)=實(shí)際檢出的陽性數(shù)-假陽性數(shù)真陰性數(shù)=實(shí)際檢出的陰性數(shù)-假陰性數(shù)敏感性=真陽性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陰性數(shù))特異性=真陰性數(shù)/(真陰性數(shù)+假陽性數(shù))符合率=(真陽性數(shù)+真陰性數(shù))/被檢總數(shù)陽性數(shù)、假陽性數(shù)和真陽性數(shù)等小結(jié)見表5。表5實(shí)際樣品中阪崎腸桿菌的檢測(cè)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權(quán)利要求1、一種阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的配方為蛋白胨8～20g、牛肉膏粉4～7g、氯化鈉4～7g、膽鹽1.0～2.0g、瓊脂12～20g、顯色底物X-a-glucopyranoside0.05～0.5g、Na2CO30.01～0.04g、檸檬酸鐵銨0.3～2.0g、硫代硫酸鈉0.3～2.0g。2、如權(quán)利要求1所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的配方為蛋白胨llg、牛肉膏粉5g、氯化鈉5g、膽鹽1.5g、瓊脂15g、顯色底物X-a—glucopyranoside0.lg、Na^O:;0.02g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉l.Og。3、一種阪崎腸桿菌檢測(cè)試劑盒，其組成為增菌液A:緩沖蛋白胨水培養(yǎng)基，增菌液B:改良月桂基硫酸鹽胰蛋白月示肉湯，及如權(quán)利要求1或2所述的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基。4、一種使用如權(quán)利要求3所述的試劑盒檢測(cè)阪崎腸桿菌的方法，其特征在于包括以下步驟(1)制備顯色平板每1000mL蒸餾水或去離子水中加入29.6660.54g阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，攪拌加熱煮沸至完全溶解，12rC高壓滅菌15min，待冷至405(TC，倒平板，備用；(2)—?dú)i增菌將樣品置于增菌液A中，混合均勻后37。C培養(yǎng)16-20h;(3)二步增菌取一步增菌液lmL加入到9mL增菌液B中，混合均勻后44。C培養(yǎng)22-26h;(4)接種培養(yǎng)將二步增菌液接種顯色平板上，37。C培養(yǎng)22-26h;(5)結(jié)果分析若顯色平板上出現(xiàn)光滑、略突起、直徑13讓、邊緣整齊的藍(lán)綠色菌落，說明該樣品存在阪崎腸桿菌。全文摘要本發(fā)明阪崎腸桿菌(Enterobactersakazakii)顯色培養(yǎng)基、檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法涉及一種微生物的檢測(cè)方法及所用的組合物。所述的顯色培養(yǎng)基配方為蛋白胨8～20g、牛肉膏粉4～7g、氯化鈉4～7g、膽鹽1.0～2.0g、瓊脂12～20g、X-a-glucopyranoside0.05～0.5g、Na₂CO₃0.01～0.04g、檸檬酸鐵銨0.3～2.0g、硫代硫酸鈉0.3～2.0g。所述的檢測(cè)試劑盒組成為上述阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基、增菌液A緩沖蛋白胨水培養(yǎng)基和增菌液B改良月桂基硫酸鹽胰蛋白肉湯。本發(fā)明所述的試劑盒配置簡單，檢測(cè)方法檢測(cè)靈敏度高，適用于處理大通量的樣本。文檔編號(hào)C12Q1/04GK101423862SQ20081022019公開日2009年5月6日申請(qǐng)日期2008年12月19日優(yōu)先權(quán)日2008年12月19日公開號(hào)200810220194.0發(fā)明者盧勉飛,吳清平,蔡芷荷申請(qǐng)人:廣東環(huán)凱微生物科技有限公司被以下專利引用(1),