專(zhuān)利名稱(chēng)：一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥現(xiàn)代化關(guān)鍵技術(shù)平臺(tái)研究領(lǐng)域。特別涉及到一種以微生物固態(tài)發(fā)酵 為中藥炮制處理手段的方法。
背景技術(shù)：
發(fā)酵是傳統(tǒng)中藥加工炮制的方法之一，例如建神曲、沉香曲、淡豆豉、半夏曲、紅 曲、麥芽等都是通過(guò)發(fā)酵而形成的藥物；蟲(chóng)草是蝙蝠蛾幼蟲(chóng)經(jīng)蟲(chóng)草菌、僵蠶是家蠶經(jīng)白 僵菌感染發(fā)酵而成的，這些經(jīng)典藥物都在經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵后產(chǎn)生了新的藥理活性。但這 些品種都是利用自然界天然菌種發(fā)酵的，屬于無(wú)意識(shí)的自然發(fā)酵，同時(shí)接入的微生物種 類(lèi)范圍受到了極大的限制，對(duì)于那些自然界中不占優(yōu)勢(shì)，生長(zhǎng)條件苛刻的微生物難以在 藥物上進(jìn)行生長(zhǎng)，從而限制了微生物在藥物中潛能的最大限度發(fā)揮。與傳統(tǒng)的中藥發(fā)酵多在天然的條件下進(jìn)行不同，現(xiàn)代中藥發(fā)酵制藥技術(shù)是在充分吸 收近代微生態(tài)學(xué)、生物工程學(xué)研究成果的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的。由于真菌含有豐富的酶類(lèi)， 如纖維素酶、木質(zhì)素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂酶等，以適當(dāng)?shù)闹兴帪榕囵B(yǎng)基或在培養(yǎng)基 中添加適量的中藥，利用微生物強(qiáng)大的分解轉(zhuǎn)化能力，不僅可對(duì)中藥中的纖維、糖類(lèi)和 蛋白等物質(zhì)加以利用。而且在代謝過(guò)程中可能對(duì)中藥中的一些成分進(jìn)行轉(zhuǎn)化，從而提高 中藥活性成分在復(fù)合制劑中的比例及效價(jià)，從而生產(chǎn)出包含多種活性成分且藥效較簡(jiǎn)單 組方配伍更佳的新型發(fā)酵制劑。但是，現(xiàn)代中藥發(fā)酵炮制法主要還是真菌類(lèi)中藥自身發(fā) 酵，如靈芝菌絲體、冬蟲(chóng)夏草菌絲體、槐耳發(fā)酵等，大都是單一發(fā)酵。雖有報(bào)道加入中 藥，但也僅是將中藥當(dāng)作菌絲體發(fā)酵的菌質(zhì)。近幾十年來(lái)，隨著物理化學(xué)、中藥化學(xué)以 及生物學(xué)等各學(xué)科的相互滲透，為中藥復(fù)方制劑的研究提供了更加先進(jìn)的技術(shù)平臺(tái)。而 固態(tài)發(fā)酵炮制技術(shù)正是這樣一種平臺(tái)?，F(xiàn)代固態(tài)發(fā)酵技術(shù)已經(jīng)在純種發(fā)酵、對(duì)規(guī)模產(chǎn)業(yè)化放大、發(fā)酵效率等方面都得到了 很大的改進(jìn)。因此，固態(tài)發(fā)酵憑借其節(jié)水、節(jié)能、污染小等優(yōu)勢(shì)而日益受到關(guān)注，加之 中藥材本身是固體物料，采用固態(tài)發(fā)酵進(jìn)行中藥炮制相對(duì)于液態(tài)發(fā)酵具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 在專(zhuān)利200510041362.6中莊毅等提出了一種藥用真菌雙向性固體發(fā)酵技術(shù)，并將該技術(shù)用于雷公藤解毒持效性的研究。但是這種技術(shù)只是對(duì)單味藥物或者簡(jiǎn)單的配伍藥物進(jìn)行 發(fā)酵。在這種發(fā)酵方式中，中藥僅僅被當(dāng)作菌絲體發(fā)酵的菌質(zhì)，而且仍然是真菌類(lèi)藥物 自身的單一菌種發(fā)酵法，這種發(fā)酵方式生產(chǎn)周期非常長(zhǎng)，不適于產(chǎn)業(yè)化的要求。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法。本發(fā)明以微 生物固態(tài)發(fā)酵技術(shù)為手段，以中藥復(fù)方及少量輔助原料為培養(yǎng)基，以一種或者多種微生 物固態(tài)發(fā)酵中藥復(fù)方，利用微生物在固態(tài)發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的復(fù)雜酶系作用于中藥復(fù)方， 發(fā)揮微生物轉(zhuǎn)化和生物催化作用，實(shí)現(xiàn)中藥復(fù)方的炮制處理，促進(jìn)中藥復(fù)方的美拉德反 應(yīng)。本發(fā)明的構(gòu)思現(xiàn)代化中藥研究要求將自然科學(xué)的方法融入到傳統(tǒng)中藥研究的有 機(jī)鏈條中，并為其服務(wù)，從而建立中藥現(xiàn)代化研究技術(shù)平臺(tái)。用現(xiàn)代固態(tài)發(fā)酵進(jìn)行中藥 炮制正是這樣一種技術(shù)平臺(tái)。但是，目前中藥發(fā)酵炮制法主要還是真菌類(lèi)中藥自身的單 一發(fā)酵方式。雖有報(bào)道加入中藥進(jìn)行發(fā)酵，但也僅是將中藥當(dāng)作菌絲體發(fā)酵的菌質(zhì)。本 發(fā)明以微生物固態(tài)發(fā)酵技術(shù)為手段，以中藥復(fù)方為培養(yǎng)基，利用微生物中豐富的酶類(lèi)對(duì) 中藥復(fù)方進(jìn)行發(fā)酵炮制，提高中藥復(fù)方的藥效。本發(fā)明技術(shù)方案本發(fā)明以北京某醫(yī)院多年來(lái)的一個(gè)臨床驗(yàn)方為例，其藥方組成 包括巴戟，杜仲，枸杞，茴香，芡實(shí)，肉蓯蓉，桑枝，山茱萸，熟地，山藥，五味子， 川牛膝，懷牛膝，甘草，菊花，石菖蒲，黃精，遠(yuǎn)志，茯苓。一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征包括以下步驟1、 中藥發(fā)酵藥用微生物篩選及馴化將中藥和輔助原料進(jìn)行混合均勻配制不同比 例(g/g)的馴化培養(yǎng)基，接種藥用微生物進(jìn)行梯度馴化。馴化時(shí)，每馴化一個(gè)梯度，反復(fù) 馴化5 10次。觀察馴化結(jié)果，若微生物在發(fā)酵周期內(nèi)能布滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)基，則轉(zhuǎn)入下一 個(gè)梯度；若經(jīng)過(guò)多次馴化仍然不能生長(zhǎng)良好，則選擇上一個(gè)梯度作為發(fā)酵培養(yǎng)基濃度。所述的輔助原料包括麩皮、稻殼、麥秸、玉米芯；所述的中藥固態(tài)發(fā)酵藥用微生物包括米曲霉CICC2413、靈芝CICC 14028， CICC 14026、特異青霉CICC 4013、蜜環(huán)菌CICC 14066、蛹蟲(chóng)草CICC 14015、米根霉CICC 3077、枯草芽孢桿菌CICC 20010等；2、 按照步驟l)中確定的培養(yǎng)基濃度配制中藥固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，并混合均勻，然后 以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量，培養(yǎng)基滅菌、冷卻后備用；3、將馴化后的微生物接種到步驟2)所配制的培養(yǎng)基中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵炮制處理。中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行烘干后，提取其中的有效成分，采用紫外(見(jiàn)說(shuō)明書(shū)附 圖l)、高壓液相色譜(見(jiàn)說(shuō)明書(shū)附圖2)、紅外光譜分析(見(jiàn)說(shuō)明書(shū)附圖3)、固態(tài)發(fā)酵對(duì)中 藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。本發(fā)明所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于，中藥固態(tài)發(fā)酵炮制 處理為所述藥用微生物的一種，或者幾種微生物混合進(jìn)行的中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理。本發(fā)明所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于，藥用微生物馴化固 態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，中藥與輔助原料的比例(g/g)為20~100%。本發(fā)明所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于，中藥固態(tài)發(fā)酵炮制 培養(yǎng)基的含水量為水分占固態(tài)培養(yǎng)基干重的重量比，所述的培養(yǎng)基含水量為 100%~2畫(huà)。本發(fā)明所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于，中藥固態(tài)發(fā)酵炮制 處理的溫度為25 35'C，培養(yǎng)時(shí)間4 20天；本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明提供的一種中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其 優(yōu)點(diǎn)在于1、 本發(fā)明以微生物固態(tài)發(fā)酵技術(shù)作為一種手段實(shí)現(xiàn)中藥復(fù)方的發(fā)酵炮制處理，突 破了現(xiàn)有固態(tài)發(fā)酵中藥炮制仍然以真菌類(lèi)中藥自身發(fā)酵為主的局限性，拓寬了中藥固態(tài) 發(fā)酵炮制菌種來(lái)源。2、 本發(fā)明以中藥復(fù)方為培養(yǎng)基，充分利用復(fù)方藥味組成的復(fù)雜性及整體性，發(fā)揮 微生物轉(zhuǎn)化和生物催化作用，改善中藥復(fù)方化學(xué)成分的比例和效價(jià)，促進(jìn)中藥復(fù)方炮制 過(guò)程中的美拉德反應(yīng)。
圖1固態(tài)發(fā)酵中藥復(fù)方有效成分提取液紫外光譜分析 圖2固態(tài)發(fā)酵中藥復(fù)方煎煮法提取有效成分HPLC色譜分析圖 圖3固態(tài)發(fā)酵中藥復(fù)方FTIR光譜圖具體實(shí)施方式以下通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述。 實(shí)施例l對(duì)發(fā)酵菌種特異青霉進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度80%,馴化梯度2.5%，反復(fù)馴 化5次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇85免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培養(yǎng)基；中藥復(fù)方與麩皮按80免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為100%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的85免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培 養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種特異青霉，放入培養(yǎng)箱中28'C培養(yǎng)7d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干并經(jīng)超微粉碎，以煎煮法提取化學(xué)成分，采用紫外、 高效液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例2對(duì)發(fā)酵菌種米根霉進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度60%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化5 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇62.5% (g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化 培養(yǎng)基；中藥復(fù)方與麩皮按60免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%, 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的62.5% (g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種米根霉，放入培養(yǎng)箱中3(TC培養(yǎng)5d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后，以乙醇提取化學(xué)成分，采用紫外、高效液相色譜、 紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例3對(duì)發(fā)酵菌種米曲霉進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度80%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化7 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇90呢(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培 養(yǎng)基；固中藥復(fù)方與麥秸按80免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%, 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的909Hg/g)中藥復(fù)方與麥秸的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培 養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種米曲霉，放入培養(yǎng)箱中3(TC培養(yǎng)5d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干并超微粉碎，以乙醇提取化學(xué)成分，采用紫外、高效 液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例4對(duì)發(fā)酵菌種靈芝進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度20%，馴化梯度2.5%,反復(fù)馴化7 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇20免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培養(yǎng)基；中藥復(fù)方與麩皮按20% (g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為200%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的20免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培 養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種靈芝，放入培養(yǎng)箱中28t:培養(yǎng)14d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后，煎煮法提取化學(xué)成分，采用紫外、高效液相色譜、 紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例S對(duì)發(fā)酵菌種蜜環(huán)菌進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度40%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化7 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇42.5% (g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化i昔養(yǎng)基；中藥復(fù)方與稻殼按40免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的42.5% (g/g)中藥復(fù)方與稻殼的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種蜜環(huán)菌，放入培養(yǎng)箱中25'C培養(yǎng)12d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后，采用煎煮法提取化學(xué)成分，采用紫外、高效液相 色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例6對(duì)發(fā)酵菌種蛹蟲(chóng)草進(jìn)行梯度馴化。別1化起始濃度20%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化7 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇20免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培 養(yǎng)基；中藥復(fù)方與麩皮按20免(g/g)均勻混合，然后以蒸鎦水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的20免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng) 基滅菌、冷卻后接種蛹蟲(chóng)草，放入培養(yǎng)箱中28。C培養(yǎng)16d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后，乙醇提取化學(xué)成分，采用紫外、高效液相色譜、 紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例7發(fā)酵菌種枯草芽孢桿菌進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度40%，馴化梯度2.5%，反復(fù) 馴化7次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇45免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培養(yǎng)基；中藥復(fù)方與稻殼按40% (g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為200%, 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的45免(g/g)中藥復(fù)方與稻殼的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng) 基滅菌、冷卻后接種枯草芽孢桿菌，放入培養(yǎng)箱中28。C培養(yǎng)4d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后，以煎煮法提取化學(xué)成分，采用紫外、高效液相色 譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例8對(duì)發(fā)酵菌種米根霉進(jìn)行梯度馴化。別1化起始濃度40%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化5 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇45免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化培養(yǎng) 基；中藥復(fù)方與稻殼按40免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為100%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；以確定的45免(g/g)中藥復(fù)方與稻殼的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng) 基滅菌、冷卻后接種米根霉，放入培養(yǎng)箱中3(TC培養(yǎng)5d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后經(jīng)超細(xì)粉碎，乙醇提取化學(xué)成分，采用紫外、高效 液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例9對(duì)發(fā)酵菌種米曲霉進(jìn)行梯度馴化。馴化起始濃度60%，馴化梯度2.5%，反復(fù)馴化5 次。觀察馴化結(jié)果，經(jīng)過(guò)多次馴化選擇62.5% (g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為馴化 培養(yǎng)基；中藥復(fù)方與稻殼按60% (g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的62.5% (g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種米根霉，放入培養(yǎng)箱中3(TC培養(yǎng)5 d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后超細(xì)粉碎，以乙醇提取化學(xué)成分，采用紫外、高效 液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例10中藥復(fù)方與稻殼按80免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為100%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的62.5呢(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種米曲霉與特異青霉，放入培養(yǎng)箱 中3(TC培養(yǎng)7d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后超細(xì)粉碎，以煎煮法提取化學(xué)成分， 采用紫外、高效液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。 實(shí)施例11中藥復(fù)方與麩皮按40免(g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為150%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的80免(g/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中 藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種米曲霉與蛹蟲(chóng)草，放入培養(yǎng)箱中30 'C培養(yǎng)5d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后超細(xì)粉碎，以乙醇提取化學(xué)成分，采用紫 外、高效液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。實(shí)施例12中藥復(fù)方與麩皮按60% (g/g)均勻混合，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量為120%， 培養(yǎng)基滅菌30min，冷卻后備用；將確定的809Kg/g)中藥復(fù)方與麩皮的混合物作為中 藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基滅菌、冷卻后接種靈芝與米根霉，放入培養(yǎng)箱中30 'C培養(yǎng)14d;將中藥復(fù)方固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物烘干后超細(xì)粉碎，以乙醇提取化學(xué)成分，采用紫 外、高效液相色譜、紅外光譜分析固態(tài)發(fā)酵對(duì)中藥復(fù)方化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)的影響。
權(quán)利要求
1、一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征包括以下步驟1)中藥發(fā)酵藥用微生物篩選及馴化將中藥和輔助原料進(jìn)行混合均勻配制不同比例(g/g)的馴化培養(yǎng)基，接種藥用微生物進(jìn)行梯度馴化，每馴化一個(gè)梯度，反復(fù)馴化5～10次；所述的輔助原料包括麩皮、稻殼、麥秸、玉米芯；所述的中藥固態(tài)發(fā)酵藥用微生物包括米曲霉CICC 2413、靈芝CICC 14028，CICC 14026、特異青霉CICC 4013、蜜環(huán)菌CICC 14066、蛹蟲(chóng)草CICC 14015、米根霉CICC 3077、枯草芽孢桿菌CICC 20010等；2)按照步驟1)中確定的培養(yǎng)基濃度配制中藥固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，并混合均勻，然后以蒸餾水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基含水量，培養(yǎng)基滅菌、冷卻后備用；3)將馴化后的微生物接種到步驟2)所配制的培養(yǎng)基中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵炮制處理。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于， 中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理為所述藥用微生物的一種，或者幾種微生物混合進(jìn)行的中 藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于， 藥用微生物馴化固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，中藥與輔助原料的比例(g/g)為20~100%。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于， 中藥固態(tài)發(fā)酵炮制培養(yǎng)基的含水量為水分占固態(tài)培養(yǎng)基干重的重量比，所述的培 養(yǎng)基含水量為100%~200%。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征在于， 中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的溫度為25 35'C，培養(yǎng)時(shí)間4~20天。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種中藥固態(tài)發(fā)酵炮制處理的方法，其特征包括以下步驟中藥發(fā)酵藥用微生物篩選及馴化、中藥固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基制備、中藥固態(tài)發(fā)酵炮制。本發(fā)明以微生物固態(tài)發(fā)酵為中藥炮制手段，突破了現(xiàn)有固態(tài)發(fā)酵中藥炮制仍然以真菌類(lèi)中藥自身發(fā)酵為主的局限性，拓寬了中藥固態(tài)發(fā)酵炮制菌種來(lái)源。本發(fā)明充分發(fā)揮微生物轉(zhuǎn)化和生物催化作用，改善了中藥復(fù)方化學(xué)組成及其藥效，促進(jìn)了中藥復(fù)方的美拉德反應(yīng)。
文檔編號(hào)C12N1/20GK101401826SQ20081022645
公開(kāi)日2009年4月8日 申請(qǐng)日期2008年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月11日 公開(kāi)號(hào)200810226456.發(fā)明者張思婧, 王華敬, 邱衛(wèi)華, 陳洪章 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所 被以下專(zhuān)利引用 (2),