專利名稱：：微生物發(fā)酵產(chǎn)物的制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及作為制造3a，6,6,9a-四甲基十二氫萘并[2,l-b]呋喃的中間體有用的二醇的制造方法。
背景技術(shù)：
：3a,6，6,9a-四甲基十二氫萘并[2,l-b]呋喃(下面記作"化合物A")是抹香鯨體內(nèi)產(chǎn)生的病態(tài)分泌物龍涎香中所包含的香氣成分，是作為琥珀(Amber)類合成香料不可缺的重要化合物?；衔顰主要以提取自硬膜鼠尾草(^/W"w/we"丄.)的香紫蘇醇作為起始原料，通過化學(xué)合成法來制造。作為化合物A的中間體，已知有3a，6,6，9a-四甲基十氫萘并[2,l-b]呋喃-2(lH)-酮(下面記作"香紫蘇內(nèi)酯(Sclareolide)")以及l(fā)-(2-羥乙基)-2，5,5,8a-四甲基十氫萘-2-醇(下面記作"二醇")。但是，上述化學(xué)合成法對(duì)環(huán)境負(fù)荷大，并且存在無法充分確保收率、純度的問題。因此，已報(bào)道有從香紫蘇醇經(jīng)由微生物轉(zhuǎn)化得到化合物A中間體，再使其環(huán)化制造化合物A的方法(例如專利文獻(xiàn)l及2)。專利文獻(xiàn)l:特開平3-224478號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2:特開昭62-74281號(hào)公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供式(2)所示的l-(2-羥乙基)-2，5,5,8a-四甲基十氫萘-2-醇的制造方法，其特征在于，將下式(la)和/或(lb)所示的化合物作為基質(zhì)通過微生物轉(zhuǎn)化得到培養(yǎng)液，將該培養(yǎng)液用篩孔度為10lOO)am的過濾器過濾后，用水或用SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑洗滌過濾器上的殘?jiān)?，然后將得到的濾餅溶解在SP值為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑中，然后過濾或離心分離溶解液。圖1是表示培養(yǎng)液3的組成，以及將培養(yǎng)液3過濾后、水洗后(實(shí)施例12)的組成，以及將培養(yǎng)液3通過乙酸乙酯提取法(比較例9)得到的提取液的組成的圖。具體實(shí)施例方式在上述專利文獻(xiàn)1及2中，通過微生物轉(zhuǎn)化所得到的二醇的分離、精制是通過將培養(yǎng)液經(jīng)乙酸乙酯進(jìn)行溶劑提取后，將干燥得到的提取物溶解在溫?zé)岬募和?乙酸乙酯或己烷/氯仿中，通過從溶解液結(jié)晶化，而進(jìn)行。但是，由于培養(yǎng)液中除了二醇以外，還混有未反應(yīng)的香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯、培養(yǎng)基成分等，在使用乙酸乙酯等的現(xiàn)有的溶劑提取法中，二醇以外的其他成分也同時(shí)被回收，只進(jìn)行二醇的分離、精制非常困難。而且，雖然參照香紫蘇內(nèi)酯的精制方法(美國(guó)專利第5,945,546號(hào)說明書)來進(jìn)行溶劑提取后，用酸或堿溶液洗滌可以得到色相改善的效果，但是其組成幾乎沒有變化，無法得到高純度的二醇。因此，本發(fā)明涉及能夠高效地制造高純度的二醇的二醇的制造方法。本發(fā)明人對(duì)二醇的分離精制手段進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)盡管二醇和香紫蘇內(nèi)酯均不溶于水，可是用特定篩目的過濾器過濾培養(yǎng)液后，再經(jīng)過水洗，可以將二者分離。還發(fā)現(xiàn)二醇相對(duì)于乙醇等特定溶劑的溶解度較大，通過將水洗后得到的濾餅溶解在這些溶劑中，能夠除去雜質(zhì)，并能夠高收率地回收高純度的二醇。根據(jù)本發(fā)明，能夠高效地以高純度制造作為化合物A的制造中間體有用的二醇。在本發(fā)明中，作為微生物轉(zhuǎn)化所利用的微生物，只要是具有將上上述式(la)和/或(lb)所示的化合物作為基質(zhì)來生成作為化合物A中間體的二醇的能力，就沒有特別限制，可以舉出，例如屬于子囊菌綱(Acw^c"m)的微生物、屬于隱球菌(07ptococcw)屬的微生物、屬于擔(dān)子菌綱的微生物、屬于八,爾-一7(/fyp/^^ma)屬的微生物等。其中，從作為化合物A中間體的二醇的生成效率的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選屬于子囊菌綱的微生物和屬于//;^/zoz;;m"屬的微生物。作為屬于子囊菌綱的微生物，可以舉出，例如命名為Acomycefe平KSM-JL2842的、作為FERMP-20759而被保藏在獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所的專利生物保藏中心的微生物。作為屬于/^p/zoz;;ma屬的微生物，可以舉出例如專利第2547713號(hào)說明書中記載的ATCC20624菌株。上述微生物，以生成作為化合物A中間體的二醇的能力為指標(biāo)，可以從土壤中分離得到。生成作為化合物A中間體的二醇的能力通過以下方式進(jìn)行評(píng)價(jià)用含有上述式(la)和/或(lb)所示的化合物的培養(yǎng)基來培養(yǎng)待測(cè)微生物，并檢測(cè)培養(yǎng)基中含有的作為化合物A中間體的二醇。作為化合物A中間體的二醇的檢測(cè)，可以采用例如氣相色譜(GC)、氣液色譜(GLC)、薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、紅外光譜(IR)、核磁共振(NMR)等現(xiàn)有的公知的分析方法。作為培養(yǎng)微生物時(shí)候的培養(yǎng)條件，沒有特別限制，只要是含有上述式(la)和/或(lb)所示的化合物、并且該微生物能夠生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，任意組成的培養(yǎng)基都可以使用。作為能夠使用的培養(yǎng)基，可以舉出含有單糖、二糖、寡糖、多糖、有機(jī)酸鹽等碳源；無機(jī)，有機(jī)銨鹽、含氮有機(jī)物、氨基酸等氮源；氯化鈉、硫酸亞鐵、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、碳酸鈣等金屬礦物質(zhì)類及維生素類等的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基等。而且，根據(jù)培養(yǎng)條件等還可以添加表面活性劑或消泡劑。對(duì)于最適的PH范圍及最適的溫度沒有特別限制，例如pH范圍為pH38，優(yōu)選為pH48，更優(yōu)選為pH57，溫度為1035。C，優(yōu)選為1530°C，更優(yōu)選為2030°C。培養(yǎng)除了采用振蕩培養(yǎng)、厭氧培養(yǎng)、靜置培養(yǎng)、發(fā)酵層培養(yǎng)以外，還可以采用休止菌體反應(yīng)及固定化菌體反應(yīng)。培養(yǎng)基中所添加的上述式(la)和/或(lb)所示的化合物的濃度，從作為化合物A中間體的二醇的生成效率的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為0.150質(zhì)量Q^?；|(zhì)可以在培養(yǎng)之前添加到培養(yǎng)基中，也可以在培養(yǎng)過程中添加到培養(yǎng)基中。在本發(fā)明中，首先用篩孔度為10100pm的過濾器過濾通過上述微生物轉(zhuǎn)化得到的培養(yǎng)液。通過該過濾可以除去培養(yǎng)液中包含的菌體等雜質(zhì)。過濾器的口徑如果比篩孔度10,小，則發(fā)生結(jié)塊而閉塞，另一方面，如果比篩孔度100pm大，則二醇的收率變差。從提高二醇的回收率及純度的觀點(diǎn)出發(fā)，過濾器的口徑優(yōu)選篩孔度為1090pm，更優(yōu)選篩孔度為1075|am，特別從回收率和純度及過濾效率的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選篩孔度為2040jmi。作為過濾手段，吸引過濾、加壓過濾、離心過濾中的任意一種均可以實(shí)施，但是從收率的觀點(diǎn)出發(fā)，特別優(yōu)選吸引過濾。作為過濾器的材質(zhì)，可以使用各種材質(zhì)，具體而言，可以使用聚丙烯、聚酯、尼龍等樹脂制、陶瓷制、金屬制等。此外，從回收率、純度及過濾效率的觀點(diǎn)出發(fā)，過濾時(shí)候的液溫優(yōu)選為08(TC，更優(yōu)選為560'C，特別優(yōu)選為1035°C。然后，用水或用SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑洗滌過濾器上的殘?jiān)?。通過該洗滌操作，可以除去培養(yǎng)液中包含的香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯、培養(yǎng)基成分等雜質(zhì)。如果采用SP值在8.320(cal/cm3)1/2范圍內(nèi)的溶劑作為洗滌液，盡管溶解香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯，但也溶解二醇。二醇對(duì)在此所采用的溶劑的溶解度優(yōu)選為0.2%以下，特別優(yōu)選為0.1Q/^以下。在此，所謂SP值表示溶解度參數(shù)，例如，在參考文獻(xiàn)《SP值基礎(chǔ)，應(yīng)用和計(jì)算方法》(株式會(huì)社情報(bào)機(jī)構(gòu)，2005年)等中有記載。作為SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑，可以舉出，例如，己烷(SP值為7.2)、環(huán)己烷(SP值為8.2)、水(SP值為23.4)、30%以下的乙醇水溶液等。這些可以單獨(dú)使用1種，也可以組合2種以上使用。并且，也可以使用適當(dāng)混合水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等溶劑，并將SP值調(diào)整為8.320(cal/cm3)1/2以外而得到的混合溶劑。另外，SP值是2(TC下的值，在混合溶劑的情況下，是混合后的SP值。在此，混合溶劑的SP值是根據(jù)各溶劑的體積比，采用對(duì)各6溶劑的SP值進(jìn)行平均而得到的值。從提高二醇的回收率及純度的觀點(diǎn)出發(fā)，洗滌液優(yōu)選為水、SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶齊1」，更優(yōu)選水、SP值不為7.520(cal/cm3)1/2的溶劑，特別優(yōu)選水。此外，從回收率、純度及過濾效率的觀點(diǎn)出發(fā)，洗滌液的液溫優(yōu)選為08(TC，更優(yōu)選為560。C，特別優(yōu)選為1035°C。從除去香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯，使二醇?xì)埩舻挠^點(diǎn)出發(fā)，洗滌操作的次數(shù)優(yōu)選為16次，更優(yōu)選為23次。此外，1次洗滌所用的洗滌液的量?jī)?yōu)選為每lOOmL培養(yǎng)液使用洗滌液100mL。洗滌液的溫度優(yōu)選為590°C。然后，將已分離'分類的濾餅溶解在SP值為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑中。SP值不為8.320(cal/cm"^的溶劑對(duì)二醇的溶解度很低，收率差。作為SP值為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑，可以舉出例如，甲醇(SP值14.5)、乙醇(SP值13.0)、1-丙醇(SP值12.0)、2畫丙醇(SP值11.5)、1-戊醇(SP值10.6)等低級(jí)醇類；乙酸乙酯(SP值9.1)、乙酸(SP值10.5)、乙二醇(SP值16.1)、二甘醇(SP值14.6)、丙三醇(SP值16.5)、甲苯(SP值8.9)、丙酮(SP值9.9)等。這些溶劑可以單獨(dú)使用l種，也可以組合2種以上使用。此外，可以使用適當(dāng)混合水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等溶劑，并將SP值調(diào)整為8.320(cal/cm3)1/2而得到的混合溶劑。其中，從提高二醇的回收率及純度的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選SP值為8.918.1(cal/cm3)1/2的溶劑，更優(yōu)選SP值為10.517(cal/cm3)1/2的溶劑，特別優(yōu)選乙醇或乙醇水溶液。從二醇的溶解性的觀點(diǎn)出發(fā)，乙醇水溶液中的乙醇濃度優(yōu)選為6099.5%濃度。從二醇的溶解性的觀點(diǎn)出發(fā)，溶解濾餅所用的溶劑的量?jī)?yōu)選相對(duì)于100g濾餅為100500mL。此外，溶劑的溫度優(yōu)選為2060°C。然后，過濾或離心分離溶解液，除去微生物片段等雜質(zhì)。從提高二醇的回收率及純度的觀點(diǎn)出發(fā)，過濾器的規(guī)格優(yōu)選篩孔度為0.110pm，特別優(yōu)選篩孔度為0.2l|im。作為過濾手段及過濾器的材質(zhì)，可以舉出與上述同樣的手段及材質(zhì)。此外，離心分離器優(yōu)選分離板型、圓筒型、傾析器(Decanter)型等一般機(jī)器。作為離心分離條件，溫度優(yōu)選為560°C，更優(yōu)選為2030°C，至于轉(zhuǎn)速和時(shí)間，在例如是圓筒型的情況下，轉(zhuǎn)速優(yōu)選為200012000r/min，更優(yōu)選為300012000r/min，特別優(yōu)選為1000012000r/min，時(shí)間優(yōu)選為130分鐘，更優(yōu)選為210分鐘，特別優(yōu)選為510分鐘。從所得到的過濾液或上清液，經(jīng)由干燥能高收率地得到高純度的二醇。干燥溫度優(yōu)選為室溫9(TC，也可以進(jìn)行減壓干燥。二醇是使用酸性催化劑，例如對(duì)甲苯磺酸、對(duì)甲苯磺酰氯、催化劑量的硫酸及酸性離子交換體，在各種溶劑中通過脫臭環(huán)化而被轉(zhuǎn)化為化合物A。實(shí)施例〔微生物轉(zhuǎn)化l)將1白金環(huán)//7i^02yw"ra"ow'gerATCC20624菌株接種到2.1%YM肉湯中，在25。C下振蕩培養(yǎng)3天，作為菌種。然后，將菌種接種到由2.1%YM肉湯、0.1%硫酸鎂組成的培養(yǎng)基中，用1L培養(yǎng)槽在25°C、0.5vvm、400r/min條件下進(jìn)行通氣攪拌培養(yǎng)2天之后，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候添加由10%吐溫80、20%香紫蘇醇組成的基質(zhì)，使最終濃度為香紫蘇醇為4%，從添加基質(zhì)起的5天內(nèi)，用1NNaOH及INHC1控制pH為6.0并進(jìn)行通氣攪拌培養(yǎng)。將得到的培養(yǎng)液作為培養(yǎng)液1?！参⑸镛D(zhuǎn)化2)將1白金環(huán)Acowyce^平KSM-JL2842菌株接種到2.1%YM肉湯中，在25'C下振蕩培養(yǎng)3天，集菌并用生理鹽水洗滌3次后，與由0.1M磷酸緩沖液(pH6.0)、0.1%硫酸鎂、3%吐溫80、6%香紫蘇醇組成的培養(yǎng)基混合，用1L培養(yǎng)槽在25。C、0.5vvm、400r/min條件下進(jìn)行休止菌體反應(yīng)10天。將得到的培養(yǎng)液作為培養(yǎng)液2?！参⑸镛D(zhuǎn)化3)除了菌株為Acom;;c"e平KSM-JL2842菌株以外，采用與微生物轉(zhuǎn)化1同樣的方法進(jìn)行培養(yǎng)。將得到的培養(yǎng)液作為培養(yǎng)液3。〔分析法)香紫蘇醇、香紫蘇內(nèi)酯及二醇的分析法是用乙酸乙酯提取并適當(dāng)稀釋后，進(jìn)行氣相色譜(GC)分析。GC分析裝置是用6890NGCSystem(Agilenttechnologies公司)來進(jìn)行，分析條件如下。使用火焰離子化檢測(cè)器FID(FlameIonizationDetector)(Agilenttechnologies公司)作為檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度為25(TC，進(jìn)樣法為分流模式(分流比為100:1)，總流量為200ml/分鐘，柱流速為0.4ml/分鐘，柱子為DB-WAX(0O.Immxl0m)(J&W公司)，柱溫箱溫度為25(TC。實(shí)施例14分別用表1所示的口徑的過濾器來吸引過濾用ATCC20624菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液1(30mL)后，用30mL的蒸餾水(SP值23.4)反復(fù)洗滌3次。另外，過濾及洗滌時(shí)候的溫度為室溫(20°C)。然后，將所得到的濾餅分別溶解在乙醇(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(SP值為13.0)(30mL)中，用0.2pm的過濾器過濾各溶解液后，通過減壓干燥過濾液得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表l中顯示。比較例1及2除了用篩孔度為5pm、150pm的過濾器分別吸引過濾用ATCC20624菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液1以外，與實(shí)施例1同樣得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表1中顯示。比較例3混合用ATCC20624菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液1(20mL)和乙酸乙酯(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(60mL)，離心分離(3000rpm，5分鐘)后回收上清液(54mL)。然后，進(jìn)一步離心分離G000rpm，5分鐘)后回收上清液，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表1中顯示。比較例4離心分離(3000rpm，5分鐘)用ATCC20624菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液1(20mL)后，回收沉淀，與乙酸乙酯(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(60mL)混合。然后，將該混合液進(jìn)一步離心分離(3000rpm，5分鐘)后回收上清液，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表l中顯示。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從表1的結(jié)果可知通過采用口徑為1010(Him的過濾器來吸引過濾培養(yǎng)液，能夠高收率地得到高純度的二醇，而與之相對(duì)，用口徑為5pm的過濾器則會(huì)閉塞而無法回收二醇，用口徑為150nm的過濾器則二醇的收率變差。而且，可知在用乙酸乙酯直接提取培養(yǎng)液的情況下，無法將培養(yǎng)液中的香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯與二醇進(jìn)行分離，從而無法得到高純度的二醇。并且，可知在離心分離培養(yǎng)液后除去上清液，再用乙酸乙酯提取的情況下，不僅無法得到高純度的二醇，而且收率也變差。實(shí)施例59分別用表2所示的口徑的過濾器來吸引過濾用手KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液2(30mL)后，用30mL的蒸餾水(SP值為23.4)反復(fù)洗滌3次。另外，過濾及洗滌時(shí)候的溫度為室溫(20°C)。然后，將得到的濾餅分別溶解在乙醇(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(SP值為13.0)(30mL)中，用0.2pm的過濾器過濾各溶解液后，通過減壓干燥過濾液得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表2中顯示。比較例5混合用Acomj;c故w.KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液2(20mL)和乙酸乙酯(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(60mL)，離心分離(3000rpm，5分鐘)后回收上清液(54mL)。然后，進(jìn)一步離心分離(3000rpm，5分鐘)后回收上清液，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表2中顯示。比較例6離心分離(3000rpm，5分鐘)用^^comjce&^.KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液2(20mL)后，回收沉淀，再與乙酸乙酯(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(60mL)混合。然后，再離心分離G000rpm，5分鐘)后回收上清液，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表2中顯示。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>從以上結(jié)果可知采用口徑為1010(Vm的過濾器過濾培養(yǎng)液，并用水洗滌后，將得到的濾餅溶解在乙醇中，然后用過濾器過濾，能夠高收率地得到高純度的二醇。實(shí)施例10用口徑為10pm的過濾器來吸引過濾用Acow_yc"e取KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液2(30mL)后，用20%乙醇水溶液(SP值為21.3)30mL反復(fù)洗滌3次。另外，過濾及洗滌時(shí)候的溫度為室溫(20°C)。然后，將所得到的各濾餅溶解在乙醇(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(SP值為13.0)(30mL)中。用0.2pm的過濾器過濾該溶解液后，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表3中顯示。實(shí)施例11除了用30%乙醇溶液(SP值為20.3)30mL反復(fù)洗滌3次，將所得到的濾餅溶解在乙醇(和光純藥工業(yè)(株)，特級(jí)試劑)(SP值為13.0)(30mL)中后，用0.2pm的過濾器過濾該溶解液以外，與實(shí)施例10同樣得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表3中顯示。比較例7及8除了分別用表3所示的口徑的過濾器來吸引過濾培養(yǎng)液，并用40%乙醇水溶液(SP值為19.3)30mL洗滌以外，與實(shí)施例10同樣得到二醇的結(jié)晶。結(jié)果在表3中顯示。表3過濾器口徑(pm)乙醇濃度(％)(SP値)二醇純度(%)二醇收率(％)實(shí)施例101020(21.3)97.090.6實(shí)施例111030(20.3)97.390.7比較例72040(19.3)96.773.2比較例84040(19.3)97.462.8從表3結(jié)果可知用SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑洗滌，可以僅分離'精制二醇，而與之相對(duì)，當(dāng)采用SP值在8.320(cal/cm3)1/2范圍內(nèi)的溶劑洗滌時(shí)，二醇會(huì)與香紫蘇醇和香紫蘇內(nèi)酯一起溶解，從而無法高收率地得到高純度的二醇。實(shí)施例12用400目(34j^m)的過濾器來吸引過濾用^scow少c"e^.KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液3(200mL)后，用200mL的蒸餾水(SP值為23.4)反復(fù)洗滌6次。另外，過濾及洗滌時(shí)候的溫度為室溫(20°C)。結(jié)果在表4及圖1中顯示。12比較例9將與實(shí)施例12同樣的用Acom^c^e平KSM-JL2842菌株進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化所得到的培養(yǎng)液3(100mL)和乙酸乙酯(和光純藥工業(yè)(株)混合，特級(jí)試劑)(150mL)混合，回收乙酸乙酯層(145mL)。然后，用0.2pm的過濾器過濾，回收濾液，通過減壓干燥得到二醇的結(jié)晶。另外，過濾時(shí)候的溫度為室溫(20°C)。結(jié)果在表4及圖1中顯示。表4二醇(％)香紫蘇內(nèi)酯(％)香紫蘇醇(％)培養(yǎng)液387.910.12.0實(shí)施例12(過濾后)89.98.71.4實(shí)施例12(水洗后)99.20.30.5比較例9(乙酸乙酯提取法)88.98.82.3從表4結(jié)果可知與用乙酸乙酯提取法的精制相比較，根據(jù)本發(fā)明的方法精制的二醇的純度高。權(quán)利要求1.一種式(2)所示的1-(2-羥乙基)-2，5，5，8a-四甲基十氫萘-2-醇的制造方法，其特征在于，將下式(1a)和/或(1b)所示的化合物作為基質(zhì)通過微生物轉(zhuǎn)化得到培養(yǎng)液，將該培養(yǎng)液用篩孔度為10～100μm的過濾器過濾，并用水或用SP值不為8.3～20(cal/cm3)1/2的溶劑洗滌過濾器上的殘?jiān)?，將得到的濾餅溶解在SP值為8.3～20(cal/cm3)1/2的溶劑中，然后過濾或離心分離溶解液。2.如權(quán)利要求1所述的制造方法，其特征在于，所述SP值不為8.320(cal/cm3)1/2的溶劑為己烷、環(huán)己垸、30%以下的乙醇水溶液或水，SP值為8.320(cal/cm"^的溶劑為乙醇、甲醇、l-丙醇、2-丙醇、乙酸、甲苯、乙酸乙酯、l-戊醇、丙酮或二甘醇。3.如權(quán)利要求1或2所述的制造方法，其特征在于，所述培養(yǎng)液是包含式(la)和/或(lb)所示的化合物、3a，6,6,9a-四甲基十氫萘并[2,l-b]呋喃-2(lH)-酮以及式(2)所示的l-(2-羥乙基)-2,5,5,8a-四甲基十氫萘-2-醇的培養(yǎng)液。4.l-(2-羥乙基)-2,5，5，8a-四甲基十氫萘-2-醇，其特征在于，是通過權(quán)利要求13中的任一項(xiàng)所述的制造方法得到的。全文摘要本發(fā)明涉及一種式(2)所示的二醇的制造方法，其特征在于，將式(1a)和/或(1b)所示的化合物作為基質(zhì)通過微生物轉(zhuǎn)化得到培養(yǎng)液，將該培養(yǎng)液用篩孔度為10～100μm的過濾器過濾，并用水或用SP值不為8.3～20(cal/cm³)^1/2的溶劑洗滌后，將得到的濾餅溶解在SP值為8.3～20(cal/cm³)^1/2的溶劑中，然后進(jìn)行過濾或離心分離。根據(jù)本發(fā)明，能夠高效地以高純度制造作為3a，6，6，9a-四甲基十二氫萘并[2，1-b]呋喃的制造中間體有用的1-(2-羥乙基)-2，5，5，8a-四甲基十氫萘-2-醇。文檔編號(hào)C12P7/02GK101622357SQ200880007000公開日2010年1月6日申請(qǐng)日期2008年3月5日優(yōu)先權(quán)日2007年3月6日發(fā)明者小山伸吾,小西宏幸,小野塚和洋,浜正勝,渡邉高明申請(qǐng)人:花王株式會(huì)社