專利名稱：具有增加的產(chǎn)量的植物的制作方法
具有增加的產(chǎn)量的植物本文公開(kāi)的本發(fā)明中提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的植 物的方法，所述方法包括在植物或其部分中增加或產(chǎn)生一種或多種活性。本發(fā)明還涉及增 強(qiáng)或改善轉(zhuǎn)基因植物的一種或多種性狀的核酸，以及源于此類植物或部分的細(xì)胞、后代、種 子和花粉，還涉及生產(chǎn)和使用此類植物細(xì)胞或植物、后代、種子或花粉的方法。特別地，所述 改善的性狀顯示為增加的產(chǎn)量，這優(yōu)選通過(guò)改善一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性狀(例如低溫耐受 性)來(lái)實(shí)現(xiàn)。在田間條件下，植物性能，例如在生長(zhǎng)、發(fā)育、生物量積累和種子產(chǎn)生的方面，取決 于植物對(duì)數(shù)種環(huán)境條件、改變和脅迫的耐受和順應(yīng)能力。鑒于開(kāi)始了農(nóng)業(yè)和園藝，人們需要 在作物培養(yǎng)中改善植物性狀。育種策略促進(jìn)作物性能經(jīng)受生物性和非生物性脅迫，改善養(yǎng) 分使用效率以及改變其它內(nèi)在(intrinsic)作物特定產(chǎn)量參數(shù)，即，通過(guò)應(yīng)用技術(shù)進(jìn)展增
加產(chǎn)量。植物是固著性生物，其因此需要應(yīng)付多種環(huán)境脅迫。一方面，生物性脅迫(例如 植物害蟲和病原體)，另一方面，非生物性環(huán)境脅迫，是植物生長(zhǎng)和生產(chǎn)力的主要限制因素 (Boyer, Plant Productivity andEnvironment, Science 218,443-448(1982) ；Bohnert 等 A,Adaptations toEnvironmental Stresses,Plant Cell7(7), 1099-1111 (1995)) ,^Sift 限制植物種植和地理分布。通常，暴露給不同脅迫的植物具有低的植物材料(例如種子、果 實(shí)或其它產(chǎn)品)產(chǎn)量。非生物性和生物性脅迫導(dǎo)致的作物損失和作物產(chǎn)量損失是顯著的經(jīng) 濟(jì)和政治因素，其導(dǎo)致食品短缺，特別是在很多不發(fā)達(dá)國(guó)家?，F(xiàn)今，用于作物和園藝改善的傳統(tǒng)手段利用選擇性育種技術(shù)，來(lái)鑒定具有想要的 特征的植物。分子生物學(xué)的進(jìn)展已經(jīng)允許以特異性方式修飾植物種質(zhì)。例如，在若干情況 下，修飾單個(gè)基因?qū)е吕缑{迫耐受性(Wang等人，2003)顯著增加以及其它產(chǎn)量相關(guān)性 狀。人們需要鑒定出賦予對(duì)多種脅迫組合的抗性的基因或者賦予在非最優(yōu)生長(zhǎng)條件下改善 的產(chǎn)量的基因。人們?nèi)孕枰b定出賦予改善植物產(chǎn)量的整體能力的基因。因此，人們需要鑒定出賦予增加的植物產(chǎn)量的基因。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加 的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括至少下述步驟增加或產(chǎn)生選自以下的一種或多種活 性(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、 3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn) 氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶 (Enoyl CoA hydratase)、烯酰-CoA 水合酶(enoyl-CoA hydratase)、烯酰-CoA 異構(gòu)酶、乙 醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié) 合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全_[?；鵢載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrugresistance protein)、多重抗藥性蛋白(multipledrug resistance protein)、NADH 脫氧 酶/NAD (P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2 受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋 白、precorrin-ey甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā) 生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subimit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇 酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋 白、yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白。術(shù)語(yǔ)“產(chǎn)量”在本文中使用時(shí)一般指來(lái)自植物(特別是作物)的可測(cè)量的產(chǎn)出 (produce) 0可以以多種方法來(lái)測(cè)量產(chǎn)量和產(chǎn)量增加(較之未經(jīng)轉(zhuǎn)化的起始或野生型植 物)，應(yīng)當(dāng)理解，技術(shù)人員將能考慮到特別的實(shí)施方案、關(guān)注的特別的作物和關(guān)注的特定目 的或應(yīng)用，應(yīng)用正確的理解。優(yōu)選地，可在存在或不存在脅迫條件下實(shí)現(xiàn)本文描述的根據(jù)本發(fā)明的植物的優(yōu)選 增強(qiáng)或改善的產(chǎn)量特征。因此，“產(chǎn)量”的含義主要取決于感興趣的作物和想要的應(yīng)用，應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域技 術(shù)人員將能從說(shuō)明書的上下文理解其在每種特別情況下的含義。就描述本發(fā)明的目的而言，增強(qiáng)或增加的“產(chǎn)量”指選自以下的一種或多種產(chǎn)量參 數(shù)生物量產(chǎn)量、干生物量產(chǎn)量、地上干生物量產(chǎn)量、地下干生物量產(chǎn)量、鮮重生物量產(chǎn)量、 地上鮮重生物量產(chǎn)量、地下鮮重生物量產(chǎn)量；可收獲部分的增強(qiáng)的產(chǎn)量，其可以是干重或鮮 重或兩者，地上或地下或兩者；增強(qiáng)的作物果實(shí)的產(chǎn)量，其可以是干重或鮮重或兩者，地上 或地下或兩者；以及優(yōu)選地，增強(qiáng)的種子的產(chǎn)量，其可以是干重或鮮重或兩者，地上或地下 或兩者。術(shù)語(yǔ)“產(chǎn)量”在本文中使用時(shí)一般指來(lái)自植物(特別是作物)的可測(cè)量的產(chǎn)出?？梢砸远喾N方式來(lái)測(cè)量產(chǎn)量和產(chǎn)量增加(與原始或野生型植物相比較)。應(yīng)當(dāng)理 解，在特別的實(shí)施方案中、所關(guān)注的特別的作物、所關(guān)注的特定目的或應(yīng)用中，技術(shù)人員能 應(yīng)用正確的含義。例如，本發(fā)明提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞或植物的方法，所述方法通過(guò)增加 或產(chǎn)生一種或多種上文所述的活性，使得所述植物較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型或 起始植物而言顯示出增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如，增加的對(duì)環(huán)境脅迫的耐受性和/或增加 的內(nèi)在產(chǎn)量和/或生物量生產(chǎn)。在一種實(shí)施方案中，產(chǎn)量增加表示增加的可收獲產(chǎn)量、生物量產(chǎn)量和/或增加的
種子產(chǎn)量。本文描述的“產(chǎn)量”在一種實(shí)施方案中表示植物的可收獲產(chǎn)量。植物產(chǎn)量可取決 于每種特別情況下感興趣的特定植物/作物以及感興趣的其意欲應(yīng)用(例如，食物生產(chǎn)、飼 料生產(chǎn)、經(jīng)加工食物生產(chǎn)、生物燃料、生物氣或酒精生產(chǎn)等等)。因此，在一種實(shí)施方案中，產(chǎn) 量被計(jì)算為收獲指數(shù)(表示為各可收獲部分的重量除以總生物量的比例)、每面積(英畝、 平方米等)的可收獲部分重量，等等。在一種實(shí)施方案中，“產(chǎn)量”指生物量產(chǎn)量，例如，干重生物量產(chǎn)量和/或鮮重生物 量產(chǎn)量。生物量產(chǎn)量指植物的地上或地下部分，這取決于特定情況(測(cè)試條件、感興趣的特定作物、感興趣的應(yīng)用，等等)。在一種實(shí)施方案中，生物量產(chǎn)量指地上和地下部分。生物量 產(chǎn)量可作為鮮重、干重或基于經(jīng)調(diào)整的濕度來(lái)計(jì)算。生物量產(chǎn)量可基于每株植物來(lái)計(jì)算，或 者可相對(duì)于特定面積來(lái)計(jì)算(例如，每英畝/平方米/或等等的生物量產(chǎn)量)。在其它一些實(shí)施方案中，“產(chǎn)量”指種子產(chǎn)量，其可通過(guò)下述一種或多種參數(shù)來(lái)測(cè) 量種子數(shù)量或飽滿種子數(shù)量(每株植物或每面積(英畝/平方米等等))；種子飽滿率(飽 滿的種子數(shù)和種子總數(shù)之間的比例)；每株植物的花數(shù)；種子生物量或總種子重量(每株植 物或每面積(英畝/平方米等等))；千粒重(TKW ；從計(jì)數(shù)的飽滿種子數(shù)及其總重量外推的； TKff的增加可能是增加的種子尺寸、增加的種子重量、增加的胚尺寸和/或增加的胚乳導(dǎo)致 的)。本領(lǐng)域還已知其它一些測(cè)量種子產(chǎn)量的參數(shù)?？梢曰诟芍鼗蝓r重來(lái)測(cè)定種子產(chǎn)量， 或者通常，基于經(jīng)調(diào)整的濕度來(lái)測(cè)定，例如，以15. 5百分比濕度進(jìn)行。根據(jù)本發(fā)明，所述增加的產(chǎn)量可通常通過(guò)增強(qiáng)或改善植物的一種或多種產(chǎn)量相關(guān) 性狀來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述增強(qiáng)或改善是較之原始或野生型植物而言的。植物的此類產(chǎn)量相關(guān)的性 狀(對(duì)其加以改善將導(dǎo)致產(chǎn)量增加)包括但不限于植物內(nèi)在產(chǎn)量能力(capacity)的增 加、改善的養(yǎng)分使用效率和/或增加的脅迫耐受性，特別是增加的非生物性脅迫耐受性。因此，在一種實(shí)施方案中，賦予植物產(chǎn)量增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀是植物的內(nèi)在產(chǎn)量 能力的增加，其可例如表現(xiàn)為改善特定(內(nèi)在)種子產(chǎn)量(例如，在增加種子/谷粒大小、 增加穗數(shù)、增加每穗種子數(shù)、改善種子飽滿、改善種子組成、改善胚或胚乳等方面)；修飾和 改善植物的固有生長(zhǎng)和發(fā)育機(jī)制(例如植物高度、植物生長(zhǎng)速率、莢果數(shù)、莢果在植物上的 位置、節(jié)間數(shù)、莢果破碎發(fā)生率、結(jié)瘤作用(nodulation)和氮固定效率、碳同化效率、幼苗 活力/早期萌發(fā)勢(shì)(early vigour)、增強(qiáng)的萌發(fā)效率(在脅迫或非脅迫條件下)、植物構(gòu)造 改善、細(xì)胞周期修飾、光合作用修飾、多種信號(hào)傳導(dǎo)途徑修飾、對(duì)轉(zhuǎn)錄調(diào)控的修飾、對(duì)翻譯調(diào) 控的修飾、對(duì)酶活性的修飾等)；等等。因此，在一種實(shí)施方案中，賦予植物產(chǎn)量增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀是植物脅迫耐受性 的改善或增加，其可例如表現(xiàn)為改善或增加植物對(duì)脅迫(特別是非生物性脅迫)的耐受 性。在本申請(qǐng)中，非生物性脅迫通常指植物通常面對(duì)的非生物性的環(huán)境條件，其包括通常被 稱為“非生物性脅迫”條件的那些條件，這包括但不限于，干旱(對(duì)干旱的耐受可作為改善 的水使用效率的結(jié)果獲得)、熱、低溫和寒冷條件(例如冰凍和嚴(yán)寒條件)、鹽度、滲透脅迫、 陰、高植物密度、機(jī)械脅迫、氧化脅迫等等。因此，在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，通過(guò)增加“植物的養(yǎng)分使用效率”來(lái)介導(dǎo)增加 的植物產(chǎn)量，這例如通過(guò)改善養(yǎng)分(包括但不限于磷、鉀和氮)的使用效率。例如，人們需要這樣的植物，其能更有效地使用氮，使得生長(zhǎng)需要更少的氮，因此 導(dǎo)致氮缺乏條件下獲得改善的產(chǎn)量水平。此外，可用目前或標(biāo)準(zhǔn)的氮使用水平獲得更高的產(chǎn)量。因此，在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，通過(guò)增加植物或其部分的氮使用效率來(lái)增加 植物產(chǎn)量。因此，本發(fā)明的另一目的是提供這樣的植物，其較之相應(yīng)的野生型植物，顯示出 增強(qiáng)的氮使用效率，和/或，在受限的氮供應(yīng)條件下，展示出增加的產(chǎn)量。相對(duì)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的收益而言，氮肥成本高并且對(duì)環(huán)境有害，人們想要開(kāi)發(fā)策略，以降 低氮輸入和/或優(yōu)化氮攝取和/或利用給定的氮有效性同時(shí)保持植物(優(yōu)選栽培植物，例 如作物)的最優(yōu)產(chǎn)量、生產(chǎn)力和品質(zhì)。此外，人們還想在在低肥料輸入時(shí)保持作物產(chǎn)量，或
11者在相似或甚至更貧瘠的土壤品質(zhì)上獲得更高的產(chǎn)量。可根據(jù)下述方法來(lái)測(cè)定和定量植物 增強(qiáng)的NUE。在培養(yǎng)室(Svaliif Weibull5 Svalov, Sweden)中的盆中培養(yǎng)轉(zhuǎn)化植物。在植
物為擬南芥的情況下，將其種子種在盆中，其中含有營(yíng)養(yǎng)缺乏土((“Einheitserde Typ 0”， 30%粘土，Tantau,Wansdorf Germany))和沙子的 1 1 (ν ν)混合物。通過(guò)黑暗中 4°C 下的4天時(shí)間來(lái)誘導(dǎo)萌發(fā)。隨后植物生長(zhǎng)在標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)條件下。在植物為擬南芥的情況下，標(biāo) 準(zhǔn)培養(yǎng)條件為16小時(shí)光照和8小時(shí)黑暗的光周期、20°C、60%相對(duì)濕度、200 μ E/m2S的光 子通量密度。在植物為擬南芥的情況下，每隔一天用N缺乏營(yíng)養(yǎng)液澆水。9至10天后，將植 物單獨(dú)培養(yǎng)。總共29至31天后，收獲植物，通過(guò)植物地上部分(優(yōu)選地，蓮座(rosettes)) 的鮮重對(duì)其加以評(píng)估。在另一實(shí)施方案中，按照實(shí)施例所述的方法來(lái)測(cè)定干旱耐受性。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及增加產(chǎn)量的方法，所述方法包括下述步驟(a)測(cè)量土壤中的N含量，以及(b)測(cè)定土壤中的N-含量對(duì)原始或野生型植物(例如作物)的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)是否最優(yōu) 或并非最優(yōu)，以及(cl)如果N-含量對(duì)于原始或野生型植物的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)并非最優(yōu)的話，在所述土壤 中培育本發(fā)明的植物，或者(c2)如果N-含量對(duì)于原始或野生型植物來(lái)說(shuō)最優(yōu)的話，在土壤中培育本發(fā)明的 植物，將產(chǎn)量與標(biāo)準(zhǔn)、原始或野生型植物的產(chǎn)量相比，選擇和培育顯示最高產(chǎn)量的植物。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，通過(guò)增加植物的脅迫耐受性來(lái)增加植物產(chǎn)量。通常，術(shù)語(yǔ)“增加的脅迫耐受性”可被定義為較之未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型或起始植物而 言，在脅迫條件下植物的存活和/或更高的產(chǎn)量生產(chǎn)。在其生命周期中，植物通常要面對(duì)多樣環(huán)境條件。在某些情況下可能對(duì)植物產(chǎn)量 造成影響的任何此類條件在本文中都被稱為“脅迫”條件。環(huán)境脅迫通?？煞譃樯镄院?非生物性(環(huán)境)脅迫。不利的養(yǎng)分條件一些時(shí)候也被稱為“環(huán)境脅迫”。本發(fā)明也包括針 對(duì)這類環(huán)境脅迫的解決方案，例如，在增加的養(yǎng)分使用效率的方面。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，通過(guò)增加植物或其部分的非生物性脅迫耐受性，來(lái) 增加植物產(chǎn)量。就本發(fā)明描述的目的而言，術(shù)語(yǔ)“增強(qiáng)的非生物性脅迫耐受性”、“增強(qiáng)的非生物性 環(huán)境脅迫抗性”、“增強(qiáng)的環(huán)境脅迫耐受性”、“改善的環(huán)境脅迫適應(yīng)性”和與其含義類似的其 它變化和表達(dá)可互換使用，它們用于表示(但不限于)較之相應(yīng)原始或野生型植物或其部 分而言，對(duì)本文所述的一種或多種非生物性環(huán)境脅迫的耐受性的改善。術(shù)語(yǔ)非生物性脅迫耐受性指，例如，低溫耐受性、干旱耐受性、熱耐受性、鹽脅迫耐 受性等等。植物中的脅迫耐受性，例如低溫、干旱、熱和鹽脅迫耐受性可具有對(duì)植物生長(zhǎng)來(lái)說(shuō) 重要的共同主題，即，水的有效性。通常，植物在其生命周期中暴露給降低的環(huán)境水含量的 條件。保護(hù)策略與嚴(yán)寒耐受性的那些相似。因此，在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，所述產(chǎn)量相關(guān)性狀涉及本發(fā)明植物的增加的 水使用效率和/或本發(fā)明植物的增加的干旱條件耐受性。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，干旱脅迫表示導(dǎo)致植物中缺水或者供應(yīng)給植物的水 降低的任何環(huán)境脅迫，其包括低溫和/或鹽導(dǎo)致的次級(jí)脅迫和/或干旱或熱期間的初級(jí)脅 迫，例如脫水(desiccation)等等?？筛鶕?jù)下述方法來(lái)測(cè)定和定量增加的干旱條件耐受性。將轉(zhuǎn)化的植物單個(gè)培養(yǎng)在培養(yǎng)室(York Indus-triekalte GmbH, Mannheim, Germany)中的盆中。誘導(dǎo)萌發(fā)。在植物為擬南芥的情況下，將種植的種子保持在黑暗中在 4°C下保持3天以誘導(dǎo)萌發(fā)。其后將條件改變?yōu)?0°C /6°C的日夜溫度和16/8小時(shí)150 μ E/ m2S的日夜周期，保持3天。然后將植物在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。在植物為擬南芥的情況 下，標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件為16小時(shí)光照和8小時(shí)黑暗的光周期、20°C、60%相對(duì)濕度和200 μ E的 光子通量密度。培養(yǎng)并栽培植物直至長(zhǎng)出葉。在植物為擬南芥的情況下，每天澆水直至約 為3周齡。這時(shí)通過(guò)斷水施加干旱。在未轉(zhuǎn)化野生型植物顯示可見(jiàn)損傷癥狀之后，開(kāi)始進(jìn) 行評(píng)估，在連續(xù)的5至6天中，根據(jù)與野生型和臨近植物相比的干旱癥狀和生物量產(chǎn)生對(duì)植 物進(jìn)行評(píng)分。在另一實(shí)施方案中，根據(jù)實(shí)施例中描述的方法來(lái)測(cè)定干旱耐受性，例如，對(duì)周期性 干旱的耐受性。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，干旱耐受性是對(duì)周期性干旱的耐受性。因此，在一種實(shí) 施方案中，本發(fā)明涉及增加產(chǎn)量的方法，所述方法包括下述步驟(a)測(cè)定用于栽種的地區(qū)的水供應(yīng)對(duì)于原始或野生型植物(例如作物)的生長(zhǎng)來(lái) 說(shuō)是否最優(yōu)或并非最優(yōu)，和/或，測(cè)定用于栽種的地區(qū)中植物生長(zhǎng)的可視損傷癥狀；以及(bl)如果水供應(yīng)對(duì)于原始或野生型植物的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)并非最優(yōu)的話，或者，在該地 區(qū)生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)、原始或野生型植物中可發(fā)現(xiàn)干旱的可視癥狀的話，在所述土壤中培育本發(fā) 明的植物，或者(b2)如果水供應(yīng)對(duì)于原始或野生型植物來(lái)說(shuō)最優(yōu)的話，在所述土壤中培育本發(fā)明 的植物，將產(chǎn)量與標(biāo)準(zhǔn)、原始或野生型植物的產(chǎn)量相比，選擇和培育顯示最高產(chǎn)量的植物。可視損傷癥狀表示下述特征之一或其中兩種、三種或更多種的任何組合a)萎蔫，b)葉變成褐色，c)失去膨壓，導(dǎo)致葉或針葉莖和花脫落，d)葉或針葉下垂和/或脫落，e)葉為綠色，但葉面角與對(duì)照相比稍朝向地面，f)葉片開(kāi)始內(nèi)卷(卷曲)，g)葉或針葉過(guò)早衰老，h)葉或針葉中喪失葉綠素和/或變黃。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的植物的所述產(chǎn)量相關(guān)性狀是所述植物的增 加的熱條件耐受性。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的植物的所述產(chǎn)量相關(guān)性狀是所述植物的增 加的低溫耐受性，即，包含冰凍耐受性和/或嚴(yán)寒耐受性。低溫沖擊多種生物過(guò)程。其延遲或抑制幾乎所有代謝和細(xì)胞過(guò)程。植物對(duì)低溫的 應(yīng)答是其生態(tài)范圍的重要決定因素。在高緯度或高海拔地區(qū)，因?yàn)橄募径虝簭亩枰娱L(zhǎng)生長(zhǎng)季節(jié)，應(yīng)付低溫的問(wèn)題尤為重要。大多數(shù)植物進(jìn)化出了適應(yīng)性策略，以保護(hù)其自身抵擋低溫。通常，對(duì)低溫的適應(yīng)可 分為嚴(yán)寒耐受性和冰凍耐受性。嚴(yán)寒耐受性是在來(lái)自溫帶或北方帶的物種中天然發(fā)現(xiàn)的，其允許在較低但是不冰 凍的溫度下存活和有增強(qiáng)的生長(zhǎng)。來(lái)自熱帶或亞熱帶的物種是嚴(yán)寒敏感性的，其在發(fā)育的 一個(gè)或多個(gè)階段，在大約10°c的溫度下通常會(huì)顯示出萎蔫、萎黃或壞死，生長(zhǎng)緩慢，甚至死 亡。因此，改善或增強(qiáng)的“嚴(yán)寒耐受性”或其變化形式在本文中表示對(duì)10°c左右的較低但是 并不冰凍的溫度具有改善的適應(yīng)，優(yōu)選對(duì)1至18°c的溫度，更優(yōu)選4-14°C的溫度，最優(yōu)選8 至12°C的溫度具有改善的適應(yīng)，所述溫度在下文中稱為“嚴(yán)寒溫度”。冰凍耐受性允許在接近0到特別地低于0度的溫度下存活。其被認(rèn)為是通過(guò)被稱 為寒冷順應(yīng)的過(guò)程促進(jìn)的，該過(guò)程在較低但不冰凍的溫度下發(fā)生，其在低于0度的溫度下 提供增加的冰凍耐受性。此外，來(lái)自溫帶地區(qū)的大多數(shù)物種具有適應(yīng)溫度季節(jié)性變化的生 命周期。對(duì)這些植物而言，低溫還可能通過(guò)成層現(xiàn)象和春化過(guò)程在植物發(fā)育中發(fā)揮重要作 用。顯然，難于對(duì)嚴(yán)寒耐受性和冰凍耐受性加以定義或在其之間進(jìn)行清晰的區(qū)別，所述過(guò)程 可能重疊或互相聯(lián)系。改善或增強(qiáng)的“冰凍耐受性”或其變化形式在本文中指對(duì)接近或低于0度的溫度 的改善的適應(yīng)性，即，所述溫度優(yōu)選低于4°C，更優(yōu)選低于3或2°C，特別優(yōu)選為是或低于 0(零)°C或低于_4°C的溫度，或者甚至極端低的溫度，可低至-10°C或更低；上述溫度在下 文中被稱為“冰凍溫度”。對(duì)環(huán)境脅迫(例如冰凍和/或嚴(yán)寒溫度)的“改善的適應(yīng)性”在本文中指在上文 中更詳細(xì)定義的一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性狀方面，導(dǎo)致產(chǎn)量增加的改善的植物性能。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的植物在暴露給對(duì)嚴(yán)寒敏感性野生型或原始植 物而言的低溫之后，可顯示出早期幼苗生長(zhǎng)，在另一實(shí)施方案中，改善種子萌發(fā)速率。種子 萌發(fā)過(guò)程強(qiáng)烈依賴于環(huán)境溫度，種子的性質(zhì)決定了暴露給低溫時(shí)萌發(fā)和幼苗出現(xiàn)期間的活 性水平和性能。本發(fā)明的方法在一種實(shí)施方案中還提供了下述植物，所述植物在嚴(yán)寒條件 下顯示出降低的葉發(fā)育遲滯。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法涉及對(duì)耐受性的主要作物的生產(chǎn)，所述作物例 如玉米(玉蜀黍)、豆、稻、大豆、棉花、西紅柿、香蕉、黃瓜或馬鈴薯，因?yàn)榇蠖鄶?shù)主要作物都 是嚴(yán)寒敏感性的?？衫缤ㄟ^(guò)下述方法來(lái)測(cè)定增強(qiáng)的對(duì)低溫的耐受性在培養(yǎng)室(例如York，Mannheim，Germany)中的盆中培育轉(zhuǎn)化的植物。在植物為 擬南芥的情況下，將其種子種在含有富營(yíng)養(yǎng)土(GS90，Tantau，WansdOrf，Germany)和沙子 的3. 5 1 (ν/ν)混合物中。植物在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)。在植物為擬南芥的情況下，標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)條件為16小時(shí)光照和8小時(shí)黑暗的光周期，60%相對(duì)濕度和200ymol/m2S的光子通 量密度。培養(yǎng)并栽培植物。在植物為擬南芥的情況下，每隔一天澆水。9至10天后將植物 單獨(dú)培養(yǎng)。在播種14天后施加寒冷(例如11至12°C的寒冷)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束?？傆?jì)培養(yǎng)29 至31天后，收獲植物并根據(jù)植物的地上部分(在擬南芥的情況下優(yōu)選為蓮座)鮮重進(jìn)行評(píng) 分。。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及增加產(chǎn)量的方法，所述方法包括下述步驟
(a)測(cè)定用于栽種的地區(qū)的溫度對(duì)于原始或野生型植物(例如作物)來(lái)說(shuō)是否最 優(yōu)或并非最優(yōu)；以及(bl)如果溫度對(duì)于該地區(qū)生長(zhǎng)的原始或野生型植物的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)是并非最優(yōu)的低 的話，在所述土壤中培育本發(fā)明的植物；或者(b2)如果溫度對(duì)于原始或野生型植物來(lái)說(shuō)最優(yōu)的話，在所述土壤中培育本發(fā)明的 植物，將產(chǎn)量與標(biāo)準(zhǔn)、原始或野生型植物的產(chǎn)量相比，選擇和培育顯示最高產(chǎn)量的植物。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，產(chǎn)量相關(guān)性狀還可以是增加的鹽度耐受性(鹽耐受 性)，滲透脅迫耐受性，增加的遮蔽耐受性，增加的高植物密度耐受性，增加的機(jī)械脅迫耐受 性和/或增加的氧化脅迫耐受性。因此，在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，通過(guò)改善本文定義的一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性 狀來(lái)增加產(chǎn)量。因此本發(fā)明提供了通過(guò)增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄 糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3-甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、 醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系 統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂 合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白 質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙 醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié) 合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；?載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistanceprotein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH 脫 氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào) 2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣 蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞 形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complexsubunit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、T0RC1的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋 白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、 yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a-蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的一種或多種活性，來(lái)生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生型植物而言顯示出增加的產(chǎn) 量相關(guān)性狀的轉(zhuǎn)基因植物的方法。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生型植物而言顯 示出增加的脅迫抗性(特別是非生物性脅迫抗性)的植物的方法，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn) 生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。在另一實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的以及通過(guò)本 發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物顯示的非生物性脅迫抗性是增加的低溫耐受性，特別是增加的嚴(yán)寒耐受 性。在另一實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的以及通過(guò)本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物顯示的非 生物性脅迫抗性是增加的干旱耐受性，特別是增加的周期性干旱耐受性。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生型植物而言顯示出增 加的內(nèi)在產(chǎn)量的植物的方法，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生型植物而言顯示出增 加的養(yǎng)分使用效率的植物的方法，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。 在另一實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的以及通過(guò)本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物顯示的養(yǎng)分使 用效率是增加的氮使用效率。因此，在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物，源于此類植物的 后代、種子和/或花粉的方法，它們每種較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞或植 物而言都顯示出增加的低溫耐受性(特別是嚴(yán)寒耐受性)，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生一種 或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。。因此，在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物，源于此類植物的 后代、種子和/或花粉的方法，它們每種較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞或植 物而言都顯示出增加的低溫耐受性以及氮使用效率(NUE)和/或增加的內(nèi)在產(chǎn)量和/或周 期性干旱耐受性，特別是嚴(yán)寒耐受性，和干旱耐受性，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生一種或多種 所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。因此，在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物，源于此類植物的 后代、種子和/或花粉的方法，它們每種較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞或植 物而言都顯示出增加的低溫耐受性以及氮使用效率(NUE)和增加的周期性干旱耐受性或 增加的內(nèi)在產(chǎn)量，特別是嚴(yán)寒耐受性，和干旱耐受性和增加的生物量，所述方法通過(guò)增加或 產(chǎn)生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。因此，在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物，源于此類植物的 后代、種子和/或花粉的方法，它們每種較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞或植 物而言都顯示出增加的低溫耐受性以及氮使用效率(NUE)或增加的周期性干旱耐受性和 增加的內(nèi)在產(chǎn)量，特別是嚴(yán)寒耐受性，和干旱耐受性和增加的生物量，所述方法通過(guò)增加或 產(chǎn)生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。因此，在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供了生產(chǎn)下述轉(zhuǎn)基因植物，源于此類植物的 后代、種子和/或花粉的方法，它們每種較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞或植 物而言都顯示出增加的低溫耐受性以及氮使用效率(NUE)和增加的周期性干旱耐受性和 增加的內(nèi)在產(chǎn)量，特別是嚴(yán)寒耐受性，和干旱耐受性和增加的生物量，所述方法通過(guò)增加或 產(chǎn)生一種或多種所述活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。此外，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物 細(xì)胞或植物而言顯示出一種或多種增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀的轉(zhuǎn)基因植物，這通過(guò)增加或產(chǎn)生 選自上文所述的活性的組的一種或多種活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。此外，本發(fā)明涉及生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的植物的方法， 所述方法包括選自以下的至少一種步驟(i)增加或產(chǎn)生下述多肽的活性，所述多肽包含表II或表IV的第5或7欄分別示 出的多肽、共有序列或至少一種多肽基序；(ii)增加或產(chǎn)生包含表I的第5或7欄示出的多核苷酸的核酸分子的表達(dá)產(chǎn)物的 活性，以及(iii)增加或產(chǎn)生(i)或(ii)的功能性等價(jià)物的活性。在一種實(shí)施方案中，所述一種或多種活性的增加或產(chǎn)生是通過(guò)下述一種或多種核
16酸序列賦予的，所述核酸序列包含選自表I第5或7欄所示的組的多核苷酸。因此，所述一 種或多種活性的增加或產(chǎn)生例如是通過(guò)所述核酸分子的一種或多種表達(dá)產(chǎn)物(例如蛋白) 賦予的。因此，在上文所述的本發(fā)明中，所述一種或多種活性的增加或產(chǎn)生例如是通過(guò)下述 一種或多種蛋白賦予的，所述蛋白每種都包含選自表II的第5和7欄示出的組的多肽。就本發(fā)明描述的目的而言，具有選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷 酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移 酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合 蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn) 移酶樣蛋白(NAD(P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白 質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰 轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺 合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、 己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧 化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistanceprotein)、多重 抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧 化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原 酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin_樣蛋白、precorrin_6y甲基化酶、降 解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨 酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complexsubunit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl 的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、 尿苷二磷酸-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yer 175w-a-蛋白、yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、 YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的活性的蛋白，包含表I第5或7欄所示的 一種或多種核酸序列編碼的多肽的蛋白，或包含表II的第5和7欄示出的多肽的蛋白也被 稱為“產(chǎn)量相關(guān)蛋白”或“YRP”。因此，本發(fā)明的或根據(jù)本發(fā)明使用的、編碼具有選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫 氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn) 移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn) 送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷 脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋 白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、 乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié) 合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；鵢載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistanceprotein)、NADH 脫 氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào) 2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣 蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài) 發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosomecomplexsubimit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇 酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋 白、yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的活 性的蛋白的基因，編碼包含表I第5或7欄所示的核酸序列編碼的多肽的蛋白的基因，和/ 或編碼包含表II的第5和7欄示出的多肽的蛋白的基因，也被稱為“YRP編碼基因”。因此，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生 型植物而言顯示出增加的產(chǎn)量的植物，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油-3-磷 酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphat印h0sphatase)、3-甲基_2_氧代丁 酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋 白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、 B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn) 錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、 烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA 組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原 合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全_[酰基_載體-蛋白]合 酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥 個(gè)生蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥j"生蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò) 氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨 酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基 (signalosome complex subunit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、 轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn) 蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_ 蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白 和YNR040W-蛋白的一種或多種活性來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述活性是通過(guò)包含選自表I的第5或7欄所 示的組的多核苷酸的一種或多種核酸序列賦予的，或是通過(guò)下述一種或多種蛋白賦予的， 所述蛋白每種包含選自表I的第5或7欄所示的組的一種或多種核酸序列編碼的多肽，或 者是通過(guò)下述一種或多種蛋白賦予的，所述蛋白每種包含選自表II的第5和7欄示出的組 的多肽。如所提到的，產(chǎn)量增加可通過(guò)一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性狀來(lái)介導(dǎo)。因此，本發(fā)明的方 法涉及生產(chǎn)顯示所述一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物。因此，本發(fā)明提供了一種方法，用于生產(chǎn)顯示出增加的養(yǎng)分使用效率例如氮使用 效率(NUE)，增加的脅迫抗性特別是非生物性脅迫抗性，增加的養(yǎng)分使用效率，增加的水使 用效率和/或增加的脅迫抗性特別是非生物性脅迫抗性，特別是低溫耐受性或干旱耐受 性，或增加內(nèi)在產(chǎn)量的植物。在一種實(shí)施方案中，通過(guò)增加具有下述活性的一種或多種蛋白(例如，或者表II 第5和7欄示出的一種或多種多肽)的量和/或比活性，來(lái)增加選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、 2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphat印hosphatase)、3_甲基_2_氧代丁酸酯羥甲 基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯 糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、
18心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制 蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、 乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié) 合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全_[?；鵢載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH 脫 氫酶/NAD (P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào) 2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣 蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài) 發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subimit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇 酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋 白、yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的所 述活性。此外，本發(fā)明涉及生產(chǎn)較之相應(yīng)原始或野生型轉(zhuǎn)基因植物而言具有增加的產(chǎn)量的 植物的方法，所述方法包括(a)在植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物或其部分中增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油_3_磷 酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基_2_氧代丁 酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋 白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、 B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn) 錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、 烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA 組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原 合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；?載體-蛋白]合 酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥 個(gè)生蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥j"生蛋白(multiple drugresistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò) 氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨 酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基 (signalosome complex subunit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、 轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn) 蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白 和YNR040W-蛋白的一種或多種活性；以及(b)在允許所述植物細(xì)胞、植物或其部分發(fā)育的條件下，種植或培育所述植物細(xì) 胞、植物或其部分；以及(c)回收較之相應(yīng)的(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)原始或野生型植物而言顯示出增加的產(chǎn)量的植物；(d)以及任選地，選擇較之相應(yīng)的(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植 物或其部分(顯示出可視缺陷癥狀和/或死亡)而言，顯示出增加的產(chǎn)量(優(yōu)選改善的養(yǎng) 分使用效率和/或非生物性脅迫抗性)的植物或其部分。此外，還本發(fā)明還涉及鑒定出具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括針對(duì) 選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase), 3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn) 氨酶、Β1906-蛋白、Β3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合 酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨 糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(componentprotein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移 酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰 基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的 鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrierprotein)、Pirin-樣蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋 白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的活性，對(duì)一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或 植物或其部分的群體進(jìn)行篩選，將活性水平與參照的活性水平加以比較；鑒定出較之參照 而言活性增加的一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分，任選地，從 鑒定出的植物細(xì)胞核、細(xì)胞或組織產(chǎn)生植物。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及鑒定出具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述 方法包括針對(duì)編碼賦予下述活性的多肽的核酸的表達(dá)水平，對(duì)一種或多種植物細(xì)胞核、 植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分的群體進(jìn)行篩選，所述活性選自(DL)-甘油-3-磷 酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基_2_氧代丁 酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道 蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋 白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于 在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水 合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性 酶IIA組分蛋白(componentprotein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫 氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；?載 體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)
^iilI^tiS S (multidrug resistance protein) > ^MifiI^iiS S (multipledrug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrierprotein)、Pirin-樣蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋 白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白，將表達(dá)水平與參照加以比較；鑒定出較之參照而言表達(dá)水 平增加的一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分，任選地，從鑒定出 的植物細(xì)胞核、細(xì)胞或組織產(chǎn)生植物。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及增加植物的群體的產(chǎn)量的方法，所述方法包括檢 查用于栽種的地區(qū)的生長(zhǎng)溫度，將所述溫度與考慮用于栽種的植物物種或品種的最優(yōu)生長(zhǎng) 溫度相比較，如果生長(zhǎng)溫度對(duì)于考慮用于栽種的植物物種或品種的栽種和培育來(lái)說(shuō)并非最 優(yōu)的話，栽種和培育本發(fā)明的植物。所述方法可部分或整體重復(fù)一次或多次。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明的一個(gè)目的是開(kāi)發(fā)一種工藝，以在光合活性生物中改 善對(duì)環(huán)境脅迫的適應(yīng)性，特別是對(duì)低溫的適應(yīng)性，即，增強(qiáng)低溫耐受性，這包括但不限于增 強(qiáng)嚴(yán)寒耐受性和/或冰凍耐受性，這是單獨(dú)表現(xiàn)或在此類增加的非生物性脅迫適應(yīng)性中一 起表現(xiàn)的，和/或開(kāi)發(fā)一種工藝，用于在非生物性脅迫(特別是低溫)條件下獲得增加的產(chǎn) 量。我們發(fā)現(xiàn)，通過(guò)提供本文所述的根據(jù)本發(fā)明的工藝，實(shí)現(xiàn)了該目的。本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型或起始植物細(xì) 胞和/或植物而言，具有增加的非生物性環(huán)境脅迫(特別是低溫)耐受性和/或在非生物 性環(huán)境脅迫(例如低溫)條件下顯示出增加的產(chǎn)量的植物細(xì)胞和/或植物。我們發(fā)現(xiàn)，通過(guò)提供本文所述的根據(jù)本發(fā)明的植物細(xì)胞和/或植物，實(shí)現(xiàn)了該目 的。在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，這些性狀通過(guò)用于在光合活性生物(優(yōu)選是植物) 中較之相應(yīng)(未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型或起始光合活性生物而言獲得增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫 耐受性的工藝來(lái)獲得。對(duì)環(huán)境脅迫(例如冰凍和/或嚴(yán)寒溫度)的“改善的適應(yīng)性”指改善的植物性能。因此，就本發(fā)明描述的目的而言，在提到對(duì)光合活性生物(優(yōu)選是植物，最優(yōu)選是 作物植物)的低溫脅迫時(shí)，術(shù)語(yǔ)“低溫”指上文所述的任何低溫條件，優(yōu)選是上文定義的嚴(yán) 寒和/或冰凍溫度，這取決于上下文的需要。在另一實(shí)施方案中，在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性”表示， 當(dāng)面對(duì)上文提到的非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度，或者干 旱)時(shí)，光合活性生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型或起始光合活性生 物而言展示出增強(qiáng)的產(chǎn)量，例如，上文所述的產(chǎn)量，例如種子產(chǎn)量或生物量產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng)的干生物量產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的地上干生物量產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的地下干生物量產(chǎn)量。在其另一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受 性”表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活 性生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增 強(qiáng)的鮮重生物量產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的地上鮮重生物量產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的地下鮮重生物量產(chǎn)量。在其另一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受 性”表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活 性生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增 強(qiáng)的植物可收獲部分產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的植物干可收獲部分產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的植物干地上可收獲部分產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的植物地下干可收獲部分產(chǎn)量。在其另一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受 性”表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增 強(qiáng)的植物鮮重可收獲部分產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的植物地上鮮重可收獲部分產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的植物地下鮮重可收獲部分產(chǎn)量。在另一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的作物果實(shí)產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的新鮮作物果實(shí)產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的干作物果實(shí)產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的谷粒干重。在另一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的種子產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的鮮重種子產(chǎn)量。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)在光合活性生物中“增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性” 表示，當(dāng)面對(duì)非生物性環(huán)境脅迫條件(例如低溫條件，包括嚴(yán)寒和冰凍溫度)時(shí)，光合活性 生物(優(yōu)選是植物)較之相應(yīng)(例如，未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言展示出增強(qiáng) 的干種子產(chǎn)量。 在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，這些性狀通過(guò)用于在光合活性生物(優(yōu)選是植物)中、較之相應(yīng)(未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型或起始光合活性生物而言、在環(huán)境脅迫(特別是非生物 性環(huán)境脅迫)條件下獲得增加的產(chǎn)量的工藝來(lái)獲得。在其一種實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“增加的產(chǎn)量”表示，光合活性生物(尤其是植物)在 非生物性環(huán)境脅迫條件下，較之相應(yīng)的野生型光合活性生物，展示出增加的產(chǎn)量，例如，展 示出增加的生長(zhǎng)速率。增加的生長(zhǎng)速率可通過(guò)增加的整株植物生物量生產(chǎn)或增加的植物地上部分生物 量生產(chǎn)或增加的植物地下部分生物量生產(chǎn)或增加的植物的部分(例如莖、葉、花、果實(shí)和/ 或種子)的生物量生產(chǎn)來(lái)表現(xiàn)，或增加的生長(zhǎng)速率可賦予增加的整株植物生物量生產(chǎn)或 增加的植物地上部分生物量生產(chǎn)或增加的植物地下部分生物量生產(chǎn)或增加的植物的部分 (例如莖、葉、花、果實(shí)和/或種子)的生物量。在其一種實(shí)施方案中，增加的產(chǎn)量包括更高的果實(shí)產(chǎn)量、更高的種子產(chǎn)量、更高的 鮮物質(zhì)生產(chǎn)和/或更高的干物質(zhì)生產(chǎn)。在其另一實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“增加的產(chǎn)量”表示，光合活性生物(優(yōu)選是植物)，較 之相應(yīng)的(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物而言，在非生物性環(huán)境脅迫條件下，展示 出延長(zhǎng)的生長(zhǎng)。延長(zhǎng)的生長(zhǎng)包含在未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型光合活性生物顯示可視的缺陷癥狀 和/或死亡時(shí)，光合活性生物(優(yōu)選是植物)存活和/或繼續(xù)生長(zhǎng)。因此，在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化 的)野生型植物細(xì)胞而言具有增加的產(chǎn)量(例如非生物性環(huán)境脅迫耐受性或/或其它增 加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的方法，所述方法通過(guò)增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘 油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基_2_氧 代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通 道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋 白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于 在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水 合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性 酶IIA組分蛋白(componentprotein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫 氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰基-載 體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)
^iilI^tiS S (multidrug resistance protein) > ^ MifiS S (multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrierprotein)、Pirin-樣蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋 白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的一種或多種活性來(lái)實(shí)現(xiàn)。在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中，具有選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄 糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3-甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系 統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂 合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白 質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙 醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié) 合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全_[?；鵢載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistanceprotein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH 脫 氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào) 2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣 蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞 形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complexsubunit), SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋 白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、 yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a-蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的活性的蛋白質(zhì)以及表II第5和7欄示出的多肽被稱為“LTRRP”或“產(chǎn)量 相關(guān)蛋白”(“YRPs”)。兩個(gè)術(shù)語(yǔ)具有相同含義并可互換。在另一優(yōu)選實(shí)施方案中，光合活性生物(尤其是植物)在非生物性環(huán)境脅迫條件 下顯示出增加的產(chǎn)量，例如，植物顯示出增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性或其它產(chǎn)量相關(guān) 性狀。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明滿足了下述需求鑒定出新的、獨(dú)特的基因，所述基因 能在內(nèi)源和/或外源基因表達(dá)或過(guò)量表達(dá)時(shí)向光合活性生物(優(yōu)選是植物)賦予增加的產(chǎn) 量，例如，具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增加的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干 旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量 相關(guān)性狀。在其另一實(shí)施方案中，本發(fā)明滿足了下述需求鑒定出新的、獨(dú)特的基因，所述基 因能在內(nèi)源基因表達(dá)或過(guò)量表達(dá)時(shí)向光合活性生物(優(yōu)選是植物)賦予增加的產(chǎn)量，例如， 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增加的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀。在其另一實(shí)施方案中，本發(fā)明滿足了下述需求鑒定出新的、獨(dú)特的基因，所述基 因能在外源基因表達(dá)或過(guò)量表達(dá)時(shí)向光合活性生物(優(yōu)選是植物)賦予增加的產(chǎn)量，例如， 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增加的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明滿足了下述需求鑒定出新的、獨(dú)特的基因，所述基因 能在內(nèi)源和/或外源基因表達(dá)或過(guò)量表達(dá)時(shí)向光合活性生物(優(yōu)選是植物)賦予增加的非 生物性環(huán)境脅迫耐受性組合增加的產(chǎn)量。因此，本發(fā)明涉及生產(chǎn)例如轉(zhuǎn)基因的光合活性生物或其部分，或植物細(xì)胞、植物或 其部分的方法，所述方法例如用于產(chǎn)生下述植物，所述植物較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物或其部分或植物細(xì)胞、植物或其部分而言，具有增加的產(chǎn)量，例如具有增 加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增加的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或 低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，所述方 法包括(a)在光合活性生物或其部分，例如，植物細(xì)胞、植物或其部分中增加或產(chǎn)生選 自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、 3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn) 氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合 酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨 糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(componentprotein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移 酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰 基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的 鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD (P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrierprotein)、Pirin-樣蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋 白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的一種或多種活性，以及(b)在允許光合活性生物或其部分，優(yōu)選植物細(xì)胞、植物或其部分發(fā)育的條件下， 培育光合活性生物或其部分，例如植物細(xì)胞、植物或其部分，所述光合活性生物或其部分， 例如植物細(xì)胞、植物或其部分較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物或其部分， 優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分而言，具有增加的產(chǎn)量，例如，具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增加的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因 植物或其部分的方法，導(dǎo)致產(chǎn)生較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部 分而言增加的產(chǎn)量，所述方法包括(a)在所述植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物或其部分中增加或產(chǎn)生一種或多種選 自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphat印hosphatase)、 3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨 酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖 醇-特異性酶IIA組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移 酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰 基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的 鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrier protein)、Pirin_樣蛋白、precorrin_6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋 白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的活性；(b)優(yōu)選存在或不存在養(yǎng)分缺乏和/或非生物性脅迫時(shí)，在允許植物細(xì)胞、植物或 其部分發(fā)育的條件下，培育較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分顯 示出增加的產(chǎn)量的植物細(xì)胞、植物或其部分，以及(c)選擇較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分(在所述條 件下顯示可視缺陷癥狀和/或死亡)顯示出增加的產(chǎn)量，優(yōu)選改善的養(yǎng)分使用效率和/或 非生物性脅迫抗性的植物細(xì)胞、植物或其部分。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)例如轉(zhuǎn)基因的光合活性生物 或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分，它們較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合 活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分而言，具有增加的產(chǎn)量，例如，具有增加 的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低 溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，所述方法 包括(a)在光合活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分中增加或產(chǎn)生 一種或多種選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3-甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲 基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD(P)-結(jié) 合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA 水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/ 山梨糖醇_特異性酶IIA組分蛋白(componentprotein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn) 移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰 基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的 鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥性蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨 酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白 (Phosphocarrierprotein)、Pirin-樣蛋白、precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信 號(hào)復(fù)合體亞基(signalosome complex subunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異 性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的活性，(b)培育光合活性生物或其部分(優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分)與例如未經(jīng)轉(zhuǎn) 化的野生型光合活性生物或其部分(優(yōu)選地植物)，例如在非生物性環(huán)境脅迫條件下培育，(c)在例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型光合活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其 部分顯示出可視的缺陷癥狀和/或死亡之后，選擇較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光 合活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分而言，具有增加的產(chǎn)量的光合活性生 物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分，例如，具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如，增強(qiáng) 的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分 使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或另一增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀。在本說(shuō)明書通篇中的一種實(shí)施方案中，非生物性環(huán)境脅迫指低溫脅迫。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)例如轉(zhuǎn)基因的光合活性生物 或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分，例如用于生產(chǎn)所述植物，它們較之相應(yīng)(例如 未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞、植物或其部分而言，具有增 加的產(chǎn)量，例如，具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增 加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或另一增加 的產(chǎn)量相關(guān)性狀，所述方法包括(a)在光合活性生物或其部分，優(yōu)選地植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物或其部分中增 加或產(chǎn)生表II的第3欄所示的蛋白或表I第5欄所示的核酸序列編碼的蛋白的活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型光合活性生物或其部分(優(yōu)選是 植物)而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅 迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量 和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的植物發(fā)育的條件下，培育光合活性生物或其部分，優(yōu)選 地植物細(xì)胞、植物或其部分。在一種實(shí)施方案中，如表II或表I第6欄所示，在細(xì)胞的部分中，所述活性，例如 表II第3欄所示的所述蛋白或者表I第5欄所示的核酸序列編碼的蛋白的活性增加。本發(fā)明的方法在一種實(shí)施方案中包括下述步驟(i)增加或產(chǎn)生至少一種下述核酸分子的表達(dá)；和/或(ii)增加或產(chǎn)生表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)；和/或(iii)增加或產(chǎn)生至少一種下述核酸分子編碼的表達(dá)產(chǎn)物的一種或多種活性；所述核酸分子包含選自以下的核酸分子(a)編碼表II第5或7欄所示的多肽的核酸分子；(b)表I第5或7欄所示的核酸分子；(c)核酸分子，其由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性的結(jié)果，源于表II第5或7欄示出的多肽 序列，并且賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(d)核酸分子，其與包含表I的第5或7欄所示的核酸分子的多核苷酸的核酸分子 序列具有至少30%的同一性，并且，賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn) 基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(e)核酸分子，其編碼的多肽與(a)至(C)的核酸分子編碼的多肽的氨基酸序列 具有至少30%的同一性，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活 性，并且，賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增 加的產(chǎn)量；(f)核酸分子，其在嚴(yán)格雜交條件下與(a)至(C)的核酸分子雜交，并且，賦予較之 相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(g)核酸分子，其編碼的多肽可在針對(duì)(a)至(e)的一種核酸分子編碼的多肽制造 的單克隆或多克隆抗體協(xié)助下被分離出來(lái)，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的 核酸分子代表的活性；(h)核酸分子，其編碼包含表IV第7欄所示的共有序列或一種或多種多肽基序的 多肽，并且優(yōu)選具有包含表II或IV的第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性； (i)核酸分子，其編碼具有表II第5欄示出的蛋白代表的活性的多肽，并且賦予較 之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(j)核酸分子，其包含使用表III第7欄中的引物通過(guò)擴(kuò)增cDNA文庫(kù)或基因組文 庫(kù)獲得的多核苷酸，并且優(yōu)選具有包含表II或IV第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表 的活性；以及(k)核酸分子，其可通過(guò)在嚴(yán)格雜交條件下用包含(a)或(b)的核酸分子的互補(bǔ) 序列的探針或用其片段篩選合適的核酸文庫(kù)來(lái)獲得，并且編碼具有包含表II第5欄示出 的多肽的蛋白代表的活性的多肽，所述探針片段具有與(a)至(e)表征的核酸分子序列互 補(bǔ)的核酸分子的至少 15nt，優(yōu)選 20nt、30nt、50nt、100nt、200nt 或 500nt、lOOOnt、1500nt、 2000nt g 3000nto此外，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而 言具有增加的產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因植物，用包含選自以下的核酸分子的核酸分子來(lái)轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞 或植物細(xì)胞核或植物組織，以產(chǎn)生此類植物(a)編碼表II第5或7欄所示的多肽的核酸分子；(b)表I第5或7欄所示的核酸分子；(c)核酸分子，其由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性的結(jié)果，源于表II第5或7欄示出的多肽 序列，并且賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增 加的產(chǎn)量；(d)核酸分子，其與包含表I的第5或7欄所示的核酸分子的多核苷酸的核酸分子 序列具有至少30%的同一性，并且，賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn) 基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(e)核酸分子，其編碼的多肽與(a)至(C)的核酸分子編碼的多肽的氨基酸序列具 有至少30%左右的同一性，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的 活性，并且，賦予較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(f)核酸分子，其在嚴(yán)格雜交條件下與(a)至(C)的核酸分子雜交，并且，賦予較之 相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(g)核酸分子，其編碼的多肽可在針對(duì)(a)至(e)的一種核酸分子編碼的多肽制造 的單克隆或多克隆抗體協(xié)助下被分離出來(lái)，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的 核酸分子代表的活性；(h)核酸分子，其編碼包含表IV第7欄所示的共有序列或一種或多種多肽基序的 多肽，并且優(yōu)選具有包含表II或IV的第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性；(i)核酸分子，其編碼具有表II第5欄示出的蛋白代表的活性的多肽，并且賦予較 之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(j)核酸分子，其包含使用表III第7欄中的引物通過(guò)擴(kuò)增cDNA文庫(kù)或基因組文 庫(kù)獲得的多核苷酸，并且優(yōu)選具有包含表II或IV第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表 的活性；以及(k)核酸分子，其可通過(guò)在嚴(yán)格雜交條件下用包含(a)或(b)的核酸分子的互補(bǔ)序 列的探針或用其片段篩選合適的核酸文庫(kù)來(lái)獲得，并且編碼具有包含表II第5欄示出的多 肽的蛋白代表的活性的多肽，所述探針片段具有與(a)至(e)表征的核酸分子序列互補(bǔ)的 核酸分子的至少50nt，并且從該經(jīng)轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞或植物組織再生具有增加的產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基 因植物。修飾，S卩，增加，可通過(guò)內(nèi)源或外源因素導(dǎo)致。例如，在生物或其部分中活性的增加 可通過(guò)向介質(zhì)或營(yíng)養(yǎng)物中添加基因產(chǎn)物或前體或激活子或激動(dòng)劑來(lái)導(dǎo)致，或者通過(guò)將所述 物質(zhì)瞬時(shí)或穩(wěn)定引入生物中來(lái)導(dǎo)致。此外，此類增加可通過(guò)將本發(fā)明的核酸序列或編碼蛋 白引入正確的細(xì)胞區(qū)室來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述區(qū)域例如分別是細(xì)胞核或胞質(zhì)或引入質(zhì)體，這可通過(guò) 轉(zhuǎn)化和/或靶向來(lái)實(shí)現(xiàn)。就本發(fā)明描述的目的而言，術(shù)語(yǔ)“胞質(zhì)”和“非靶向”將表示，本發(fā) 明的核酸在不添加非天然轉(zhuǎn)運(yùn)肽編碼序列的情況下表達(dá)。非天然轉(zhuǎn)運(yùn)肽編碼序列是這樣的 序列其并非本發(fā)明核酸(例如表I第5或7欄示出的核酸)的天然部分，而是通過(guò)分子操 作步驟(例如實(shí)施例中“質(zhì)體靶向表達(dá)”一節(jié)描述的那些步驟)添加的。因此，術(shù)語(yǔ)“胞質(zhì)” 和“非靶向”將不排除本發(fā)明的核酸序列的產(chǎn)物通過(guò)其天然存在的序列性質(zhì)在轉(zhuǎn)基因生物 背景中靶向定位到任何細(xì)胞區(qū)室。技術(shù)人員可使用軟件工具，例如TargetP(Emanuelsson 等人，(2000), Predicting sub-cellular localization ofproteins based on their N-terminal amino acid sequence. ,J. Mol. Biol. 300,1005-1016.)>ChloroP(Emanuelsson 等人(1999), ChloroP, a neuralnetwork-based method for predicting chloroplast transit peptides and theircleavage sites. ,Protein Science,8 :978_984.)或其它予頁(yè) 貝Ij軟件工具(Emanuelsson等人(2007)，Locating proteins in the cell using TargetP, SignalP, and related tools.，Nature Protocols 2，953-971)針對(duì)生物(植物)預(yù)測(cè)源 于并入的序列的成熟多肽的亞細(xì)胞定位。因此，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物細(xì) 胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生 物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效
30率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植物或其部分， 所述方法包括(a)在植物細(xì)胞的細(xì)胞器，尤其是在質(zhì)體中增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油-3-磷 酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase)、3_甲基_2_氧代丁 酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋 白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、 B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn) 錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、 烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇_特異性酶IIA 組分蛋白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原 合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；?載體-蛋白]合 酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥 個(gè)生蛋白(multidrug resistance protein)、多重抗藥j"生蛋白(multiple drugresistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò) 氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨 酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基 (signalosome complex subunit)、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、 轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn) 蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_ 蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白 和YNR040W-蛋白的一種或多種活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，如果每份表I中第6欄中，針對(duì)下述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“質(zhì)體的” 的話，本文公開(kāi)的由表II所示的多肽賦予的活性是在質(zhì)體(例如細(xì)胞器)中增加或產(chǎn)生 的。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植 物或其部分，所述方法包括(a)在植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡 萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase) ,3-甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移 酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn) 送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、 心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD(P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上 控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性酶IIA組分蛋 白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成 起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰基-載體-蛋白]合酶、 無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性 蛋白(multidrugresistance protein)、多重抗藥 j"生蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò) 氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨 酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基 (signalosome complexsubunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn) 錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_ 蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的一種或多種活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，如果每份表I中第6欄中，針對(duì)下述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞質(zhì)” 的話，本文公開(kāi)的由表II所示的多肽賦予的活性是在細(xì)胞質(zhì)中增加或產(chǎn)生的。在一種實(shí)施方案中，本文公開(kāi)的由表II所示的多肽(作為命中(hit)44)賦予的 SLR1348活性是在線粒體中增加或產(chǎn)生的。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植 物或其部分，所述方法包括(a)在所述表的第6欄指出的細(xì)胞區(qū)室中，增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核酸 序列編碼的表II第3欄所示的蛋白的活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植 物或其部分，所述方法包括(a)在細(xì)胞器，尤其是在植物細(xì)胞的質(zhì)體中，增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核 酸序列編碼的表II第3欄所示的蛋白的活性，以及
(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，如果表I中第6欄中，針對(duì)所述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“質(zhì)體”的話， 表II所示的多肽的活性在質(zhì)體中增加或產(chǎn)生。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植 物或其部分，所述方法包括(a)在植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核酸序列編碼的表 II第3欄所示的蛋白的活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，如果表I中第6欄中，針對(duì)所述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞質(zhì)”的 話，表II所示的多肽的活性在細(xì)胞質(zhì)中增加或產(chǎn)生。在一種實(shí)施方案中，如果表I中第6欄中，針對(duì)所述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞質(zhì)”的 話，表II所示的多肽的活性在植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和其它區(qū)室，例如質(zhì)體或/或線粒體中增 加或產(chǎn)生。在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植 物或其部分，所述方法包括(a)在植物細(xì)胞的線粒體中，增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核酸序列編碼的表 II第3欄所示的蛋白的活性，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中，如果表I中第6欄中，針對(duì)所述多肽列出了術(shù)語(yǔ)“線粒體”的 話，表II所示的多肽的活性在線粒體中增加或產(chǎn)生。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的例如轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植物或其部分，所述方法包括(al)在植物細(xì)胞的細(xì)胞器中增加或產(chǎn)生選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧 葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶(phosphate phosphatase) ,3-甲基_2_氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn) 移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖 運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、 心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD(P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上 控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA 異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性酶IIA組分蛋 白(component protein)、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成 起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[?；?載體-蛋白]合酶、 無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性 蛋白(multidrugresistance protein)、多重抗藥 j"生蛋白(multiple drug resistance protein)、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò) 氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白(Phosphocarrier protein)、Pirin-樣蛋白、preC0rrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨 酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基 (signalosome complexsubunit)、SLR1094_蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn) 錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件(two-module)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸_N_乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋 白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_ 蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白和 YNR040W-蛋白的一種或多種活性，或(a2)在植物細(xì)胞中增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核酸序列編碼的表II第3 欄所示的蛋白的活性，所述核酸序列與編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列相連；或者(a3)在植物細(xì)胞中增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的核酸序列編碼的表II第3 欄所示的蛋白的活性，所述核酸序列與編碼細(xì)胞器定位序列(尤其是葉綠體定位序列)的 核酸序列相連，以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量(例如 具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性 和/或低溫耐受性和/或增加的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀) 的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種方法，用于生產(chǎn)較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的) 野生型植物細(xì)胞、植物或其部分而言具有增加的產(chǎn)量(例如具有增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀，例 如增強(qiáng)的非生物性環(huán)境脅迫耐受性，例如增加的干旱耐受性和/或低溫耐受性和/或增加 的養(yǎng)分使用效率、內(nèi)在產(chǎn)量和/或其它增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀)的轉(zhuǎn)基因的植物細(xì)胞、植物或 其部分，所述方法包括(al)通過(guò)對(duì)細(xì)胞器的轉(zhuǎn)化，在植物的細(xì)胞器中增加或產(chǎn)生表I第5或7欄所示的 核酸序列編碼的表II第3欄所示的蛋白的活性；或者(a2)通過(guò)對(duì)質(zhì)體的轉(zhuǎn)化，在植物的質(zhì)體中或其一個(gè)或多個(gè)部分中增加或產(chǎn)生表I 第5或7欄所示的核酸序列編碼的表II第3欄所示的蛋白的活性；
以及(b)在允許較之相應(yīng)(例如未經(jīng)轉(zhuǎn)化的)野生型植物而言具有增強(qiáng)的非生物性環(huán) 境脅迫耐受性和/或增加的產(chǎn)量的植物發(fā)育的條件下，培育所述植物細(xì)胞。由此，本發(fā)明還涉及下述方法，所述方法用于生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有 增加的產(chǎn)量的植物，所述增加的產(chǎn)量例如，基于增加的或改善的產(chǎn)量相關(guān)性狀，所述方法包 括至少一種選自以下的步驟(i)增加或產(chǎn)生包含表II或表IV的分別第5或7欄示出的多肽、共有序列或至少 一種多肽基序的多肽的活性；(ii)增加或產(chǎn)生包含表I第5或7欄示出的多核苷酸的核酸分子的表達(dá)產(chǎn)物的活 性，以及(iii)增加或產(chǎn)生(i)或(ii)的功能性等價(jià)物的活性。原則上，編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列可分離自每種生物，例如微生物，例如含有質(zhì)體 (優(yōu)選葉綠體)的藻類或植物?！稗D(zhuǎn)運(yùn)肽”是一種氨基酸序列，其編碼核酸序列與相應(yīng)的結(jié) 構(gòu)基因一起被翻譯。這意味著轉(zhuǎn)運(yùn)肽是翻譯后蛋白質(zhì)的整體部分，形成了蛋白質(zhì)的氨基端 延伸。這兩者一起翻譯成所謂的“前蛋白”。一般而言，轉(zhuǎn)運(yùn)肽在蛋白質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)正確的細(xì)胞 器(如質(zhì)體)的過(guò)程中或運(yùn)輸后立即被切下，得到成熟蛋白。轉(zhuǎn)運(yùn)肽通過(guò)協(xié)助蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn) 穿過(guò)胞內(nèi)膜而確保了成熟蛋白的正確定位。編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列可以來(lái)自最終位于質(zhì)體并且來(lái)自于選自以下的生物的 核酸序列傘藻屬(Acetabularia)、擬南芥屬(Arabidopsis)、蕓苔屬(Brassica)、辣椒 屬(Capsicum)、衣藻屬(Chlamydomonas)、南瓜屬(Cururbita)、杜氏藻屬(Dunaliella)、 裸藻屬(Euglena)、黃花菊屬(Flaveria)、大豆屬(Glycine)、向日葵屬(Helianthus)、 大麥屬(Hordeum)、浮萍屬(Lemna)、黑麥草屬(Lolium)、番爺屬(Lycopersion)、蘋果 屬(Malus) > WHM (Medicago) > H Φ M (Mesembryanthemum)、M (Nicotiana)、 月見(jiàn)草屬(Oenotherea)、稻屬(Oryza)、牽牛屬(Petunia)、菜豆屬(Phaseolus)、劍葉 蘚屬(Physcomitrella)、松屬(Pinus)、豌豆屬(Pisum)、蘿卜屬(Raphanus)、蠅子草屬 (Silene)、芥屬(Sinapis)、爺屬(Solanum)、菠菜屬(Spinacea)、舌甘菊屬(Stevia)、集球藻 屬(Synechococcus)、小麥屬(Triticum)禾口玉蜀黍?qū)?Zea)0例如，有益地用于本發(fā)明方法中的這些轉(zhuǎn)運(yùn)肽來(lái)自編碼選自以下蛋白質(zhì)的核酸序 列核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶、5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶、乙酰乳酸合酶、 葉綠體核糖體蛋白CS17、Cs蛋白、鐵氧還蛋白、質(zhì)體藍(lán)素、核酮糖二磷酸羧化酶活化酶、色 氨酸合酶、?；d體蛋白、質(zhì)體陪伴蛋白-60、細(xì)胞色素c552、22-kDA熱休克蛋白、33-kDa氧 相關(guān)增強(qiáng)子蛋白 1 (Oxygen-evolving enhancer protein 1)、ATP 合酶 γ 亞基、ATP 合酶 δ 亞基、葉綠素_a/b-結(jié)合蛋白11-1、氧相關(guān)增強(qiáng)子蛋白2、氧相關(guān)增強(qiáng)子蛋白3、光系統(tǒng)I P21、光系統(tǒng)I :P28、光系統(tǒng)I :P30、光系統(tǒng)I :P35、光系統(tǒng)I :P37、甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶、 葉綠素a/b結(jié)合蛋白、CAB2蛋白、羥甲基膽色烷合酶、丙酮酸-正磷酸雙激酶、CAB3蛋白、 質(zhì)體鐵蛋白、鐵蛋白、早期光誘導(dǎo)蛋白、谷氨酸-1-半醛氨基轉(zhuǎn)移酶、原葉綠素還原酶、淀粉 粒結(jié)合的淀粉酶合酶(starch-granule-bound amylase synthase)、光系統(tǒng)II的光收獲葉 綠素a/b結(jié)合蛋白、主要花粉變應(yīng)原Lol ρ 5a、質(zhì)體ClpB ATP依賴性蛋白酶、超氧化物歧 化酶、鐵氧還蛋白NADP氧化還原酶、28-kDa核糖核蛋白、31_kDa核糖核蛋白、33_kDa核糖核蛋白、乙酰乳酸合酶、ATP合酶CFtl亞基1、ATP合酶CFtl亞基2、ATP合酶CFtl亞基3、ATP 合酶CFtl亞基4、細(xì)胞色素f、ADP-葡萄糖焦磷酸化酶、谷氨酰胺合酶、谷氨酰胺合酶2、碳酸 酐酶、GapA蛋白、熱休克蛋白hsp21、磷酸易位酶、質(zhì)體ClpA ATP依賴性蛋白酶、質(zhì)體核糖體 蛋白CL24、質(zhì)體核糖體蛋白CL9、質(zhì)體核糖體蛋白PsCL18、質(zhì)體核糖體蛋白PsCL25、DAHP合 酶、淀粉磷酸化酶、根?；d體蛋白II、甜菜醛脫氫酶、GapB蛋白、谷氨酰胺合成酶2、磷酸 核酮糖激酶、亞硝酸還原酶、核糖體蛋白L12、核糖體蛋白L13、核糖體蛋白L21、核糖體蛋白 L35、核糖體蛋白L40、磷酸丙糖-3-磷酸甘油酸-磷酸易位蛋白、鐵氧還蛋白依賴性谷氨酸 合酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、NADP依賴性蘋果酸酶和NADP蘋果酸脫氫酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列來(lái)自編碼最終位于質(zhì)體并且來(lái)自 于選自以下生物的蛋白質(zhì)的核酸序列地中海傘藻(Acetabulariamediterranea)、擬 南芥(Arabidopsis thaliana)、蕓苔(Brassica campestris)、歐洲油菜(Brassica napus)> M W. (Capsicum annuum)> 胃氏 $ ■ (Chlamydomonas reinhardtii)>
/R (Cururbita moschata) > ife _土 氏· (Dunaliella salina) > _土 氏· (Dunaliella tertiolecta)、細(xì)小裸藻(Euglenagracilis)、Flaveria trinervia、大豆(Glycine max)、向日葵(Helianthusannuus)、大麥(Hordeum vulgare)、浮萍(Lemna gibba)、黑麥 草(Loliumperenne)、番爺(Lycopersion esculentum)、蘋果(Malus domestica)、野苜 猜(Medicago falcata)、紫苜猜(Medicago sativa)、冰葉臼中花(Mesembryanthemum crystal linum)、 ^J- Pf(Nicotianaplumbaginifolia)、 _ )0胃(Nicotiana
sylvestris)、煙草(Nicotianatabacum)、月見(jiàn)草(Oenotherea hookeri)、禾 S (Oryza sativa)、碧冬爺(Petuniahybrida)、菜豆(Phaseolus vulgaris)、展葉劍葉蘚 (Physcomitrella patens)、黑松(Pinus tunbergii)、豌豆(Pisum sativum)、蘿卜 (Raphanus sativus)、白花妮子草(Silene pratensis)、白芥(Sinapis alba)、馬鈴薯 (Solanumtuberosum)、 (Spinacea oleracea) > Stf^ (Stevia rebaudiana) (Synechococcus)、集胞藻屬(Synechocystis)、小麥(Triticum aestivum)禾口玉米(Zea mays)。編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列公開(kāi)在von Heijne等(Plant MolecularBiology Reporter, 9 (2), 104, (1991))，該文獻(xiàn)通過(guò)參考并入本文。表V顯示了 von Hei jne等所述 轉(zhuǎn)運(yùn)肽的一些實(shí)例。根據(jù)本發(fā)明特別是實(shí)施例中的公開(kāi)內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)onHeijne等所 公開(kāi)的其他核酸序列與表I第5欄和第7欄中所述核酸序列連接起來(lái)，例如，針對(duì)表I第6 欄中指出為“質(zhì)體的”的核酸分子編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核苷酸序列來(lái)自菠菜屬(Spinacia)，例如葉綠體30S核糖體蛋白 PSrp-Ι、根酰基載體蛋白II、酰基載體蛋白、ATP合酶γ亞基、ATP合酶δ亞基、細(xì)胞色 素f、鐵氧還蛋白I、鐵氧還蛋白NADP氧化還原酶(=FNR)、亞硝酸還原酶、磷酸核酮糖激 酶、質(zhì)體藍(lán)素或碳酸酐酶。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)理解，可以從質(zhì)體定位蛋白中容易地分離編碼 轉(zhuǎn)運(yùn)肽的多種其他核酸序列，所述蛋白從核基因中表達(dá)為前體，接著靶向至質(zhì)體。這樣的轉(zhuǎn) 運(yùn)肽編碼序列可用于構(gòu)建其他表達(dá)構(gòu)建體。有利地用于本發(fā)明方法并且作為本發(fā)明核酸序 列和蛋白質(zhì)的一部分的轉(zhuǎn)運(yùn)肽一般長(zhǎng)度為20至120個(gè)氨基酸，優(yōu)選25至110、30至100或 35至90個(gè)氨基酸，更優(yōu)選40至85個(gè)氨基酸，最優(yōu)選45至80個(gè)氨基酸，并在翻譯后發(fā)揮將蛋白質(zhì)引導(dǎo)至質(zhì)體(優(yōu)選葉綠體)的功能。編碼這些轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列位于編碼成熟蛋 白的核酸序列的上游。為了將轉(zhuǎn)運(yùn)肽編碼核酸與編碼待靶向蛋白質(zhì)的核酸正確地進(jìn)行分子 連接，有時(shí)必須在連接位置引入額外的堿基對(duì)，其形成可用于對(duì)不同核酸分子進(jìn)行分子連 接的限制酶識(shí)別序列。該方法可導(dǎo)致成熟輸入蛋白的N端出現(xiàn)很少的額外氨基酸，它們通 常(并且優(yōu)選)不干擾蛋白質(zhì)的功能。在任何情況下，連接位置處形成限制酶識(shí)別序列的 額外堿基對(duì)都必須慎重選擇，以避免形成終止密碼子或編碼對(duì)蛋白質(zhì)折疊產(chǎn)生強(qiáng)烈影響的 氨基酸(如脯氨酸)的密碼子。優(yōu)選地，這些額外的密碼子編碼結(jié)構(gòu)柔性的小氨基酸，例如 甘氨酸或丙氨酸。如上文所述，編碼表II第3或5欄所示的蛋白的核酸序列以及表I第7欄公開(kāi)的 其同源物可與編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列連接，這在例如，如果當(dāng)表I第6欄針對(duì)核酸分子指示 出術(shù)語(yǔ)“質(zhì)體的”時(shí)。編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的這一核酸序列確保蛋白運(yùn)輸?shù)礁骷?xì)胞器，尤其是質(zhì)體。 待表達(dá)的基因的核酸序列和編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的核酸序列有效相連。因此，轉(zhuǎn)運(yùn)肽與編碼表II的 第3或5欄所示的蛋白的核酸序列和表I第5欄所公開(kāi)的其同源物符合讀框地融合，這在 例如，如果當(dāng)表I第6欄針對(duì)核酸分子指示出術(shù)語(yǔ)“質(zhì)體的”的時(shí)候。本發(fā)明的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞器”表示例如“線粒體”或優(yōu)選地表示“質(zhì)體”。本發(fā)明的術(shù)語(yǔ) “質(zhì)體”旨在包括多種形式的質(zhì)體，包括前質(zhì)體、葉綠體、色質(zhì)體、gerontoplast、白色體、造 粉體、油質(zhì)體和黃化質(zhì)體，優(yōu)選葉綠體。它們都具有共同的祖先——前述的前質(zhì)體。Schmidt 等(J. Biol. Chem. 268 (36)，27447 (1993) )、Della-Cioppa 等(Plant. Physiol. 84,965(1987))、de Castro Silva Filho 等(Plant Mol. Biol. 30,769(1996)), Zhao 等(J. Biol. Chem. 270 (11) ,6081(1995))、 R6mer 等(Biochem. Biophys. Res. Commun. 196(3)，1414(1993))、Keegstra 等(Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol.40，471 (1989))、Lubben 等(Photosynthesis Res. 17，173(1988))禾口 Lawrence 等(J. Biol. Chem. 272(33) ,20357(1997))描述了 其他轉(zhuǎn)運(yùn)肽。Kermode Allison R. ^t CriticalReviews in Plant Science 15 (4) , 285 (1996) ψ VX "Mechanisms of Intracellular Protein Transport and Targeting in Plant Cells.，，為 Hiffi:^ 了關(guān)于 靶向的一般性綜述。用于本發(fā)明方法中并構(gòu)成本發(fā)明核酸序列一部分的有利的轉(zhuǎn)運(yùn)肽序列一般富含 羥基化氨基酸殘基(絲氨酸和蘇氨酸)，這兩種殘基一般構(gòu)成了總數(shù)的20至35%。它們經(jīng) 常具有不含Gly、Pro和帶電殘基的氨基末端區(qū)域。此外，它們含有大量小疏水氨基酸，例如 纈氨酸和丙氨酸，一般缺少酸性氨基酸。此外，它們一般具有富含Ser、Thr、Lys和Arg的中 間區(qū)域?？傮w而言，它們通常帶有正的凈電荷?；蛘?，可以根據(jù)本領(lǐng)域已公開(kāi)轉(zhuǎn)運(yùn)肽序列的結(jié)構(gòu)，部分或完全地化學(xué)合成編碼轉(zhuǎn) 運(yùn)肽的核酸序列。所述天然或化學(xué)合成的序列可以與編碼成熟蛋白的序列直接連接，或者 通過(guò)接頭核酸序列連接，所述接頭的長(zhǎng)度一般小于500個(gè)堿基對(duì)，優(yōu)選小于450、400、350、 300,250或200個(gè)堿基對(duì)，更優(yōu)選小于150、100、90、80、70、60、50、40、或30個(gè)堿基對(duì)，最優(yōu) 選小于25、20、15、12、9、6或3個(gè)堿基對(duì)，并與編碼序列符合讀框。此外，編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽的有利 的核酸序列可包含來(lái)自一種以上生物和/或化學(xué)來(lái)源的序列，并可包括在天然狀態(tài)下與該 轉(zhuǎn)運(yùn)肽相連的來(lái)自成熟蛋白氨基端區(qū)域的核酸序列。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所 述成熟蛋白的氨基端區(qū)域的長(zhǎng)度一般小于150個(gè)氨基酸，優(yōu)選小于140、130、120、110、100或90個(gè)氨基酸，更優(yōu)選小于80、70、60、50、40、35、30、25或20個(gè)氨基酸，最優(yōu)選小于19、18、 17、16、15、14、13、12、11或10個(gè)氨基酸。但更短或更長(zhǎng)的區(qū)段也是可能的。此外，靶向序列 也可以是本發(fā)明核酸序列的一部分，所述靶向序列有利于將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)至其他細(xì)胞區(qū)室， 例如液泡、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、乙醛酸循環(huán)體、過(guò)氧化物酶體或線粒體。從所述本發(fā)明核酸序列翻譯來(lái)的蛋白是一類融合蛋白，其表示編碼轉(zhuǎn)運(yùn)肽(例 如，表V所示的那些，例如，該表的最后一個(gè))的核酸序列與表I第5和7欄所示的核酸序 列連接，這在例如，如果當(dāng)表I第6欄針對(duì)核酸分子指示出術(shù)語(yǔ)“質(zhì)體的”的時(shí)候。本領(lǐng)域 技術(shù)人員能將所述序列以功能方式連接。有利地，在轉(zhuǎn)運(yùn)優(yōu)選進(jìn)入質(zhì)體期間，從表II第5 和7欄所示的蛋白部分上切下轉(zhuǎn)運(yùn)肽部分。對(duì)表V最后一行所示的優(yōu)選轉(zhuǎn)運(yùn)肽進(jìn)行切割的 所有產(chǎn)物優(yōu)選在表II第5和7欄中提到的蛋白的起始甲硫氨酸前具有N-末端氨基酸序 列QIA CSS或QIA EFQLTT0在表II第5和7欄中提到的蛋白的起始甲硫氨酸前還能可存 在其它短氨基酸序列，所述序列范圍在1至20個(gè)氨基酸之間，優(yōu)選2至15個(gè)氨基酸之間， 更優(yōu)選3至10個(gè)氨基酸之間，最優(yōu)選4至8個(gè)氨基酸之間。在氨基酸序列QIA CSS的情 況下，起始甲硫氨酸前面的三個(gè)氨基酸來(lái)源于LIC( = ligaton ind印endentcloining，無(wú) 需連接克隆)盒。在表達(dá)大腸桿菌基因的情況下，所述短氨基酸序列是優(yōu)選的。在氨基酸 序列QIA EFQLTT的情況下，起始甲硫氨酸前的六個(gè)氨基酸來(lái)源于LIC盒。在表達(dá)釀酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)基因的情況下所述短氨基酸序列是優(yōu)選的。技術(shù)人員知道，其 它短序列也可用于表達(dá)表I第5和7欄提到的基因。此外，技術(shù)人員知道下述事實(shí)表達(dá)基 因無(wú)需此類短序列。表V :von Heijne等人公開(kāi)的轉(zhuǎn)運(yùn)肽的例子
權(quán)利要求
生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括至少下述步驟在植物或其部分中增加或產(chǎn)生選自以下的一種或多種活性(DL) 甘油 3 磷酸酶、2 脫氧葡萄糖 6 磷酸酯磷酸酶、3 甲基 2 氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP 結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906 蛋白、B3410 蛋白、心磷脂合成酶、CoA 轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD(P) 結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰 CoA水合酶、烯酰 CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇 特異性酶IIA組分蛋白、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S 轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP 結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全 [?；?載體 蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛甾醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白、多重抗藥性蛋白、NADH脫氫酶/NAD(P)H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白、Pirin 樣蛋白、precorrin 6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基、SLR1094 蛋白質(zhì)、TORC1的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸 N 乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yer175w a 蛋白、yhr213w a 蛋白、YML079W 蛋白、YMR157C 蛋白、YNL024C 蛋白和YNR040W 蛋白。
2.生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括選自以 下的至少一種步驟(i)增加或產(chǎn)生下述多肽的活性，所述多肽包含表II或表IV的第5或7欄分別示出的 多肽、共有序列或至少一種多肽基序；( )增加或產(chǎn)生包含表I的第5或7欄示出的多核苷酸的核酸分子的表達(dá)產(chǎn)物的活 性，以及(iii)增加或產(chǎn)生(i)或(ii)的功能性等價(jià)物的活性。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其包括(i)增加或產(chǎn)生至少一種下述核酸分子的表達(dá)；和/或( )增加或產(chǎn)生表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)；和/或(iii)增加或產(chǎn)生至少一種下述核酸分子編碼的表達(dá)產(chǎn)物的一種或多種活性；所述核酸分子包含選自以下的核酸分子(a)編碼表II第5或7欄所示的多肽的核酸分子；(b)表I第5或7欄所示的核酸分子；(c)核酸分子，其由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性的結(jié)果，源于表II第5或7欄示出的多肽 序列，并且賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn) 量；(d)核酸分子，其與包含表I的第5或7欄所示的核酸分子的多核苷酸的核酸分子序列 具有至少大約30%的同一性，并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物 或其部分而言增加的產(chǎn)量；(e)核酸分子，其編碼的多肽與(a)至(c)的核酸分子編碼的多肽的氨基酸序列具有至 少大約30%的同一性，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性，并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(f)核酸分子，其在嚴(yán)格雜交條件下與(a)至(c)的核酸分子雜交，并且，賦予較之相應(yīng) 未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(g)核酸分子，其編碼的多肽可在針對(duì)(a)至(e)的一種核酸分子編碼的多肽制備的單 克隆或多克隆抗體協(xié)助下被分離出來(lái)，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸 分子代表的活性；(h)核酸分子，其編碼包含表IV第7欄所示的共有序列或一種或多種多肽基序的多肽， 并且優(yōu)選具有包含表II或IV的第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性；(i)核酸分子，其編碼具有表II第5欄示出的蛋白代表的活性的多肽，并且賦予較之相 應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(j)核酸分子，其包含使用表III第7欄中的引物通過(guò)擴(kuò)增cDNA文庫(kù)或基因組文庫(kù)獲 得的多核苷酸，并且優(yōu)選具有包含表II或IV第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活 性；以及(k)核酸分子，其可通過(guò)在嚴(yán)格雜交條件下用包含(a)或(b)的核酸分子的互補(bǔ)序列的 探針或用其片段篩選合適的核酸文庫(kù)來(lái)獲得，并且編碼具有包含表II第5欄示出的多肽的 蛋白代表的活性的多肽，所述探針片段具有與(a)至(e)表征的核酸分子序列互補(bǔ)的核酸 分子的至少大約50nt。
4.用于生產(chǎn)較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因植物的方 法，其包括用包含選自以下的核酸分子的核酸分子來(lái)轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞或植物細(xì)胞核或植物組 織(a)編碼表II第5或7欄所示的多肽的核酸分子；(b)表I第5或7欄所示的核酸分子；(c)核酸分子，其由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性的結(jié)果，源于表II第5或7欄示出的多肽 序列，并且賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn) 量；(d)核酸分子，其與包含表I的第5或7欄所示的核酸分子的多核苷酸的核酸分子序列 具有至少大約30%的同一性，并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物 或其部分而言增加的產(chǎn)量；(e)核酸分子，其編碼的多肽與(a)至(c)的核酸分子編碼的多肽的氨基酸序列具有至 少大約30%的同一性，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性， 并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(f)核酸分子，其在嚴(yán)格雜交條件下與(a)至(c)的核酸分子雜交，并且，賦予較之相應(yīng) 未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(g)核酸分子，其編碼的多肽可在針對(duì)(a)至(e)的一種核酸分子編碼的多肽制備的單 克隆或多克隆抗體協(xié)助下被分離出來(lái)，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸 分子代表的活性；(h)核酸分子，其編碼包含表IV第7欄所示的共有序列或一種或多種多肽基序的多肽， 并且優(yōu)選具有包含表II或IV的第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性；(i)核酸分子，其編碼具有表II第5欄示出的蛋白代表的活性的多肽，并且賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(j)核酸分子，其包含使用表III第7欄中的引物通過(guò)擴(kuò)增CDNA文庫(kù)或基因組文庫(kù)獲 得的多核苷酸，并且優(yōu)選具有包含表II或IV第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活 性；以及(k)核酸分子，其可通過(guò)在嚴(yán)格雜交條件下用包含(a)或(b)的核酸分子的互補(bǔ)序列的 探針或用其片段篩選合適的核酸文庫(kù)來(lái)獲得，并且編碼具有包含表II第5欄示出的多肽的 蛋白代表的活性的多肽，所述探針片段具有與(a)至(e)表征的核酸分子序列互補(bǔ)的核酸 分子的至少大約50nt，并且從該經(jīng)轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞或植物組織再生具有增加的產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因植物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)的方法，其中增加或產(chǎn)生的一種或多種活性分別是 (DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶、3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基 轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖 運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心 磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制 蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、 乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性酶IIA組分蛋白、谷氨酰胺 合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、 己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全_[?；鵢載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧 化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白、多重抗藥性蛋白、NADH脫氫酶/NAD (P) H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺 苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白、Pirin-樣蛋白、precorrin-ey甲基化酶、降解糖蛋白所 需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn) 移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋 白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、 yhr213w-a-蛋白、YML079W-蛋白、YMRl57C-蛋白、YNL024C-蛋白或 YNR040W-蛋白。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的方法，其導(dǎo)致在標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)條件下，與相應(yīng)的未經(jīng)轉(zhuǎn)化野生 型植物相比增加的產(chǎn)量。
7.分離的核酸分子，其包含選自以下的核酸分子(a)編碼表IIB第5或7欄所示的多肽的核酸分子；(b)表IB第5或7欄所示的核酸分子；(c)核酸分子，其由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性的結(jié)果，源于表II第5或7欄示出的多肽 序列，并且賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn) 量；(d)核酸分子，其與包含表I的第5或7欄所示的核酸分子的多核苷酸的核酸分子序列 具有至少大約30%的同一性，并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物 或其部分而言增加的產(chǎn)量；(e)核酸分子，其編碼的多肽與(a)至(c)的核酸分子編碼的多肽的氨基酸序列具有至 少大約30%的同一性，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性，并且，賦予較之相應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(f)核酸分子，其在嚴(yán)格雜交條件下與(a)至(c)的核酸分子雜交，并且，賦予較之相應(yīng) 未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(g)核酸分子，其編碼的多肽可在針對(duì)(a)至(e)的一種核酸分子編碼的多肽制備的單 克隆或多克隆抗體協(xié)助下被分離出來(lái)，并且其具有包含表I第5欄示出的多核苷酸的核酸 分子代表的活性；(h)核酸分子，其編碼包含表IV第7欄所示的共有序列或一種或多種多肽基序的多肽， 并且優(yōu)選具有包含表II或IV的第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活性；(i)核酸分子，其編碼具有表II第5欄示出的蛋白代表的活性的多肽，并且賦予較之相 應(yīng)未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量；(j)核酸分子，其包含使用表III第7欄中的引物通過(guò)擴(kuò)增cDNA文庫(kù)或基因組文庫(kù)獲 得的多核苷酸，并且優(yōu)選具有包含表II或IV第5欄示出的多核苷酸的核酸分子代表的活 性；以及(k)核酸分子，其可通過(guò)在嚴(yán)格雜交條件下用包含(a)或(b)的核酸分子的互補(bǔ)序列的 探針或用其片段篩選合適的核酸文庫(kù)來(lái)獲得，并且編碼具有包含表II第5欄示出的多肽的 蛋白代表的活性的多肽，所述探針片段具有與(a)至(e)表征的核酸分子序列互補(bǔ)的核酸 分子的至少50nt。
8.權(quán)利要求7的核酸分子，其中根據(jù)(a)至(k)的核酸分子與表IA的第5或7欄示出 的序列有至少一個(gè)或多個(gè)核苷酸不同，且優(yōu)選的編碼與表IIA的第5或7欄示出的蛋白質(zhì) 序列有至少一個(gè)或多個(gè)氨基酸不同的蛋白質(zhì)。
9.核酸構(gòu)建體，其賦予權(quán)利要求7或8所述的核酸分子或權(quán)利要求1-4的任一項(xiàng)表征 的核酸分子的表達(dá)，所述核酸構(gòu)建體包含一種或多種調(diào)節(jié)元件。
10.載體，其包含權(quán)利要求7或8所述的核酸分子，或權(quán)利要求1-4的任一項(xiàng)表征的核 酸分子，或權(quán)利要求9的核酸構(gòu)建體。
11.生產(chǎn)多肽的方法，其中多肽在權(quán)利要求11所述的宿主核或宿主細(xì)胞中表達(dá)。
12.通過(guò)權(quán)利要求12所述的方法生產(chǎn)的，或由權(quán)利要求7或8所述的核酸分子編碼的， 或如表IIB中所示的多肽，其中多肽通過(guò)一個(gè)或多個(gè)氨基酸區(qū)別于表IIA所示序列。
13.抗體，其特異性結(jié)合權(quán)利要求13所述的多肽。
14.植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織、繁殖材料、花粉、后代、收獲的材料或植物，其包 含權(quán)利要求7或8所述的核酸分子，或權(quán)利要求1-4的任一項(xiàng)表征的核酸分子，權(quán)利要求11 所述的宿主核或宿主細(xì)胞。
15.在再生后產(chǎn)生具有增加產(chǎn)量的植物的植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織、繁殖材料、 種子、花粉、后代或植物部分；或具有增加產(chǎn)量的植物；或其部分；其中所述與相應(yīng)的野生 型相比的產(chǎn)量增加是通過(guò)權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法產(chǎn)生的，或轉(zhuǎn)化了權(quán)利要求7或8 所述的核酸分子，或權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)表征的核酸分子，或權(quán)利要求9的核酸構(gòu)建體產(chǎn)生 的。
16.源自單子葉植物的權(quán)利要求15的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植 物或其部分。
17.源自雙予葉植物的權(quán)利要求15的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分。
18.權(quán)利要求15的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分，其中 相應(yīng)的植物選自玉米(玉蜀黍)、小麥、黑麥、燕麥、黑小麥、稻、大麥、大豆、花生、棉花、包 括卡諾拉油菜和冬油菜的油菜、木薯、胡椒、向日葵、亞麻、琉璃苣、紅花、亞麻子、報(bào)春花、油 菜籽、球莖甘藍(lán)、萬(wàn)壽菊、包括馬鈴薯、煙草、茄子、西紅柿的茄科植物；蠶豆屬物種、豌豆、苜 蓿、咖啡、可可、茶、柳屬物種、油棕、椰子、多年生草本植物、飼料作物和擬南芥。
19.權(quán)利要求15的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分，其中植 物選自玉米、大豆、油菜(包括卡諾拉油菜和冬油菜)、棉花、小麥和稻。
20.包括一種或多種植物細(xì)胞核或植物細(xì)胞、后代、種子或花粉，或通過(guò)權(quán)利要求 14-19的任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因植物。
21.源自或由權(quán)利要求6-9的任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因植物細(xì) 胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、包括一種或多種此類轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核或植物細(xì)胞的植物、后代、 種子或花粉，其中所述轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核、轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞、包括一種或多種 此類轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞核或植物細(xì)胞的植物、后代、種子或花粉對(duì)于賦予較之相應(yīng)的未經(jīng)轉(zhuǎn) 化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分而言增加的產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因是遺傳純合的。
22.用于鑒定與相應(yīng)的未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分相比，在植物 細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因植物或其部分、轉(zhuǎn)基因植物或其部分中賦予增加的產(chǎn)量的化合物的方法，其包 括步驟(a)培養(yǎng)植物細(xì)胞；表達(dá)權(quán)利要求12的多肽的轉(zhuǎn)基因植物或其部分，和讀出系統(tǒng)，該讀 出系統(tǒng)能在允許該多肽在化合物或包含多種化合物的樣品存在下與此讀出系統(tǒng)發(fā)生相互 作用的合適條件下與該多肽相互作用，并能在一定條件下應(yīng)答于化合物與所述多肽的結(jié)合 而提供檢測(cè)信號(hào)，該條件允許表達(dá)所述讀出系統(tǒng)和權(quán)利要求12的核酸分子編碼的多肽；(b)通過(guò)檢測(cè)由所述讀出系統(tǒng)所產(chǎn)生信號(hào)的存在與否或者增加來(lái)鑒定該化合物是否是 有效的激動(dòng)劑。
23.生產(chǎn)農(nóng)業(yè)組合物的方法，其包括權(quán)利要求22的方法的步驟，以及以農(nóng)業(yè)應(yīng)用可接 受的形式配制權(quán)利要求22中鑒定的化合物。
24.組合物，其包含權(quán)利要求7或8的核酸分子，權(quán)利要求9的核酸構(gòu)建體，權(quán)利要求 10的載體，權(quán)利要求12的多肽，權(quán)利要求22的化合物，權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)表征的核酸 分子，和/或權(quán)利要求13的抗體；和任選的農(nóng)業(yè)可接受的載體。
25.選自酵母或大腸桿菌的權(quán)利要求12的多肽或核酸分子。
26.權(quán)利要求7或8的核酸的用途，其用于制備與相應(yīng)的未經(jīng)轉(zhuǎn)化的野生型植物相比具 有增加的產(chǎn)量的植物。
27.根據(jù)權(quán)利要求7或8的核酸的用途，其作為標(biāo)記物用于鑒定或選擇與相應(yīng)的未經(jīng)轉(zhuǎn) 化的野生型植物相比具有增加的產(chǎn)量的植物。
28.根據(jù)權(quán)利要求17的核酸或其部分作為標(biāo)記物用于檢測(cè)植物或植物細(xì)胞中產(chǎn)量增 加的用途。
29.鑒定出具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括針對(duì)選自(DL)-甘油-3-磷 酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶、3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移 酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn) 移酶樣蛋白(NAD⑵-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白 質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰 轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖醇-特異性酶IIA組分蛋白、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn) 移酶、甘油脫氫酶、糖原合成起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰 基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的 鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白、多重抗藥性蛋白、NADH脫氫酶/NAD (P) H硝基還原酶、氧化還 原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、 磷酸載體蛋白、Pirin-樣蛋白、precorrin-ey甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫 氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞 基、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組 件轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w-a-蛋白、 YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白的活性，對(duì)一種或多種植物 細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分的群體進(jìn)行篩選，將活性水平與參照的活性水 平加以比較；鑒定出較之參照而言活性增加的一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織 或植物或其部分，任選地，從鑒定出的植物細(xì)胞核、細(xì)胞或組織產(chǎn)生植物。
30.鑒定出具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括針對(duì)編碼賦予下述活性的 多肽的核酸的表達(dá)水平，對(duì)一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分的 群體進(jìn)行篩選，所述活性選自(DL)-甘油-3-磷酸酶、2-脫氧葡萄糖-6-磷酸酯磷酸酶、 3-甲基-2-氧代丁酸酯羥甲基轉(zhuǎn)移酶、醇乙酰轉(zhuǎn)移酶、氨基酸通透酶、氨甲基轉(zhuǎn)移酶、銨轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白、水通道蛋白、阿拉伯糖運(yùn)送系統(tǒng)ATP-結(jié)合蛋白、精氨琥珀酸合酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨 酶、B1906-蛋白、B3410-蛋白、心磷脂合成酶、CoA-轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(NAD (P)-結(jié)合)、鈷轉(zhuǎn) 運(yùn)蛋白、用于在轉(zhuǎn)錄后水平上控制蛋白質(zhì)組的DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白、烯酰CoA水合酶、 烯酰-CoA水合酶、烯酰-CoA異構(gòu)酶、乙醇胺激酶、甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶1、葡萄糖醇/山梨糖 醇-特異性酶IIA組分蛋白、谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、甘油脫氫酶、糖原合成 起始蛋白、GTP-結(jié)合蛋白、熱休克蛋白、己糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、全-[酰基-載體-蛋白]合酶、無(wú)機(jī) 磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、羊毛留醇合酶、醛氧化酶和黃嘌呤脫氫酶的鉬結(jié)合亞基、多抗藥性蛋白、 多重抗藥性蛋白、NADH脫氫酶/NAD (P) H硝基還原酶、氧化還原酶、肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶、 過(guò)氧化物酶體導(dǎo)向信號(hào)2受體、磷酸腺苷磷酰硫酸還原酶、磷酸載體蛋白、Pirin-樣蛋白、 precorrin-6y甲基化酶、降解糖蛋白所需的蛋白質(zhì)、嘧啶脫氨酶/還原酶、細(xì)胞形態(tài)發(fā)生 和NO信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)物、絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、信號(hào)復(fù)合體亞基、SLR1094-蛋白質(zhì)、TORCl的 亞基、硫醇特異性單加氧酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白、轉(zhuǎn)酮醇酶、雙組件轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、尿苷二磷酸-N-乙 酰葡糖胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、yerl75w-a-蛋白、yhr213w_a_蛋白、YML079W-蛋白、YMR157C-蛋白、 YNL024C-蛋白和YNR040W-蛋白，將表達(dá)水平與參照加以比較；鑒定出較之參照而言表達(dá)水 平增加的一種或多種植物細(xì)胞核、植物細(xì)胞、植物組織或植物或其部分，任選地，從鑒定出 的植物細(xì)胞核、細(xì)胞或組織產(chǎn)生植物。
31.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法或根據(jù)權(quán)利要求14-20的任一項(xiàng)的植物，其中所述植 物表現(xiàn)出改善的產(chǎn)量相關(guān)性狀。
32.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法或根據(jù)權(quán)利要求14或15的任一項(xiàng)的植物，其中所述植物表現(xiàn)出改善的養(yǎng)分使用效率和/或非生物性脅迫耐受性。
33.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法或根據(jù)權(quán)利要求14-20的任一項(xiàng)的植物，其中所述植 物表現(xiàn)出改善的增加的低溫耐受性。
34.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法或根據(jù)權(quán)利要求14-20的任一項(xiàng)的植物，其中所述植 物表現(xiàn)出可收獲產(chǎn)量的增加。
35.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法或根據(jù)權(quán)利要求14-20的任一項(xiàng)的植物，其中所述植 物表現(xiàn)出改善，其中產(chǎn)量增加是基于每株植物或涉及特定可耕地來(lái)計(jì)算的。
36.增加植物的群體的產(chǎn)量的方法，所述方法包括檢查用于栽種的地區(qū)的生長(zhǎng)溫度， 將所述溫度與考慮用于栽種的植物物種或品種的最優(yōu)生長(zhǎng)溫度相比較，如果生長(zhǎng)溫度對(duì)于 考慮用于栽種的植物物種或品種的栽種和培育來(lái)說(shuō)并非最優(yōu)的話，栽種和培育權(quán)利要求14 至20或31至35的任一項(xiàng)的植物。
全文摘要
本文公開(kāi)的本發(fā)明中提供了生產(chǎn)較之相應(yīng)野生型植物而言具有增加的產(chǎn)量的植物的方法，所述方法包括在植物或其部分中增加或產(chǎn)生一種或多種活性。本發(fā)明還涉及增強(qiáng)或改善轉(zhuǎn)基因植物的一種或多種性狀的核酸，以及源于此類植物或部分的細(xì)胞、后代、種子和花粉，還涉及生產(chǎn)和使用此類植物細(xì)胞或植物、后代、種子或花粉的方法。特別地，所述改善的性狀顯示為增加的產(chǎn)量，這優(yōu)選通過(guò)改善一種或多種產(chǎn)量相關(guān)性狀(例如低溫耐受性)來(lái)實(shí)現(xiàn)。
文檔編號(hào)C12N15/82GK101939435SQ200880117056
公開(kāi)日2011年1月5日 申請(qǐng)日期2008年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月21日
發(fā)明者G·里特, H·舍恩, O·布萊辛, O·蒂姆, P·普齊奧 申請(qǐng)人:巴斯夫植物科學(xué)有限公司