專利名稱：α-淀粉酶,其編碼基因及其表達(dá)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明涉及α-淀粉酶，其編碼基因，含有 該基因的重組質(zhì)粒和菌株，以及表達(dá)方法。
背景技術(shù)：
淀粉(Starch)是一種碳水化合物，幾乎完全是以α-D-葡萄糖為單位聚合而 成的，鏈平均長(zhǎng)度為500-1000個(gè)葡萄糖殘基。淀粉中能溶于熱水的一部分叫直鏈淀粉 (Amylase)，不能溶解的叫支鏈淀粉(Amylopectin)，曾稱為α -直鏈淀粉或紅直鏈淀粉 (Erythroamylose)，這兩種成分是淀粉顆粒的主要成分，含量可以達(dá)到75% -80%。直鏈淀粉分子量在10_2000kD之間，以α _1，4糖苷鍵型縮合而成，卷曲成螺旋形， 遇碘呈紫藍(lán)色，每個(gè)糖鏈含有幾千個(gè)葡萄糖殘基，直鏈淀粉在62o-68onm呈最大的光吸收。 支鏈淀粉分子量在50-400000kD之間，主要以α-1，4糖苷鍵型縮合而成，少量由α_1，6糖 苷鍵型縮合而成，平均每24個(gè)有約1個(gè)末端葡萄糖殘基的α -1，6支鏈出現(xiàn)，支鏈淀粉分子 分支很多，在熱水中膨潤(rùn)成淀粉糊，遇碘呈紫紅色，在530-550nm呈最大光吸收。淀粉幾乎存在于所有的綠色植物多數(shù)組織中，是植物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的一種儲(chǔ)存形式， 在顯微鏡下以顆粒形狀存在于植物有機(jī)體中。就目前的情況來(lái)看能夠作為淀粉原料的作物 主要是玉米，其次是薯類、稻谷和小麥，2004年我國(guó)糧食總產(chǎn)量達(dá)到46947. 2萬(wàn)噸，而這四 種糧食作物年產(chǎn)量占我國(guó)糧食作物總產(chǎn)量90%以上，所以在我國(guó)淀粉資源是相當(dāng)豐富的。淀粉酶是水解淀粉和糖原酶類的通稱，廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中。由于淀粉 酶在工農(nóng)業(yè)上的重要價(jià)值，因此很早就有人對(duì)淀粉酶進(jìn)行研究。1833年P(guān)ayen和Persoz 已首次從麥芽的水抽提物中用酒精沉淀分離到淀粉酶。1894年日本人高峰讓吉用麩皮培 養(yǎng)米曲霉(Aspergillus oryzae)用水提取，再以酒精沉淀，得到作為消化劑的酶，即高峰 淀粉酶。1919年法國(guó)Boidin和Effront首次用枯草桿菌生產(chǎn)淀粉酶，為微生物酶的工業(yè) 生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。1949年，日本人成功的進(jìn)行的α-淀粉酶的深層發(fā)酵，從而促進(jìn)了酶的大 規(guī)模生產(chǎn)的發(fā)展。淀粉酶按照水解淀粉方式的不同大致可分為四大類(1) α-淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1)，它以糖原或淀粉為底物，從分子內(nèi)部切開(kāi)α-1，4糖苷鍵而使底物水解成糊精和 少量的葡萄糖和麥芽糖。(2) β _淀粉酶(EC 3. 2. 1. 2)從底物的非還原末端依次間隔的切 開(kāi)α -1，4糖苷鍵，因此作用于直鏈淀粉時(shí)所得的產(chǎn)物為麥芽糖，而作用于支鏈時(shí)只能得到 50% -65%麥芽糖，殘留下40%左右的極限糊精。(3)葡萄糖淀粉酶(EC 3. 2. 1. 3):習(xí)慣上 簡(jiǎn)稱糖化酶，從底物非還原性末端依次水解α-1，4糖苷鍵和分支點(diǎn)α_1，6糖苷鍵，生成葡 萄糖。(4)異淀粉酶(EC 3.2.1.9)只水解糖原或支鏈淀粉分支點(diǎn)α-1，6糖苷鍵，切下整 個(gè)側(cè)枝。從催化專一性上看，把α-淀粉酶歸為糖苷水解酶類(glycosyl hydrases)的 第13家族，屬于α-葡萄糖苷水解酶(α-Glycosyl hydrases, EC 3.2.1)，α -淀粉酶 (a-amylase)又稱為液化淀粉酶，其系統(tǒng)名稱為α-1，4_葡聚糖_4_葡聚糖水解酶(α_1， 4-glucan-glucanhydrolase EC 3.2. 1.1)，常用名 α-淀粉酶，又名 α-1，4 糊精酶，是一種內(nèi)切酶，能水解淀粉分子中的α-1，4糖苷鍵，將其任意切成長(zhǎng)短不一的短鏈糊精和少量的 低相對(duì)分子質(zhì)量糖類，直鏈淀粉和支鏈淀粉均以無(wú)規(guī)則的形式進(jìn)行分解，從而使淀粉糊的 粘度迅速下降，即“液化”起作用，故α "淀粉酶又稱為液化酶。α -淀粉酶水解淀粉機(jī)制在上個(gè)世紀(jì)50年代后逐漸得到闡述α _淀粉酶對(duì)于直 鏈淀粉的作用第一步是將直鏈淀粉任意地迅速地降解成小分子糊精、麥芽糖和麥芽三糖， 第二步緩慢地將低聚糖水解為葡萄糖和麥芽糖。水解終產(chǎn)物有α-極限糊精、部分低聚糖、 麥芽糖和葡萄糖。在α-1，4糖苷鍵水解地過(guò)程中，葡萄糖單位間的C1-0-C4鍵地Cl-O鍵 間斷裂。α -淀粉酶液化淀粉導(dǎo)致淀粉部分解聚，失去粘性和遇碘呈色的性質(zhì)，水解物的還 原力增加，當(dāng)?shù)竭_(dá)消色點(diǎn)附近時(shí)隨還原力增加而反應(yīng)速度降低，逐漸達(dá)到水解極限。但是不 同來(lái)源的α _淀粉酶，不同來(lái)源的淀粉、對(duì)淀粉的預(yù)處理方式、處理溫度以及溶液PH等因素 都會(huì)影響這一水解過(guò)程，導(dǎo)致α -淀粉酶作用于淀粉的水解極限不同，生成低寡糖組成存 在差異和結(jié)構(gòu)不同的極限糊精。不同來(lái)源的α-淀粉酶，水解淀粉的極限不同。當(dāng)α-淀粉酶作用于淀粉時(shí)，隨 著粘度的下降，碘反應(yīng)由藍(lán)變紫，再變?yōu)榧t色，直至無(wú)色，反應(yīng)液的還原力逐漸的加強(qiáng)，到達(dá) 消色點(diǎn)附近時(shí)隨還原力的增加反應(yīng)速度逐漸降低，此時(shí)的水解率因酶的來(lái)源而異，細(xì)菌、霉 菌、麥芽的α-淀粉酶為10-20% ；胰液、唾液和細(xì)菌糖化型α-淀粉酶約為40%。α-淀粉酶廣泛存在于包括人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌等各種生物中，從1956 年首次報(bào)道分離α-淀粉酶開(kāi)始，目前已經(jīng)分離并鑒定的超過(guò)120種α-淀粉酶，從 數(shù)量上看微生物來(lái)源的α-淀粉酶占大部分。微生物中能產(chǎn)生α-淀粉酶的屬有 Bacillus， Thermomonospor, Acinetobacter, Pseudomonas, Streptomyces, Aspergillus， Penicillus等。目前在工業(yè)上大量使用的α -淀粉酶主要來(lái)源于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)，解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，黑曲霉(Aspergillus niger)禾口米曲霉(Aspergillus oryzae)。α-淀粉酶具有相當(dāng)大的商業(yè)價(jià)值，廣泛應(yīng)用于淀粉深加工工業(yè)、酒精工業(yè)、啤酒 工業(yè)、檸檬酸工業(yè)、味精及淀粉糖化工業(yè)、制藥工業(yè)及紡織業(yè)。目前我國(guó)40多家酶制劑廠 中，淀粉酶是相當(dāng)一部分廠家的主要酶制劑產(chǎn)品。國(guó)內(nèi)生產(chǎn)其中適用于不同用途的α-淀 粉酶有10余種劑型，但以吸附型居多，包被型或高純度劑型較少。在我國(guó)α-淀粉酶主要 生產(chǎn)菌株是枯草芽孢桿菌和黑曲霉。但是這些生產(chǎn)菌株幾乎都從自然界篩選得到或經(jīng)過(guò)人 工誘變的菌株，酶的性質(zhì)并不十分優(yōu)良，加之酶的后處理工藝落后，產(chǎn)品利潤(rùn)普遍不高。在 中國(guó)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的基因工程菌株實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的α-淀粉酶的報(bào)道極少。因此，目前本領(lǐng)域還有必要找到性能優(yōu)越的新的α-淀粉酶的編碼基因，開(kāi)發(fā)出 高性能的淀粉酶，更新和完善淀粉酶的種類，為淀粉原料的深加工提供更好的條件，開(kāi)創(chuàng)新 的酶法工藝，提高收得率、降低消耗、提高產(chǎn)品質(zhì)量、增加效益，從而可以進(jìn)一步促進(jìn)淀粉原 料深加工行業(yè)的發(fā)展，顯著提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供α-淀粉酶，其編碼基因，含有該基因的重組質(zhì)粒和菌株， 以及表達(dá)方法。
在本發(fā)明的第一方面，提供一種分離的α _淀粉酶，所述的α -淀粉酶的氨基酸序 列如SEQ ID NO 11所示，其中，第14位氨基酸選自Tyr或His ；第124位氨基酸選自Asp或Asn ；第133位氨基酸選自His或Arg ；第134位氨基酸選自Arg或Gln ；第164位氨基酸選自Asp或Gly ；第180位氨基酸選自Glu或Lys ；第211位氨基酸選自Glu或Lys ；第264位氨基酸選自Gln或Pro ；第272位氨基酸選自Asn或Thr ；第310位氨基酸選自Gly或Ser ；第373位氨基酸選自Pro或Ser ；或第396位氨基酸選自Tyr或Hi s。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述的α -淀粉酶的氨基酸序列如SEQ ID NO :6，SEQ ID NO :7， SEQ ID NO :8，SEQ ID NO 9 或 SEQ ID NO 10 所示。在本發(fā)明的另一方面，提供一種分離的多核苷酸，所述的多核苷酸包含一核苷酸 序列，該核苷酸序列選自下組(a)編碼所述α -淀粉酶的多核苷酸；或(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述的多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID N0:1, SEQ ID NO :2， SEQ ID NO :3，SEQ ID NO 4 或 SEQ ID NO 5 所示。在本發(fā)明的另一方面，提供一種載體，所述的載體包含所述的多核苷酸。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述的載體是大腸桿菌質(zhì)粒。在另一優(yōu)選例中，所述的載體選自pTrcHis2_BSAmy、pTrcHis2_BCAmy、 pTrcHis2-BL16Amy>pTrcHis2-BLAmy pTrcHis2_BPAmy。在本發(fā)明的另一方面，提供一種細(xì)胞，其包含所述的載體，或其基因組中整合有所 述的多核苷酸。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞是包含所述核酸分子或用所述載體轉(zhuǎn)化的大腸桿菌 BL21。在本發(fā)明的另一方面，提供一種生產(chǎn)所述的α -淀粉酶的方法，包括培養(yǎng)所述的 細(xì)胞，從培養(yǎng)物中分離出表達(dá)產(chǎn)物。在本發(fā)明的另一方面，提供一種組合物，所述組合物中含有所述的α-淀粉酶；以 及食品學(xué)上可接受的載體。在本發(fā)明的另一方面，提供所述的α -淀粉酶的用途，用于水解糖原或淀粉。在本發(fā)明的另一方面，提供一種水解糖原或淀粉的方法，所述方法包括用所述的 α -淀粉酶處理糖原或淀粉。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開(kāi)內(nèi)容，對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn) 的。


圖1 來(lái)自枯草芽孢桿菌的編碼α -淀粉酶的核酸序列BS-Amy (SEQ ID NO :1)及 其編碼的氨基酸序列(SEQ ID NO :6)。圖2 來(lái)自蠟狀芽孢桿菌的編碼α -淀粉酶的核酸序列BC-Amy (SEQ ID NO 2)及
5其編碼的氨基酸序列(SEQ ID NO :7)。圖3 來(lái)自地衣芽孢桿菌的編碼α -淀粉酶的核酸序列BL16_Amy (SEQ ID NO 3) 及其編碼的氨基酸序列(SEQ ID NO 8)。圖4 來(lái)自地衣芽孢桿菌的編碼α -淀粉酶的核酸序列BL-Amy (SEQ ID NO 4)及 其編碼的氨基酸序列(SEQ ID NO :9)。 圖5 來(lái)自短小芽孢桿菌的編碼α -淀粉酶的核酸序列BP-Amy (SEQ ID NO :5)及 其編碼的氨基酸序列(SEQ ID Ν0:10)。圖6 五種來(lái)源的α -淀粉酶氨基酸序列的比對(duì)。圖 7:大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL 16-Amy、BL-Amy 和 BP-Amy 序列所編碼 α-淀粉酶的最適反應(yīng)ΡΗ。圖 8:大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL16-Amy、BL-Amy 和 ΒΡ-Amy 序列所編碼 α-淀粉酶的最適反應(yīng)溫度。圖 9:大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL 16-Amy、BL-Amy 和 BP-Amy 序列所編碼 α-淀粉酶的PH穩(wěn)定性。圖 10:大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL 16-Amy、BL-Amy 和 ΒΡ-Amy 序列所編碼 α -淀粉酶的熱穩(wěn)定性。圖 11 大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL 16-Amy, BL-Amy 和 BP-Amy 序列所編碼 α -淀粉酶發(fā)酵過(guò)程中樣品的SDS-PAGE。圖 12:大腸桿菌表達(dá) BS-Amy、BC-Amy、BL 16-Amy、BL-Amy 和 BP-Amy 序列所編碼 α-淀粉酶的分子量。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明人經(jīng)過(guò)深入的研究，首次分離獲得一類具有優(yōu)異的水解糖原或淀粉效果的 α-淀粉酶，其具有酶活性高且穩(wěn)定性(特別是熱穩(wěn)定性)好的特點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上完成本發(fā) 明。如本文所用，“分離的”是指物質(zhì)從其原始環(huán)境中分離出來(lái)(如果是天然的物質(zhì)，原 始環(huán)境即是天然環(huán)境)。如活體細(xì)胞內(nèi)的天然狀態(tài)下的多聚核苷酸和蛋白是沒(méi)有分離純化 的，但同樣的多聚核苷酸或蛋白如從天然狀態(tài)中同存在的其他物質(zhì)中分開(kāi)，則為分離純化 的。如本文所用，“分離的α-淀粉酶”是指α-淀粉酶基本上不含天然與其相關(guān)的其 它蛋白、脂類、糖類或其它物質(zhì)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能用標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)純化技術(shù)純化α-淀 粉酶。基本上純的蛋白在非還原聚丙烯酰胺凝膠上能產(chǎn)生單一的主帶。α-淀粉酶的純度 能用氨基酸序列分析。本發(fā)明的α-淀粉酶可以是重組蛋白(多肽)、天然蛋白、合成蛋白，優(yōu)選重組蛋 白。本發(fā)明的α-淀粉酶可以是天然純化的產(chǎn)物，或是化學(xué)合成的產(chǎn)物，或使用重組技術(shù)從 原核或真核宿主(例如，細(xì)菌、酵母、高等植物、昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中產(chǎn)生。根據(jù)重組生 產(chǎn)方案所用的宿主，本發(fā)明的α-淀粉酶可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本發(fā)明的 α-淀粉酶還可包括或不包括起始的甲硫氨酸殘基。本發(fā)明還包括α _淀粉酶的片段、衍生物和類似物。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“片段”、“衍生物”和“類似物”是指基本上保持本發(fā)明的天然α-淀粉酶相同的生物學(xué)功能或活性的蛋 白。本發(fā)明的α-淀粉酶片段、衍生物或類似物可以是(i)有一個(gè)或多個(gè)保守或非保守性 氨基酸殘基(優(yōu)選保守性氨基酸殘基)被取代的蛋白，而這樣的取代的氨基酸殘基可以是 也可以不是由遺傳密碼編碼的，或(ii)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基中具有取代基團(tuán)的蛋白， 或(iii)成熟蛋白與另一個(gè)化合物(比如延長(zhǎng)蛋白半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合 所形成的蛋白，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此蛋白序列而形成的蛋白(如前導(dǎo)序列或 分泌序列或用來(lái)純化此蛋白的序列或蛋白原序列，或與抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。 根據(jù)本文的教導(dǎo)，這些片段、衍生物和類似物屬于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員公知的范圍。在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“ α -淀粉酶”指具有α -淀粉酶活性的SEQ ID NO=Il序列的 蛋白。該術(shù)語(yǔ)還包括具有與α-淀粉酶相同功能的、SEQ ID Ν0:11序列的變異形式。這些 變異形式包括(但并不限于)一個(gè)或多個(gè)(通常為1-30個(gè)，較佳地1-20個(gè)，更佳地1-10 個(gè)，最佳地1-5個(gè))氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一個(gè) 或數(shù)個(gè)(通常為20個(gè)以內(nèi)，較佳地為10個(gè)以內(nèi)，更佳地為5個(gè)以內(nèi))氨基酸。例如，在本 領(lǐng)域中，用性能相近或相似的氨基酸進(jìn)行取代時(shí)，通常不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。又比如，在 C末端和/或N末端添加一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸通常也不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。該術(shù)語(yǔ)還包括 α-淀粉酶的活性片段和活性衍生物。該α-淀粉酶的變異形式包括同源序列、保守性變異體、等位變異體、天然突變 體、誘導(dǎo)突變體、在高或低的嚴(yán)緊度條件下能與α "淀粉酶的DNA雜交的DNA所編碼的蛋 白、以及利用抗α-淀粉酶的抗血清獲得的多肽或蛋白。本發(fā)明還提供了其他蛋白，如包含 α-淀粉酶或其片段的融合蛋白。除了幾乎全長(zhǎng)的蛋白外，本發(fā)明還包括了 α-淀粉酶的可 溶性片段。通常，該片段具有α-淀粉酶序列的至少約10個(gè)連續(xù)氨基酸，通常至少約30個(gè) 連續(xù)氨基酸，較佳地至少約50個(gè)連續(xù)氨基酸，更佳地至少約80個(gè)連續(xù)氨基酸，最佳地至少 約100個(gè)連續(xù)氨基酸。發(fā)明還提供α -淀粉酶的類似物。這些類似物與天然α _淀粉酶的差別可以是氨 基酸序列上的差異，也可以是不影響序列的修飾形式上的差異，或者兼而有之。這些蛋白包 括天然或誘導(dǎo)的遺傳變異體。誘導(dǎo)變異體可以通過(guò)各種技術(shù)得到，如通過(guò)輻射或暴露于誘 變劑而產(chǎn)生隨機(jī)誘變，還可通過(guò)定點(diǎn)誘變法或其他已知分子生物學(xué)的技術(shù)。類似物還包括 具有不同于天然L-氨基酸的殘基(如D-氨基酸)的類似物，以及具有非天然存在的或合 成的氨基酸(如β、Y-氨基酸)的類似物。應(yīng)理解，本發(fā)明的α-淀粉酶并不限于上述例 舉的代表性的蛋白。修飾(通常不改變一級(jí)結(jié)構(gòu))形式包括體內(nèi)或體外的蛋白的化學(xué)衍生形式如乙 ?；螋然?。修飾還包括糖基化，如那些在蛋白的合成和加工中或進(jìn)一步加工步驟中進(jìn) 行糖基化修飾而產(chǎn)生的蛋白。這種修飾可以通過(guò)將蛋白暴露于進(jìn)行糖基化的酶(如哺乳動(dòng) 物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修飾形式還包括具有磷酸化氨基酸殘基(如磷酸酪 氨酸，磷酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸)的序列。還包括被修飾從而提高了其抗蛋白水解性能或優(yōu) 化了溶解性能的蛋白。在本發(fā)明中，“ α -淀粉酶保守性變異蛋白(多肽)”指與SEQ ID NO=Il的氨基酸 序列相比，有至多10個(gè)，較佳地至多8個(gè)，更佳地至多5個(gè)，最佳地至多3個(gè)氨基酸被性質(zhì) 相似或相近的氨基酸所替換而形成蛋白。這些保守性變異蛋白最好根據(jù)表1進(jìn)行氨基酸替換而產(chǎn)生。表 權(quán)利要求
一種分離的α 淀粉酶，其特征在于，所述的α 淀粉酶的氨基酸序列如SEQ IDNO11所示，其中，第14位氨基酸選自Tyr或His；第124位氨基酸選自Asp或Asn；第133位氨基酸選自His或Arg；第134位氨基酸選自Arg或Gln；第164位氨基酸選自Asp或Gly；第180位氨基酸選自Glu或Lys；第211位氨基酸選自Glu或Lys；第264位氨基酸選自Gln或Pro；第272位氨基酸選自Asn或Thr；第310位氨基酸選自Gly或Ser；第373位氨基酸選自Pro或Ser；或第396位氨基酸選自Tyr或His。
2.如權(quán)利要求1所述的α-淀粉酶，其特征在于，所述的α-淀粉酶的氨基酸序列如 SEQ ID NO :6，SEQ ID NO :7，SEQ ID NO :8，SEQ ID NO 9 或 SEQ ID NO 10 所示。
3.一種分離的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸包含一核苷酸序列，該核苷酸序 列選自下組(a)編碼如權(quán)利要求1或2所述α-淀粉酶的多核苷酸；或(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸。
4.如權(quán)利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID NO :1，SEQ ID NO :2，SEQ ID NO :3，SEQ ID NO 4 或 SEQ ID NO 5 所示。
5.一種載體，其特征在于，所述的載體包含權(quán)利要求2所述的多核苷酸。
6.一種細(xì)胞，其特征在于，其包含權(quán)利要求5所述的載體，或其基因組中整合有權(quán)利要 求3或4所述的多核苷酸。
7.—種生產(chǎn)權(quán)利要求1所述的α-淀粉酶的方法，其特征在于，包括培養(yǎng)權(quán)利要求6 所述的細(xì)胞，從培養(yǎng)物中分離出表達(dá)產(chǎn)物。
8.一種組合物，其特征在于，所述組合物中含有權(quán)利要求1或2所述的α-淀粉酶；以 及食品學(xué)上可接受的載體。
9.權(quán)利要求1所述的α-淀粉酶的用途，其特征在于，用于水解糖原或淀粉。
10.一種水解糖原或淀粉的方法，其特征在于，所述方法包括用權(quán)利要求1所述的 α -淀粉酶處理糖原或淀粉。
全文摘要
本發(fā)明涉及α-淀粉酶，其編碼基因及其表達(dá)。公開(kāi)了一種具有SEQ ID NO11所示通式序列的α-淀粉酶。本發(fā)明還公開(kāi)了所述α-淀粉酶的編碼基因，含有該編碼基因的表達(dá)載體和細(xì)胞，以及所述α-淀粉酶的制備方法和用途。
文檔編號(hào)C12N15/56GK101962633SQ20091005520
公開(kāi)日2011年2月2日 申請(qǐng)日期2009年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月23日
發(fā)明者葉秀云, 張洋, 羅鋆琳, 賴慶安, 靳偉剛 申請(qǐng)人:福建福大百特科技發(fā)展有限公司