專利名稱：用于細(xì)胞遷移研究及高通量藥物篩選的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置的制作方法
用于細(xì)胞遷移研究及高通量藥物篩選的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置 發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種簡(jiǎn)便快速的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置，適用于細(xì)胞遷移研究以及以細(xì)胞 遷移為靶點(diǎn)的高通量藥物篩選。
背景技術(shù)：
細(xì)胞遷移在人體的正常生理活動(dòng)和疾病發(fā)生中普遍存在，例如細(xì)胞的覓食、 傷口損傷愈合、胚胎發(fā)生、神經(jīng)系統(tǒng)形成、免疫反應(yīng)、癌癥轉(zhuǎn)移等很多事件都涉 及到細(xì)胞遷移。細(xì)胞遷移是當(dāng)甜生命科學(xué)研究的一個(gè)重要方向和熱點(diǎn)，科學(xué)家們 試圖通過(guò)對(duì)細(xì)胞遷移的研究，在血管損傷修復(fù)、阻止癌癥轉(zhuǎn)移、植皮等醫(yī)學(xué)應(yīng)用 方面取得更大成果。
目前研究細(xì)胞遷移主要有兩種實(shí)驗(yàn)方法劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell實(shí)驗(yàn)。上皮 細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等在生理狀態(tài)下形成單層或者復(fù)層上皮，在創(chuàng)傷愈合等病理狀態(tài) 下，細(xì)胞發(fā)生遷移，以側(cè)向的運(yùn)動(dòng)為主。劃痕實(shí)驗(yàn)很好地模擬了這種運(yùn)動(dòng)形式， 并且操作方便，細(xì)胞外圍環(huán)境容易控制，因此是研究細(xì)胞遷移的一個(gè)很好的模型。 在現(xiàn)行的劃痕實(shí)驗(yàn)中， 一般采用無(wú)菌的塑料槍頭人工手劃，具有劃痕不直、劃痕 位置不確定、不便于拍照及后續(xù)的定量統(tǒng)計(jì)分析等缺陷。另外，現(xiàn)行的劃痕方法 不適用于以細(xì)胞遷移為耙點(diǎn)進(jìn)行高通量藥物篩選。
針對(duì)以上實(shí)際問(wèn)題，本領(lǐng)域很有必要發(fā)明一種操作快速方便、劃痕位置固定、 適用于細(xì)胞遷移研究及高通量藥物篩選的裝置。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種快速方便的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置，適用于細(xì)胞遷移研究及 高通量藥物篩選，且劃痕均一，位置固定，便于后續(xù)的拍照與定量分析。 本發(fā)明具有以下幾個(gè)特征
1. 側(cè)壁可以沿折痕折疊，當(dāng)側(cè)壁1和側(cè)壁2折疊，側(cè)壁3和側(cè)壁4展開時(shí)， 該裝置可以沿著細(xì)胞培養(yǎng)板橫向移動(dòng)，產(chǎn)生一道劃痕。類似地，當(dāng)側(cè)壁 3和側(cè)壁4折疊，側(cè)壁1和側(cè)壁1展開時(shí)，該裝置可以沿著細(xì)胞培養(yǎng)板 縱向移動(dòng)，產(chǎn)生一道垂直的劃痕。
2. 橡膠劃痕棒條形板可以拆分下來(lái)，它與板蓋通過(guò)螺絲固定。這樣，當(dāng)樣 品數(shù)目較少時(shí)，可以只安裝上合適數(shù)量的橡膠劃痕棒條形板，充分利用 細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔。
3. 可適用于高通量篩選系統(tǒng)，通過(guò)計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化工作站代替人工進(jìn) 行加樣、劃痕、清洗、培養(yǎng)基更換、拍照統(tǒng)計(jì)等操作，使操作過(guò)程程序 化，減少人工操作造成的誤差，結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。


圖1是本發(fā)明的整體結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是本發(fā)明的橡膠劃痕棒條形板的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式
根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要，選擇適當(dāng)數(shù)量的橡膠劃痕棒條形板，用螺絲固定在相應(yīng)的 位置上。實(shí)驗(yàn)前用紫外線照射安裝好的裝置，進(jìn)行滅菌。
在細(xì)胞培養(yǎng)板中鋪好細(xì)胞，劃痕實(shí)驗(yàn)時(shí)拿開細(xì)胞培養(yǎng)板的板蓋，把本發(fā)明套 在細(xì)胞培養(yǎng)板上，側(cè)壁1和側(cè)壁2折疊下來(lái)，側(cè)壁3和側(cè)壁4伸展開，使橡膠劃 痕棒位于細(xì)胞培養(yǎng)板的孔的最左邊，輕輕向右推動(dòng)，劃出一道劃痕；接著側(cè)壁3 和側(cè)壁4折疊下來(lái)，側(cè)壁1和側(cè)壁2伸展開，使橡膠劃痕棒位于細(xì)胞培養(yǎng)板的孔 的最上邊，輕輕向下推動(dòng)，劃出一道劃痕。這樣， 一道十字交叉的劃痕就產(chǎn)生了。 然后，洗去劃掉的細(xì)胞，換成新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)基。觀察，拍照。拍照時(shí)以十字交 叉處為參照點(diǎn)，這樣一個(gè)孔就可以拍4個(gè)視野。
權(quán)利要求
1、一種用于細(xì)胞遷移研究和高通量藥物篩選的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置，其特征如下(a)與細(xì)胞培養(yǎng)板尺寸精確吻合的劃痕裝置板身。(b)板身上有螺絲小孔，可以固定鑲有橡膠劃痕棒的條形板。(c)條形板上鑲有一定數(shù)量的橡膠劃痕棒。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的板身，其四側(cè)壁均可以沿折痕折疊與展開，折疊時(shí)正好與細(xì)胞培 養(yǎng)板套牢，并可以平行地自由滑動(dòng)。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑲有橡膠劃痕棒條形板，其兩側(cè)有蠊絲孔正好可以用螺絲與板身 固定在一起，也可以拆下來(lái)。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的橡膠劃痕棒，其位置正好位于每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板的孔的正中央處。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的梭膠劃痕梓，其髙度比培養(yǎng)板的商度略髙，且與細(xì)胞接觸端的直 徑為5毫米。
6、 劃痕實(shí)驗(yàn)中該裝置的使用方法(a) 前一天晚上接種細(xì)胞丁-細(xì)胞培養(yǎng)板中。(b) 實(shí)驗(yàn)時(shí)，將該裝置的兩側(cè)伸展開，另兩側(cè)折疊下來(lái)套在細(xì)胞培養(yǎng)板上，按住自左向右 輕輕推動(dòng)該裝置。(c) 類似地，將該裝置折疊T"來(lái)的兩側(cè)展開，將伸展的兩側(cè)折疊下來(lái)套住細(xì)胞培養(yǎng)板，按 住自上而下輕輕推動(dòng)該裝置。(d) 清洗劃痕，洗去劃i的細(xì)胞。(e) 換成新鮮的含有血淸的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，毎隔一段時(shí)間觀察和拍照。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前細(xì)胞先用無(wú)血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)一個(gè)晚上。
8、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實(shí)驗(yàn)，劃痕后可以加入抑制或促進(jìn)細(xì)胞遷移的藥物。
9、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實(shí)驗(yàn)，拍照時(shí)每次拍照位置要一致。
10、 根據(jù)權(quán)利耍求9所述的拍照位置，可以取十字交叉的劃痕為標(biāo)記，每次拍十字交叉處的 4個(gè)視野。
11、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的劃痕實(shí)驗(yàn)，通過(guò)測(cè)量劃痕區(qū)域的像素定量分析細(xì)胞遷移的速度。
12、 該裝置可適用于髙通量藥物篩選系統(tǒng)，通過(guò)計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化工作站代替人工進(jìn)行加 樣、劃痕、清洗、培養(yǎng)基更換、拍照統(tǒng)計(jì)等操作。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種簡(jiǎn)便快速的劃痕實(shí)驗(yàn)裝置，適用于細(xì)胞遷移研究以及以細(xì)胞遷移為靶點(diǎn)的高通量藥物篩選。本發(fā)明帶有可拆卸的橡膠劃頭，以含有多個(gè)孔的細(xì)胞培養(yǎng)板(6、12、24、96、384孔板等)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，能精確地套在細(xì)胞培養(yǎng)板上，只需輕輕一推，就可以產(chǎn)生整齊均一的劃痕，且劃痕位置固定，便于拍照及后續(xù)的統(tǒng)計(jì)分析。本裝置也適用于高通量篩選系統(tǒng)的自動(dòng)化工作平臺(tái)，用于快速篩選以細(xì)胞遷移為靶點(diǎn)的藥物。另外，本發(fā)明可重復(fù)使用，所帶的橡膠劃頭具有可拆卸功能，經(jīng)酒精噴灑，紫外線照射后即可使用。本發(fā)明為劃痕實(shí)驗(yàn)提供了一種簡(jiǎn)便快速的辦法，具有很大的市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)C12Q1/02GK101508954SQ200910068158
公開日2009年8月19日 申請(qǐng)日期2009年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月18日
發(fā)明者軍 周, 謝松波, 高金珉 申請(qǐng)人:南開大學(xué)