專利名稱：蜂花粉無糖活性速溶顆粒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蜂花粉無糖活性速溶顆粒及其制備方法，屬于醫(yī)藥、保健 食品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
自《本草綱目》以來，蜂花粉的全面復(fù)合型營(yíng)養(yǎng)和神奇功效， 一直受到國(guó) 人追捧，在中國(guó)民間具有廣泛的藥用和食用群體。近年來，在部分功能性食品 和藥品不斷出現(xiàn)安全事故的背景下，追求平衡健康、重視食療食補(bǔ)以及回歸天 然的科學(xué)理念再度回歸。近年來，蜂花粉其產(chǎn)品的開發(fā)利用研究在國(guó)內(nèi)外已再 次引起廣泛地開展，已引起人們的重視。歐、美一些國(guó)家興起花粉熱，利用花 粉食品，提高食品業(yè)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。我國(guó)也利用花粉作食品添加劑和醫(yī)藥保健品， 提高食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和防病治病。蜂花粉是蜜蜂從種子植物的花朵上釆集花粉過程中形成的花粉團(tuán)，含有人體所必需的蛋白質(zhì)(SOD、多種氨基酸)、脂類、碳水化合物、多種維生素(維 生素C、 E、 A、 D、 P、 Bp B6)和孩￡量元素(K、 P、 Fe、 Cu、 Mn、 Mg、 Ca、 Zn等等)，以及對(duì)人體生理機(jī)能有特殊功效的黃酮類、核酸、天然植物激素、 性激素和促性腺激素等多種生物活性物質(zhì)，在國(guó)際上其被稱為"完全營(yíng)養(yǎng)品"。具 有明顯的增強(qiáng)人體免疫力、抗疲勞、延緩衰老、美容以及治療前列腺疾病等作 用。我國(guó)幅員il闊，蜂花粉資源豐富，特別是近年來，我國(guó)油菜的栽種面積增 加，因而油菜蜂花粉是高產(chǎn)價(jià)廉的蜂花粉，雖然油菜蜂花粉對(duì)人體有許許多多 的益處，但其固有的腥澀氣味以及一定的致敏性往往使部分消費(fèi)者避而遠(yuǎn)之。根據(jù)花粉的結(jié)構(gòu)可知，成熟的花粉壁分為明顯的2層，即內(nèi)壁和外壁。外 壁較厚、硬而缺乏彈性，主要成分是纖維素，具有抗酸、抗生物分解的特性。 外壁通常有萌發(fā)孔或溝縫，為外壁最薄弱的地方，花粉粒萌發(fā)時(shí)由此伸出花粉 壁。其外壁結(jié)構(gòu)中的孢粉素具有耐酸、耐堿、耐溫、耐壓以及對(duì)胃酸和其他消化系統(tǒng)酶非常穩(wěn)定的理化特性，不少研究表明當(dāng)花粉進(jìn)入人體的消化道時(shí)，雖 然可以通過表面的萌發(fā)孔釋放一些營(yíng)養(yǎng)成分，但為數(shù)極少，因此為了提高花粉 的開發(fā)利用價(jià)值，對(duì)其進(jìn)行特殊的破壁處理就顯得尤為重要?；ǚ燮票谑侵富ǚ鄣募?xì)胞受到不同程度的損傷，以便花粉內(nèi)含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的 釋放、吸收和利用。它是花粉加工中的一個(gè)關(guān)鍵技術(shù)。目前國(guó)內(nèi)外報(bào)道的花粉破壁方法包括濕法破壁和干法破壁。濕法破壁方法主要有溫差破壁法、機(jī)械破壁法、有機(jī)溶劑破壁法、發(fā)酵酶解破壁法等；干 法破壁主要有微波輻射破壁法和氣流粉碎法?，F(xiàn)有的破壁方法各有其優(yōu)點(diǎn)，但 是缺點(diǎn)同樣明顯，或者處理周期長(zhǎng)，對(duì)花粉的營(yíng)養(yǎng)成分破壞較大；或者破壁過 程中產(chǎn)生大量熱量，導(dǎo)致花粉酶活的喪失；或者工藝復(fù)雜且成本昂貴，增加產(chǎn) 品成本，在生產(chǎn)中不易推廣使用。發(fā)明內(nèi)容為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種蜂花粉活性成分速溶顆粒 的制備方法及產(chǎn)品，是采用復(fù)合酶酶解破壁方法進(jìn)行蜂花粉破壁后與常用賦型 劑制備成顆粒。植物復(fù)合水解酶酶解蜂花粉是現(xiàn)今最新的工藝方法，與其它方 法相比較，該方法具有簡(jiǎn)單、條件溫和、容易操作、反應(yīng)過程耗時(shí)短、破壁率 高等顯著特點(diǎn)。蜂花粉經(jīng)酶解后，其中的主要活性成分含量顯著提高，所含致 敏物質(zhì)被酶解分解，從而既大幅度提高了產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又提高了花粉產(chǎn)品 的食用安全性，提升產(chǎn)品品質(zhì)。為了達(dá)到所述目的，本發(fā)明提供一種蜂花粉活性成分速溶顆粒的制備方法， 其主要包括以下步驟1. 配制檸檬酸緩沖溶液將檸檬酸5.50-50.50g和檸檬酸鈉14.70-60.00g溶 于150-200ml去離子水中，調(diào)整緩沖溶液的pH值為2.5-6.8,取60-120ml緩沖 溶液倒入2 5 Oml的錐形瓶中；2. 將所述緩沖溶液在滅菌鍋中0.05-0.50Mpa,滅菌15-45min,取出冷卻后 備用；3. 取植物復(fù)合水解酶80-400 nl,將其加入到上述冷卻的緩沖溶液中至溶 解，再稱取經(jīng)干熱滅菌的蜂花粉5-45g加入到該錐形瓶中，混和均勻；4. 搖床培養(yǎng)在轉(zhuǎn)速120-250rpm,反應(yīng)溫度30-45°C,提取時(shí)間2-10h, pH2.5-6.8的條件，確?；ǚ勖附馄票诔浞?；5. 反應(yīng)混合液經(jīng)減壓過濾得提取液，測(cè)量提取液總體積，并測(cè)其總黃酮、SOD酶活力，再取50ml冷凍干燥得到濃縮液，計(jì)算蜂花粉提取率。6. 將過濾后的不溶性固形物(其主要成分包括纖維素、半纖維素、花粉多 糖、脂肪、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì))取樣，在40-12(TC恒溫干燥箱烘干，至舍水量 2.5-12.5%。7. 制粒將上述濃縮液、不溶性固形物與藥物學(xué)常用賦型劑(無糖型)、 溶劑混合后制成顆粒。其中，所述植物復(fù)合水解酶選自纖維素酶、果膠酶、蛋白酶中的一種以上 任意比例混合物，優(yōu)選含纖維素酶果膠酶蛋白酶的重量比為1-5: 1-5: 1-5, 更優(yōu)選纖維素酶果膠酶蛋白酶的重量比為1: 1: 1。所述搖床培養(yǎng)的條件優(yōu)選為反應(yīng)溫度45。C,提取時(shí)間6h， pH3.4。所述步驟7中的制粒例如可以采用藥典所述的配方和方法。在本發(fā)明的較 佳實(shí)施例中，釆用如下方法分別稱取如下重量份數(shù)的原料所述濃縮液20-80份、可溶性淀粉20-50份、 不溶性固形物10-90份、木糖醇2-10份、羧曱基纖維素2-10份和麥芽糊精10-50 份混合均勻，加入乙醇溶液30-100 ml和食用香精適量活成團(tuán)狀，于20目篩上 搓成顆粒，散開，30-60。C烘干1-4小時(shí)。通風(fēng)冷卻，裝袋。其中，優(yōu)選的，是將所述濃縮液50份、可溶性淀粉30份、不溶性固形物 20份、木糖醇3份、羧甲基纖維素4份和麥芽糊精25份混合均勻，加入50ml 乙醇溶液和占原料總重0.5-1%的食用香精活成團(tuán)狀，于20目篩上搓成顆粒，散 開，40'C烘干2小時(shí)。其中，所述乙醇溶液為蒸餾水和無水乙醇按體積比1:4 - 4:1配制而成，優(yōu) 選體積比1:1。經(jīng)本發(fā)明方法制備得到的提取液總體積為200-280ml，蜂花粉提取率為 25-55%，不溶性固形物含水量為2.5-12.5%。所制得的油菜蜂花粉顆粒按中國(guó)藥 典2005版顆粒劑進(jìn)行理化質(zhì)量4企查。本發(fā)明得到的酶解蜂花粉顆粒破壁率高，活性成分含量大大提高，花粉黃 酮含量平均提高了 2.07倍，花粉SOD酶活力也有較高的保留。酶解花粉其感官 指標(biāo)亦有顯著提升顏色由酶解前因花源差異導(dǎo)致的花粉顆粒自然色差，改善 為均一柔和淡黃色；口感由酶解前微澀味，改善為具有植物自然清新及低度甜 味?；ǚ劢?jīng)酶解后，過敏原被水解破壞，提高了產(chǎn)品生物安全度。


圖1為蜂花粉速溶顆粒劑展示圖2為蜂花粉速溶顆粒劑5min溶解圖； 圖3為蜂花粉速溶顆粒劑展示圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，應(yīng)該理解的是，這些實(shí)施例僅用 于例證的目的，決不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。 [對(duì)照例1 ]本例為空白對(duì)照組。
配制檸檬酸緩沖溶液，將檸檬酸5.50-50.50g和檸檬酸鈉14.70-60.00g溶于 200ml去離子水中，調(diào)整緩沖溶液的pH值至2.5-6.8,取80ml緩沖溶液倒入250ml 的錐形瓶中；將所述緩沖溶液在滅菌鍋中O.lMpa,滅菌20min，取出冷卻后備 用；
將20g經(jīng)干熱滅菌的蜂花粉加入到上述緩沖液中，上搖床培養(yǎng)，在轉(zhuǎn)速為 120rpm,反應(yīng)溫度45。c, ^是取時(shí)間6h, pH3.4的條件下，充分石皮壁。反應(yīng)混合 液經(jīng)減壓4由濾后，測(cè)量得到的提取液體積為200ml,之后取50ml濃縮，液冷凍 干燥，測(cè)得其總黃酮含量為247.249mg/100g,其SOD酶活力為203.160U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在40-120。c恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水 量為4.5%。
將上述濃縮液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物20g、木糖醇3g、羧甲 基纖維素4g和麥芽糊精25g-混合均勻，加入50 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙醇 按體積比1: 1配置而成)和食用香精(占原料總重的0.6%)活成團(tuán)狀，于20目 篩上搓成顆粒，散開，40。c烘干2小時(shí)即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取80 m 1植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠酶 蛋白酶的重量比為1: 1: 1)，和20g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速為 120rpm,反應(yīng)溫度45。c,提取時(shí)間6h， pH3.4的條件下，充分破壁。反應(yīng)混合 液經(jīng)減壓抽濾后，測(cè)量得到的一是取液體積為250ml,之后取50ml濃縮，冷凍干 燥，測(cè)得其總黃酮含量為335.520mg/100g，其SOD酶活力為149.96U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在40-120。c恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水 量為5.0°/o。將上述濃縮液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物20g、木糖醇3g、羧甲 基纖維素4g和麥芽糊精25g混合均勻，加入50 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙醇 按體積比1: 1配置而成)和食用香精(占原料總重的0.6%)活成團(tuán)狀，于20目 篩上搓成顆粒，散開，40。C供干即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取80 ja 1植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠酶 蛋白酶的重量比為2: 1: 1)，和20g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速為 150rpm,反應(yīng)溫度45。C,提取時(shí)間6h, pH3.4的條件下，充分破壁。反應(yīng)混合 液經(jīng)減壓^由濾后，測(cè)量纟尋到的一是耳又液體積為280ml,之后耳又50m濃縮，冷凍干 燥，測(cè)得其總黃酮含量為352.603mg/100g,其SOD酶活力為203.15U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在60。C恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水量為 2.5%。
將上述濃縮液20g、可溶性淀粉50g、不溶性固形物50g、木糖醇7g、羧甲 基纖維素6g和麥芽糊精25g混合均勻，加入70 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙醇 按體積比1: 4配置而成)和食用香精(占原料總重的1%)活成團(tuán)狀，于20目 篩上搓成顆粒，散開，40。C烘干即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取100ul植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠 酶蛋白酶的重量比為5: 3: 1),和40g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速 為150rpm,反應(yīng)溫度45。C,提取時(shí)間10h， pH6.8的條件下，充分破壁。反應(yīng) 混合液經(jīng)減壓抽濾后，測(cè)量得到的提取液體積為250ml,之后取50ml提取液冷 凍干燥得到濃縮液，測(cè)得其總黃酮含量為389.063mg/100g，其SOD酶活力為 214.14U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在100。C恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水量為 10.0%。
將上述濃縮液80g、可溶性淀粉40g、不溶性固形物10g、木糖醇8g、羧甲 基纖維素4g和麥芽糊精15g混合均勻，加入80 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙醇 按體積比4: 1配置而成)和食用香精(占原料總重的0.7%)活成團(tuán)狀，于20目 篩上搓成顆粒，散開，60。C烘干2小時(shí)即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取200jul植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠酶蛋白酶的重量比為1: 4: 2),和30g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速 為150rpm,反應(yīng)溫度40。C，提取時(shí)間4h, pH3.4的條件下，充分破壁。反應(yīng)混 合液經(jīng)減壓抽濾后，測(cè)量得到的提取液體積為210ml，之后取50ml提取液冷凍 干燥得到濃縮液，測(cè)得其總黃酮含量為439.063mg/100g,其SOD酶活力為 256.61U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在80。C恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水量為 6.0%。
將上述濃縮液20g、可溶性淀粉20g、不溶性固形物90g、木糖醇8g、羧曱 基纖維素10g和麥芽糊精40g混合均勻，加入100 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙 醇按體積比1: 1配置而成)和食用香精(占原料總重的0.8%)活成團(tuán)狀，于20 目篩上搓成顆粒，散開，40。C烘干4小時(shí)即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取300 nl植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠 酶蛋白酶的重量比為2: 4: 3)，和10g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速 為150rpm,反應(yīng)溫度35。C,提取時(shí)間6h, pH4.5的條件下，充分破壁。反應(yīng)混 合液經(jīng)減壓抽濾后，測(cè)量得到的提取液體積為270ml,之后耳又50mU是耳又液冷凍 干燥得到濃縮液，測(cè)得其總黃酮含量為472.190mg/100g,其SOD酶活力為 267.30U/mL。
將抽濾后的不溶性固形物取樣，在12(TC恒溫烘箱烘干至恒重計(jì)算含水量為 5.8%。
將上述濃縮液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物60g、木糖醇2g、歡曱 基纖維素10g和麥芽糊精15g混合均勻，加入40 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙 醇按體積比2: 1配置而成)和食用香精(占原料總重的0.9% )活成團(tuán)狀，于20 目篩上搓成顆粒，散開，2(TC烘干3小時(shí)即得本發(fā)明顆粒。
緩沖溶液的制備同對(duì)照例1。取400jal植物復(fù)合水解酶(纖維素酶果膠 酶蛋白酶的重量比為5: 2: 4),和20g蜂花粉同時(shí)加入到緩沖液中，在轉(zhuǎn)速 為120rpm，反應(yīng)溫度45。C,提取時(shí)間5h, pH3.4的條件下，充分破壁。反應(yīng)混 合液經(jīng)減壓抽濾后，測(cè)量得到的提取液體積為240ml,之后取50ml提取液冷凍 干燥得到濃縮液，測(cè)得其總黃酮含量為512.813mg/100g,其SOD酶活力為 320.77U/mL。將抽濾后的不溶性固形物取樣，在105。C恒溫烘箱供干至恒重計(jì)算含水量為
11.2%。
將上述濃縮液50g、可溶性淀粉40g、不溶性固形物10g、木糖醇3g、羧甲 基纖維素10g和麥芽糊精25g混合均勻，加入50 ml乙醇溶液(蒸餾水和無水乙 醇按體積比i: 3配置而成)和食用香精(占原料總重的0.5%)活成團(tuán)狀，于20 目篩上搓成顆粒，散開，4(TC烘干1小時(shí)即得本發(fā)明顆粒。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明而言僅僅是說明性的，而非 限制性的。本專業(yè)技術(shù)人員理解，在本發(fā)明權(quán)利要求所限定的精神和范圍內(nèi)可 對(duì)其進(jìn)行許多改變，修改，甚至等效，但都將落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1、一種蜂花粉活性成分速溶顆粒的制備方法，其特征在于，主要包括以下步驟A. 配制檸檬酸緩沖溶液將檸檬酸5.50-50.50g和檸檬酸鈉14.70-60.00溶于150-200ml去離子水中，調(diào)整緩沖溶液的pH值至2.5-6.8，取60-120ml緩沖溶液倒入250ml的錐形瓶中；B. 將所述緩沖溶液在滅菌鍋中0.05-0.50Mpa，滅菌15-45min，取出冷卻后備用；C. 取植物復(fù)合水解酶80-400μl，將其加入到上述冷卻的緩沖溶液中至溶解，再稱取經(jīng)干熱滅菌的蜂花粉5-45g加入到該錐形瓶中，混和均勻；D. 搖床培養(yǎng)在轉(zhuǎn)速120-250rpm，反應(yīng)溫度30-45℃，提取時(shí)間2-10h，pH2.5-6.8的條件下，確?；ǚ勖附馄票诔浞?；E. 反應(yīng)混合液經(jīng)減壓過濾得提取液，冷凍干燥得到濃縮液；F. 將過濾后的不溶性固形物在40-120℃恒溫烘箱烘干至恒重；G. 制粒將所述濃縮液、所述不溶性固形物與藥物學(xué)常用無糖型賦型劑、溶劑混合后制成顆粒。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述植物復(fù)合水解酶選自 纖維素酶、果膠酶、蛋白酶中的兩種及兩種以上任意比例混合物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述植物復(fù)合水解酶為纖 維素酶l-5份，果膠酶l-5份，蛋白酶l-5份，均為重量份。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述植物復(fù)合水解酶為纖 維素酶、果膠酶、蛋白酶的重量比為1: 1: l的混合物。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述搖床培養(yǎng)的條件優(yōu)選 為反應(yīng)溫度45。C，提取時(shí)間6h, pH3.4。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述制粒包括以下步驟， 分別稱耳又如下重量份數(shù)的原料所述濃縮液20-80份、可溶性淀粉20-50份、不 溶性固形物10-90份、木糖醇2-10份、羧甲基纖維素2-10份和麥芽糊精10-50 份混合均勻，加入30-100 ml乙醇溶液和食用香精適量活成團(tuán)狀，于20目篩上 搓成顆粒，散開，30-60。C烘干1-4小時(shí)。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述制粒包括以下步驟，分別稱取如下重量份數(shù)的原料所述濃縮液50份、可溶性淀粉30份、不溶性 固形物20份、木糖醇3份、羧甲基纖維素4份和麥芽糊精25份混合均勻，加 入50 ml乙醇溶液和占原料總重0.5-1%的食用香精活成團(tuán)狀，于20目篩上搓成 顆粒，散開，4(TC烘干2小時(shí)。
8、 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于所述乙醇溶液為蒸餾 水和無水乙醇"l姿體積比1:4-4:1配制而成。
9、 一種蜂花粉活性成分速溶顆粒，其特征在于，其是根據(jù)權(quán)利要求l-8所 述的方法制備得到的。
10、 權(quán)利要求9所述的蜂花粉活性成分速溶顆粒作為食品添加劑或醫(yī)藥保健 品的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供一種蜂花粉活性成分速溶顆粒的制備方法及產(chǎn)品，是采用復(fù)合酶酶解破壁方法進(jìn)行蜂花粉破壁后與常用賦型劑制備成顆粒。植物復(fù)合水解酶酶解蜂花粉是現(xiàn)今最新的工藝方法，與其它方法相比較，該方法具有簡(jiǎn)單、條件溫和、容易操作、反應(yīng)過程耗時(shí)短、破壁率高等顯著特點(diǎn)。蜂花粉經(jīng)酶解后，其中的主要活性成分含量顯著提高，所含致敏物質(zhì)被酶解分解，從而既大幅度提高了產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，又提高了花粉產(chǎn)品的食用安全性，提升產(chǎn)品品質(zhì)。
文檔編號(hào)A23L1/29GK101502307SQ200910079478
公開日2009年8月12日 申請(qǐng)日期2009年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月12日
發(fā)明者盧鑫鑫, 周賀新, 趙有璽, 平 龔 申請(qǐng)人:北京聯(lián)合大學(xué)生物化學(xué)工程學(xué)院