專利名稱：：一種鮮山藥提取物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于食品、天然產(chǎn)物的加工提取與分離
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種食品或天然藥物山藥的提取物，及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：山藥為薯蕷科多年生纏繞草本植物山藥DioscoreaoppositeThunb.的塊根。產(chǎn)于河南焦作(舊屬懷慶府)的懷山藥與產(chǎn)于淮河流域江蘇省灌南縣的淮山藥均屬同種植物。山藥具有補脾、養(yǎng)肺、固腎、益精的作用?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》列為上品。言其"主傷中補虛贏，除寒熱邪氣，補中益氣力，長肌肉。久服耳聰目明，輕身不饑延年。"《本草綱目》云"山藥性溫味甘平無毒，健脾胃，益肺腎，止泄痢，化痰涎，潤皮毛"。山藥能供給人體大量的黏液蛋白，這是多糖與蛋白質(zhì)相結(jié)合的復合物，能預防心血管系統(tǒng)的脂肪沉積，保持血管的彈性，防止動脈粥樣硬化的發(fā)生，減少皮下脂肪沉積，避免出現(xiàn)肥胖。還能防止肝臟和腎臟結(jié)締組織的萎縮、保持消化道、呼吸道及關(guān)節(jié)腔的潤滑。山藥中的黏多糖與無機鹽結(jié)合后可以形成骨質(zhì)，增強軟骨的彈性。從山藥中提取山藥多糖可不同程度地提高T淋巴細胞的增殖能力、NK細胞活性、血清溶血素活性、血清IgG含量，也能增強巨噬細胞的吞噬能力。因此，山藥多糖具有明顯的抗腫瘤、增強免疫調(diào)節(jié)和抗突變的作用；既具有非特異性免疫功能，又具有提高特異性細胞免疫和體液免疫功能；對全面改善機體的免疫功能具有重要的意義。以往山藥多糖大多按中藥傳統(tǒng)的方法，以山藥飲片用水煎煮提取，山藥多糖的提取率低，而且山藥提取物中存在大量的山藥淀粉，山藥提取物多糖含量測定數(shù)據(jù)嚴重偏高，因而難以準確測定山藥提取物中的多糖，產(chǎn)品質(zhì)量難以監(jiān)控。除上述傳統(tǒng)方法外，現(xiàn)有技術(shù)文獻也披露了鮮山藥提取物的制備方法。一種方法是將鮮山藥攪拌機破碎，加入4倍量體積95%乙醇，在9(TC水浴中回流提取，間歇攪拌。離心得殘渣，殘渣依次用無水乙醇、丙酮、石油醚進行多次抽洗，殘渣以料液比1:20的水提取，提取溫度60'C，提取時間為3h，離心分離，上清液濃縮，加95%乙醇醇析，沉淀物用蒸餾水復溶后再加95%乙醇醇析，反復三次，將沉淀用無水乙醇、無水乙醚、丙酮洗滌，真空干燥，得山藥水溶性多糖粗品。采用Sevage法(氯仿一正丁醇)去除蛋白。用少量雙蒸水溶解粗多糖，混勻后加入Sevage法混合液，振搖20min，可見凝膠狀的蛋白質(zhì)析出，用離心法除去，反復23一3次。上清液用3倍體積的相應濃度的乙醇沉淀，即得脫蛋白山藥多糖。將多糖溶解后加入適量的30XHA，在50。C下保溫脫色20min，然后加入3倍體積的相應濃度的乙醇，離心后取沉淀用95%乙醇、無水乙醇各淋洗l次，丙酮、乙醚各淋洗2次后，60'C烘干至恒重，得到較純的山藥水溶性粗多糖(山藥水溶性多糖的提取及抗氧化性研究，食品研究與開發(fā)，2007,28(11))。該法以鮮山藥直接提取，沒有報道山藥水溶性粗多糖的提取得率及其含量；用HA脫色促使山藥多糖氧化，破壞了山藥多糖的生物活性；Sevage法脫蛋白，同時也脫除了具有較高抗氧化能力生物活性的糖蛋白(多糖與蛋白質(zhì)相結(jié)合的復合多糖)。Sevage法(氯仿一正丁醇)脫蛋白，無水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，溶劑毒性大、易燃易爆，成本高，工藝繁雜，難以實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。另一種方法是將鮮山藥漿料經(jīng)石油醚回流脫脂，過濾，濾液回收石油醚。濾渣用80%的乙醇溶液浸泡過夜，回流提取。將濾渣加蒸餾水，5CTC熱提，濾液減壓濃縮，Sevage法脫蛋白，加活性炭脫色，離心，濾液加95%乙醇，4'C靜置過夜。離心，沉淀物用無水乙醇、丙酮、無水乙醚多次洗滌，真空干燥得精制山藥多糖(山藥粗多糖的提取工藝，食品與生物技術(shù)學報，2006，25(3))。該法用鮮山藥直接提取，沒有報道山藥水溶性粗多糖的含量，只報道以鮮山藥計粗多糖得率為0.2449%，得率低。與前述方法相同，該方法存在Sevage法脫蛋白及使用石油醚、無水乙醚、丙酮等溶劑所帶來的缺點，難以實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)?，F(xiàn)有的鮮山藥提取物的制備方法中，均未披露其中是否含淀粉，這些方法無法去除山藥提取物中的淀粉。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種鮮山藥提取物的制備方法，能夠解決傳統(tǒng)方法山藥飲片用水煎煮或現(xiàn)有的鮮山藥提取方法所存在的提取物中存在大量山藥淀粉的問題；克服現(xiàn)有的鮮山藥提取方法使用氯仿等有毒溶劑及石油醚等易燃易爆溶劑的缺點，及使用生產(chǎn)效率低的透析方法，工藝繁雜，產(chǎn)品收率低等缺點。木發(fā)明的制備方法直接以鮮山藥為原料，產(chǎn)品收率高，工藝簡化，適用于工業(yè)化的山藥提取物生產(chǎn)。本發(fā)明的目的還在于提供一種不含淀粉的鮮山藥提取物，其主要組分為多糖、礦物質(zhì)和蛋白質(zhì)等。本發(fā)明的另一目的在于提供所述鮮山藥提取物用于制備具有增強免疫力作用的藥品或保健食品的用途。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下-一種鮮山藥提取物的制備方法，其特征在于原料鮮山藥去皮、清洗、破碎、打漿、膠體磨研磨制成鮮山藥漿；鮮山藥槳加110倍重量的水加熱提?。凰崛∫弘x心分離，上清液減壓濃縮制得波美度為720的流浸膏；用流浸膏容積的220倍容積的95%乙醇醇沉；醇沉液離心分離，沉渣加1030倍重量的水攪拌溶解并離心分離，上清液干燥制成鮮山藥提取物。所述的加熱提取，即將鮮山藥漿加水后加熱并攪拌提取15小時，提取溫度為40'C60°C;可提取操作13次。所述的減壓濃縮，其濃縮溫度為6(TC7(TC。所述的千燥可采用真空微波干燥或真空冷凍干燥的方法。本發(fā)明方法以鮮山藥計，產(chǎn)品得率1%1.2%，高于公開文獻的報道。本發(fā)明還涉及一種鮮山藥提取物，其特征在于采用上述方法制備。所述的鮮山藥提取物，其主要組分為多糖、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)等。鮮山藥提取物不含淀粉，碘試劑鑒別反應為陰性。本發(fā)明還涉及所述的鮮山藥提取物用于制備具有增強免疫力作用的藥品或保健食品的用途。該鮮山藥提取物具有顯著增強免疫力的保健功能，可用于制造用于增強免疫力的藥品或保健食品。本發(fā)明的鮮山藥提取物制備方法，鮮山藥提取物不含淀粉，收率高，工藝簡化，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的方法及所制得的產(chǎn)品，還具有以下技術(shù)效果1、本發(fā)明的的制備方法不使用有毒、易燃、易爆等溶劑，生產(chǎn)安全性高，產(chǎn)品安全性高；2、本發(fā)明的的制備方法，其生產(chǎn)過程不產(chǎn)生有害廢水、廢渣、廢氣等污染物；3、本發(fā)明的鮮山藥提取物具有顯著增強免疫力的保健功能，可用于醫(yī)藥、保健食品等行業(yè)。下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行詳細描述。本發(fā)明的范圍并不以具體實施方式為限，而是由權(quán)利要求的范圍加以限定。具體實施例方式實施例1鮮山藥200kg去皮，自來水沖洗后，破碎機破碎，粉碎機打漿，膠體磨研磨制成鮮山藥漿。用泵將鮮山藥漿輸入提取罐中，加水400升，加熱攪拌提取2小時，提取溫度60。C;水提取液離心分離，上清液70。C減壓濃縮，制得波美度為15的流浸膏；流浸膏用220倍容積的95%乙醇醇沉；醇沉液離心分離，沉渣加1030倍重量的水攪拌溶解制成水溶液；水溶液離心分離，上清液真空微波干燥，制成不含淀粉的鮮山藥提取物2.0kg。以鮮山藥計，產(chǎn)品收率為1.0%。其主要組分為多糖、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)等。取濃度為0.06%鮮山藥提取物水溶液5滴，置于白瓷板中，加1滴碘試劑后不變藍色，即碘試劑鑒別反應為陰性，表明鮮山藥提取物不含淀粉。以0.06%可溶性淀粉作為對照。實施例2鮮山藥500kg去皮，自來水沖洗，破碎機破碎，粉碎機打漿，膠體磨研磨制成鮮山藥漿；用泵將鮮山藥漿輸入提取罐中，加水1000升，加熱攪拌提取3小時，提取溫度55°C;水提取液離心分離，上清液60'C減壓濃縮，制得波美度為20的流浸膏；流浸膏用220倍容積的95%乙醇醇沉；醇沉液離心分離，沉渣加1030倍重量的水攪拌溶解制成水溶液；水溶液離心分離，上清液真空冷凍干燥，制成不含淀粉的鮮山藥提取物5.5kg。以鮮山藥計，產(chǎn)品收率為1.10%。其主要組分為多糖、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)等。鮮山藥提取物碘試劑鑒別反應為陰性，表明其中不含淀粉。本發(fā)明實施例2鮮山藥提取物經(jīng)動物功能性試驗，證明具有增強免疫力的保健功能，其試驗結(jié)果如下1.ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗結(jié)果表明鮮山藥提取物在中劑量組、高劑量組時，具有增強細胞免疫功能的作用。結(jié)果見表l:表1鮮山藥提取物對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗的影晌組別(mg/kg)動物數(shù)(只)加ConA孔與不加ConA孔吸光度的差值0100.012±0.005低劑量100.015±0.006中劑量100.025±0,007*高劑量100.023±0.006**Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)2.二硝基氟苯誘導小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗(耳腫脹法表2鮮山藥提取物對二硝基氟苯誘導小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應的影響(均值士標準差)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)3.抗體生成細胞檢測試驗(Jerne改良玻片法)結(jié)果表明鮮山藥提取物在中劑量組、高劑量組時，具有增強體液免疫功能的作用。結(jié)果見表3:表3鮮山藥提取物對溶血空斑數(shù)的影響(均值士標準差)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)4.血清溶血素的測定(血凝法)結(jié)果表明鮮山藥提取物在高劑量組時，具有增強體液免疫功能的作用。結(jié)果見表4:表4鮮山藥提取物對小鼠血清溶血素抗體積數(shù)的影響(均值土標準差)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)5.小鼠碳廓清試驗結(jié)果表明鮮山藥提取物在高劑量組時，具有增強小鼠單核吞噬細胞吞噬的作用。結(jié)果見表5:表5鮮山藥提取物對小鼠吞噬指數(shù)的影響(均值土標準差)組別(mg/kg)動物數(shù)(只)吞噬指數(shù)0103.88±0.70低劑量103.96±0.42中劑量104.40±0.44高劑量104.69±0.67**Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)6.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗結(jié)果表明鮮山藥提取物在中劑量組、高劑量組時，具有增強小鼠巨噬細胞吞噬功能的作用。結(jié)果見表6:表6鮮山藥提取物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的呑噬率及吞噬指數(shù)的影響(均值士標準差)組別(mg/kg)動物數(shù)(只)吞噬率(％)吞噬指數(shù)01017.3±1.70.21±0.22低劑量1021.1±4.20.26±0.08中劑量1026.3±7.4*0.34±0.09*高齊糧1027.9±4.4*0.37±0.08**Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)7.NK細胞活性測定試驗(乳酸脫氫酶測定法)結(jié)果表明鮮山藥提取物在中劑量組、高劑量組時，具有增強NK細胞活性的作用。結(jié)果見表7:表7鮮山藥提取物對NK細胞活性的影響(均值土標準差)組別(mg/kg)動物數(shù)(只)NK細胞活性(％)01031.9±1.9低劑量1033.4±3.6中劑量1037.6±1.9*高劑量1038.8±2.1**Dunnett'st檢驗，與陰性對照組比較差異有顯著意義(P<0.05)本發(fā)明方法制成的鮮山藥提取物具有增強細胞免疫功能的作用、增強體液免疫功能的作用、增強小鼠單核吞噬細胞吞噬的作用、增強小鼠巨噬細胞吞噬功能的作用、增強NK細胞活性的作用。該鮮山藥提取物具有顯著增強免疫力的保健功能，可作為具有增強免疫力的保健食品。8權(quán)利要求1、一種鮮山藥提取物的制備方法，其特征在于原料鮮山藥去皮、清洗、破碎、打漿、膠體磨研磨制成鮮山藥漿；鮮山藥漿加1～10倍重量的水加熱提??；水提取液離心分離，上清液減壓濃縮，制得波美度7～20的流浸膏；用流浸膏容積的2～20倍容積的95％乙醇醇沉；醇沉液離心分離，沉渣加10～30倍重量的水攪拌溶解并離心分離，上清液干燥制成鮮山藥提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的加熱提取，方法是將鮮山藥漿加水后加熱并攪拌提取15小時，提取溫度為40。C60°C;提取操作13次。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于所述的減壓濃縮溫度為60。C7(TC。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的干燥可采用真空微波干燥或真空冷凍干燥的方法。5、一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的鮮山藥提取物。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的鮮山藥提取物，其特征在于所述的鮮山藥提取物不含淀粉。7、權(quán)利要求5所述的鮮山藥提取物用于制備具有增強免疫力作用的藥品或保健食品的用途。全文摘要本發(fā)明公開了一種鮮山藥提取物及其制備方法和用途。將原料鮮山藥去皮、清洗、破碎、打漿、膠體磨研磨制成鮮山藥漿；鮮山藥漿加1～10倍重量的水加熱提??；水提取液離心分離，上清液減壓濃縮制得波美度7～20的流浸膏；用流浸膏容積的2～20倍容積的95％乙醇醇沉；醇沉液離心分離，沉渣加10～30倍重量的水攪拌溶解并離心分離，上清液干燥制成鮮山藥提取物。本發(fā)明的鮮山藥提取物不含淀粉，其主要組分為多糖、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)等。具有顯著增強免疫力的保健功能，可用于制造用于增強免疫力的藥品或保健食品。文檔編號A23L1/214GK101632436SQ200910181879公開日2010年1月27日申請日期2009年7月31日優(yōu)先權(quán)日2009年7月31日發(fā)明者冰夏,龐自潔,張宗和,浩徐,楊如同,潘福生,清秦,趙愛明,林陶,黃嘉玲申請人:江蘇省中國科學院植物研究所;南京龍源天然多酚合成廠