專(zhuān)利名稱(chēng)：對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物菌株的培養(yǎng)方法，具體地說(shuō)涉及一種對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污 染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法；屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
工業(yè)廢水污染是治理當(dāng)前生態(tài)保護(hù)中一項(xiàng)非常重要和極具挑戰(zhàn)性的工作。來(lái)自 印染、制藥、農(nóng)藥、制革、石油化工和食品工業(yè)等生產(chǎn)過(guò)程中的有機(jī)廢水成分復(fù)雜、可生化性 差，嚴(yán)重污染水環(huán)境，甚至將削弱水生生物等的長(zhǎng)期繁殖能力?，F(xiàn)有的工業(yè)廢水的凈化處理 技術(shù)可歸納為生物法、化學(xué)法、物理_化學(xué)耦合法和物化_生物耦合法等。其中生物法具有 經(jīng)濟(jì)性好，無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)。 現(xiàn)有的工業(yè)廢水中對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重的主要有苯酚、苯胺和硝基苯類(lèi)化合物等。其 中苯酚是造紙、煉焦、煉油、塑料、紡織等工業(yè)廢水中的主要污染物。硝基苯類(lèi)化合物廣泛應(yīng) 用于農(nóng)藥、染料、炸藥、橡膠以及其它化工產(chǎn)品的生產(chǎn)。環(huán)境中的硝基苯類(lèi)污染物主要包括 硝基苯、硝基氯苯、硝基甲苯、硝基苯酚、硝基苯胺等化合物。利用微生物降解苯酚、苯胺和 硝基苯類(lèi)化合物是一種既經(jīng)濟(jì)且不會(huì)產(chǎn)生二次污染的方法，近年來(lái)，從工業(yè)廢水污染的環(huán)
境中分離到許多可以降解苯酚、苯胺和硝基苯類(lèi)化合物的微生物菌株。盛連喜等人在應(yīng)用 生態(tài)學(xué)報(bào)，2007年7月，第18巻，第7期中對(duì)硝基苯類(lèi)化合物微生物降解研究進(jìn)展，并從硝 基苯類(lèi)化合物降解菌的馴化篩選，降解途徑、降解激勵(lì)、共代謝、趨化性和分子遺傳學(xué)角度， 闡述了硝基苯類(lèi)化合物生物降解的最近研究進(jìn)展。溫洪宇等人在徐州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然 科學(xué)版)2003年12月，第21巻，第4期中敘述了降解苯酚細(xì)菌的分離及生理學(xué)特性研究， 雖然它通過(guò)菌株培養(yǎng)、馴化與篩選從工業(yè)廢水中分離出兩株可以降解苯酚的細(xì)菌，但是該 菌株僅僅對(duì)苯酚具有降解作用，對(duì)工業(yè)廢水中同時(shí)具有苯胺和硝基苯類(lèi)化合物的復(fù)合污染 物卻不具有降解能力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一種對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能 力的微生物菌株的培養(yǎng)方法。 本發(fā)明的目的是通過(guò)下列技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有 降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟 A、針對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)復(fù)合化合物，分別配制含不同濃度梯 度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，所述的液體培養(yǎng)基中還添加微生物菌株生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué) 基質(zhì)成分，將部分液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)化成選擇性固體培養(yǎng)基； B、將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)，培 養(yǎng)溫度為20-4(TC，培養(yǎng)時(shí)間為2-4天； C、將假單胞菌株接種到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后將其制成感受態(tài)細(xì)胞，將步驟B中培養(yǎng)的菌株濃縮后與感受態(tài)細(xì)胞一起重懸于低濃度梯度的工業(yè)廢水 液體培養(yǎng)基，在溫度為10-4(TC的條件下孵育10-45小時(shí)；再采用不同濃度梯度的工業(yè)廢水 液體培養(yǎng)基進(jìn)行馴化培養(yǎng)，馴化培養(yǎng)溫度為15-45t:，馴化培養(yǎng)時(shí)間6-25天，反復(fù)馴化培養(yǎng) 2-12次，馴化培養(yǎng)后涂布于選擇性固體培養(yǎng)基，在溫度為10-4(TC的條件下孵育10-45小 時(shí)，然后進(jìn)行鑒定； D、將步驟C中獲得菌株進(jìn)行純化后，即獲得對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能 力的微生物菌株。 本發(fā)明首先根據(jù)工業(yè)廢水中的復(fù)合污染物種類(lèi)，制成的不同濃度含復(fù)合污染物的 液體培養(yǎng)基，然后對(duì)活性污泥微生物進(jìn)行富集，再加入感受態(tài)的宿主菌重懸于低濃度梯度 的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基進(jìn)行孵育，采用不同濃度的廢水進(jìn)行反復(fù)馴化，并選擇優(yōu)勢(shì)菌種，純 化后最終得到對(duì)復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌種。 其中步驟A中配制不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，主要配制目標(biāo)化合物的 濃度為0， 0. 5g/L， 1. Og/L， 1. 5g/L， 2. Og/L， 2. 5g/L， 3. Og/L， 3. 5g/L。不同濃度梯度的工業(yè)廢 水液體培養(yǎng)基可以統(tǒng)計(jì)出工業(yè)廢水降解微生物菌株隨復(fù)合污染物濃度變化的生長(zhǎng)變化情 況以及對(duì)復(fù)合污染物的降解率；微生物菌種生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué)基質(zhì)成分主要有磷、鐵、 鉀、氧、鈉、氯、鈣、鎂等元素。將部分液體培養(yǎng)基添加15-20g瓊脂(按1000ml水計(jì)算)后 就轉(zhuǎn)化成選擇性固體培養(yǎng)基。 步驟B中采用的是常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的配方為牛肉膏3克， 蛋白胨10克，氯化鈉5克，瓊脂15克，水1000ml。 步驟C中的假單胞菌株(Pseudomonas)主要是惡臭假單胞菌株，將它接種到常規(guī) 的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后把細(xì)胞懸浮在pH6. 0的10Ommol/L CaCl2 中，在冰浴條件下，放置過(guò)夜，讓其轉(zhuǎn)化成感受態(tài)細(xì)胞。 在上述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法中，步 驟A中所述的液體培養(yǎng)基中其它化學(xué)基質(zhì)組分為硝酸鉀0. 5-1. 5g/L ;氯化鈉0. l_lg/
L ;K2HP04 3H20 :0. 2g-0. 8g/L ;MgS04 7H20 :0. 2g_0. 8g/L ;FeS04 7H200. 005—0. 015g/L。
在上述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法 中，步驟C中感受態(tài)細(xì)胞細(xì)菌濃度為1Xl(f-3X10、fu/mL;菌株濃縮后細(xì)菌濃度為 lX 107-3X 109cfu/mL。 作為優(yōu)選，步驟C中在低濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基中孵育溫度為15_35°C， 孵育時(shí)間為12-36小時(shí)。所述的低濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基主要是指濃度為O、 0. 5g/L或1. Og/L的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基。 作為優(yōu)選，步驟C中馴化培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為20-4(TC，培養(yǎng)時(shí)間7-21天，反復(fù)馴化 培養(yǎng)3-10次。 綜上所述，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn) 1、本發(fā)明的培養(yǎng)方法采用含不同濃度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基對(duì)活性污泥微生物 進(jìn)行富集培養(yǎng)，加入感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行馴化培養(yǎng)，最終純化后選擇出對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染 物具有較強(qiáng)降解能力的優(yōu)勢(shì)菌種，應(yīng)用比較方便且范圍較廣，便于進(jìn)行大規(guī)模的工業(yè)化推廣。 2、本發(fā)明的培養(yǎng)方法工藝流程簡(jiǎn)單，使用原料的成本較低，培養(yǎng)的菌株對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)化合物降解效率較高。


圖1是實(shí)施例1培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株生長(zhǎng) 曲線圖。 圖2是實(shí)施例1培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株與pH 值對(duì)應(yīng)關(guān)系圖。 圖3是實(shí)施例1培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株對(duì)有 機(jī)物的耐受性曲線圖。 圖4是實(shí)施例1培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株對(duì)工 業(yè)廢水中有機(jī)物的降解的曲線圖。 圖5是實(shí)施例2培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株生長(zhǎng) 曲線圖。 圖6是實(shí)施例2培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株與pH 值對(duì)應(yīng)關(guān)系圖。 圖7是實(shí)施例2培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株對(duì)有 機(jī)物的耐受性曲線圖。 圖8是實(shí)施例2培養(yǎng)的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株對(duì)工 業(yè)廢水中有機(jī)物的降解的曲線圖。
具體實(shí)施例方式
下面通過(guò)具體實(shí)施例并結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體的說(shuō)明；但
是本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1 針對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)復(fù)合污染物，分別配制含濃度為Og/L， 0. 5g/L， 1. Og/L， 1. 5g/L， 2. Og/L， 2. 5g/L， 3. Og/L， 3. 5g/L不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體培 養(yǎng)基，在工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基中還加入微生物菌株生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué)基質(zhì)配方硝酸 鉀:0. 5g/L ;氯化鈉:lg/L ;K2HP04 3H20 :0. 8g/L ;MgS04 *7H20 :0. 2g/L ;FeS04 *7H20 0. OlOg/ L，并將部分液體培養(yǎng)基加入添加15g瓊脂(按1000ml水計(jì)算)后轉(zhuǎn)化成選擇性固體培養(yǎng) 基。 將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培 養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為20°C ，培養(yǎng)時(shí)間4天。 將惡臭假單胞菌株接種到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后把 細(xì)胞懸浮在P朋.0的lOOmmol/L CaCl2中，在冰浴條件下，放置過(guò)夜，讓其轉(zhuǎn)化成感受態(tài)細(xì) 胞。將步驟B中培養(yǎng)的菌株濃縮后(細(xì)菌濃度為lX 107-3X 109cfU/mL)與感受態(tài)細(xì)胞(細(xì) 菌濃度為lX 107-3X 109cfu/mL) —起重懸于低濃度梯度(濃度分別為Og/L， 0. 5g/L， 1. Og/ L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，在溫度為35t:的條件下孵育12小時(shí)；再采用其它不同濃度梯 度(濃度分別為1. 5g/L，2. 0g/L，2. 5g/L，3. 0g/L，3. 5g/L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基進(jìn)行馴化 培養(yǎng)，馴化培養(yǎng)溫度為20°C ，馴化培養(yǎng)時(shí)間21天，反復(fù)馴化培養(yǎng)3次，馴化培養(yǎng)后涂布于選擇性固體培養(yǎng)基，在溫度為15t:的條件下孵育36小時(shí)，挑選單菌落采用常規(guī)的方法進(jìn)行鑒 定，并對(duì)其隨苯胺濃度的生長(zhǎng)變化情況，隨廢水濃度的生長(zhǎng)變化情況，降解能力鑒定；分別 對(duì)其生長(zhǎng)性能，對(duì)pH值的適應(yīng)性能，對(duì)廢水中的有機(jī)物耐受性能和對(duì)廢水中有機(jī)物的降解 性能進(jìn)行鑒定，鑒定結(jié)果如圖1、圖2、圖3和圖4所示。 將上述經(jīng)過(guò)鑒定后符合標(biāo)準(zhǔn)的菌株采用劃線平板分離法進(jìn)行純化后，即獲得對(duì)工
業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株。
實(shí)施例2 針對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)復(fù)合污染物，分別配制含濃度為Og/L， 0. 5g/L， 1. Og/L， 1. 5g/L，2. 0g/L，2. 5g/L，3. 0g/L，3. 5g/L不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體 培養(yǎng)基，在工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基中還加入微生物菌株生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué)基質(zhì)配方硝 酸鉀1. Og/L ;氯化鈉:0. 5g/L ;K2HP04 3H20 :0. 5g/L ;MgS04 7H20 :0. 5g/L ;FeS04 7H20 0. 005g/L，并將部分液體培養(yǎng)基加入添加20g瓊脂(按1000ml水計(jì)算)后轉(zhuǎn)化成選擇性固 體培養(yǎng)基。 將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培 養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30°C ，培養(yǎng)時(shí)間3天。 將惡臭假單胞菌株接種到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后把 細(xì)胞懸浮在P朋.0的lOOmmol/L CaCl2中，在冰浴條件下，放置過(guò)夜，讓其轉(zhuǎn)化成感受態(tài)細(xì) 胞。將步驟B中培養(yǎng)的菌株濃縮后(細(xì)菌濃度為lX 107-3X 109cfU/mL)與感受態(tài)細(xì)胞(細(xì) 菌濃度為lX 107-3X 109cfu/mL) —起重懸于低濃度梯度(濃度分別為Og/L， 0. 5g/L， 1. Og/ L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，在溫度為25t:的條件下孵育24小時(shí)；再采用其它不同濃度梯度 (濃度分別為1. 5g/L， 2. Og/L， 2. 5g/L， 3. Og/L， 3. 5g/L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基進(jìn)行馴化培 養(yǎng)，馴化培養(yǎng)溫度為30°C ，培養(yǎng)時(shí)間14天，反復(fù)馴化培養(yǎng)6次，馴化培養(yǎng)后涂布于選擇性固 體培養(yǎng)基，在溫度為25t:的條件下孵育24小時(shí)，挑選單菌落采用常規(guī)的方法進(jìn)行鑒定，分 別對(duì)其生長(zhǎng)性能，對(duì)pH值的適應(yīng)性能，對(duì)廢水中的有機(jī)物耐受性能和對(duì)廢水中有機(jī)物的降 解性能進(jìn)行鑒定，鑒定結(jié)果如圖5、圖6、圖7和圖8所示。 將上述經(jīng)過(guò)鑒定后符合標(biāo)準(zhǔn)的菌株采用劃線平板分離法進(jìn)行純化后，即獲得對(duì)工
業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株。
實(shí)施例3 針對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)復(fù)合污染物，分別配制含濃度為Og/L， 0. 5g/L， 1. Og/L， 1. 5g/L，2. 0g/L，2. 5g/L，3. 0g/L，3. 5g/L不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體 培養(yǎng)基，在工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基中還加入微生物菌株生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué)基質(zhì)配方硝 酸鉀1. 5g/L ;氯化鈉:0. lg/L ;K2HP04 3H20 :0. 2g/L ;MgS04 7H20 :0. 8g/L ;FeS04 7H20 0. 015g/L，并將部分液體培養(yǎng)基加入添加20g瓊脂(按1000ml水計(jì)算)后轉(zhuǎn)化成選擇性固 體培養(yǎng)基。 將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培 養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為40°C ，培養(yǎng)時(shí)間2天。 將惡臭假單胞菌株接種到常規(guī)的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后把 細(xì)胞懸浮在P朋.0的lOOmmol/L CaCl2中，在冰浴條件下，放置過(guò)夜，讓其轉(zhuǎn)化成感受態(tài)細(xì) 胞。將步驟B中培養(yǎng)的菌株濃縮后(細(xì)菌濃度為lX 107-3X 109cfU/mL)與感受態(tài)細(xì)胞(細(xì)菌濃度為lX 107-3X 109cfu/mL) —起重懸于低濃度梯度(濃度分別為0g/L， 0. 5g/L， 1. 0g/ L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，在溫度為15t:的條件下孵育36小時(shí)；再采用其它不同濃度梯度 (濃度分別為1. 5g/L， 2. Og/L， 2. 5g/L， 3. Og/L， 3. 5g/L)的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基進(jìn)行馴化培 養(yǎng)，馴化培養(yǎng)溫度為40°C ，馴化培養(yǎng)時(shí)間7天，反復(fù)馴化培養(yǎng)8次，馴化培養(yǎng)后涂布于選擇性 固體培養(yǎng)基，在溫度為35t:的條件下孵育12小時(shí)，挑選單菌落采用常規(guī)的方法進(jìn)行鑒定， 分別對(duì)其生長(zhǎng)性能，對(duì)pH值的適應(yīng)性能，對(duì)廢水中的有機(jī)物耐受性能和對(duì)廢水中有機(jī)物的 降解性能進(jìn)行鑒定。 將上述經(jīng)過(guò)鑒定后符合標(biāo)準(zhǔn)的菌株采用劃線平板分離法進(jìn)行純化后，即獲得對(duì)工 業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株。 本發(fā)明中所描述的具體實(shí)施例僅是對(duì)本發(fā)明精神作舉例說(shuō)明。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)
域的技術(shù)人員可以對(duì)所描述的具體實(shí)施例做各種各樣的修改或補(bǔ)充或采用類(lèi)似的方式替
代，但并不會(huì)偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書(shū)所定義的范圍。 盡管對(duì)本發(fā)明已作出了詳細(xì)的說(shuō)明并引證了一些具體實(shí)施例，但是對(duì)本領(lǐng)域熟練
技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，只要不離開(kāi)本發(fā)明的精神和范圍可作各種變化或修正是顯然的。
權(quán)利要求
一種對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟A、針對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)復(fù)合化合物，分別配制含不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，所述的液體培養(yǎng)基中還添加微生物菌株生長(zhǎng)所需要的其它化學(xué)基質(zhì)成分，將部分液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)化成選擇性固體培養(yǎng)基；B、將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為20-40℃，培養(yǎng)時(shí)間為2-4天；C、將假單胞菌株接種到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集，富集后將其制成感受態(tài)細(xì)胞，將步驟B中培養(yǎng)的菌株濃縮后與感受態(tài)細(xì)胞一起重懸于低濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基，在溫度為10-40℃的條件下孵育10-45小時(shí)；再采用不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基進(jìn)行馴化培養(yǎng)，馴化培養(yǎng)溫度為15-45℃，馴化培養(yǎng)時(shí)間6-25天，反復(fù)馴化培養(yǎng)2-12次，馴化培養(yǎng)后涂布于選擇性固體培養(yǎng)基，在溫度為10-40℃的條件下孵育10-45小時(shí)，然后進(jìn)行鑒定；D、將步驟C中獲得菌株進(jìn)行純化后，即獲得對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法，其特征在于步驟A中所述的液體培養(yǎng)基中其它化學(xué)基質(zhì)組分為硝酸鉀0. 5-1. 5g/L ;氯化鈉:0. Hg/L ;K2HP04 3H20 :0. 2g-0. 8g/L ;MgS04 7H20 :0. 2g_0. 8g/L ; FeS04 7H20 0. 005-0. 015g/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培 養(yǎng)方法，其特征在于步驟C中感受態(tài)細(xì)胞細(xì)菌濃度為lXl(f-3X10、fu/mL;菌株濃縮后細(xì) 菌濃度為1 X 107-3 X 109cfu/mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌 株的培養(yǎng)方法，其特征在于步驟C中在低濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基中孵育溫度為 15-35"C，孵育時(shí)間為12-36小時(shí)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的 培養(yǎng)方法，其特征在于步驟C中馴化培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為20-4(TC，培養(yǎng)時(shí)間7-21天，反復(fù) 馴化培養(yǎng)3-10次。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。它解決了現(xiàn)有的用于降解工業(yè)廢水的菌株對(duì)復(fù)合污染物不具降解能力的問(wèn)題。本發(fā)明對(duì)工業(yè)廢水中復(fù)合污染物具有降解能力的微生物菌株的培養(yǎng)方法，包括以下步驟配制含不同濃度梯度的工業(yè)廢水液體培養(yǎng)基；將工業(yè)廢水中的活性污泥加入到牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)；馴化培養(yǎng)；對(duì)菌株進(jìn)行純化。本發(fā)明的培養(yǎng)方法工藝流程簡(jiǎn)單，使用原料的成本較低，培養(yǎng)的菌株對(duì)復(fù)合污染物具有較強(qiáng)的降解能力，對(duì)工業(yè)廢水中的苯胺、苯酚和硝基苯類(lèi)化合物降解效率較高。
文檔編號(hào)C12N1/00GK101701190SQ200910223758
公開(kāi)日2010年5月5日 申請(qǐng)日期2009年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月19日
發(fā)明者李鈞敏 申請(qǐng)人:李鈞敏