專利名稱：轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因檢測用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)，具體涉及一種轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因檢測用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒。
(二)技術(shù)背景轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的PCR檢測必須以一種準(zhǔn)確、可靠、穩(wěn)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為陽性對照，以 防止假陰性的出現(xiàn)。目前國際上所構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)分子都是將1個(gè)目的基因克隆到1個(gè)質(zhì)粒中， 或者將1個(gè)品種或品系的內(nèi)參基因和目的基因同時(shí)克隆到1個(gè)質(zhì)粒中，在做不同物種轉(zhuǎn)基 因成分檢測時(shí)，需要多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)分子，比較繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型目的在于提供一種可以用于不同品種轉(zhuǎn)基因糧食作物定性檢測 CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因的轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因 檢測通用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒。本實(shí)用新型的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的它包括一個(gè)帶蓋的封閉盒，封閉盒內(nèi)裝有載樣 板和一個(gè) Ep 管，Ep 管中裝有 pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-CrylA(B) -BAR-RBCL 質(zhì)粒。本實(shí)用新型還有這樣一些技術(shù)特征1、所述的載樣板上設(shè)置有載樣孔，Ep管穿過載樣孔設(shè)置。本實(shí)用新型是利用重組技術(shù)將轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻的主要外源基因CrylA(B) 基因、BAR基因、CP4-EPSPS基因、PAT基因和共同的內(nèi)參RBCL基因同時(shí)都克隆到一個(gè)質(zhì)粒 中，在做大豆、玉米和水稻轉(zhuǎn)基因成分定性檢測時(shí)，在陽性對照PCR反應(yīng)中加入該標(biāo)準(zhǔn)分子 質(zhì)粒，內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因RBCL基因和外源基因CP4-EPSPS基因、Cry IA (B)基因、BAR基因和PAT基 因均得到了擴(kuò)增，且擴(kuò)增片段大小與預(yù)期片段大小一致，而陰性對照中僅擴(kuò)增出內(nèi)參基因 片段，空白對照中沒有任何擴(kuò)增片段，表明PCR反應(yīng)體系正常工作，可以對樣品檢測結(jié)果進(jìn) 行判定是否含有CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因。本實(shí)用新型中的標(biāo)準(zhǔn)分子與其他檢測大豆、玉米和水稻轉(zhuǎn)基因的標(biāo)準(zhǔn)分子不同， 其它產(chǎn)品需要至少4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)分子即需4個(gè)EP管，而本實(shí)用新型將轉(zhuǎn)基因市場上常見的轉(zhuǎn)基 因糧食作物大豆、玉米和水稻的主要外源基因CrylA(B)基因、BAR基因、CP4-EPSPS基因、 PAT基因和共同的內(nèi)參RBCL基因同時(shí)都克隆到一個(gè)質(zhì)粒中，可以用于不同品種轉(zhuǎn)基因糧食 作物定性檢測CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因的通用陽性標(biāo)準(zhǔn)分子。 本實(shí)用新型只需用1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)分子即只有1個(gè)EP管便滿足檢測需要。因此，本實(shí)用新型更輕 巧、簡便快捷。不僅可以解決實(shí)驗(yàn)室普遍缺乏陽性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的難題，還可以提高檢測效率、 縮短檢測周期。

圖1為本實(shí)用新型盒體外形圖；[0010]圖2為本實(shí)用新型載樣板結(jié)構(gòu)圖；圖3為圖2的橫向視圖；圖4為本實(shí)用新型Ep管外形圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本實(shí)用新型作進(jìn)一步的說明結(jié)合圖1-圖4，本實(shí)施例包括一個(gè)帶蓋的密封盒1，盒內(nèi)裝有載樣板2和一個(gè)EP 管 3，Ep 管 3 中裝有 pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-CrylA (B) -BAR-RBCL 質(zhì)粒，載樣板上 2 上有載 樣孔4，Ep管3穿過載樣孔4設(shè)置。
權(quán)利要求一種轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因檢測用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒，它包括一個(gè)帶蓋的封閉盒，其特征在于所述的封閉盒內(nèi)裝有載樣板和一個(gè)Ep管。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因檢測用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒， 其特征在于所述的載樣板(2)上設(shè)置有載樣孔(4)，Ep管(3)穿過載樣孔(4)設(shè)置。
專利摘要本實(shí)用新型提供了一種轉(zhuǎn)基因大豆、玉米和水稻外源基因檢測用標(biāo)準(zhǔn)分子試劑盒，包括一個(gè)帶蓋的封閉盒1，盒內(nèi)裝有載樣板2和一個(gè)Ep管3，Ep管中裝有pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-Cry1A(B)-BAR-RBCL質(zhì)粒。本實(shí)用新型可以用于不同品種轉(zhuǎn)基因糧食作物定性檢測CP4-EPSPS基因、Cry1A(B)基因、BAR基因和PAT基因的通用陽性標(biāo)準(zhǔn)分子。本實(shí)用新型輕巧、簡便快捷。不僅可以解決實(shí)驗(yàn)室普遍缺乏陽性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的難題，還可以提高檢測效率、縮短檢測周期。
文檔編號C12Q1/68GK201587947SQ2009202441
公開日2010年9月22日 申請日期2009年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月18日
發(fā)明者仇有文, 劉營, 敖金霞, 曲波, 李慶章, 袁肖寒, 高學(xué)軍 申請人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)