專利名稱：針對(duì)漸進(jìn)性糖化終極產(chǎn)物受體(rage)的抗體及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)涉及抗體，特別是單克隆抗體，且特別是其CDR嫁接的人源化形式，其可 以用于治療和診斷阿爾茨海默氏病(AD)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞變性、學(xué)習(xí)與記憶力缺損、淀 粉狀蛋白β的異常轉(zhuǎn)運(yùn)以及與漸進(jìn)性糖化終極產(chǎn)物受體(RAGE)相關(guān)的其他神經(jīng)炎性 (neuroinflammatrory)狀況。具體地，本發(fā)明涉及與RAGE結(jié)合的抗體及其片段。背景信息
阿爾茨海默氏病(AD)是老年人中最頻繁的癡呆原因，在超過65歲的那些群體中具有 約10%的發(fā)生率。隨著年齡增加，該疾病的可能性也上升。世界上，存在受該疾病侵襲的約 1500萬人，并且壽命預(yù)期中的進(jìn)一步增加預(yù)期在接下來的數(shù)十年間受該疾病侵襲的人的數(shù) 目增至約3倍?？紤]到前述，存在關(guān)于用于AD治療的巨大和立即的需要。用此種治療，受侵 襲的患者可能能夠維持功能和活躍生活方式多年，超過如果沒有此種治療不可能的那種。 因此，對(duì)于患者及其護(hù)理者，不僅存在關(guān)于此種治療的財(cái)務(wù)問題，還存在“生活質(zhì)量”問題。從分子觀點(diǎn)來看，AD的特征在于異常聚集的蛋白質(zhì)的沉積。在細(xì)胞外淀粉狀蛋白 斑的情況下，這些沉積物主要由淀粉狀蛋白肽絲(Αβ )組成，并且在細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖 維纏結(jié)(NFTs)的情況下，主要由tau蛋白質(zhì)組成。AD的特征還在于增加的RAGE神經(jīng)元表 達(dá)。RAGE是免疫球蛋白家族的多配體(multi-ligand)受體，其起關(guān)于Αβ的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞 表面受體的作用。在小鼠中的J β 40輸注已通過幾個(gè)組顯示導(dǎo)致腦血管的血管收縮和腦血流量 (CBF)的降低。患有AD的患者還具有減少的腦血流量。在其中轉(zhuǎn)基因動(dòng)物超表達(dá)蛋白質(zhì)淀 粉狀蛋白前體蛋白質(zhì)(APP)的AD小鼠模型中，所述APP導(dǎo)致引起斑形成的疾病，RAGE已被 暗示為疾病進(jìn)展中的致病因子(Deane等人Nature Medicine 9 (7)第907-913頁，2003 ； Arancio 等人 EMB0J，1-10, 2004)。RAGE已顯示與Αβ-肽結(jié)合。這種相互作用的抑制阻抑轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型中的A β 積累；因此，RAGE被認(rèn)為與AD有關(guān)。用sRAGE (可溶性RAGE)以及抗RAGE抗體的治療也已 顯示降低斑數(shù)目(Deane等人，2003)。通過抗體阻斷RAGE與淀粉狀蛋白的相互作用可以變 成用于AD患者的治療；然而，由動(dòng)物血清生成的現(xiàn)有多克隆抗體不適合于人的長(zhǎng)期治療。RAGE與Αβ的相互作用公開于WO 2006/077101 Al中，其描述了缺乏ν_結(jié)構(gòu)域 的RAGE競(jìng)爭(zhēng)A β與RAGE的結(jié)合，以及代表RAGE的C末端結(jié)構(gòu)域部分，主要是Cl-結(jié)構(gòu)域 的肽的競(jìng)爭(zhēng)。抗RAGE抗體與RAGE的ν-結(jié)構(gòu)域的相互作用公開于W02007109749 (Α2)中； 其還描述了不同配體(SlOOb、HMGBl (高速泳動(dòng)族1蛋白質(zhì))、淀粉狀蛋白)的結(jié)合將經(jīng) 由與這個(gè)結(jié)構(gòu)域結(jié)合與RAGE結(jié)合。WO 2008/137552 A2公開了與RAGE的不同結(jié)構(gòu)域結(jié)合的特定單克隆抗RAGE抗體。 所述抗體的大多數(shù)抑制人RAGE與HMGBl和CpG DNA的復(fù)合物的相互作用。WO 2006/077101涉及命名為RAGE的AGER-RME和AGER-CDP的肽的鑒定、功能性 和用途。所述肽尤其可應(yīng)用于鑒定且制備RAGE結(jié)合配體，如抗RAGE抗體。本發(fā)明描述了 與RAGE的C-結(jié)構(gòu)域結(jié)合的新單克隆抗體，以及與A β和對(duì)于RAGE中的Cl和C2-結(jié)構(gòu)域的單克隆抗體結(jié)合的特定相互作用和競(jìng)爭(zhēng)。發(fā)明概述
本發(fā)明提供了與RAGE特異性結(jié)合的結(jié)合分子，特別是抗體；本發(fā)明的代表性抗RAGE抗 體可以包括SEQ ID NOs :1、5、9、13、17和21中顯示的至少一個(gè)抗體可變區(qū)氨基酸序列，或 其個(gè)別CDRs或相關(guān)CDR序列，如下文更詳細(xì)地說明的。具體而言，本發(fā)明提供了與RAGE結(jié)合的單克隆抗體，更具體而言與RAGE的C-結(jié) 構(gòu)域結(jié)合的單克隆抗體。在本發(fā)明中包括的是抗RAGE抗體，其與RAGE特異性結(jié)合，并且包括具有與SEQ ID NOs. :5、13和21中的任何一種至少90%等同的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，或是所述序列中 包括的抗體的RAGE結(jié)合片段。還包括的是抗RAGE抗體，其與RAGE特異性結(jié)合，并且包括具有與SEQ ID NOs. 1、9和17中的任何一種至少90%等同的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，或是所述序列中包括的 抗體的RAGE結(jié)合片段。本發(fā)明的具體實(shí)施方案由幾種單克隆抗體代表，所述單克隆抗體能夠與RAGE的 C-結(jié)構(gòu)域結(jié)合，并且阻斷Αβ-球聚體(globulomers)的結(jié)合。更具體而言，本發(fā)明描述了 單克隆抗體11E6，其與RAGE的C-2結(jié)構(gòu)域結(jié)合，不與具有用于生成多克隆抗體的氨基酸序 列的肽結(jié)合，并且能夠體內(nèi)中和A β 1-40對(duì)小鼠中的腦脈管系統(tǒng)的作用。本發(fā)明的抗RAGE抗體包括與RAGE的C-結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合的抗體。本發(fā)明的抗RAGE抗體包括如上所述的抗RAGE抗體或RAGE結(jié)合片段，其選自嵌合 抗體、CDR嫁接的或人源化的抗體、單鏈抗體、融合蛋白和人抗體。在各種實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是重組抗體或單克隆抗體。本申請(qǐng)的特定中和 抗體在本文中被稱為mAb7F9、mAbllE6和mAb4E5及其功能抗體片段，并且具有與mAb7F9、 mAbllE6和mAb4E5等同的性質(zhì)的其他抗體和功能抗體片段，預(yù)期作為本發(fā)明的部分，所述 性質(zhì)例如以低解離動(dòng)力學(xué)和高中和能力與RAGE的高親和力結(jié)合。然而，本申請(qǐng)的人抗體 可以包括不由人種系免疫球蛋白免疫原性RAGE多肽或其片段編碼的氨基酸殘基，其可以 通過本領(lǐng)域已知的任何方法進(jìn)行測(cè)定。例如，結(jié)合親和力可以通過競(jìng)爭(zhēng)ELISAs、c RIAs, BIAcore或KinExA技術(shù)進(jìn)行測(cè)量。解離速率也可以通過BIAcore或KinExA技術(shù)進(jìn)行測(cè)量。 結(jié)合親和力和解離速率通過表面等離振子共振使用例如BIAcore進(jìn)行測(cè)量。本申請(qǐng)的單克隆抗體之一，mAb7F9抗體，與包括重鏈可變區(qū)(VH區(qū))的序列具有至 少90%氨基酸序列同一性，所述重鏈可變區(qū)包括SEQ ID NO :1 ；以及分別為SEQ ID N0:1的 殘基31-35、50-68和101-108的SEQ ID NOs. 2、3和4的序列。本發(fā)明的mAb7F9抗體與 包括輕鏈可變區(qū)(VL區(qū))的序列具有至少90%氨基酸序列同一性，所述輕鏈可變區(qū)包括SEQ ID NO :5，以及分別為 SEQ ID NO :5 的殘基 24_34、50-56、89_97 的 SEQ ID NOs. 6、7 禾口 8 的 序列。本申請(qǐng)的另一種單克隆抗體，mAbllE6抗體，與包括重鏈可變區(qū)(VH區(qū))的序列具 有至少90%氨基酸序列同一性，所述重鏈可變區(qū)包括SEQ ID NO :9 ；以及分別為SEQ ID NO: 9 的殘基 31-35、50-66 和 99-109 的 SEQ ID NOs. 10、11 和 12 的序列。本發(fā)明的 mAbllE6 抗體與包括輕鏈可變區(qū)(VL區(qū))的序列具有至少90%氨基酸序列同一性，所述輕鏈可變區(qū) 包括 SEQ ID NO :13，以及分別為 SEQ ID NO 13 的殘基 24_34、50-56、89_97 的 SEQ ID NOs.14、15和16的序列。mAbllE6與RAGE的C-2結(jié)構(gòu)域結(jié)合，不與具有用于生成多克隆抗體的 氨基酸序列的肽結(jié)合，并且能夠體內(nèi)中和A β 1-40對(duì)小鼠中的腦脈管系統(tǒng)的作用。本申請(qǐng)的另一種單克隆抗體，mAb4E5抗體，與包括重鏈可變區(qū)(VH區(qū))的序列具有 至少90%氨基酸序列同一性，所述重鏈可變區(qū)包括SEQ ID NO 17 ；以及分別為SEQ ID NO: 17 的殘基 31-35、50-66 和 99-109 的 SEQ ID NOs. 18、19 和 20 的序列。本發(fā)明的 mAb4E5 抗體與包括輕鏈可變區(qū)(VL區(qū))的序列具有至少90%氨基酸序列同一性，所述輕鏈可變區(qū) 包括 SEQ ID NO :21，以及分別為 SEQ ID NO :21 的殘基 24_34、50-56、89_97 的 SEQ ID NOs. 22、23和24的序列。還預(yù)期與本申請(qǐng)的RAGE相互作用的分離的單克隆抗體可以是糖基化的結(jié)合蛋 白，其中所述抗體或其抗原結(jié)合部分包括一個(gè)或多個(gè)碳水化合物殘基。新生體內(nèi)蛋白質(zhì)生 產(chǎn)可以經(jīng)歷進(jìn)一步加工，稱為翻譯后修飾。具體地，糖(糖基)殘基可以酶促添加，稱為糖基 化的過程。所得到的具有共價(jià)連接的寡糖側(cè)鏈的蛋白質(zhì)稱為糖基化的蛋白或糖蛋白。蛋 白質(zhì)糖基化依賴于目的蛋白質(zhì)的氨基酸序列，以及蛋白質(zhì)在其中表達(dá)的宿主細(xì)胞。不同生 物可以產(chǎn)生不同糖基化酶(例如，糖基轉(zhuǎn)移酶和糖苷酶)，并且具有可用的不同底物(核苷酸 糖)。由于此種因素，蛋白質(zhì)糖基化模式和糖基殘基的組成可能依賴于具體蛋白質(zhì)在其中表 達(dá)的宿主系統(tǒng)而不同。在本發(fā)明中有用的糖基殘基可以包括但不限于，葡萄糖、半乳糖、甘 露糖、巖藻糖、η-乙酰葡糖胺和唾液酸。本申請(qǐng)的抗體包括重鏈恒定區(qū)，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD 恒定區(qū)。此外，抗體可以包括輕鏈恒定區(qū)，κ輕鏈恒定區(qū)或λ輕鏈恒定區(qū)。具體地，抗體包 括κ輕鏈恒定區(qū)。可替代地，抗體部分可以是例如Fab片段或單鏈Fv片段。Fc部分中改變 抗體效應(yīng)子功能的氨基酸殘基置換是本領(lǐng)域已知的(Winter等人美國(guó)專利號(hào)5，648，260 ； 5，624，821)?？贵w的Fc部分介導(dǎo)幾種重要的效應(yīng)子功能，例如細(xì)胞因子誘導(dǎo)、ADCC、吞噬作 用、依賴補(bǔ)體的細(xì)胞毒性(CDC)以及抗體和抗原-抗體復(fù)合物的半衰期/清除率。在一些 情況下，這些效應(yīng)子功能是治療抗體所需的，但在其他情況下，可能是不需要的或甚至有害 的，這依賴于治療目的。特定人IgG同種型，特別是IgGl和IgG3，經(jīng)由分別與Fc γ Rs和 補(bǔ)體Clq結(jié)合而介導(dǎo)ADCC和⑶C。新生Fc受體(Fcfoi)是決定抗體的循環(huán)半衰期的關(guān)鍵組 分。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，置換抗體恒定區(qū)中的至少一個(gè)氨基酸殘基，例如抗體的Fc區(qū)， 從而使得改變抗體的效應(yīng)子功能。附圖簡(jiǎn)述


圖1A -1C顯示重組和雜交瘤衍生的抗人RAGE單克隆抗體7F9、11E6和4E5與重組人 RAGE 的 ELISA 結(jié)合。圖2顯示通過斑點(diǎn)印跡結(jié)合表征單克隆抗體7F9、11E6和4E5。圖3A - 3C顯示HTRF測(cè)定結(jié)果，其顯示sRAGE - A β -球聚體-單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)。圖4 顯示 HTRF sRAGE - A β -球聚體結(jié)合。圖5顯示A β -球聚體與sRAGE-Fc和RAGE ν-結(jié)構(gòu)域的結(jié)合。圖6Α - 6C顯示本發(fā)明的單克隆抗體與不同RAGE片段的ELISA結(jié)合實(shí)驗(yàn)。圖7Α - 7C顯示本發(fā)明的單克隆抗體與不同RAGE片段的ELISA結(jié)合實(shí)驗(yàn)。圖8a - 8f顯示通過不同劑量的A β 1-40誘導(dǎo)的腦血流量改變。圖9a - 9c顯示11E6在Αβ 1-40誘導(dǎo)的腦血流量中的改變中的作用。
ΜΛ0顯示在用不同劑量的11E6或?qū)φ湛贵w處理的老年Tg2576小鼠中觀察到的
腦血流量改變。圖11顯示抗體11E6保護(hù)海馬神經(jīng)元免于A β誘導(dǎo)的發(fā)動(dòng)蛋白切割。上圖顯示 代表來自單次實(shí)驗(yàn)的重復(fù)實(shí)驗(yàn)條件的樣品，并且在上方指出處理濃度(以μΜ表示)。不添加 Αβ的細(xì)胞顯示大部分完整的( 100 kDa)發(fā)動(dòng)蛋白I信號(hào)(第一個(gè)條)，其在用5μΜ Αβ處 理的細(xì)胞中減少且逆轉(zhuǎn)至 90kDa切割產(chǎn)物(第二個(gè)條)?？贵w11E6處理(第三個(gè)條)阻止 切割，而Igl對(duì)照抗體(第四個(gè)條)無顯著保護(hù)作用。下圖3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的發(fā)動(dòng)蛋白信號(hào)的 定量(在針對(duì)ΟμΜ Αβ處理標(biāo)準(zhǔn)化后，表示為％發(fā)動(dòng)蛋白+/- SEM)揭示11Ε6的統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著 的保護(hù)作用(單因素方差分析(One-way ANOVA), Kruskal Wallis檢驗(yàn)隨后為Durms檢驗(yàn)； * 指出 p<0，05)
_顯示在大鼠海馬切片培養(yǎng)中11E6 (A)或?qū)φ湛贵w(B)對(duì)球聚體誘導(dǎo)的突觸傳遞 強(qiáng)阻抑的影響。0.1 μΜ 11Ε6完全逆轉(zhuǎn)球聚體誘導(dǎo)的缺陷(參見(A))。圖13顯示用抗體11E6的12周處理對(duì)Tg2576小鼠中的淀粉狀蛋白斑沉積的作用。 顯示在11E6或IgGl對(duì)照抗體處理(n=19/組)后，如通過用抗A β抗體6G1標(biāo)記檢測(cè)的，由斑 覆蓋的面積(Α，Β)和斑數(shù)目(C，D)。用11E6處理使新皮質(zhì)中由沉積物覆蓋的面積和沉積物 數(shù)目分別減少5%(C)0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析揭示強(qiáng)趨勢(shì)(括號(hào)中的星號(hào)，ρ<0. 06; Mann-Whitney U檢驗(yàn))。減少在額皮質(zhì)中是統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的(星號(hào)，p<0. 05 ;Mann_Whitney U檢驗(yàn))，其中在11E6處理后，沉積物面積減少23. 5% (B)，并且其數(shù)目減少沈.8% (D)。
H序列表SEQIDNO 1 :mAbVH7F9的氨基酸序列SEQIDNO 2 :mAbVH7F9 CDR-Hl的氨基酸序列SEQIDNO 3 :mAbVH7F9 CDR-H2的氨基酸序列SEQIDNO 4 :mAbVH7F9 CDR-H3的氨基酸序列SEQIDNO 5 :mAbVL7F9的氨基酸序列SEQIDNO 6 :mAbVL7F9 CDR-Ll的氨基酸序列SEQIDNO 7 :mAbVL7F9 CDR-L2的氨基酸序列SEQIDNO 8 :mAbVL7F9 CDR-L3的氨基酸序列SEQIDNO 9 :mAbVH11E6的氨基酸序列SEQIDNO 10 :mAbVH11E6 CDR-Hl 的氨基酸序列SEQIDNO 11 :mAbVH11E6 CDR-H2 的氨基酸序列SEQIDNO 12 :mAbVH11E6 CDR-H3 的氨基酸序列SEQIDNO 13 :mAbVL11E6的氨基酸序列SEQIDNO 14 :mAbVL11E6 CDR-Ll 的氨基酸序列SEQIDNO 15 :mAbVL11E6 CDR-L2 的氨基酸序列SEQIDNO 16 :mAbVL11E6 CDR-L3 的氨基酸序列SEQIDNO 17 :mAbVH4E5的氨基酸序列SEQIDNO 18 :mAbVH4E5 CDR-Hl的氨基酉堯序列SEQIDNO 19 :mAbVH4E5 CDR-H2的氨基酉堯序列SEQIDNO 20 :mAbVH4E5 CDR-H3的氨基酉堯序列SEQID NO 21 :mAb VL 4E5 的氨基酸序列
SEQID NO 22 :mAb VL 4E5 CDR-Ll 的氨基酸序列
SEQID NO 23 :mAb VL 4E5 CDR-L2 的氨基酸序列
SEQID NO 24 :mAb VL 4E5 CDR-L3 的氨基酸序列
SEQID NO 25 人IgY 1重鏈恒定區(qū)的氨基酸序列
SEQID NO 26 人IgK輕鏈恒定區(qū)的氨基酸序列
SEQID NO 27 編碼OmpA-[RAGE (23-340) ]_6His的構(gòu)建體#1 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核 苷酸序列
SEQIDNO:28編碼6His--(Thr)-[RAGE (24-129)]的構(gòu)建體#2 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸序列SEQIDNO:29編碼6His--(Thr)-[RAGE (24-234)]的構(gòu)建體#3 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸序列SEQIDNO:30編碼6His--(Thr)-[RAGE (24-336)]的構(gòu)建體#4 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸序列SEQIDNO:31編碼6His--(Thr) -[RAGE (130-234)]的構(gòu)建體#5 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸!序列SEQIDNO:32編碼6His--(Thr) -[RAGE (130-336)]的構(gòu)建體#6 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸!序列SEQIDNO:33編碼6His--(Thr) -[RAGE (235-336)]的構(gòu)建體#7 (粗體)的全長(zhǎng)質(zhì)粒核苷酸!序列SEQIDNO:34編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#1SEQIDNO:35編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#2SEQIDNO:36編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#3SEQIDNO:37編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)MSEQIDNO:38編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#5SEQIDNO:39編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#6SEQIDNO:40編碼的氨基酸序列RAGE蛋白質(zhì)#7SEQIDNO:41= IgY-I恒定區(qū)突變氨基酸序列SEQIDNO:42=Ig Y-2恒定區(qū)氨基酸序列SEQIDNO:43構(gòu)架氨基酸？序列 VH7-4. 1/JH6 FRlSEQIDNO:44構(gòu)架氨基酸？序列 VH7-4. 1/JH6 FR2 和 VH1-2/JH6 FR2SEQIDNO:45構(gòu)架氨基酸？序列 VH7-4. 1/JH6 FR3SEQIDNO:46構(gòu)架氨基酸？序列 VH7-4. 1/JH6 FR4 和 VH1-2/JH6 FR4SEQIDNO:47構(gòu)架氨基酸？序列 VH1-2/JH6 FRlSEQIDNO:48構(gòu)架氨基酸？序列 VH1-2/JH6 FR3SEQIDNO:49構(gòu)架氨基酸？序列 1-12/L5/JK2 FRlSEQIDNO:50構(gòu)架氨基酸？序列 1-12/L5/JK2 FR2SEQIDNO:51構(gòu)架氨基酸？序列 1-12/L5/JK2 FR3SEQIDNO:52構(gòu)架氨基酸？序歹丨J 1-12/L5/JK2 FR4 和 3--15/L2/JK2 FR4SEQIDNO53構(gòu)架氨基酸序列3-15/L2/JK2 FRlSEQIDNO54構(gòu)架氨基酸序列3-15/L2/JK2 FR2SEQIDNO55構(gòu)架氨基酸序列3-15/L2/JK2 FR3SEQIDNO56⑶R嫁接的氨基酸序列VH 11E6. I-GLSEQIDNO57CDR嫁接的氨基酸序列VH 11E6.2-GLSEQIDNO58⑶R嫁接的氨基酸序列VL 11E6. I-GLSEQIDNO59CDR嫁接的氨基酸序列VL 11E6.2-GLSEQIDNO60hRAGE的氨基酸序列SEQIDNO61husRAGE片段的氨基酸序列SEQIDNO62人源化抗體序列VH hllE6. 1SEQIDNO63人源化抗體序列VL hllE6. 1SEQIDNO64人源化抗體序列VL hllE6. 2SEQIDNO65人源化抗體序列VL hllE6. 3SEQIDNO66人源化抗體序列VL hllE6. 4SEQIDNO67人源化抗體序列VH hllE6. 5SEQIDNO68人源化抗體序列VH hllE6. 9SEQIDNO69人源化抗體序列VH hllE6. 16SEQIDNO70RAGE衍生的肽NtermR31的氨基酸序列SEQIDNO71RAGE衍生的肽1的氨基酸序列SEQIDNO72RAGE衍生的肽2的氨基酸序列SEQIDNO73RAGE衍生的肽3的氨基酸序列SEQIDNO74RAGE衍生的肽4的氨基酸序列SEQIDNO75RAGE衍生的肽5的氨基酸序列SEQIDNO76RAGE衍生的肽6的氨基酸序列SEQIDNO77RAGE衍生的肽7的氨基酸序列SEQIDNO78RAGE衍生的肽8的氨基酸序列SEQIDNO79RAGE衍生的肽9的氨基酸序列SEQIDNO80RAGE衍生的肽10的氨基酸序列SEQIDNO81寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO82寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO83寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO84寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO85寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO86寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO87寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO88寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO89寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO90寡核苷酸引物的核苷酸序列SEQIDNO91寡核苷酸引物的核苷酸序列
10SEQ ID N0:92 寡核苷酸引物的核苷酸序列 SEQ ID N0:93 寡核苷酸引物的核苷酸序列 SEQ ID N0:94 寡核苷酸引物的核苷酸序列 詳述
1. 一般定義
除非本文另有定義，與本發(fā)明結(jié)合使用的科學(xué)和技術(shù)術(shù)語應(yīng)具有由本領(lǐng)域普通技術(shù)人 員通常理解的含義。術(shù)語的含義和范圍應(yīng)是清楚的，然而，在任何潛在含糊的情況下，本文 提供的定義優(yōu)于任何詞典或外部定義。另外，除非上下文另有要求，單數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)， 并且復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。在本申請(qǐng)中，“或”的使用意指“和/或”，除非另有說明。此外， 術(shù)語“包括”以及其他形式的使用不是限制性的。此外，術(shù)語例如“元件”或“組分”包含包 括一個(gè)單位的元件和組分，以及包括超過一個(gè)亞單位的元件和組分，除非另有具體說明。一般地，與本文描述的細(xì)胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)以 及蛋白質(zhì)和核酸化學(xué)和雜交結(jié)合使用的名稱及其技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知且通常使用的那 些。本發(fā)明的方法和技術(shù)一般根據(jù)本領(lǐng)域眾所周知且如各種一般和更具體的參考文獻(xiàn)中所 述的常規(guī)方法執(zhí)行，所述參考文獻(xiàn)在本說明書自始至終引用且討論，除非另有說明。酶促反 應(yīng)和純化技術(shù)根據(jù)制造商的說明書進(jìn)行，如本領(lǐng)域通常實(shí)現(xiàn)的或如本文描述的。與本文描 述的分析化學(xué)、合成有機(jī)化學(xué)以及醫(yī)學(xué)和藥物化學(xué)結(jié)合使用的名稱及其實(shí)驗(yàn)室程序和技術(shù) 是本領(lǐng)域眾所周知且通常使用的那些。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)用于化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、配制 和遞送、以及患者治療。為了本發(fā)明可以更容易理解，下文定義了所選擇的術(shù)語。如本文使用的，術(shù)語“多肽”指氨基酸的任何聚合鏈。術(shù)語“肽”和“蛋白質(zhì)”可與 術(shù)語多肽互換使用，并且也指氨基酸的聚合鏈。術(shù)語“多肽”包括天然或人工蛋白質(zhì)，蛋白 質(zhì)片段和蛋白質(zhì)序列的多肽類似物。多肽可以是單體或聚合的。術(shù)語“分離的蛋白質(zhì)”或“分離的多肽”是由于其起源或衍生來源不與在其天然狀 態(tài)下伴隨其的天然結(jié)合的組分結(jié)合的蛋白質(zhì)或多肽；基本上不含來自相同物種的其他蛋白 質(zhì)；由來自不同物種的細(xì)胞表達(dá)；或在自然界中不存在。因此，化學(xué)合成或在與它天然來源 的細(xì)胞不同的細(xì)胞系統(tǒng)中合成的多肽將與其天然結(jié)合的組分“分離”。蛋白質(zhì)也可以通過分 離致使基本上不含天然結(jié)合的組分，其中使用本領(lǐng)域眾所周知的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。如本文使用的，術(shù)語“回收”指通過分離致使化學(xué)種類例如多肽基本上不含天然結(jié) 合的組分的過程，例如使用本領(lǐng)域眾所周知的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。術(shù)語“漸進(jìn)性糖化終極產(chǎn)物受體(RAGE)”指定免疫球蛋白家族中的多配體受體，其 尤其結(jié)合可溶性Αβ肽、SlOOb和HMGBl (也稱為兩性蛋白(amphoterin))。RAGE介導(dǎo)響應(yīng) 與這些配體結(jié)合的病理生理學(xué)相關(guān)的細(xì)胞改變。超表達(dá)RAGE和人APP的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物顯示 空間學(xué)習(xí)與記憶中的早期異常，從而指出RAGE是在阿爾茨海默型病理學(xué)中關(guān)于A β誘導(dǎo)的 神經(jīng)元擾動(dòng)的輔因子，并且暗示RAGE是改善細(xì)胞功能障礙的潛在治療靶。RAGE的結(jié)構(gòu)尚未得到解決。與其他蛋白質(zhì)的同源性導(dǎo)致其中RAGE具有幾個(gè)結(jié)構(gòu) 域的模型。這些結(jié)構(gòu)域與免疫球蛋白類似命名(i)在N末端上的V樣結(jié)構(gòu)域在免疫球 蛋白中的這個(gè)等價(jià)結(jié)構(gòu)域結(jié)合抗原，并且代表在這些蛋白質(zhì)內(nèi)的唯一結(jié)合區(qū)。在RAGE中， 這個(gè)結(jié)構(gòu)域與一些配體如SlOO結(jié)合(Ostendorp等人EMB0J. 26, 3875, 2007 ；Leclerc等人JBC觀2，31317，2007)。與RAGE中的ν樣結(jié)構(gòu)域結(jié)合的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)不同配體SlOOb、 HMGBl和淀粉狀蛋白β的結(jié)合(W02007109749 (Α2))，從而暗示這些配體也將經(jīng)由這個(gè)相 同結(jié)構(gòu)域與RAGE結(jié)合。(ii)第一個(gè)C2樣結(jié)構(gòu)域在RAGE內(nèi)的2個(gè)結(jié)構(gòu)域與免疫球蛋白 的C2結(jié)構(gòu)域具有同源性；這些結(jié)構(gòu)域之一已被稱為Cl (也由Ostendorp等人BBRC 2006 使用的名稱)。與這個(gè)結(jié)構(gòu)域結(jié)合的幾個(gè)配體已得到描述，例如S100A12 (也被稱為ENRAGE 或鈣粒蛋白C)，其以Kd = 90 nM的親和力結(jié)合(Hofmann等人Cell 97，889，1999 ;Xie等 人JBCJ82，4218，2007)。A β與S100A12競(jìng)爭(zhēng)這個(gè)結(jié)構(gòu)域，從而暗示A β也與Cl-結(jié)構(gòu)域 結(jié)合。(iii)第二個(gè)C2樣結(jié)構(gòu)域這個(gè)結(jié)構(gòu)域被稱為C2 (也由Ostendorp等人BBRC 2006 使用)。RAGE配體S100A6與C2結(jié)構(gòu)域結(jié)合，并且針對(duì)來自C2結(jié)構(gòu)域的肽生成的抗體顯示 關(guān)于這種結(jié)合與S100A6競(jìng)爭(zhēng)；該抗體導(dǎo)致SH-SY5Y中減少的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(Leclerc等人JBC 282，31317, 2007)。"RAGE結(jié)構(gòu)域”可以與現(xiàn)有技術(shù)中提供的不同定義一致進(jìn)行定義。根據(jù)Xie 等人 2007，J. Biol. Chem.，第 282 卷4218-4231，h RAGE 結(jié)構(gòu)域的下 述定義適用
-V結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO 60的氨基酸對(duì)_1四)， -Cl 結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO:60 的氨基酸 130_2；34)， -C2 結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO:60 的氨基酸 235-336)，
根據(jù)由 Hudson 等人，The FASEB Journal. 2008 ;22 1572-1580 的更近期定義，h RAGE (根據(jù)SEQ ID N0:60的404個(gè)氨基酸殘基)具有由下述組成的細(xì)胞外區(qū)域(SEQ ID N0:60 的氨基酸1-；342)
-信號(hào)肽(SEQ ID N0:60的氨基酸1-22)，隨后為3個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，包括 -Ig樣V型結(jié)構(gòu)域(SEQ ID N0:60的氨基酸23 - 116)和
-2個(gè)Ig樣C2型結(jié)構(gòu)域(SEQ ID N0:60的氨基酸1 -221 ；也指定為Cl結(jié)構(gòu) 域；和SEQ ID N0:60的氨基酸227 - 317，也指定為C2結(jié)構(gòu)域)；
-單個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域(SEQ ID N0:60的氨基酸343 - 363)， 禾口
-短胞質(zhì)尾區(qū)(SEQ ID N0:60的氨基酸364 - 404)。鑒于高度同一性，特別就結(jié)構(gòu)域V、Cl和C2的定義而言，并且除非另有說明，可以 應(yīng)用定義中的每一種，以限定本發(fā)明的結(jié)合蛋白的結(jié)合特征。如上所述，RAGE能夠經(jīng)由不同結(jié)構(gòu)域結(jié)合不同配體。來自與其他配體的競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn) 的結(jié)果看起來指出A β與Cl-結(jié)構(gòu)域結(jié)合(Hofmarm等人Cell 97，889，1999或Xie等人 JBC，282，4218，2007)。作為RAGE配體的非限制性例子，可以提及
-漸進(jìn)性糖化終極產(chǎn)物(AGEs), (Baynes J. W. , 1991,Diabetes. 1991,40:405-412 ； Ahmed K. A.，2007，J Clin Biochem Nutr. 41 (2) :97-105)；
-SlOO/鈣粒蛋白家族的成員(例如，鈣粒蛋白C (也稱為ENRAGE和S100A12)、 S100A1、S100A4、S100A11、S100A13、S100B 和 S100P)；
-淀粉狀蛋白-β_肽(Αβ)，如例如Αβ 1-40肽
-淀粉狀蛋白_β球聚體；如例如Αβ1-42、Αβ12-42、ΑΒ20-42球聚體(參見Barghorn 等人，球形淀粉狀蛋白β肽1-42寡聚體-阿爾茨海默氏病中同質(zhì)和穩(wěn)定的神經(jīng)病理學(xué)蛋白質(zhì))Journal of Neurochemistry. 95 (3) :834-847, November 2005 ；W02007/062852 ； W02008/150949 ；全部引入本文作為參考)；
- 白細(xì)胞(eukocyte)整聯(lián)蛋白(例如，Mac-I)
如本文使用的，術(shù)語“RAGE”特指人RAGE，也指定為“hRAGE”或“huRAGE”。除非另有說 明，術(shù)語“RAGE”也包括從不同于人的其他物種如例如嚙齒類動(dòng)物如小鼠或大鼠中分離或獲 得的RAGE分子；或牛RAGE分子。術(shù)語“sRAGE”指衍生自RAGE的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的可溶形式RAGE。例如，衍生自人 RAGE的sRAGE分子，也指定為husRAGE，包括人RAGE (參見SEQ ID NO :60)的氨基酸殘基1 -331 (參見 SEQ ID NO :61)。如本文使用的，“生物學(xué)活性”指如本文定義的RAGE的所有固有生物學(xué)性質(zhì)。如本文使用的，關(guān)于抗體、蛋白質(zhì)或肽與第二個(gè)化學(xué)種類的相互作用的術(shù)語“特異 性結(jié)合”或“特異地結(jié)合”意指相互作用依賴于在化學(xué)種類上的特定結(jié)構(gòu)(例如，如下文定義 的“抗原決定簇”或“表位”)的存在；例如，抗體識(shí)別且結(jié)合特定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，而不是普遍地 與蛋白質(zhì)結(jié)合。如果抗體對(duì)于表位“A”特異，那么在包含標(biāo)記的“A”和抗體的反應(yīng)中包含 表位A (或游離的、未標(biāo)記的A)的分子的存在，將減少與抗體結(jié)合的標(biāo)記的A的量。如本文使用的，術(shù)語“抗體”泛指包含4條多肽鏈一一 2條重(H)鏈和2條輕(L) 鏈的任何免疫球蛋白(Ig)分子，或其任何功能片段、突變體、變體或衍生，其保留Ig分子的 基本表位結(jié)合特征。此種突變體、變體或衍生抗體形式是本領(lǐng)域已知的。它的非限制性實(shí) 施方案在下文討論?？贵w被說成“能夠結(jié)合”分子，如果它能夠與分子特異性反應(yīng)，從而使 分子與抗體結(jié)合的話。如本文使用的，“單克隆抗體”意指抗體分子的制劑，其共享共同的重鏈和共同的 輕鏈氨基酸序列，與包含不同抗體的混合物的“多克隆”抗體制劑形成對(duì)比。單克隆抗體可 以通過幾種新技術(shù)如噬菌體、細(xì)菌、酵母或核糖體展示，以及由雜交瘤衍生的抗體例示的經(jīng) 典方法(例如，通過由雜交瘤技術(shù)制備的雜交瘤分泌的抗體，例如標(biāo)準(zhǔn)Kohler和Milstein 雜交瘤方法((1975) Nature 256:495-497)生成。在全長(zhǎng)抗體中，每條重鏈由重鏈可變區(qū)(本文縮寫為HCVR或VH)和重鏈恒定區(qū)組 成。重鏈恒定區(qū)由3個(gè)結(jié)構(gòu)域一一 CH1、CH2和CH3組成。每條輕鏈由輕鏈可變區(qū)(本文縮 寫為L(zhǎng)CVR或VL)和輕鏈恒定區(qū)組成。輕鏈恒定區(qū)由1個(gè)結(jié)構(gòu)域一一 CL組成。VH和VL區(qū) 可以進(jìn)一步再分成稱為互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)的高變區(qū)，由稱為構(gòu)架區(qū)(FR)的更保守區(qū)域點(diǎn) 綴。每個(gè)VH和VL由3個(gè)CDRs和4個(gè)FRs組成，從氨基末端到羧基末端以下述順序排列 FRl、CDRl、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。免疫球蛋白分子可以具有任何類型(例如，IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 和 IgY)、類別(例如，IgG 1、IgG2、IgG 3、IgG 4、IgAl 和 IgA2)或亞類。如本文使用的，術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分”或“抗原結(jié)合片段”(或簡(jiǎn)單地“抗體部 分”或“抗體片段”)指抗體的一種或多種片段，其保留與抗原(例如，RAGE)特異性結(jié)合的能 力。已顯示抗體的抗原結(jié)合功能可以通過全長(zhǎng)抗體的片段執(zhí)行。此種抗體實(shí)施方案也可以 是雙特異性、雙重特異性(dual specific)或多特異性形式；與2種或更多種不同抗原特異 性結(jié)合。術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分”內(nèi)包含的結(jié)合片段例子包括(i) Fab片段，由VL、VH、 CL和CHl結(jié)構(gòu)域組成的單價(jià)片段；(ii)F (ab' )2片段，包括由鉸鏈區(qū)的二硫鍵連接的2個(gè) Fab片段的二價(jià)片段；(iii)由VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成的Fd片段；(iv)由抗體單臂的VL和
13VH結(jié)構(gòu)域組成的Fv片段，(ν)包括單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域的dAb片段(引入本文作為參考的Ward 等人，(1989)#atorg341 544-546,ffinter 等人，PCT 公開 WO 90/05144 Al);和(vi)分離的 互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)。此外，盡管Fv片段的2個(gè)結(jié)構(gòu)域VL和VH由分開的基因編碼，但它們 可以使用重組方法通過合成接頭進(jìn)行連接，所述合成接頭使得它們能夠制備為單條蛋白質(zhì) 鏈，其中VL和VH區(qū)配對(duì)以形成單價(jià)分子(稱為單鏈Fv (scFv);參見例如，Bird等人(1988) SciencelM 423-426 和 Huston 等人(1988Froc. Natl. Acad. Sci.5879-5883)0
此種單鏈抗體也意欲包含在術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分”內(nèi)。還包含其他形式的單鏈抗體例 如雙抗體。雙抗體是二價(jià)、雙特異性抗體，其中VH和VL結(jié)構(gòu)域在單條多肽鏈上表達(dá)，但使 用太短而不允許相同鏈上的2個(gè)結(jié)構(gòu)域之間配對(duì)的接頭，從而迫使結(jié)構(gòu)域與另一條鏈的互 補(bǔ)結(jié)構(gòu)域配對(duì)且產(chǎn)生2個(gè)抗原結(jié)合部位(參見例如，Holliger，P.等人(1993)/￥oc. Natl. Acad. Sci. "5 迎6444-6448 ;Poljak，R. J.等人(1994) SirwctoreZ: 1121-1123)。此種 抗原結(jié)合部分是本領(lǐng)域已知的(Kontermann和Dubel編輯，Antibody Engineering (2001) Springer-Verlag. New York.第 790 頁(ISBN 3-540-41354-5)。如本文使用的，術(shù)語“抗體構(gòu)建體”指包括與接頭多肽或免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域 連接的本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)抗原結(jié)合部分的多肽。接頭多肽包括通過肽鍵連接的2個(gè)或 更多個(gè)氨基酸殘基，并且用于連接一個(gè)或多個(gè)抗原結(jié)合部分。此種接頭多肽是本領(lǐng)域眾所 周知的(參見例如，HolIiger，P.等人(1993)Natl. Acad. Sci.6444-6448 ； Poljak，R. J.等人(1994)份ractoret 1121-1123)。免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域指重或輕鏈恒 定結(jié)構(gòu)域。人IgG重鏈和輕鏈恒定結(jié)構(gòu)域氨基酸序列是本領(lǐng)域已知的并且在表1中表示。表1 人IgG重鏈恒定結(jié)構(gòu)域和輕鏈恒定結(jié)構(gòu)域的序列
權(quán)利要求
1.一種包括抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的分離的單克隆抗體，所述抗體能夠結(jié)合人RAGE分子的 表位，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括包含選自下述的氨基酸序列的至少一個(gè)CDR:a)由SEQID NO. :4、12和20組成的氨基酸序列的⑶R-H3組；與所述序列之一具有至 少50%的序列同一性的修飾的CDR氨基酸序列；和/或b)由SEQID NO. 8,16和M組成的氨基酸序列的⑶R-L3組；和與所述序列之一具有 至少50%的序列同一性的修飾的CDR氨基酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的抗體，其進(jìn)一步包括至少一個(gè)CDR，所述至少一個(gè)CDR包含下述氨 基酸序列，所述氨基酸序列選自由SEQ ID NO :2、10、18組成的⑶R-Hl組；或選自由SEQ ID N0:3、ll、19組成的CDR-H2組；或選自由SEQ ID NO :6、14、22組成的CDR-Ll組；或選自由 SEQ ID NO :7、15、23 組成的 CDR-L2 組；和與所述序列之一具有至少50%的序列同一性的修飾的CDR氨基酸序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的抗體，其包括至少3個(gè)CDRs，所述至少3個(gè)CDR選自由下述組成 的可變結(jié)構(gòu)域⑶R組或可變結(jié)構(gòu)域組，其中所述3個(gè)CDRs中的至少一個(gè)是與親本序列具有至少50 %的序列 同一性的修飾的CDR氨基酸序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的抗體，其中所述至少2個(gè)可變結(jié)構(gòu)域⑶R組選自下述 VH 7F9 組和 VL 7F9 組；VH 4E5 組和 VL 4E5 和 VH 11E6 組和 VL 11E6 組。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求之一的抗體，其進(jìn)一步包括人受體構(gòu)架。
6.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的抗體，其包括選自SEQID NO :56和57的至少一個(gè)重鏈可 變結(jié)構(gòu)域；和/或選自SEQ ID NO 58和59的至少一個(gè)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的抗體，其中所述結(jié)合蛋白包括選自下述的至少一個(gè)構(gòu)架突變(重鏈序列位置):1、2、68、70、72、76、85、89、95(輕鏈序列位置):11、13、43、49、58、70、87。
8.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的抗體，其中所述結(jié)合蛋白包括具有選自下述的氨基酸序列 的至少一個(gè)(構(gòu)架突變的)可變結(jié)構(gòu)域(重鏈序列)SEQ ID NO 62、67、68 和 69 ；(輕鏈序列)SEQ ID NO :63、64、65 和 66。
9.權(quán)利要求1的抗體，其選自抗體11E6、4E5和7F9。
10.一種分離的核酸，其編碼權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的抗體的氨基酸序列。
11.一種載體，其包括根據(jù)權(quán)利要求10的分離的核酸。
12.—種宿主細(xì)胞，其包括根據(jù)權(quán)利要求11的載體。
13.—種產(chǎn)生能夠結(jié)合RAGE的蛋白質(zhì)的方法，其包括在足以產(chǎn)生能夠結(jié)合RAGE的結(jié)合 蛋白的條件下，在培養(yǎng)基中培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求12的宿主細(xì)胞。
14.一種蛋白質(zhì)，其根據(jù)權(quán)利要求13的方法產(chǎn)生。
15.一種用于釋放抗體的組合物，所述組合物包括(a)制劑，其中所述制劑包括結(jié)晶形式的權(quán)利要求1-9的抗體作為成分；和(b)至少一種聚合載體。
16.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的抗體，和藥學(xué)上可接受的載體。
17.一種用于處理哺乳動(dòng)物的方法，其包括給哺乳動(dòng)物施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求15 或16的組合物的步驟。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述方法用于治療選自下述的神經(jīng)學(xué)疾病肌萎縮 性側(cè)索硬化、臂叢損傷、腦損傷包括外傷性腦損傷、大腦性癱瘓、Friedrich氏共濟(jì)失調(diào)、 Guillain Barre、腦白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良、多發(fā)性硬化、小兒麻痹癥后的后遺癥、脊柱裂、脊髓損 傷、脊髓性肌萎縮、脊髓瘤、中風(fēng)、橫貫性脊髓炎、癡呆、老年性癡呆、輕度認(rèn)知缺損、阿爾 茨海默相關(guān)癡呆、亨廷頓氏舞蹈癥、遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、運(yùn)動(dòng)過度、躁狂癥、Parkinson病、 steel-Richard綜合征、唐氏綜合征、重癥肌無力、神經(jīng)外傷、脈管淀粉樣變性、伴淀粉樣變 性腦出血I、腦炎癥、Friedrich氏共濟(jì)失調(diào)、急性意識(shí)錯(cuò)亂病癥、肌萎縮性側(cè)索硬化、青光 眼、阿爾茨海默氏病、糖尿病腎病、膿毒癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和相關(guān)炎性疾病。
19.權(quán)利要求17的方法，其中所述方法用于治療阿爾茨海默氏病。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述組合物包括11E6。
全文摘要
本申請(qǐng)涉及分離的蛋白質(zhì)，特別是單克隆抗體，且特別是CDR嫁接的人源化抗體，其與RAGE蛋白質(zhì)結(jié)合。具體而言，這些抗體具有抑制RAGE與其各種配體結(jié)合的能力。本申請(qǐng)中描述的抗體或其部分用于治療特征在于RAGE的病理生理學(xué)配體或由RAGE的病理生理學(xué)配體誘導(dǎo)的疾病或病癥，例如錯(cuò)折疊(missfotd)的蛋白質(zhì)如淀粉狀蛋白β和漸進(jìn)性糖化終極產(chǎn)物。
文檔編號(hào)C12N15/12GK102089430SQ200980126432
公開日2011年6月8日 申請(qǐng)日期2009年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月9日
發(fā)明者E·L·迪吉亞馬里諾, G·B·福克斯, J·E·哈蘭, M·施米德特, R·勒伯特, R·米勒, U·埃伯特, V·尼姆里希, 吳振, 羅峰, 謝仲明, 顧繼杰 申請(qǐng)人:雅培制藥有限公司, 雅培股份有限兩合公司