專利名稱：在氮限制條件下具有改變的農(nóng)學(xué)特性的植物和涉及編碼lnt6多肽及其同源物的基因的相 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明領(lǐng)域涉及植物育種和遺傳學(xué)，具體地講涉及植物中可用的賦予氮利用效率和/或氮限制條件耐受性的重組DNA構(gòu)建體。
背景技術(shù)：
世界范圍內(nèi)非生物脅迫顯著地限制了作物產(chǎn)量。據(jù)評(píng)估這些因素累積地造成平均 70%的農(nóng)業(yè)產(chǎn)量減少。植物是固著的，必須適應(yīng)它們周邊的主要環(huán)境條件。這已經(jīng)導(dǎo)致它們發(fā)展出基因調(diào)控、形態(tài)發(fā)生和代謝的高可塑性。適應(yīng)和防御機(jī)制策略涉及激活編碼對(duì)適應(yīng)或防御不同脅迫重要的蛋白。植物氮吸收在它們的生長(zhǎng)中起到重要作用(Gallais等人，J. Exp. Bot. 55(396) 295-306 Q004))。植物從環(huán)境中的無(wú)機(jī)氮合成氨基酸。因此，氮肥已經(jīng)成為提高栽培植物如玉米和大豆的產(chǎn)量有力工具。為了避免硝酸鹽污染并保持足夠的利潤(rùn)率，如今農(nóng)民期望減少氮肥的使用。如果能提高植物的氮同化能力，然后就能期望植物生長(zhǎng)和產(chǎn)量的提高。概括地說(shuō)，具有更好的氮利用效率(NUE)的植物品種是所期望的?？衫眉せ顦?biāo)記來(lái)鑒定能影響性狀的基因。已經(jīng)在模型植物擬南芥屬中使用該方法(Weigel等人，Plant Physiol. 122 1003-1013 (2000))。插入轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子元件能夠顯著激活和/或提高附近內(nèi)源基因的表達(dá)。這種方法可以用于鑒定特定性狀(例如植物的氮利用效率)的受關(guān)注的基因，當(dāng)所述基因作為轉(zhuǎn)基因進(jìn)入生物中時(shí)能夠改變?cè)撔誀睢０l(fā)明概述本發(fā)明包括在一個(gè)實(shí)施方案中，在基因組中包含重組DNA構(gòu)建體的植物，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與SEQ ID NO :18、20、22、24、洸、28、30、31、33、 37、38、40、41、42、43、44、45、46或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性，并且其中所述植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，在基因組中包含重組DNA構(gòu)建體的植物，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與SEQ ID NO :18、20、22、對(duì)、26、沘、30、31、 33、37、38、40、41、42、43、44、45、46或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性，并且其中所述植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。任選地，在氮限制條件下與未包含所述重組DNA構(gòu)建體的所述對(duì)照植物比較時(shí)，所述植物表現(xiàn)出所述至少一種農(nóng)學(xué)特性的所述改變。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種農(nóng)學(xué)特性選自在綠度、產(chǎn)量、生長(zhǎng)速率、生物量、成熟時(shí)的鮮重、成熟時(shí)的干重、果實(shí)產(chǎn)量、種子產(chǎn)量、總植物含氮量、果實(shí)含氮量、種子含氮量、營(yíng)養(yǎng)組織含氮量、總植物游離氨基酸含量、營(yíng)養(yǎng)組織游離氨基酸含量、果實(shí)游離氨基酸含量、種子游離氨基酸含量、總植物蛋白質(zhì)含量、果實(shí)蛋白質(zhì)含量、種子蛋白質(zhì)含量、營(yíng)養(yǎng)組織蛋白質(zhì)含量、耐旱性、氮攝取、根倒伏、收獲指數(shù)、莖倒伏、植株高度、穗高、穗長(zhǎng)、早期幼苗活力、和低溫脅迫下的出苗。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種農(nóng)學(xué)特性為產(chǎn)量或生物量并且所述改變?yōu)樘岣?。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括本發(fā)明的任何植物，其中所述植物選自玉米、 大豆、卡諾拉(canola)、稻、小麥、大麥和高粱。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括本發(fā)明的任何植物的種子，其中所述種子在其基因組中包含重組DNA構(gòu)建體，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、洸、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、44、45、46、或 47 進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性，并且其中所述種子產(chǎn)生的植物在與不包含所述重組 DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性或至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變，或者兩者皆有。在另一個(gè)實(shí)施方案中，增加植物氮脅迫耐受性的方法，所述方法包括(a)將重組 DNA構(gòu)建體引入到可再生的植物細(xì)胞中，該重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、44、45、46、或 47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中該轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；和(c) 獲得源自步驟(b)的轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含該重組 DNA構(gòu)建體，并且在與不包含該重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，評(píng)價(jià)植物氮脅迫耐受性的方法，所述方法包括(a)將重組 DNA構(gòu)建體引入到可再生的植物細(xì)胞中，該重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、44、45、46、或 47進(jìn)行比較時(shí)，具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中該轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；(c)獲取來(lái)源于所述轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；以及(d)評(píng)價(jià)該轉(zhuǎn)子代植物在與不包含該重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)的氮脅迫耐受性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)定植物至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變的方法，所述方法包括 (a)將重組DNA構(gòu)建體引入到可再生的植物細(xì)胞中，該重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、 44、45、46、或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中該轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；(c)獲取來(lái)源于轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；以及(d)測(cè)定該子代植物在與未包含該重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)是否表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。任選地，所述測(cè)定步驟(d)包括測(cè)定所述轉(zhuǎn)基因植物在氮限制條件下與未包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)是否表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種農(nóng)學(xué)特性選自在綠度、產(chǎn)量、生長(zhǎng)速率、生物量、成熟時(shí)的鮮重、成熟時(shí)的干重、果實(shí)產(chǎn)量、種子產(chǎn)量、總植物含氮量、果實(shí)含氮量、種子含氮量、營(yíng)養(yǎng)組織含氮量、總植物游離氨基酸含量、營(yíng)養(yǎng)組織游離氨基酸含量、果實(shí)游離氨基酸含量、種子游離氨基酸含量、總植物蛋白質(zhì)含量、果實(shí)蛋白質(zhì)含量、種子蛋白質(zhì)含量、營(yíng)養(yǎng)組織蛋白質(zhì)含量、耐旱性、氮攝取、根倒伏、收獲指數(shù)、莖倒伏、植株高度、穗高、穗長(zhǎng)、早期幼苗活力、和低溫脅迫下的出苗。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種農(nóng)學(xué)特性為產(chǎn)量或生物量并且所述改變?yōu)樘?br> 尚ο在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括本發(fā)明的任何方法，其中所述植物選自玉米、 大豆、卡諾拉、稻、小麥、大麥和高粱。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括分離的多核苷酸，所述分離的多核苷酸包含 (a)編碼多肽的核苷酸序列，其中SEQ ID N0:20、M、26J8、37或40的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法具有至少或 71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、 81 82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 92%,93%,94%,95%, 96%、97%、98%、99%、100%的序列同一性，或(b)所述核苷酸序列的全長(zhǎng)互補(bǔ)序列，其中所述全長(zhǎng)互補(bǔ)序列和所述核苷酸序列由相同數(shù)目的核苷酸組成并且是100%互補(bǔ)的。所述多肽可包含SEQ ID N0:20、M、26J8、37或40的氨基酸序列，并且所述核苷酸序列可包含 SEQ ID NO :19、23、25、27、36 或 39 的核苷酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含本發(fā)明任何分離的多核苷酸的重組DNA構(gòu)建體，所述分離的多核苷酸可操作地連接到至少一個(gè)調(diào)控序列，并且本發(fā)明涉及包含所述重組DNA構(gòu)建體的細(xì)胞、植物和種子。所述細(xì)胞可為真核細(xì)胞，例如酵母、昆蟲(chóng)或植物細(xì)胞， 或者可為原核細(xì)胞，例如細(xì)菌。附圖簡(jiǎn)述和序列表根據(jù)以下的詳細(xì)描述和附圖以及序列表，可更全面地理解本發(fā)明，以下的詳細(xì)描述和附圖以及序列表形成本申請(qǐng)的一部分。

圖1示出pHSbarENDs2活化標(biāo)記構(gòu)建體的圖譜，該構(gòu)建體用于制備擬南芥屬種群 (SEQ ID NO 1)ο圖 2 示出載體 pDONR Zeo (SEQ ID NO :2)，GATEWAY 供體載體的圖譜。attPl 位點(diǎn)位于核苷酸570-801 ；attP2位點(diǎn)位于核苷酸27M-2985 (互補(bǔ)鏈)。圖 3 示出載體 pDONR 221 (SEQ ID NO :3)，GATEWAY 供體載體的圖譜。attPl 位點(diǎn)位于核苷酸570-801 ；attP2位點(diǎn)位于核苷酸27M-2985 (互補(bǔ)鏈)。
圖4示出載體pBC-yell0W(SEQ ID NO 4)的圖譜，該載體是用于構(gòu)建擬南芥屬表達(dá)載體的目的載體。attRl位點(diǎn)位于核苷酸11276-11399(互補(bǔ)鏈)；attR2位點(diǎn)位于核苷酸9695-9819 (互補(bǔ)鏈)。圖5示出載體PHP27840 (SEQ ID NO 5)的圖譜，該載體是用于構(gòu)建大豆表達(dá)載體的目的載體。attRl位點(diǎn)位于核苷酸7310-7434 ；attR2位點(diǎn)位于核苷酸8890-9014。圖6示出載體PHP23236(SEQ ID NO 6)的圖譜，它是用于構(gòu)建Gaspe Flint來(lái)源的玉米品系的表達(dá)載體的目的載體。attRl位點(diǎn)位于核苷酸2006-2130 ；attR2位點(diǎn)位于核苷酸 2899-3023。圖7示出載體PHP10523 (SEQ ID NO :7)的圖譜，該載體是存在于農(nóng)桿菌菌株 LBA4404 中的質(zhì)粒 DNA(Komari 等人，Plant J. 10 165-174(1996) ；NCBI 通用標(biāo)識(shí)符 59797027)。圖8示出載體PHP23235 (SEQ ID NO 8)的圖譜，它是用于構(gòu)建目的載體PHP23236 的載體。圖 9 示出載體 PHP20234(SEQ ID NO 9)的圖譜。圖10示出目的載體PHP22655(SEQ ID NO 10)的圖譜。圖11示出用于篩選的五個(gè)品系(標(biāo)記為1至5-每個(gè)品系有十一個(gè)個(gè)體)，加上野生型對(duì)照品系Cl (九個(gè)個(gè)體)的典型網(wǎng)格圖案。圖12示出通過(guò)圖像分析測(cè)定的若干個(gè)不同硝酸鉀濃度對(duì)植物顏色的效應(yīng)。綠色區(qū)(色調(diào)50至66)對(duì)氮?jiǎng)┝康捻憫?yīng)證明該區(qū)可被用于指示氮同化作用。圖13為實(shí)施例18中用于半水栽玉米生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。圖14是列出實(shí)施例18中與不同硝酸鹽濃度對(duì)Gaspe Flint衍生的玉米系生長(zhǎng)和發(fā)育的影響相關(guān)的數(shù)據(jù)的圖表。圖15A-15G示出擬南芥LNT6多肽(SEQ ID NO 30)的全長(zhǎng)氨基酸序列與SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、31、33、37、和 38 的 LNT6 同源物的多重比對(duì)。圖16示出圖15A-15G中顯示的每對(duì)氨基酸序列的序列同一性百分比和趨異值的圖表。本文所附的序列描述和序列表遵循在37 C. F. R. § 1. 821-1. 825中所列出的用于專利申請(qǐng)公開(kāi)中的核苷酸和/或氨基酸序列的規(guī)定。序列表包含遵循IUPAC-IUBMB標(biāo)準(zhǔn)的核苷酸序列的單字母編碼和氨基酸序列的三字母編碼，IUPAC-IUBMB標(biāo)準(zhǔn)描述于Nucleic Acids Res. 13 :3021-3030 (1985)和 Biochemical J. 219(2) :345_373 (1984)中，它們引入本文以供參考。用于核苷酸和氨基酸序列數(shù)據(jù)的符號(hào)和格式遵循在37 C.F.R. § 1.822中所列出的規(guī)定。表1列出了本文所述的某些多肽、包含編碼多肽全部或其主要部分的核酸片段的 cDNA克隆的命名、以及在所附序列表中使用的對(duì)應(yīng)標(biāo)識(shí)符(SEQ ID NO:))。^ 1耐低氮蛋白(LNT)
權(quán)利要求
1.在基因組中包含重組DNA構(gòu)建體的植物，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、 44、45、46、或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性，并且其中所述植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性。
2.在基因組中包含重組DNA構(gòu)建體的植物，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、 44、45、46、或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性，并且其中所述植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。
3.權(quán)利要求2的植物，其中所述至少一種農(nóng)學(xué)特性是選自下列的至少一種綠度、產(chǎn)量、生長(zhǎng)速率、生物量、成熟時(shí)的鮮重、成熟時(shí)的干重、果實(shí)產(chǎn)量、種子產(chǎn)量、總植物含氮量、 果實(shí)含氮量、種子含氮量、總植物游離氨基酸含量、果實(shí)游離氨基酸含量、種子游離氨基酸含量、果實(shí)蛋白質(zhì)含量、種子蛋白質(zhì)含量、營(yíng)養(yǎng)組織蛋白質(zhì)含量、耐旱性、氮攝取、根倒伏、收獲指數(shù)、莖倒伏、植株高度、穗高、穗長(zhǎng)、早期幼苗活力、和低溫脅迫下的出苗。
4.權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的植物，其中在氮限制條件下與未包含所述重組DNA構(gòu)建體的所述對(duì)照植物比較時(shí)，所述植物表現(xiàn)出所述至少一種農(nóng)學(xué)特性的所述改變。
5.權(quán)利要求2至4中任一項(xiàng)的植物，其中所述至少一種農(nóng)學(xué)特性是產(chǎn)量或生物量，并且進(jìn)一步地，其中所述改變是提高。
6.權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的植物，其中所述植物選自玉米、大豆、卡諾拉、稻、小麥、 大麥和高粱。
7.權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的植物的種子，其中所述種子在其基因組中包含重組DNA 構(gòu)建體，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控元件的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于Clustal V比對(duì)方法在與18、20、22、24、 26、28、30、31、33、37、38、40、41、42、43、44、45、46 或 47 進(jìn)行比較時(shí)具有至少 50% 的序列同一性，并且其中從所述種子產(chǎn)生的植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性或至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變，或者它們兩者。
8.增加植物氮脅迫耐受性的方法，所述方法包括(a)將重組DNA構(gòu)建體弓丨入到可再生的植物細(xì)胞中，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、 42、43、44、45、46或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中所述轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；和(c)獲得源自步驟(b)的轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體，并且在與不包含該重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)表現(xiàn)出提高的氮脅迫耐受性。
9.評(píng)估植物氮脅迫耐受性的方法，所述方法包括(a)將重組DNA構(gòu)建體引入到可再生的植物細(xì)胞中，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、 42、43、44、45、46或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中所述轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；(c)獲得源自所述轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；和(d)評(píng)價(jià)所述子代植物在與不包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物進(jìn)行比較時(shí)的氮脅迫耐受性。
10.測(cè)定植物農(nóng)學(xué)特性的改變的方法，所述方法包括(a)將重組DNA構(gòu)建體弓丨入到可再生的植物細(xì)胞中，所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼多肽，所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V 比對(duì)方法在與 SEQ ID NO :18、20、22、24、26、28、30、31、33、37、38、40、41、 42、43、44、45、46或47進(jìn)行比較時(shí)具有至少50%的序列同一性；(b)在步驟(a)之后，從所述可再生的植物細(xì)胞再生出轉(zhuǎn)基因植物，其中所述轉(zhuǎn)基因植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；(c)獲得源自所述轉(zhuǎn)基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因組中包含所述重組DNA構(gòu)建體；和(d)測(cè)定所述子代植物在與未包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)是否表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述測(cè)定步驟(d)包括測(cè)定所述轉(zhuǎn)基因植物在氮限制條件下與未包含所述重組DNA構(gòu)建體的對(duì)照植物比較時(shí)是否表現(xiàn)出至少一種農(nóng)學(xué)特性的改變。
12.權(quán)利要求10或權(quán)利要求11的方法，其中所述至少一種農(nóng)學(xué)特性是選自下列的至少一種綠度、產(chǎn)量、生長(zhǎng)速率、生物量、成熟時(shí)的鮮重、成熟時(shí)的干重、果實(shí)產(chǎn)量、種子產(chǎn)量、 總植物含氮量、果實(shí)含氮量、種子含氮量、總植物游離氨基酸含量、果實(shí)游離氨基酸含量、種子游離氨基酸含量、果實(shí)蛋白質(zhì)含量、種子蛋白質(zhì)含量、營(yíng)養(yǎng)組織蛋白質(zhì)含量、耐旱性、氮攝取、根倒伏、收獲指數(shù)、莖倒伏、植株高度、穗高、穗長(zhǎng)、早期幼苗活力、和低溫脅迫下的出苗。
13.權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種農(nóng)學(xué)特性是產(chǎn)量或生物量， 并且進(jìn)一步地，其中所述改變是提高。
14.權(quán)利要求8至13中任一項(xiàng)的方法，其中所述植物選自玉米、大豆、卡諾拉、稻、小麥、大麥和高粱。
15.分離的多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)編碼具有LNT6多肽活性的多肽的核苷酸序列，其中所述多肽的氨基酸序列基于 Clustal V比對(duì)方法在與SEQ ID NO :20、對(duì)、26、沘、37或40進(jìn)行比較時(shí)具有至少90%的序列同一性，其中所述Clustal V比對(duì)方法采用以下逐對(duì)比對(duì)默認(rèn)參數(shù)=KTUPLE = 1，GAP PENALTY = 3，WINDOW = 5，和 DIAGONALS SAVED = 5，或(b)(a)的核苷酸序列的全長(zhǎng)互補(bǔ)序列。
16.權(quán)利要求15的多核苷酸，其中所述多肽的氨基酸序列包括SEQID NO =20,24,26,`28,37.或 40。
17.權(quán)利要求15的多核苷酸，其中所述核苷酸序列包括SEQID NO 19、23、25、27、36或39。
18.包含重組DNA構(gòu)建體的植物或種子，其中所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接到至少一種調(diào)控序列的權(quán)利要求15至17中任一項(xiàng)的多核苷酸。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了尤其可用于在氮限制條件下改變植物農(nóng)學(xué)特性的分離的多核苷酸和多肽以及重組DNA構(gòu)建體，包含這些重組DNA構(gòu)建體的組合物(如植物或種子)、以及利用這些重組DNA構(gòu)建體的方法。所述重組DNA構(gòu)建體包含可操作地連接至在植物中有功能的啟動(dòng)子的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼LNT6多肽或其同源物。
文檔編號(hào)C12N15/82GK102203263SQ200980143409
公開(kāi)日2011年9月28日 申請(qǐng)日期2009年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月29日
發(fā)明者D·勞塞爾特, H·薩凱, M·奧克曼, S·M·艾倫, S·V·廷蓋, S·盧克 申請(qǐng)人:先鋒國(guó)際良種公司, 納幕爾杜邦公司