專利名稱：病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子及其在增強(qiáng)植物的疾病抗性中的用途的制作方法
病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子及其在增強(qiáng)植物的疾病抗性中的用
途
背景技術(shù)：
植物是數(shù)以千計(jì)的感染性疾病的宿主，這些疾病是由多種植物致病性真菌、細(xì)菌、 病毒、卵菌和線蟲引起的。植物識(shí)別并通過誘導(dǎo)迅速的防御應(yīng)答來抵抗很多入侵的植物病原體。識(shí)別通常是由于植物中的顯性或半顯性抗性(R)基因產(chǎn)物與入侵的植物病原體表達(dá)的相應(yīng)的顯性的無毒性(Avr)基因產(chǎn)物之間的相互作用而引起的。R-基因激發(fā)的抗性通常引起程序性細(xì)胞死亡，其被稱作高敏感性應(yīng)答(Η 。相信HR限制了病原體的傳播。R基因產(chǎn)物如何介導(dǎo)相應(yīng)的Avr蛋白的感知在很大程度上仍然是未知的。已經(jīng)有人提出植物病原體Avr產(chǎn)物作為配體發(fā)揮作用，并且植物R基因產(chǎn)物作為受體發(fā)揮作用。 在這種受體-配體模型中，Avr產(chǎn)物與植物中相應(yīng)的R基因產(chǎn)物的結(jié)合啟動(dòng)植物中的事件鏈，產(chǎn)生HR，引起疾病的抗性。在另一模型中，R蛋白感知Avr蛋白的作用而非感知其結(jié)構(gòu)。 在該模型中，相信Avr蛋白修飾植物靶蛋白(致病靶標(biāo))以促進(jìn)病原體的毒力。匹配的R 蛋白檢測到致病蛋白的修飾并且激發(fā)防御應(yīng)答。實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明一些R蛋白是Avr的受體， 而其它R蛋白檢測Avr蛋白的活性?，F(xiàn)在，產(chǎn)生攜帶異源基因序列的轉(zhuǎn)基因植物是植物分子生物學(xué)家的常規(guī)實(shí)踐。 用于將分離的基因序列摻入到表達(dá)盒中、產(chǎn)生植物轉(zhuǎn)化載體并轉(zhuǎn)化很多類型的植物的方法是熟知的。產(chǎn)生由于導(dǎo)入了異源轉(zhuǎn)基因而具有修飾的特性的轉(zhuǎn)基因植物的實(shí)例包括 Guerineau的美國專利5，719，046 (通過導(dǎo)入細(xì)菌二氫蝶酸合酶基因而產(chǎn)生除草劑抗性的植物)Jorgensen的美國專利5，231，020(植物中類黃酮的修飾)；Dougherty的美國專利 5，583，021 (病毒抗性植物的產(chǎn)生)；以及DeGreve的美國專利5，767，372和Fischoff的美國專利5，500，365(通過導(dǎo)入蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)基因而產(chǎn)生昆蟲抗性的植物)。伴隨著這些技術(shù)，類似地，植物R基因的分離也允許產(chǎn)生具有對某些病原體的增強(qiáng)的抗性的植物。自從第一次克隆了 R基因，即來自番茄的Pto(其賦予丁香假單胞菌番爺致病變種(Pseudomonas syringae pv. tomato)抗性，見 Martin 等人，(1993) Science 262 :1432-1436)，已經(jīng)報(bào)道了多種其它的 R 基因(Liu 等人，(2007) J. Genet. Genomics34 765-776.)。已經(jīng)有多種此類基因被用于將編碼的抗性特性導(dǎo)入之前對相應(yīng)的病原體易感的植物品系。例如，美國專利5，571，706描述了將N基因?qū)雽煵莼ㄈ~病毒(TMV) 易感的煙草品系中，從而產(chǎn)生TMV抗性煙草植物。WO 95Λ8423描述了攜帶來自擬南芥 (Arabidopsis thaliana)的Rps2基因的轉(zhuǎn)基因植物的產(chǎn)生，這作為產(chǎn)生對細(xì)菌病原體包括丁香假單胞菌O^seudomonas syringae)的抗性的方法；W098/02545描述了將Prf基因?qū)胫参镆垣@得廣譜病原體抗性。由植物致病性細(xì)菌野油菜黃單胞菌辣椒斑點(diǎn)病致病變種(Xanthomonas campestris pv. vesicatoria) (Xcv)引起的番茄和胡椒的細(xì)菌性斑點(diǎn)病能夠?qū)κ澜缟暇哂懈邼穸群透呓涤炅康牡貐^(qū)的這些作物的商業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成破壞。經(jīng)濟(jì)作物中Xcv的控制主要是依賴于殺蟲劑的應(yīng)用，然而，在番茄和胡椒中都已經(jīng)描述了對細(xì)菌性斑點(diǎn)病的遺傳抗t生(Cook and Stall(1963)Phytopathology 53 :1060-1062 ；Cook and Guevara(1984) Plant Dis. 68:329-330 ；Kim and Hartman(1985)Plant Dis. 69 :233-235 Jones and Scott (1986)Plant Dis. 70 :337-339)。在這兩種宿主中已經(jīng)更好地表征了胡椒中的遺傳抗性。已經(jīng)鑒定了數(shù)個(gè)以“基因-基因”模式賦予抗性的單一基因座(Bsl、Bs2和Bs3) (Hibberd 等人，(1987)Phytopathology 77:1304-1307)。此外，已經(jīng)從)(cv中克隆了相應(yīng)的無毒性基因(avrBsl、avrBs2 禾口 avrBs3) (Swanson 等人，(1988)Mol. Plant-Microbe Interact. 1 5-9 ；Minsavage 等人，(1990)Mol. Plant-Microbe Interact. 3 :41-47)。這些無毒性基因的遺傳和分子學(xué)表征提供了關(guān)于Xcv與胡椒之間相互作用的大量信息(Kearney等人，(1988) Nature 332 :541-543 ；Kearney and Staskawicz (1990) Nature346 :385-386 ;Herbers 等人，(1992)Nature 356 :172-174 ；Van der Ackerveken 等人，(1992)Plant J. 2 :359-366)。 最近，分離了胡椒的Bs3基因并進(jìn)行了測序(美國專利6，262, 343)。Xcv使用III型分泌(T3Q系統(tǒng)以將大約20種效應(yīng)子蛋白的集合注射進(jìn)入宿主胞質(zhì)內(nèi)，它們聯(lián)合起來引發(fā)毒力CThieme等人，(2005) J. Bacteriol. 187 :7254)。R蛋白介導(dǎo)的針對Xcv效應(yīng)子蛋白的防御通常伴隨程序性細(xì)胞死亡應(yīng)答，其被稱作HR。AvrBs3 是一種被R蛋白識(shí)別的Avr蛋白，其是存在于多種黃單胞菌和青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)菌株中的高度相關(guān)的細(xì)菌效應(yīng)子蛋白的大的家族(> 100個(gè)經(jīng)測序的成員)中的成員(Schornack等人，(2006) J. Plant Physiol. 163 :256)。由于它們在結(jié)構(gòu)上與真核轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)性，AvrBs3樣蛋白也被稱作TAL(轉(zhuǎn)錄激活子樣)效應(yīng)子。TAL 效應(yīng)子的最顯著的特征是中央的重復(fù)序列結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域由數(shù)目可變的(1.5-28.5)串聯(lián)排列的幾乎相同的34/35-(黃單胞菌/雷爾氏菌)重復(fù)序列單元組成。對來自Xcv的 AvrBs3的分析已經(jīng)表明該重復(fù)序列結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)與啟動(dòng)子元件的特異性結(jié)合，該啟動(dòng)子元件被稱作“upa盒”(Kay等人，(2007) Science 318:648-651)。全長的AvrBs3蛋白不僅與具有upa盒的啟動(dòng)子結(jié)合，而且轉(zhuǎn)錄激活這些啟動(dòng)子。在對于b易感的胡椒基因型中， AvrBs3與upa20基因的啟動(dòng)子結(jié)合并將其激活，這引起細(xì)胞肥大(Kay等人，(2007) Science 318 :648-651)。在含有Bs3抗性基因的胡椒植物中，AvrBs3激發(fā)細(xì)胞死亡應(yīng)答(即HR)， 這限制了病原體的生長。分子學(xué)分析揭示Bs3啟動(dòng)子與upa20啟動(dòng)子一樣，包含upa盒。 AvrBs3與胡椒Bs3啟動(dòng)子結(jié)合并將其轉(zhuǎn)錄激活，從而激發(fā)防御應(yīng)答(Riimer等人，(2007) Science 318:645-648)。因此Bs3啟動(dòng)子是基于DNA的誘捕受體。AvrBs3_刪除衍生物 AvrBs3Ai 印16(缺失重復(fù)序列單元11-14)不激活Bs3啟動(dòng)子，但激活其等位基因變體 Bs3-E(R6mer等人，(2007) Science 318:645-648)。有趣的是，Bs3 和 Bs3_E 的啟動(dòng)子的區(qū)別在于它們的upa盒(在本文中分別被稱作"upaA Bs3"和"upaAwBs3_pl6"盒)。因此，TAL效應(yīng)子的識(shí)別特異性是由下列決定的a)給定的TAL效應(yīng)子的重復(fù)序列單元的總和；以及b)給定的宿主啟動(dòng)子的upa盒。來自細(xì)菌性水稻病原體水稻黃單胞菌水稻致病變種(Xanthomonas oryzae pv. oryzae) (Xoo)的TAL效應(yīng)子Avr)(a27激活匹配的水稻R基因)(a27的啟動(dòng)子(Gu等人， (2005)Nature435 :1122-1125)。因此，R基因Bs3和Xa27都被它們匹配的TAL效應(yīng)子轉(zhuǎn)錄激活，因此它們在激活機(jī)理上是相同的。然而，預(yù)測的Bs3和)Ca27蛋白彼此沒有序列同源性，與經(jīng)典的NB-LRR型R蛋白也沒有序列同源性。但是，Avr)(a27-和AvrBs3_介導(dǎo)的宿主啟動(dòng)子的激活似乎在機(jī)理上是相似的。目前為止，尚無報(bào)道提出證據(jù)證明Avri(a27與)Ca27啟動(dòng)子結(jié)合以及)(a27啟動(dòng)子包含與Avr)(a27結(jié)合的upa盒。

發(fā)明內(nèi)容
提供了用于制備病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子的方法，所述啟動(dòng)子用于植物在遭受植物病原體的攻擊后的基因的表達(dá)。本發(fā)明的方法包括產(chǎn)生包含1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)upa 盒的病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子。通過使用與來自不同的植物病原體(尤其是細(xì)菌性植物病原體)的TAL效應(yīng)子結(jié)合的兩個(gè)或更多個(gè)upa盒，該方法可用于制備可以被兩種或更多種植物病原體誘導(dǎo)的啟動(dòng)子。還提供了制備R基因的方法，所述R基因用于增強(qiáng)植物對植物病原體的抗性。本發(fā)明的方法包括產(chǎn)生包含與R基因產(chǎn)物的編碼序列可操作地連接的病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子的核酸構(gòu)建體。所述病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子由本文公開的方法制備并且包含1個(gè)、2個(gè)、 3個(gè)或更多個(gè)upa盒。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，該方法用于產(chǎn)生可以被兩種或更多種植物病原體誘導(dǎo)的R基因。本發(fā)明的此類R基因包含具有兩個(gè)或更多個(gè)upa盒的啟動(dòng)子，其中每個(gè)upa盒可以被產(chǎn)生TAL效應(yīng)子的不同的植物病原體(特別是細(xì)菌性植物病原體)誘導(dǎo)。還提供了用于鑒定來自植物的基因的啟動(dòng)子中的upa盒的方法。該方法包括將植物、植物的部分或植物細(xì)胞暴露于TAL效應(yīng)子，然后鑒定所述植物、植物的部分或植物細(xì)胞中的兩個(gè)或更多個(gè)基因，其中在暴露于所述TAL效應(yīng)子之后直接誘導(dǎo)這些基因的表達(dá)。 該方法還包括對所述兩個(gè)或更多個(gè)基因的啟動(dòng)子進(jìn)行比較以鑒定一個(gè)或多個(gè)包含潛在upa 盒的核苷酸序列，就upa-盒活性測定任意此類核苷酸序列。最后，該方法包括將具有upa 盒活性的核苷酸序列鑒定為upa盒。另外還提供了包含本發(fā)明的病原體可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子、upa盒和R基因的分離的核酸分子、表達(dá)盒、核酸或多核苷酸構(gòu)建體、植物、植物的部分、植物細(xì)胞、種子和非人類宿主細(xì)胞。


圖1A.用于研究upa盒的功能的構(gòu)建體的示意圖。綠色和粉色的盒分別代表Bs3/ Bs3-E啟動(dòng)子和Bs4啟動(dòng)子。小的橙色和藍(lán)色的盒分別代表upaAwBs3和upaAwBs3,repl6盒。注意Bs3和Bs3-E啟動(dòng)子的區(qū)別僅在于這些盒內(nèi)的差異，其它部分是相同的；因此，以相同的顏色顯示。叩^_33盒內(nèi)的白線標(biāo)示出了該盒中的突變。upa盒附近的數(shù)字表示它們與ATG 起始密碼子之間的距離?；疑暮斜硎綛s3基因的編碼區(qū)。圖1B.不同的Bs3和Bs4啟動(dòng)子衍生物的功能分析。通過根癌農(nóng)桿菌 (Agrobacterium tumefaciens)將所示的啟動(dòng)子衍生物與35S-驅(qū)動(dòng)的avrBs3基因一起輸送進(jìn)入本氏煙草(Nicotiana benthamiana)的葉子(0D600 = 0.8)。虛線標(biāo)示出了接種區(qū)域。滲透4天之后，澄清葉子以顯示HR(深色區(qū)域)。請注意35S-驅(qū)動(dòng)的avrBs3的輸送本身也激發(fā)弱的應(yīng)答(見圖中的‘空’)。因此，只有深色區(qū)域(標(biāo)記為星號(hào)Γ])表示功能性啟動(dòng)子。圖2A.用于研究敘27和xa27啟動(dòng)子之間的啟動(dòng)子多態(tài)性以及這些多態(tài)性的功能相關(guān)性的構(gòu)建體的示意圖。黃色、橙色和粉色的盒分別代表xa27、)(a27和Bs4啟動(dòng)子。黑色的盒代表upaAvrXa27盒。xa27啟動(dòng)子(不被AvrXa27誘導(dǎo))和)(a27啟動(dòng)子(被AvrXa27 誘導(dǎo))的upa盒之間的2個(gè)核苷酸的多態(tài)性由兩條白線標(biāo)示。份27和敘27啟動(dòng)子在大約 Ikb的區(qū)域內(nèi)顯示出總共15個(gè)多態(tài)性，因此以不同的顏色表示。淺灰色和深灰色的盒表示胡椒Bs3和番茄Bs4基因的編碼區(qū)。圖2B. Xa27和xa27啟動(dòng)子之間的多態(tài)性的功能分析。通過根癌農(nóng)桿菌 (Agrobacterium tumefaciens)將所示的啟動(dòng)子衍生物與35S-驅(qū)動(dòng)的avr Xa27基因一起輸送進(jìn)入本氏煙草(Nicotiana benthamiana)的葉子(0D600 = 0.8)。虛線標(biāo)示出了接種區(qū)域。滲透4天之后，澄清葉子以顯示HR(深色區(qū)域)。深色區(qū)域(標(biāo)記為星號(hào)[*])表示功能性啟動(dòng)子。圖3A.用于研究復(fù)合啟動(dòng)子的功能的構(gòu)建體的示意圖，所述復(fù)合啟動(dòng)子組合了包含Bs3、Bs3-E*)(a27啟動(dòng)子的upa盒的的核苷酸序列。綠色、黃色、橙色和粉色的盒分別代表Bs3、xa27、Xa27和Bs4啟動(dòng)子。藍(lán)色、棕色和黑色的盒分別代表來自Bs3、Bs3_E和)(a27 啟動(dòng)子的upa盒。xa27啟動(dòng)子(不被Avr)(a27誘導(dǎo))和)(a27啟動(dòng)子(被Avr)(a27誘導(dǎo)) 的upa盒之間的2個(gè)核苷酸的多態(tài)性由兩條白線標(biāo)示。xa27和)(a27啟動(dòng)子在大約11Λ的區(qū)域內(nèi)顯示出總共15個(gè)多態(tài)性，因此以不同的顏色表示。Bs3和Bs3-E啟動(dòng)子的區(qū)別僅在于它們的upa盒內(nèi)的差異，其它部分是相同的；因此，以相同的顏色顯示。黑色和灰色的盒表示胡椒Bs3和番茄Bs4基因的編碼區(qū)。圖3B.組合了 Bs3、Bs3_E和)(a27啟動(dòng)子的識(shí)別特異性的復(fù)合啟動(dòng)子的功能分析。通過根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)將所示的啟動(dòng)子衍生物與35S-驅(qū)動(dòng)的avrBs3基因(左側(cè)的葉子)、35S_驅(qū)動(dòng)的avr)(a27基因(中間的葉子)或35S-驅(qū)動(dòng)的 avrBs3Arepl6 (右側(cè)的葉子)一起輸送進(jìn)入本氏煙草(Nicotiana benthamiana)的葉子(0D600 = 0.8)。虛線標(biāo)示出了接種區(qū)域。滲透4天之后，澄清葉子以顯示HR(深色區(qū)域)。深色區(qū)域(標(biāo)記為星號(hào)[*])表示功能性啟動(dòng)子。序列表隨附的序列表中列出的核苷酸和氨基酸序列以用于核苷酸堿基的標(biāo)準(zhǔn)字母縮寫和用于氨基酸的三字符來表示。核苷酸序列按照從序列的5'末端開始并前進(jìn)(即每行從左至右)至3'末端的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)則書寫。僅顯示了每個(gè)核酸序列的一條鏈，但是應(yīng)該理解為 對所顯示的鏈的任意引述都包括了互補(bǔ)的鏈。氨基酸序列按照從序列的氨基末端開始并前進(jìn)(即每行從左至右)至羧基末端的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)則書寫。SEQ ID NO 1顯示了包含胡椒Bs3基因的編碼序列的核苷酸序列。該核苷酸序列可以見登記號(hào)EU078684。SEQ ID NO 2顯示了包含番茄Bs4基因的編碼序列的核苷酸序列。該核苷酸序列可以見登記號(hào)AY438027。SEQ ID NO 3顯示了包含Bs3基因的啟動(dòng)子的核苷酸序列。該核苷酸序列可以見登記號(hào)EU078684。SEQ ID NO 4顯示了包含Bs3基因的Bs3_E等位基因的啟動(dòng)子的核苷酸序列。該核苷酸序列可以見登記號(hào)EU078683。SEQ ID NO 5顯示了 Bs3 Upamut啟動(dòng)子的核苷酸序列。SEQ ID NO 6顯示了 Bs3 Upa294啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO7顯示了 Bs3 Upa424啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO:8顯示了包含Bs4基因的啟動(dòng)子的核苷酸序列。該核苷:酸序列可以見登記號(hào)AY438027O
SEQIDNO9顯示了 Bs4 upa啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO10顯示了 Bs4 Upamut啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO:11顯示了包含水稻敘27基因的啟動(dòng)子的核苷酸序列。該核苷酉堯序列可以見登記號(hào)AY986492。
SEQIDNO:12顯示了包含水稻xa27基因的啟動(dòng)子的核苷酸序列。該核苷酉堯序列可以見登記號(hào)AY986491。
SEQIDNO13顯示了 Bs3+Bs3-E啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO14顯示了 Bs3+Xa27+Bs3-E啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO15顯示了 Bs3+Xa27啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO16顯示了 Bs3+xa27+Bs3-E啟動(dòng)子的核苷酸序列。
SEQIDNO17顯示了 upaAwBs3盒的核苷酸序列。
SEQIDNO18顯示了 upaAwBs3,repl6盒的核苷酸序列。
SEQIDNO19顯示了 Bs3upamut盒的核苷酸序列。
SEQIDNO20顯示了包含upaAwBs3盒的核苷酸序列。
SEQIDNO21顯示了包含突變的upaAwBs3盒的核苷酸序列。
SEQIDNO22顯示了 upaAwXa27盒的核苷酸序列。
SEQIDNO23顯示了包含upaAwxa27盒的核苷酸序列。
SEQIDNO24顯示了包含upaAwBs3,repl6盒的核苷酸序列。
SEQIDNO:25顯示了 upa盒的共有核苷酸序列，在Kay等人，(2007) Science
318 (5850) :648-651中證明與AvrBs3結(jié)合的保守性DNA元件。SEQIDNO26顯示了包含upaAwBs3盒的核苷酸序列O
SEQIDNO:27 顯示了包含 upiiAvrBs3 Arepl6 盒的核苷酸序列。
SEQIDNO28顯示了 Upapth5tol盒的核苷I酸序列。
SEQIDNO29顯示了 upaPthx。6盒的核苷I酸序列。
SEQIDNO30顯示了 upaPthx。7盒的核苷I酸序列。
SEQIDNO31顯示了水稻OsTFXl基因的UPTpth5to6 IL ο
SEQIDNO32顯示了水稻0sllN3基因的UPTAwXa7 y勺核苷·g序列。
SEQIDNO33顯示了水稻0s)(al3基因的UPTpth5tol y勺核苷·g序列。
SEQIDNO34顯示了實(shí)施例8中公開的復(fù)合啟動(dòng)子的核苷畫ι序列。
SEQIDNO:35顯示了 UPTap11盒的核苷酸序列，其用于包含SEQID N0:34所示的核
苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO :36顯示了 UPTap12盒的核苷酸序列，其用于包含SEQID NO :；34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO :37顯示了朋、13盒的核苷酸序列，其用于包含SEQID NO :；34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO :38顯示了 UPTpthfi盒的核苷酸序列，其用于包含SEQID NO :；34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO :39顯示了 UPTPthA*盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ ID NO:;34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 40顯示了 UPTPthA * 2盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ ID NO 34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 41顯示了 UPTPthAw盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ 核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 42顯示了 UPTPthA1盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ 核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 43顯示了 UPTPthA2盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ 核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 44顯示了 UPTPthA3盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ 核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 45顯示了 UPTpB3.7盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ 核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 46顯示了 UPTHssB3.Q盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ ID NO 34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO :47顯示了 UPTp-盒的核苷酸序列，其用于包含SEQID NO :；34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。SEQ ID NO 48顯示了 UPTpthe盒的核苷酸序列，其用于包含SEQ ID NO 34所示的核苷酸序列的復(fù)合啟動(dòng)子中。
具體實(shí)施例方式最近分離、測序并表征了胡椒(Capsicum armuum)BS3抗性(R)基因。見Rijmer等人，(2007) Science 318 :645_648，美國專利申請
發(fā)明者J·伯奇, P·洛米爾, S·斯綽納克, T·拉哈耶, U·伯納斯 申請人:雙刃基金會(huì)