專利名稱：一種竹蓀孢子的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食用菌加工領(lǐng)域，具體涉及竹蓀孢子的分離、收集、純化、保存等工藝。
背景技術(shù)：
竹蓀為鬼筆科竹蓀屬OVcij^Mora)真菌，是一種名貴的食用菌，自古就列為朝廷 貢品，為國(guó)宴和高級(jí)宴席上的著名山珍之一?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明竹蓀具有健脾胃、降血壓、 降血脂、抗腫瘤、抗凝血、抗炎癥、抗艾滋病、提高免疫力、保護(hù)肝臟等功能，是一種具有良好 保健功能的健康食品。竹蓀子實(shí)體由菌體(菌裙和菌柄)、菌蓋和菌托三部分組成。商品竹蓀只是采收、力口 工竹蓀子實(shí)體的菌體部分，而占子實(shí)體生物量60%以上的菌蓋和菌托被直接遺棄，即每生 產(chǎn)Ikg商品竹蓀就產(chǎn)生1. 5kg的廢棄物。大量菌蓋和菌托被遺棄在田間不僅浪費(fèi)資源；而 且容易污染環(huán)境，成為細(xì)菌、霉菌、菇蚊、菇蠅等病蟲(chóng)害滋生的的源頭。目前還未見(jiàn)有提取竹 蓀孢子工藝的報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種從竹蓀菌體采收后的廢棄物中收集、分離、純化獲得竹蓀孢子的 方法，能充分開(kāi)發(fā)竹蓀資源，提高竹蓀產(chǎn)品的附加值，同時(shí)解決竹蓀采收加工過(guò)程下腳料處 理問(wèn)題。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
收集采收竹蓀菌體后剩下的菌蓋和菌托，低溫保存。將收集的菌蓋和菌托放入水中，通 過(guò)震蕩、洗脫等物理方法將孢子從菌蓋和菌托中分離出。將分離出的孢子液通過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾， 去掉菌蓋、菌托碎片等雜質(zhì)，收集濾液，濾渣另做用途。濾液通過(guò)反復(fù)離心、過(guò)濾，可收集到 竹蓀孢子粗體。竹蓀孢子粗體加少量水制成懸浮液，加入酶進(jìn)行酶解，去除竹蓀孢子液中含 有的膠質(zhì)；用酸調(diào)節(jié)PH，去除竹蓀孢子液中的臭味物質(zhì)后過(guò)濾。濾液離心后去掉上清液，再 加水震蕩均勻后離心，如此反復(fù)多次，直到收集的沉淀通過(guò)顯微鏡觀察，視野中均為孢子， 且形狀和大小與文獻(xiàn)描述的相同時(shí)為止。將收集的沉淀干燥，即獲得竹蓀孢子。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)
1、竹蓀孢子是附著在生長(zhǎng)成熟期的竹蓀菌蓋中的生殖細(xì)胞，具有竹蓀的全部遺傳活性 物質(zhì)。檢測(cè)竹蓀孢子中氨基酸、粗蛋白質(zhì)含量達(dá)23. 04%、34. 72%，高于菌體所含的18.57%、 25. 30%。竹蓀孢子含有豐富的維生素，維生素Bl含量33. 5mg/g,高于菌體的29. Omg/g ；維生素C含量是菌體的一百多倍。因此竹蓀孢子含有極高的營(yíng)養(yǎng)和保健價(jià)值，制備竹蓀孢子 具有廣闊的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景。2、從竹蓀子實(shí)體采收、加工后的廢棄物中收集、提取竹蓀孢子，能充分利用資源， 提高竹蓀產(chǎn)品的附加值；同時(shí)解決了竹蓀采收過(guò)程廢棄物處理問(wèn)題，避免滋生細(xì)菌、霉菌、 菇蚊、菇蠅等病蟲(chóng)害造成的環(huán)境污染。3、通過(guò)酶解和酸解，去除了竹蓀孢子液中含有的膠質(zhì)和臭味物質(zhì)，獲得純凈的竹 蓀孢子。通過(guò)冷凍干燥不損害竹蓀孢子的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)使得孢子更易保存。


圖1為竹蓀孢子純品的掃描電鏡圖。
具體實(shí)施例方式(1)樣品采集收集采收竹蓀菌體后剩下的竹蓀菌蓋和菌托300_3000g ；
(2 )孢子分離加入水1200-12000ml，清洗5-30min ；均勻翻動(dòng)上下層，繼續(xù)清洗 5-30min ；清洗結(jié)束后用100-500目的篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣加水1000_3000ml，清洗5_30min，使竹 蓀孢子和菌托、菌蓋充分分離；用200-500目的篩網(wǎng)過(guò)濾，合并兩次濾液備用；
(3)孢子粗提濾液用低速大型離心機(jī)離心，200-600rpm離心3-20min；取上部液體 1000-2000rpm離心10_30min，取沉淀加入500_2000ml水，震蕩均勻；
(4)孢子純化震蕩液酶解l_2h，所述酶為復(fù)合果膠酶；用酸調(diào)節(jié)pH為3-7，用300-500目 的篩網(wǎng)過(guò)濾 ’濾液1000-2000rpm離心5_20min ；取沉淀，加入500_2000ml蒸餾水，震蕩均勻， 1500-3000rpm離心5-20min ；收集沉淀，干燥，裝瓶、密封、低溫保存，即為竹蓀孢子純品。以下為本發(fā)明的具體實(shí)例，進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明，但是本發(fā)明不僅限于此。實(shí)施例1
在竹蓀菌裙展開(kāi)至最大時(shí)(即成熟自溶期)，收集竹蓀菌蓋和菌托500g，放入超聲波清 洗機(jī)(型號(hào)KQ-250)，加入自來(lái)水2000ml，清洗IOmin ；均勻翻動(dòng)上下層，繼續(xù)清洗lOmin。清 洗結(jié)束后用400目的篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣放回超聲波清洗機(jī)，加入自來(lái)水1000ml，清洗lOmin，使 竹蓀孢子和菌蓋、菌托充分分離；用400目的篩網(wǎng)過(guò)濾，合并兩次濾液備用。濾液用低速大 型離心機(jī)(型號(hào)DL-5)離心，500rpm離心5min ；取上部液體，1500rpm離心15min。倒掉上清 液，加入500ml自來(lái)水，震蕩均勻；加入0. 1%果膠復(fù)合酶酶解lh，去除孢子液中的膠質(zhì)；用 冰醋酸調(diào)節(jié)PH到4-5，去除孢子中含有的異味物質(zhì)。用500目篩網(wǎng)過(guò)濾；濾液IOOOrpm離 心lOmin，去掉上清液，收集沉淀；加入IOOOmL蒸餾水，震蕩均勻，1500rpm離心15分鐘；倒 掉上清液，收集沉淀，冷凍干燥(型號(hào)FD-1)，裝瓶、密封、低溫保存。收集得到的竹蓀孢子為 暗綠色粉末狀，通過(guò)掃描電子顯微鏡(JSM6380LV，日本JEOL公司)觀察，如圖1所示，孢子 形狀為橢圓形、寬1-1. 5微米，長(zhǎng)2. 5-3微米。
權(quán)利要求
一種竹蓀孢子的提取方法，其特征在于收集竹蓀菌蓋上的孢子，通過(guò)清洗、過(guò)濾、離心，然后進(jìn)行酶解、酸解、分級(jí)離心、干燥，獲得竹蓀孢子純品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種竹蓀孢子的提取方法，其特征在于所述方法按照以下 步驟進(jìn)行(1)樣品采集將采收竹蓀菌體后剩下的竹蓀菌蓋和菌托收集備用；(2)孢子分離收集的竹蓀菌蓋和菌托用水清洗、過(guò)濾后，得到含孢子的濾液；(3)孢子粗提濾液離心、震蕩，得到孢子粗提液；(4)孢子純化孢子粗提液進(jìn)行酶解、酸解、過(guò)濾，濾液分級(jí)離心、冷凍干燥，獲得竹 蓀孢子純品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種竹蓀孢子的提取方法，其特征在于具體步驟如下 (1)樣品采集收集采收竹蓀菌體后剩下的竹蓀菌蓋和菌托300-3000g ；(2 )孢子分離加入水1200-12000ml，清洗5-30min ；均勻翻動(dòng)上下層，繼續(xù)清洗 5-30min ；清洗結(jié)束后用100-500目的篩網(wǎng)過(guò)濾，濾渣加水1000_3000ml，清洗5_30min，使竹 蓀孢子和菌托、菌蓋充分分離；用200-500目的篩網(wǎng)過(guò)濾，合并兩次濾液備用；(3)孢子粗提濾液用低速大型離心機(jī)離心，200-600rpm離心3-20min；取上部液體 1000-2000rpm離心10_30min，取沉淀加入500_2000ml水，震蕩均勻；(4)孢子純化震蕩液酶解l_2h，所述酶為復(fù)合果膠酶；用酸調(diào)節(jié)pH為3-7，用300-500 目的篩網(wǎng)過(guò)濾 ’濾液1000-2000rpm離心5_20min ；取沉淀，加入500_2000ml蒸餾水，震蕩 均勻，1500-3000rpm離心5-20min ；收集沉淀，干燥，裝瓶、密封、低溫保存，即為竹蓀孢子純品
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從竹蓀菌體采收后的廢棄物中收集、分離、純化獲得竹蓀孢子的方法，能充分開(kāi)發(fā)竹蓀資源，提高竹蓀產(chǎn)品的附加值，同時(shí)解決竹蓀采收加工過(guò)程下腳料處理問(wèn)題，屬于食用菌加工領(lǐng)域。該方法收集竹蓀菌蓋上的孢子，通過(guò)清洗、過(guò)濾、離心，然后進(jìn)行酶解、酸解、分級(jí)離心、干燥，獲得竹蓀孢子純品。本發(fā)明從竹蓀子實(shí)體采收、加工后的廢棄物中收集、提取竹蓀孢子，能充分利用資源，提高竹蓀產(chǎn)品的附加值，具有廣闊的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景；同時(shí)解決了竹蓀采收過(guò)程廢棄物處理問(wèn)題，避免滋生細(xì)菌、霉菌、菇蚊、菇蠅等病蟲(chóng)害造成的環(huán)境污染。
文檔編號(hào)A23L1/28GK101828694SQ201010142348
公開(kāi)日2010年9月15日 申請(qǐng)日期2010年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月9日
發(fā)明者張慧, 林戎斌, 林新堅(jiān), 林陳強(qiáng), 蔡海松, 陳濟(jì)琛 申請(qǐng)人:福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所