專利名稱：一種環(huán)境微生物菌劑保存劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于環(huán)境保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種室溫保存用于環(huán)境污染治理與保護(hù)的微生物菌劑(即環(huán)境微生物菌劑)中活菌的方法，以達(dá)到長(zhǎng)時(shí)間、低成本保存保持微生物菌劑中活菌數(shù)量與污染凈化性能的目的，實(shí)現(xiàn)其商品化與工業(yè)化。
背景技術(shù)：
當(dāng)前，我國(guó)環(huán)境污染仍然十分嚴(yán)峻，各種污染治理工藝與方法紛紛涌現(xiàn)，其中生物處理方法是主流技術(shù)手段，近年來(lái)以生態(tài)環(huán)境保護(hù)和污染防治為目的而研發(fā)的微生物菌劑日趨增多，微生物菌劑的使用不僅可以大大縮短處理系統(tǒng)的啟動(dòng)時(shí)間與提高處理效率，同時(shí)對(duì)難降解有毒污染物具有良好的降解效果，并提高處理系統(tǒng)的抗沖擊性能。但由于環(huán)境微生物菌劑是活菌制劑，因此不易保存，活菌死亡快；而污染凈化效果直接與菌劑中的活菌數(shù)及其活力狀態(tài)密切相關(guān)。因此，如何保證菌劑生產(chǎn)后保存中的活力是菌劑應(yīng)用于污染治理的重要問(wèn)題，菌劑中活菌的長(zhǎng)時(shí)間高活力保存是目前該領(lǐng)域的一項(xiàng)技術(shù)難題?，F(xiàn)有微生物菌劑中活菌的保存技術(shù)，主要有冷藏保存技術(shù)、低溫冷凍干燥保存技術(shù)、添加淀粉等干燥制粒保存、在菌液中加入DMSO (二甲基亞砜)保存、菌液中添加桔皮提取液等。冷藏保存與低溫冷凍干燥技術(shù)存在成本高、技術(shù)設(shè)備要求復(fù)雜以及生產(chǎn)量小等不足，DMSO則存在一定的生物毒性，導(dǎo)致菌劑保存中活菌數(shù)低以及降解性能下降等問(wèn)題。微生物菌劑的保存時(shí)間和保存條件直接影響著它的成本和應(yīng)用效果，成為其推廣應(yīng)用的技術(shù)瓶頸。目前，國(guó)內(nèi)鮮有相關(guān)研究報(bào)道，在環(huán)境微生物菌劑保存方面，也僅有許榕、何文剛等以美國(guó)組織收集中心(American Type Culture Collection) #465菌種為保存對(duì)象，采用桔皮提取液、添加玉米淀粉的方法保存該菌液，加速試驗(yàn)表明存放有效期達(dá)兩年(許榕，鄒江鷹.一種利用桔皮提取液保存活菌生物制劑中活菌的方法[P].中國(guó)專利001174M. 1,2009-09-29.何文剛，阮斌，鄒凌修.一種利用玉米淀粉保存活菌生物制劑中活菌的方法[P].中國(guó)專利02135000.0,2004-04-21.)。但這些保存方法仍是固體干燥保存技術(shù)的延續(xù)，并且僅用加速試驗(yàn)(成品在60°C、相對(duì)濕度> 75%條件下存放14天)來(lái)表征可保存兩年，缺乏對(duì)菌液中活菌數(shù)與對(duì)污染物凈化性能的長(zhǎng)期考察。綜上，由于微生物菌種室溫下存在難以保存以及降解凈化性能退化等問(wèn)題，目前在環(huán)境微生物菌劑生產(chǎn)應(yīng)用中尚缺乏高效經(jīng)濟(jì)可行的長(zhǎng)效保存技術(shù)與方法。因此，以污染凈化效能與活菌數(shù)為衡量指標(biāo)，依據(jù)微生物的生理生化與污染代謝途徑等特征，有針對(duì)性的研發(fā)環(huán)境微生物菌劑長(zhǎng)效保存技術(shù)成為污染生物處理技術(shù)研發(fā)的

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)環(huán)境微生物菌劑保存中活菌存活率低、污染降解凈化性能下降快等問(wèn)題，提供一種適應(yīng)性好、成本低廉、保存效率高、工藝簡(jiǎn)單的環(huán)境微生物菌劑室溫保存技術(shù)，以保障環(huán)境微生物菌劑產(chǎn)品在應(yīng)用時(shí)具有較多的活菌并具有良好的活力與生存能力。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
菌劑保存劑主要由脫氧劑、抑制劑、保護(hù)劑等組成，技術(shù)方案的主要思路是對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)的環(huán)境微生物菌劑進(jìn)行快速脫氧，使其快速進(jìn)入休眠狀態(tài)，并在加入抑制劑的情況下保證其長(zhǎng)期處于休眠狀態(tài)以及防止染菌，同時(shí)，添加菌種保護(hù)劑保護(hù)其降解性能不受環(huán)境變化的影響。脫氧劑主要成分為C6H8O6 (抗壞血酸)加CuSO4 (硫酸銅)或Na2S2O4 (硫代硫酸鈉) 加NaHCO3 (碳酸氫鈉)，抑制劑為CuSO4 (硫酸銅)或C7H5NaA (苯甲酸鈉)或菌種降解特征污染物(如苯酚、苯胺、甲醛等)，保護(hù)劑為C3H8O3 (甘油)。菌劑保存劑中有效成分根據(jù)菌劑特性按一定濃度添加至菌劑中，并置于室溫保存。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)
1、環(huán)境微生物菌劑可于室溫下得以保存，相對(duì)于冷藏保存、低溫干燥保存而言，本保存方法經(jīng)濟(jì)高效，保存方式相對(duì)簡(jiǎn)便、容易操作，無(wú)二次污染等。2、本菌劑保存方法具有廣譜性，研究實(shí)踐表明，保存配方對(duì)多類環(huán)境微生物菌劑 (煉油廢水處理微生物菌劑、苯酚降解微生物菌劑、苯胺降解微生物菌劑等)均具有良好的保存效果。3、菌劑保存中可有效防止染菌，菌劑保存后性能較為穩(wěn)定，滿足菌劑應(yīng)用于污水處理系統(tǒng)啟動(dòng)的需要，實(shí)用價(jià)值高。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 煉油廢水處理液體微生物菌劑室溫保存
煉油廢水處理液體微生物菌劑參照專利《一種處理煉油廢水的微生物菌劑、其制備方法及其應(yīng)用》(專利號(hào)ZL 200410081504. 7)培養(yǎng)方式發(fā)酵培養(yǎng)成液體菌劑，然后將不同菌劑的保存劑成分配成不同濃度的母液，分別按配方含量加入液體菌劑中，置于室溫下進(jìn)行保存，不同保存階段用MPN法(最大可能數(shù)法)對(duì)菌劑進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，并考察保存過(guò)程中染菌狀況與對(duì)煉油廢水的處理效果。(1)菌劑保存劑配方
表i煉油廢水麄劑保存劑S方
序號(hào)
0
CU-UoNa2S2O4 .+0
0 4SfcNa2S2O4 +.0.:! 5.Ν Ηι 03+10%0甘油
0 r9^QHgOrH).0259fcCHS04+0.Z0^Na2S2CJ4 +(>.i^NaHCO3
菌劑保存劑主要由脫氧劑、抑制劑、保護(hù)劑等組成，脫氧劑主要成分為C6H8O6 (抗壞血酸)與CuSO4 (硫酸銅)或Na2S2O4 (硫代硫酸鈉)與NaHCO3 (碳酸氫鈉)、抑制劑為CuSO4 (硫酸銅XC7H5NaO2 (苯甲酸鈉)，保護(hù)劑為C3H8O3 (甘油)。液體菌劑保存序號(hào)、保存劑配方與濃度如表1所示。 (2)活菌數(shù)動(dòng)態(tài)變化
表各窗劑保存刑配方保存敦杲
權(quán)利要求
1.一種環(huán)境微生物菌劑保存劑，由脫氧劑、抑制劑和保護(hù)劑組成。
2.權(quán)利要求1所述的環(huán)境微生物菌劑保存劑，其特征是所述的脫氧劑包含成分為抗壞血酸C6H8O6加硫酸銅CuSO4或硫代硫酸鈉Na2S2O4加碳酸氫鈉NaHCO3,其中，抗壞血酸的添加濃度為(TO. 8 ^，硫酸銅添加濃度為(Γ0. 1%。，硫代硫酸鈉添加濃度為(Tl. 5 ^，碳酸氫鈉添加濃度為(TO. 9%。;抑制劑包含成分為硫酸銅CuSO4或苯甲酸鈉C7H5NaA或目標(biāo)特征污染物，硫酸銅添加濃度即保持脫氧劑中添加濃度，苯甲酸鈉添加濃度為廣3%。，目標(biāo)特征污染物的添加濃度為其降解濃度的609Γ80% ；保護(hù)劑包含成分為甘油C3H8O3,添加濃度為(TlO%0; 以上添加量甘油為體積百分比，其余為質(zhì)量百分比。
3.權(quán)利要求2所述的環(huán)境微生物菌劑保存劑，其特征是所述目標(biāo)特征污染物是指含苯酚、苯胺的污染物，其添加量為苯酚80(Tl200mg/L，苯胺為150(T2000mg/L。
全文摘要
本發(fā)明屬于環(huán)境保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種環(huán)境微生物菌劑保存劑，由脫氧劑、抑制劑和保護(hù)劑組成；脫氧劑包含成分為抗壞血酸加硫酸銅或硫代硫酸鈉加碳酸氫鈉；抑制劑包含成分為硫酸銅或苯甲酸鈉或目標(biāo)特征污染物；保護(hù)劑包含成分為甘油。本發(fā)明保存劑具有經(jīng)濟(jì)高效、使用方便、保存時(shí)間長(zhǎng)、保存后菌劑性能穩(wěn)定、菌種活力持久、無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12N1/04GK102260630SQ201010185379
公開(kāi)日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2010年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月28日
發(fā)明者劉慶華, 周后珍, 李旭東, 譚周亮 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所