專利名稱：基于測序和bsa技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，具體地說，涉 及一種采用超級BSA和高通量測序技術(shù)結(jié)合，通過降低基因組復(fù)雜度，以對大群體進(jìn)行深 度測序，并通過關(guān)聯(lián)分析鑒定性狀相關(guān)的DNA分子標(biāo)記的方法。
背景技術(shù)：
目前的分子標(biāo)記主要分為三類第一類是以電泳和分子雜交技術(shù)為核心的如 RFLP技術(shù)，第二類是以電泳和PCR技術(shù)為核心的如AFLP技術(shù)，第三類是基于DNA芯片和測 序技術(shù)的分子標(biāo)記如SNP。其中前兩種方法檢測的多態(tài)性通量小，第三類方法價(jià)格較為昂
蟲
貝o隨著具有高通量，低成本，測序錯誤率低，測序讀長短特點(diǎn)的新一代測序技術(shù)和生 物信息學(xué)的發(fā)展，使得應(yīng)該測序技術(shù)進(jìn)行高通量標(biāo)記開發(fā)成為可能。隨著越來越多物種，特 別是作物的基因組計(jì)劃的完成測序，使我們對各個(gè)物種的基因組特點(diǎn)有了更深入的了解。 在此基礎(chǔ)上，將生物信息學(xué)方法，測序方法，傳統(tǒng)PCR技術(shù)為核心的分子標(biāo)記技術(shù)法以及分 離群體分組分析法(BSA)結(jié)合起來，充分利用生物信息學(xué)方法對不同物種基因組或BAC數(shù) 據(jù)進(jìn)行參數(shù)訓(xùn)練，根據(jù)基因組特性，找出最優(yōu)簡化基因組復(fù)雜度的參數(shù)具體包括的酶切組 合；最優(yōu)擴(kuò)增產(chǎn)物長度片段區(qū)間，實(shí)現(xiàn)減少重復(fù)序列干擾，保持特定長度片段均勻分布等屬 性。根據(jù)分析得到的物種參數(shù)，對分離群體分組進(jìn)行酶切擴(kuò)增，選擇特異長度片段進(jìn)行測 序，測序結(jié)果再通過比較找出差異。該方法比較傳統(tǒng)方法的優(yōu)點(diǎn)在于基于高通量測序方法， 使通量大大增加，通過降低基因組復(fù)雜度到手段，使開發(fā)成本大大降低，可以對大群體進(jìn)行 開發(fā)，關(guān)聯(lián)分析的可靠性及準(zhǔn)確性高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，旨在 解決現(xiàn)有分子標(biāo)記篩選方法中通量低和價(jià)格高，標(biāo)記與性狀關(guān)聯(lián)分析準(zhǔn)確性不高的問題， 主要應(yīng)用于作物分子育種等的標(biāo)記開發(fā)和基因定位方面。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明提供基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩 選方法，其基于分離群體分組分析法和經(jīng)過降低基因組復(fù)雜度后的高通量測序法，對分離 群體進(jìn)行標(biāo)記開發(fā)和性狀關(guān)聯(lián)分析，包括如下步驟1)分別制備兩分離群體DNA樣品，每個(gè) 群體中的個(gè)體樣品DNA等比例混合；2)對分離群體基因組的復(fù)雜性進(jìn)行降低處理，獲得復(fù) 雜性降低的DNA樣品；3)將復(fù)雜性降低后的分離群體DNA等比混合，利用高通量測序方式 進(jìn)行測序；4)比較兩組群體DNA樣品測序結(jié)果，獲得序列標(biāo)記，根據(jù)序列標(biāo)記豐度差異，檢 測出與性狀關(guān)聯(lián)的標(biāo)記。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述分離群體 可以是植物、動物或微生物。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述分離群體基因組DNA復(fù)雜性降低方法可以是任何有選擇性的減少基因組復(fù)雜度的方法，包括限制性 內(nèi)切酶酶切產(chǎn)物PCR擴(kuò)增或酶切產(chǎn)物選擇性吸附。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述分離群體 基因組DNA復(fù)雜性降低方法包括如下步驟1)分別制備兩分離群體DNA樣品和兩親本DNA 樣品，每個(gè)群體中的個(gè)體樣品DNA等比例混合；2)相同酶分別酶切分離群體DNA樣品和兩 親本DNA樣品；3)用不同接頭分別鏈接到四類樣品的酶切產(chǎn)物上，分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增純化； 回收特異性長度片段樣品，將四類樣品按照比例混合，混合時(shí)滿足以下條件:A兩群體樣品 比例按照1 1;B兩親本樣品比例按照1 1;進(jìn)行測序；4)比較兩親本測序結(jié)果，找出多 態(tài)性標(biāo)記，比較兩組群體DNA樣品測序結(jié)果，找出性狀相關(guān)的分子標(biāo)記及其親本中的來源。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟2)使 用的限制性內(nèi)切酶滿足以下條件a)酶在基因組上的酶切位點(diǎn)分布盡可能均勻；b)選擇特 定長度的酶切片段能夠保證序列標(biāo)簽的數(shù)量；c)選擇特定長度的酶切片段避免落在基因 組高度重復(fù)區(qū)。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟2)使 用一種或者兩種酶酶切。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述分離群體 為兩個(gè)經(jīng)鑒定的性狀分離群體，如F2、BC1、DH等目標(biāo)性狀分離的群體，其通過父母本雜交 重組排除了父母本中和目標(biāo)性狀無關(guān)的差異。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟4)還 包括將分子標(biāo)記定位到基因組或BAC文庫。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟4)還 包括通過性狀關(guān)聯(lián)的高密度分子標(biāo)記獲得性狀相關(guān)的候選功能基因。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟4)還 包括確定序列標(biāo)簽來自父本或者母本。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述每個(gè)群體 樣品測序深度為50倍以上，所述每親本測序深度為3倍以上。前述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其中所述步驟4)比 較兩組群體DNA樣品測序結(jié)果包括特異性長度片段多態(tài)性和單核苷酸多態(tài)性分子標(biāo)記。本發(fā)明所述的基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，比傳統(tǒng)方法 的優(yōu)點(diǎn)在于使用高通量測序技術(shù)，使標(biāo)記開發(fā)通量大大提高，現(xiàn)有的BSA方法群體數(shù)量不 能太大，主要原因是采用模擬信號，結(jié)果是“有”或“無”，本發(fā)明采用測序的方法結(jié)合BSA技 術(shù)獲得的分子標(biāo)記是數(shù)字信號，可直接根據(jù)分子標(biāo)記在分離群體種的豐度進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析， 因此可采用大量的樣本進(jìn)行分析，同時(shí)保證分子標(biāo)記的數(shù)量。并且該方法只對基因組特異 性酶切長度片段進(jìn)行測序，大大降低了基因組的復(fù)雜度，使開發(fā)成本大大降低，成本的降低 使大群體深度測序成為可能，和重測序相比，測序深度和測序成本都具有明顯的不可比的 優(yōu)勢，大大提高了關(guān)聯(lián)分析的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，從而位精確定位基因提供基礎(chǔ)。


圖1為本發(fā)明較佳實(shí)施例1的流程示意圖2為本發(fā)明較佳實(shí)施例1對父母本和兩群體DNA樣品測序后的分析流程示意 圖；圖3A為本發(fā)明較佳實(shí)施例2模擬Ecorl+Msel兩種酶對白菜基因組參考序列進(jìn)行 酶切后450-500長度酶切片段在染色體上的密度分布圖；圖3B為本發(fā)明較佳實(shí)施例2模擬Ecorl+Msel兩種酶對白菜基因組參考序列進(jìn)行 酶切后全基因組每100K內(nèi)的450-500p長度酶切片段數(shù)量分布圖；圖4A為本發(fā)明較佳實(shí)施例2Ecorl+MSel雙酶切白菜兩親本和兩群體DNA后加接 頭并進(jìn)行擴(kuò)增后的電泳圖；其中，1-5分別代表1 群體1 ；2 群體2 ；3 親本1 ；4 親本2 ； 5 對照；M :100bp DNA ladder ；圖4B為本發(fā)明較佳實(shí)施例2兩親本和兩群體樣品混合后的DNA電泳圖；其中，M 為lOObp DNA ladder, 1為兩群體和兩親本按照20 20 1 1比例進(jìn)行混合；圖4C為本發(fā)明較佳實(shí)施例2混合樣品加測序接頭后截取500bp_550bp長度片段 電泳圖；其中，M為50bp DNA ladder ；1和2代表500bp_550bp長度片段；圖5為本發(fā)明較佳實(shí)施例2多態(tài)性標(biāo)記在白菜分離群體中的基因分型結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1群體特異性長度擴(kuò)增片段測序檢測DNA分子標(biāo)記請參閱圖1所示，包括如下步驟(1)本實(shí)施例處理的對象是兩親本DNA樣本及經(jīng)過鑒定后的分離群體DNA樣本； 每個(gè)分離群體中的個(gè)體樣品要進(jìn)行同比例混合。(2)本實(shí)施例對要研究物種的基因組或BAC參考序列進(jìn)行分析，訓(xùn)練參數(shù)找出最 優(yōu)的酶組合，選擇最優(yōu)的擴(kuò)增產(chǎn)物長度片段，滿足以下條件a酶在基因組上的酶切位點(diǎn)分布均勻；b選擇特定長度的酶切片段能夠保證序列標(biāo)簽的數(shù)量；c選擇特定長度的酶切片段避免落在基因組高度重復(fù)區(qū)。(3)對兩個(gè)群體DNA樣品以及兩個(gè)親本DNA樣品根據(jù)(2)中選擇的酶進(jìn)行酶切， 酶切后的四類樣品分別加上不同的接頭以區(qū)分不同樣品，對四個(gè)樣品分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增純 化；回收根據(jù)⑵中選擇的特異性長度片段樣品，將四類樣品按照比例混合，混合時(shí)滿足以 下條件A兩群體比例按照1 1比例混合；B兩親本比例按照1 1比例混合；進(jìn)行DNA測 序，獲得高通量高測序深度的序列標(biāo)簽，使每個(gè)群體樣品測序深度可達(dá)到50倍以上，每個(gè) 親本的測序深度達(dá)到3倍以上。(4)比較兩個(gè)樣品的測序結(jié)果，進(jìn)行性狀關(guān)聯(lián)分析，獲得性狀相關(guān)的多態(tài)性分子標(biāo) 記以及多態(tài)性分子標(biāo)記在參考基因組上的位置和深度圖譜，最終精細(xì)定位性狀相關(guān)的候選 功能基因。圖2為對父母本和兩群體DNA樣品測序后的分析流程示意圖，包括以下步驟(1)通過兩親本測序結(jié)果獲得兩親本序列標(biāo)簽，統(tǒng)計(jì)兩親本之間的多態(tài)性，獲得多 態(tài)性分子標(biāo)記。(2)通過測序獲得兩個(gè)分離群體的序列標(biāo)簽，通過序列標(biāo)簽和目標(biāo)性狀的關(guān)聯(lián)分析，找出性狀相關(guān)的分子標(biāo)記。(3)將性狀相關(guān)標(biāo)記定位回參考基因組上，生成全基因組多態(tài)性標(biāo)記圖譜，定義出 與目標(biāo)性狀緊密連鎖的區(qū)域，獲得區(qū)域內(nèi)與特定性狀相關(guān)的候選基因。不能定位到基因組 上的通過BAC克隆進(jìn)行基因定位。在本發(fā)明實(shí)施例中樣品選擇是經(jīng)鑒定后的分離群體，通過父母本雜交重組排除了 父母本中和性狀無關(guān)的差異，使獲得的標(biāo)記更準(zhǔn)確。對基因組序列酶切分析和長度選擇過程如下(1)分析各類酶組合對參考基因組或參考BAC序列進(jìn)行酶切的結(jié)果；(2)繪制酶切 片段長度分布圖(選取合適的長度片段)，繪制各長度酶切片段在基因組上各染色體上密 度分布圖(看酶切片段的分布均勻性)；(3)選取均勻分布并且數(shù)量滿足標(biāo)記密度的酶切組 合和酶切長度片段。實(shí)施例2基于高通量測序的白菜高密度標(biāo)記開發(fā)和雄性不育性狀基因快速定位包括如下步驟1、如圖3A所示，為模擬Ecorl+Msel兩種酶對白菜基因組參考序列進(jìn)行酶切后 450-500bp長度酶切片段在染色體上的密度分布圖。經(jīng)分析后選擇效率最高的450-500bp 的長度片段，該長度片段能夠均勻分布在基因組所有染色體上。2、如圖3B所示，為模擬Ecorl+Msel兩種酶對白菜基因組參考序列進(jìn)行酶切后全 基因組每100K內(nèi)的450-500bp長度酶切片段數(shù)量分布圖。該長度片段的密度也能夠達(dá)到 設(shè)計(jì)的要求。3、通過上述分析，對白菜基因組酶切參數(shù)評估如下白菜基因組大小507M選擇用于酶切的酶Ecorl+Msel選擇的酶切片段大小450-500該長度片段大小在基因組上的數(shù)量23，932每100K有10個(gè)以上該長度片段標(biāo)記的比率94. 21%密度平均每21，187bp有一個(gè)該長度片段測序深度501.47X該長度片段分布在基因間和內(nèi)含子區(qū)的比率75. 89%該長度片段分布在外顯子區(qū)的比率19. 61%該長度片段分布在重復(fù)區(qū)域的比率4. 49%改長度片段距離最近基因的平均距離1，973bp4、白菜父母本和群體的選擇用雄性不育和可育植株構(gòu)建白菜父母本和群體，以 白菜雄性不育植株作為父本，白菜可育植株作為母本，兩親本購自中國農(nóng)科院蔬菜花卉研 究所，其中雄性不育植株編號為938A，可育植株編號為太NB ；群體為F2群體，對群體可育和 不可育植株進(jìn)行分組，群體1為可育群體，群體2為不可育群體；父本、母本及群體1、群體2 各100株。5、如表1所示，為群體中200個(gè)個(gè)體濃度和稀釋倍數(shù)，稀釋后個(gè)體濃度相等，進(jìn)行 等比例混合。表 1
6、如圖4A所示，為Ecorl+Msel雙酶切白菜兩親本和兩群體DNA后加接頭并進(jìn)行 擴(kuò)增后的電泳圖；其中，1-5分別代表1 群體1 ；2 群體2 ；3 親本1 ；4 親本2 ；5 對照；M IOObp DNA ladder。連接所用接頭為5' -GACGATGAGTCCTGAGTACTCAGGACTCAT-3‘；擴(kuò)增 所用引物為親本1 引物5 ‘ -GACAGATGAGTCCTGAGTAA-3 ‘親本2 引物5 ‘ -GACGGATGAGTCCTGAGTAA-3 ‘
群體 1 引物5 ‘ -GTGG GATGAGTCCTGAGTAA-3 ‘群體2 引物5 ‘ -GTGCGATGAGTCCTGAGTAA-3 ‘7、如圖4B所示，為將上述兩親本和兩群體DNA擴(kuò)增后的樣品進(jìn)行混合后的DNA電 泳圖。M為IOObp DNA ladder，1為兩群體和兩親本按照20 20 1 1比例進(jìn)行混合。8、如圖4C所示，為混合樣品加So 1 exa標(biāo)準(zhǔn)測序接頭(5 ‘ -pGATCGGAAGAGCGG TTCAGCAGGAATGCCGAG-3 ‘和 5 ‘ -ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3 ‘)后截取 500bp-550bp長度片段電泳圖。M為50bp DNA ladder ； 1和2代表500bp_550bp長度片段。9、將截取的500bp_550bpDNA樣品進(jìn)行Solexa測序。10、如表2所示，對測序數(shù)據(jù)分析，獲得的測序標(biāo)簽在分離群體中的數(shù)量分布。第 一列表示所獲得的標(biāo)記在兩分離群體中數(shù)量的比率，第二列表示符合第一列條件的來自父 本的標(biāo)記數(shù)量，第三列表示符合第一列條件來自母本的標(biāo)記數(shù)量。表211、如圖5所示，對測序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，為多態(tài)性標(biāo)記在白菜分離群體中的基因分 型結(jié)果圖。分別顯示在來自父本的多態(tài)性標(biāo)記和來自母本的多態(tài)性標(biāo)記，以及在基因組上 的位置信息。12、如表3所示，為對多態(tài)性標(biāo)記的基因進(jìn)行分析獲得的性質(zhì)相關(guān)候選基因及 interpro 注釋。表3 表3描述了處在標(biāo)簽豐度差異集中區(qū)域的基因分部情況，選取表2中倍數(shù)大于5 的標(biāo)簽，且在基因組上連續(xù)出現(xiàn)5個(gè)標(biāo)簽以上的區(qū)域，定義為“目標(biāo)性狀相關(guān)候選區(qū)域”，然 后對該區(qū)域進(jìn)行基因注釋。其中，第一列為基因注釋獲得的基因名稱，第二列為落在該基 因區(qū)域內(nèi)的差異標(biāo)簽個(gè)數(shù)，第三列為相關(guān)標(biāo)簽的差異倍數(shù)，第四列為基因功能注釋獲得的 Interpro編號，第五列為對Interpro功能注釋的描述。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
權(quán)利要求
基于測序和BSA技術(shù)的性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選方法，其基于分離群體分組分析法和經(jīng)過降低基因組復(fù)雜度后的高通量測序法，對分離群體進(jìn)行標(biāo)記開發(fā)和性狀關(guān)聯(lián)分析，包括如下步驟1)分別制備兩分離群體DNA樣品，每個(gè)群體中的個(gè)體樣品DNA等比例混合；2)對分離群體基因組的復(fù)雜性進(jìn)行降低處理，獲得復(fù)雜性降低的DNA樣品；3)將復(fù)雜性降低后的分離群體DNA等比混合，利用高通量測序方式進(jìn)行測序；4)比較兩組群體DNA樣品測序結(jié)果，獲得序列標(biāo)記，根據(jù)序列標(biāo)記豐度差異，檢測出與性狀關(guān)聯(lián)的標(biāo)記。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該分離群體是植物、動物或微生物。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，分離群體基因組DNA復(fù)雜性降低方法是任何 有選擇性的減少基因組復(fù)雜度的方法，包括限制性內(nèi)切酶酶切產(chǎn)物PCR擴(kuò)增或酶切產(chǎn)物選 擇性吸附。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，分離群體基因組DNA復(fù)雜性降低方法包括如 下步驟1)分別制備兩分離群體DNA樣品和兩親本DNA樣品，每個(gè)群體中的個(gè)體樣品DNA等比 例混合；2)相同酶分別酶切分離群體DNA樣品和兩親本DNA樣品；3)用不同接頭分別鏈接到四類樣品的酶切產(chǎn)物上，分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增純化；回收特異 性長度片段樣品，將四類樣品按照比例混合，混合時(shí)滿足以下條件A兩群體樣品比例按照 1 1;B兩親本樣品比例按照1 1;進(jìn)行測序；4)比較兩親本測序結(jié)果，找出多態(tài)性標(biāo)記，比較兩組群體DNA樣品測序結(jié)果，找出性狀 相關(guān)的分子標(biāo)記及其親本中的來源。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟2)使用的限制性內(nèi)切酶滿足以下 條件a)酶在基因組上的酶切位點(diǎn)分布盡可能均勻；b)選擇特定長度的酶切片段能夠保證序列標(biāo)簽的數(shù)量；c)選擇特定長度的酶切片段避免落在基因組高度重復(fù)區(qū)。
6.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟2)使用一種或者兩種酶酶切。
7.如權(quán)利要求1 6任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述分離群體為兩個(gè)經(jīng)鑒定的性 狀分離群體，包括F2、BCU DH目標(biāo)性狀分離的群體，其通過父母本雜交重組排除了父母本 中和目標(biāo)性狀無關(guān)的差異。
8.如權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于，其中步驟4)還包括將分子標(biāo)記定位到 基因組或BAC文庫。
9.如權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于，其中步驟4)還包括通過性狀關(guān)聯(lián)的高 密度分子標(biāo)記獲得性狀相關(guān)的候選功能基因。
10.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，其中步驟4)還包括確定序列標(biāo)簽來自父本 或者母本。
11.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述每個(gè)群體樣品測序深度為50倍以上， 所述每親本測序深度為3倍以上。
12.如權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述步驟4)比較兩組群體DNA樣品測 序結(jié)果包括特異性長度片段多態(tài)性和單核苷酸多態(tài)性分子標(biāo)記。
全文摘要
本發(fā)明提供一種性狀緊密關(guān)聯(lián)的DNA分子標(biāo)記篩選方法，其核心技術(shù)是將超級分離群體分組分析法(BSA)和高通量測序技術(shù)相結(jié)合鑒定性狀相關(guān)的DNA分子標(biāo)記。利用生物信息學(xué)方法對不同物種基因組或BAC序列等數(shù)據(jù)進(jìn)行參數(shù)訓(xùn)練，找出最優(yōu)的標(biāo)記測序方案，提高標(biāo)記開發(fā)的效率。對分離群體分組測序結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，檢測出和性狀關(guān)聯(lián)的分子標(biāo)記并定位回基因組或BAC，通過高密度性狀關(guān)聯(lián)分子標(biāo)記精細(xì)定位候選功能基因。該方法比較傳統(tǒng)方法的優(yōu)點(diǎn)在于通量大幅度提高，成本大幅度降低?？梢詫Υ笕后w進(jìn)行標(biāo)記定位，可直接確定標(biāo)記與目標(biāo)性狀之間的連鎖關(guān)系，關(guān)聯(lián)分析的可靠性及準(zhǔn)確性高，主要應(yīng)用于作物分子育種等標(biāo)記開發(fā)和基因定位方面。
文檔編號C12Q1/68GK101886132SQ20101022540
公開日2010年11月17日 申請日期2010年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月15日
發(fā)明者王曉武, 鄭洪坤 申請人:北京百邁客生物科技有限公司