專利名稱：鐮刀菌byb2及其在微生物發(fā)酵制備阿拉伯膠酶中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株新的阿拉伯膠酶產(chǎn)生菌株一鐮刀菌(Fusarium sp. )BYB2，及其 在微生物發(fā)酵制備L-阿拉伯糖中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
L-阿拉伯糖屬于五碳醛糖，多以阿拉伯聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、阿拉伯糖基半乳 糖體及類似于高等植物半纖維的形式存在。L-阿拉伯糖是一種低熱量的甜味劑，也是重要 的藥物中間體，并且可用于生化領(lǐng)域中細(xì)菌培養(yǎng)基的制備以及香料合成等，應(yīng)用范圍相當(dāng) 廣。但是由于L-阿拉伯糖現(xiàn)有的生產(chǎn)工藝復(fù)雜，生產(chǎn)成本高，導(dǎo)致價(jià)格居高不下，阻礙了其 在食品或醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用。目前，L-阿拉伯糖的制備方法有化學(xué)合成法和酸解法?；瘜W(xué)合成法步驟多，工藝 復(fù)雜，原材料昂貴。酸解法對(duì)反應(yīng)設(shè)備的要求較高，同時(shí)產(chǎn)生的混合糖成分復(fù)雜，后續(xù)分離 純化工藝的難度較大。日本三和興產(chǎn)株式會(huì)社已于2003年在中國申請了“通過酸水解生產(chǎn) L-阿拉伯糖的方法”的專利，在一定程度上限制了我國采用該技術(shù)生產(chǎn)L-阿拉伯糖的產(chǎn)業(yè) 化應(yīng)用。L-阿拉伯糖還可以采用酶解法，就是以阿拉伯膠為原料，采用微生物產(chǎn)生的水解酶 進(jìn)行水解，其具有選擇性強(qiáng)，后序處理相對(duì)簡單，反應(yīng)條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，更關(guān)鍵的是它可以 避開日本傳統(tǒng)酸解法制備的專利保護(hù)，是我國生產(chǎn)L-阿拉伯糖的工業(yè)化應(yīng)用的一條途徑。已見文獻(xiàn)報(bào)道的酶法制備L-阿拉伯糖都以廢棄農(nóng)產(chǎn)品為原料，往往存在L-阿拉 伯糖的產(chǎn)率低、分離純化困難等問題。阿拉伯膠是一種來源廣泛的樹膠，其L-阿拉伯糖的 含量高達(dá)30%以上，是自然界中L-阿拉伯糖含量最高的物質(zhì)，如以阿拉伯膠為原料，酶解 阿拉伯膠生產(chǎn)L-阿拉伯糖的效率將明顯提高。酶法水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖有著底 物專一性強(qiáng)、產(chǎn)物得率高、反應(yīng)條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，適用于高純度L-阿拉伯糖的大量制備。目 前在國內(nèi)外還未見有關(guān)采用酶解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖的報(bào)道。采用酶解阿拉伯膠制 備L-阿拉伯糖的技術(shù)關(guān)鍵就是獲得活力高、性能穩(wěn)定的阿拉伯膠酶，而微生物是獲得阿拉 伯膠酶的主要來源，適合酶的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。因此，篩選產(chǎn)酶活力高、生長繁殖快、營養(yǎng) 要求低的微生物菌株發(fā)酵產(chǎn)酶，并用阿拉伯膠酶來水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖具有重 要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一株阿拉伯膠酶產(chǎn)生菌株——鐮刀菌(Fusarium sp. )BYB2，及其在制 備L-阿拉伯糖中的應(yīng)用，較好地克服了 L-阿拉伯糖現(xiàn)有的生產(chǎn)工藝復(fù)雜，純度低、生產(chǎn)成 本高等缺點(diǎn)。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一株阿拉伯膠酶產(chǎn)生菌——鐮刀菌(Fusarium sp. )BYB2，保藏于中國典型培養(yǎng) 物保藏中心，地址中國，武漢，武漢大學(xué)，430072，保藏編號(hào)CCTCC NO =M 2010087，保藏日 期:2010年4月19日。
所述鐮刀菌BYB2的菌落特征如下涂布或劃線接種于平板培養(yǎng)基上生長迅速， 30°C培養(yǎng)3 5d，長出粉質(zhì)、粉白色、淺粉色至肉色、略帶有紫色、高為3 5mm的菌落，且菌 落在形成初期呈突起絮狀，菌絲白色質(zhì)密。所述鐮刀菌BYB2的孢子特征如下小型分生孢 子為單胞、卵形、著生方式為單生、產(chǎn)孢細(xì)胞為簡單瓶梗，且常在瓶梗頂端聚成球團(tuán)；大型分 生孢子為鐮刀形、少許彎曲、分隔數(shù)多為3分隔。本發(fā)明所述鐮刀菌BYB2由浙江省杭州市下城區(qū)浙江工業(yè)大學(xué)校園金合歡 (Acacia farnesiana)樹下土壤中分離和篩選得到野生菌株，再經(jīng)紫外線照射誘變處理獲得。野生菌株的分離方法為在采集的土壤中加入阿拉伯膠進(jìn)行微生物富集培養(yǎng)，使 得土壤中能以阿拉伯膠為唯一碳源生長的微生物數(shù)量增加，再將富集培養(yǎng)物稀釋后涂布于 以阿拉伯膠為唯一碳源的平板培養(yǎng)基上，30°C培養(yǎng)至菌落數(shù)量不再增加，挑取平板上生長 較大的菌落接種于斜面培養(yǎng)基上，30°C培養(yǎng)3d，將進(jìn)一步搖瓶復(fù)篩。用接種環(huán)分別挑取初篩的各個(gè)菌株新鮮斜面孢子2環(huán)，接入液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中， 30°C,200r/min振蕩條件下發(fā)酵培養(yǎng)3d。將發(fā)酵液用濾紙過濾去除菌絲體后，取清液測酶 活力，篩選出產(chǎn)酶活力最高的菌株。所述的平板培養(yǎng)基和斜面培養(yǎng)基組成相同，終濃度組成為阿拉伯膠25g/L，NaNO3 3g/L，K2HPO4 lg/L，MgSO4 · 7H20 0. 5g/L，KCl 0. 5g/L，F(xiàn)eSO4 · 7H20 0. 01g/L，瓊脂 20g/L，溶 劑為水，pH 6。所述的搖瓶篩選產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25g/L，NaN033g/L, K2HPO4 lg/L, MgSO4 · 7H20 0. 5g/L, KCl 0. 5g/L, FeSO4 · 7H20 0. 01g/L，溶劑為水，pH 6。紫外線照射野生菌株誘變育種的條件為紫外照射功率為15W，照射距離為30cm， 照射時(shí)間為5 lOmin，照射次數(shù)為1 3次。本發(fā)明還涉及所述的鐮刀菌BYB2在發(fā)酵制備阿拉伯膠酶中的應(yīng)用。所述的應(yīng)用 為將鐮刀菌BYB2菌種接種至以阿拉伯膠為唯一碳源的適用于鐮刀菌的常規(guī)液體產(chǎn)酶培 養(yǎng)基中，25 35°C培養(yǎng)45 55h，獲得含有阿拉伯膠酶的發(fā)酵液。所得發(fā)酵液經(jīng)過濾或離 心除去菌絲體的清液為粗酶液，可以直接應(yīng)用于水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖；也可以按 照常規(guī)生化方法進(jìn)行酶的分離純化，例如硫酸銨鹽析、離子交換層析或凝膠過濾層析等方 法，得到純化后的阿拉伯糖酶應(yīng)用于L-阿拉伯糖的制備。所述菌株在產(chǎn)酶培養(yǎng)前，通常需要先經(jīng)斜面培養(yǎng)活化，然后經(jīng)種子擴(kuò)大培養(yǎng)、獲得 種子液再接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行產(chǎn)酶培養(yǎng)。所述的斜面培養(yǎng)基終濃度組成為馬鈴薯150 250g/L (馬鈴薯去皮，切成小塊加 水，煮沸30min，用紗布過濾去渣)，蔗糖或葡萄糖15 25g/L，瓊脂18 22g/L，溶劑為水， pH 5 6。所述的液體種子培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠20 30g/L，酵母浸出粉3 10g/L, K2HPO4O. 5 1. 5g/L, MgSO4 · 7Η20 0· 5 lg/L，溶劑為水，pH 5. 5 6. 5。所述的液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25 35g/L，(NH4)2SO4 5 IOg/ L, K2HPO4 0. 5 1. 5g/L, MgSO4 · 7Η20 0· 5 lg/L, KC10. 5 lg/L, FeSO4 · 7H20 0. 01 0. 03g/L, H3BO3 0. 01 0. 03g/L, pH 5· 5 7。具體的，所述應(yīng)用方法如下
(1)將鐮刀菌BYB2菌種接種于斜面培養(yǎng)基，于25 30°C培養(yǎng)24 48h，得到活 化后的鐮刀菌菌種；所述的斜面培養(yǎng)基終濃度組成為馬鈴薯150 250g/L，蔗糖或葡萄糖 15 25g/L，瓊脂18 22g/L，溶劑為水，pH 5 6 ；(2)將步驟(1)活化培養(yǎng)后的鐮刀菌BYB2孢子接種至液體種子培養(yǎng)基中，于25 350C、150 250r/min振蕩條件下培養(yǎng)10 20h，得到種子液；所述液體種子培養(yǎng)基終濃度 組成為阿拉伯膠20 30g/L，酵母浸出粉3 10g/L, K2HPO4 0. 5 1. 5g/L，MgSO4 · 7H20 0. 5 lg/L，溶劑為水，pH 5. 5 6. 5 ；(3)將步驟(2)種子液以 10%的體積比的接種量，移種到液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基 中，于25 35°C、150 250r/min振蕩條件下培養(yǎng)45 55h，得到含阿拉伯膠酶的發(fā)酵 液；所述液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25 35g/L，(NH4) 2S045 10g/L，K2HPO4 0· 5 1. 5g/L, MgSO4 · 7H20 0· 5 lg/L, KCl 0· 5 lg/L, FeSO4 · 7Η200· 01 0. 03g/L, H3BO3 0. 01 0. 03g/L, pH 5· 5 7 ；(4)將步驟(3)含阿拉伯膠酶的發(fā)酵液過濾或者離心(4000 8000r/min，10 20min)，分離除去菌絲體，所得清液即為阿拉伯膠酶的粗酶液。本發(fā)明還涉及所述的鐮刀菌BYB2在水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖的應(yīng)用。具體的，所述的應(yīng)用為以鐮刀菌BYB2經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)獲得的阿拉伯膠酶為催化劑， 以阿拉伯膠為反應(yīng)底物，在PH 4 8的緩沖溶液中、于35 60°C下進(jìn)行水解反應(yīng)，制得所 述L-阿拉伯糖。本發(fā)明中，測定阿拉伯膠酶活力的方法是在IOOmL三角瓶中，加入20mL濃度為 5g/L的阿拉伯膠底物溶液和ImL待測酶液，35°C、200r/min振蕩酶解30min后，立即取ImL 酶解液于帶刻度的試管中，加入ImL 3，5-二硝基水楊酸溶液(DNS)，置于沸水浴中5min后 用流水冷卻，再定容至10mL，測波長490nm處的吸光值，根據(jù)L-阿拉伯糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線來計(jì)算
產(chǎn)生的還原糖量。阿拉伯膠酶的酶活力單位定義為在一定的反應(yīng)條件下，Imin產(chǎn)生1 μ g還原糖所 需的酶量(mL)作為一個(gè)酶活力單位(U)。本發(fā)明提供了產(chǎn)阿拉伯膠酶的鐮刀菌BYB2，其有益效果主要體現(xiàn)在(1)本發(fā)明 的鐮刀菌BYB2營養(yǎng)要求簡單、容易培養(yǎng)；(2)鐮刀菌BYB2產(chǎn)生的阿拉伯膠酶為胞外酶，無 需細(xì)胞破碎即可獲得；(3)鐮刀菌BYB2產(chǎn)阿拉伯膠酶活性高，在優(yōu)選的發(fā)酵條件下，未經(jīng)分 離純化的粗酶液活力可達(dá)231. 6U/mL ； (4)鐮刀菌BYB2產(chǎn)阿拉伯膠酶水解阿拉伯膠的反應(yīng) 條件溫和，作用時(shí)間較短，產(chǎn)物得率高。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此實(shí)施例1 產(chǎn)阿拉伯膠酶微生物的富集、分離和篩選在250mL三角瓶中加入45mL搖瓶篩選培養(yǎng)基，滅菌后再加入5g 土樣，于30°C、 200r/min的振蕩條件下培養(yǎng)5d，若培養(yǎng)過程中因水份蒸發(fā)使得培養(yǎng)基體積減小，則補(bǔ)充無 菌水至原體積。取上述培養(yǎng)液5mL接種于另一只滅菌后裝有45mL篩選培養(yǎng)基的三角瓶中， 重復(fù)上述培養(yǎng)過程，使得能以阿拉伯膠為唯一碳源生長的微生物數(shù)量增加。
將富集培養(yǎng)液用無菌水稀釋后涂布于平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)皿于30°C的生化培養(yǎng)箱 中培養(yǎng)至菌落數(shù)不再增加。觀察平板上的菌落，分別挑取顏色和形態(tài)不同的菌落接種至斜 面，置于30°C培養(yǎng)3d，將進(jìn)一步搖瓶復(fù)篩。用接種環(huán)分別挑取初篩的各個(gè)菌株新鮮斜面孢子2環(huán)，接入液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中， 30°C、200r/min振蕩條件下發(fā)酵培養(yǎng)3d。將發(fā)酵液于4500r/min下離心15min后取上清液 測酶活力，篩選出產(chǎn)酶活力最高的菌株ZHB-306，酶活力為25. 8U/mL。所述的平板培養(yǎng)基和斜面培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25g/L，NaNO3 3g/L， K2HPO4 lg/L，MgSO4 · 7H20 0. 5g/L，KCl 0. 5g/L，F(xiàn)eSO4 · 7H20 0. 01g/L，瓊脂 20g/L，溶劑為 水，pH 6。所述的搖瓶篩選培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25g/L NaNO3 3g/L, K2HPO4 lg/L, MgSO4 · 7H20 0. 5g/L, KCl 0. 5g/L, FeSO4 · 7H20 0. 01g/L，溶劑為水，pH 6。對(duì)篩選獲得的菌株ZHB-306進(jìn)行鑒定，將其命名為鐮刀菌(Fusar iumsp.) ZHB-306。實(shí)施例2 高產(chǎn)阿拉伯膠酶菌株的誘變育種對(duì)實(shí)施例1篩選得到的鐮刀菌ZHB-306菌株用紫外線照射誘變，篩選產(chǎn)阿拉伯膠 酶活力有所提高的突變菌株。紫外線照射誘變方法將菌株ZHB-306斜面菌種活化后，刮取孢子到含50mL無菌 水的三角瓶中，室溫振蕩20 30min，制成孢子懸液。在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板對(duì)孢子計(jì) 數(shù)，控制孢子數(shù)量為IXlO8個(gè)/mL左右。在紅光下，分別取2mL上述孢子懸液、一枚無菌回 形針至直徑6cm的6只培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿置于磁力攪拌器上，在預(yù)熱約20min的紫外燈下 分別照射5 lOmin。取0. 5mL上述照射處理后的孢子液，作適當(dāng)稀釋后分別移取0. 2mL涂 布平板。以同樣操作，將未經(jīng)紫外線處理的孢子液稀釋涂平板作為對(duì)照，以計(jì)算致死率。用 黑布包裹所有培養(yǎng)皿，30°C培養(yǎng)3d。挑取經(jīng)紫外線照射處理后致死率在90%以上的菌落轉(zhuǎn) 接斜面，按實(shí)施例1所述的方法，對(duì)突變菌株進(jìn)行篩選，最后獲得產(chǎn)阿拉伯膠酶活力有所提 高的菌株ZHB05F，其產(chǎn)酶活力為49. 9U/mL，高于原始菌株185%。紫外燈的功率15W，照射距離為30cm。所述的平板培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基和產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成均與實(shí)施例1相同。對(duì)誘變獲得的鐮刀菌ZHB05F菌株重新編號(hào)為鐮刀菌BYB2，提交中國典型培養(yǎng)物 保藏中心，保藏號(hào)CCTCC NO =M 2010087，保藏日期2010年4月19日。實(shí)施例3 鐮刀菌BYB2發(fā)酵制備阿拉伯膠酶的方法以鐮刀菌BYB2(CCTCC NO =M 2010087)為菌種，經(jīng)過種子制備方法、產(chǎn)酶培養(yǎng)基組 成和發(fā)酵條件優(yōu)化后，阿拉伯膠酶的制備方法如下(1)將冷凍干燥或試管斜面保藏的鐮刀菌BYB2菌種接種于斜面培養(yǎng)基，斜面于 30°C生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d。所述的斜面培養(yǎng)基終濃度組成為馬鈴薯200g/L(馬鈴薯去皮， 切成小塊加水，煮沸30min，用紗布過濾去渣)，蔗糖20g/L，瓊脂20g/L，溶劑為水，pH 5 6。(2)用接種環(huán)挑取步驟(1)活化培養(yǎng)后的鐮刀菌BYB2孢子至液體種子培養(yǎng)基中， 液體種子培養(yǎng)基于30°C、200r/min振蕩條件下培養(yǎng)14h，得到種子液；所述液體種子培養(yǎng)基 終濃度組成為阿拉伯膠25g/L，酵母浸出粉10g/L, K2HPO4 lg/L, MgSO4 · 7H20 0. 5g/L，pH6. 0 ；(3)將步驟(2)種子液以9%的體積比接種量接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基，30°C、200r/ min振蕩條件下培養(yǎng)48h，得到含阿拉伯膠酶的發(fā)酵液；所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基終濃度組成 為阿拉伯膠 30g/L，(NH4)2SO4 8g/L，玉米粉 5g/L，K2HPO4 lg/L，MgSO4 · 7H20 0. 5g/L，KCl 0. 5g/L, FeSO4 · 7H20 0. Olg/L, H3BO3 0. 01/L, pH 6。(4)將步驟(3)的含阿拉伯膠酶發(fā)酵液于5000r/min、4°C條件下離心20min，傾倒 出上清液，棄去沉淀物，所得清液即為阿拉伯膠酶粗酶液，酶活力可達(dá)231. 6U/mL。實(shí)施例4 瓊膠寡糖的制備 用pH為4、濃度為0. 2mol/L的Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液配制3g/L的阿拉伯膠底物 溶液。15mL試管中裝4mL阿拉伯膠底物溶液，加入0. 2mL實(shí)施例3阿拉伯膠酶粗酶液，保鮮 膜封口后于60°C水浴下酶解反應(yīng)30min，可得未經(jīng)分離純化的L-阿拉伯糖。用高效液相色 譜法(HPLC)檢測得L-阿拉伯糖濃度為530. 6mg/L。按阿拉伯膠中L-阿拉伯糖的含量為 30%計(jì)算，L-阿拉伯糖得率為59%。
權(quán)利要求
1.一株阿拉伯膠酶產(chǎn)生菌一鐮刀菌(Fusarium sp.)BYB2，保藏于中國典型培養(yǎng)物保 藏中心，地址中國，武漢，武漢大學(xué)，430072，保藏編號(hào)CCTCC NO =M 2010087 ；保藏日期 2010年4月19日。
2.如權(quán)利要求1所述的鐮刀菌BYB2在微生物發(fā)酵制備阿拉伯膠酶中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的應(yīng)用為將鐮刀菌BYB2菌種接種至以 阿拉伯膠為唯一碳源的適用于鐮刀菌的液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，25 35°C培養(yǎng)45 55h，獲得 含有阿拉伯膠酶的發(fā)酵液。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用如下(1)將鐮刀菌BYB2菌種接種于斜面培養(yǎng)基，于25 30°C培養(yǎng)24 48h，得到活化后的 鐮刀菌菌種；所述的斜面培養(yǎng)基終濃度組成為馬鈴薯150 250g/L，蔗糖或葡萄糖15 25g/L，瓊脂18 22g/L，溶劑為水，pH 5 6 ；(2)將步驟(1)活化培養(yǎng)后鐮刀菌BYB2孢子接種至液體種子培養(yǎng)基中，于25°C 35°C、150 250r/min振蕩條件下培養(yǎng)10 20h，得到種子液；所述液體種子培養(yǎng)基終濃度 組成為阿拉伯膠20 30g/L，酵母浸出粉3 10g/L, K2HPO4 0. 5 1. 5g/L，MgSO4 · 7H200.5 lg/L，溶劑為水，pH 5. 5 6. 5 ；(3)將步驟(2)種子液以 10%的體積比的接種量，移種到液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，于 25 35°C、150 250r/min振蕩條件下培養(yǎng)45 55h，得到含阿拉伯膠酶的發(fā)酵液；所述 液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成為阿拉伯膠25 35g/L，(NH4)2SO4 5 10g/L，K2HPO4 0. 5 1.5g/L, MgSO4 · 7Η20 0· 5 lg/L, KCl 0· 5 lg/L, FeSO4 · 7H20 0. 01 0. 03g/L, H3BO3 0. 01 0. 03g/L, pH 5· 5 7 ；(4)將步驟(3)含阿拉伯膠酶的發(fā)酵液經(jīng)過濾或者離心，分離除去菌絲體，所得清液即 為阿拉伯膠酶的粗酶液。
5.如權(quán)利要求1所述的鐮刀菌ΒΥΒ2在水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖中的應(yīng)用。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述的應(yīng)用為以鐮刀菌ΒΥΒ2經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng) 獲得的阿拉伯膠酶為催化劑，以阿拉伯膠膠為反應(yīng)底物，在PH 4 8的磷酸緩沖液中、于 35 60°C下進(jìn)行水解反應(yīng)，制得所述L-阿拉伯糖。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于所述阿拉伯膠酶由如下方法獲得將鐮刀菌 BYB2菌種接種至以阿拉伯膠為唯一碳源的適用于鐮刀菌的液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，25 35°C 培養(yǎng)45 55h，獲得含有阿拉伯膠酶的發(fā)酵液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株新的阿拉伯膠酶產(chǎn)生菌株——鐮刀菌(Fusarium sp.)BYB2，及其在發(fā)酵制備L-阿拉伯糖中的應(yīng)用。所述鐮刀菌BYB2保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)CCTCCNoM 2010087，保藏日期2010年4月19日。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在(1)本發(fā)明的鐮刀菌BYB2營養(yǎng)要求簡單、容易培養(yǎng)；(2)鐮刀菌BYB2產(chǎn)生的阿拉伯膠酶為胞外酶，無需細(xì)胞破碎即可獲得；(3)鐮刀菌BYB2產(chǎn)阿拉伯膠酶活性高，在優(yōu)選的發(fā)酵條件下，未經(jīng)分離純化的粗酶液活力可達(dá)231.6U/mL；(4)鐮刀菌BYB2產(chǎn)阿拉伯膠酶水解阿拉伯膠的反應(yīng)條件溫和，作用時(shí)間較短，產(chǎn)物得率高。
文檔編號(hào)C12N9/24GK101993826SQ201010259769
公開日2011年3月30日 申請日期2010年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月23日
發(fā)明者應(yīng)國清, 廖青青, 易喻, 梅建鳳, 王鴻, 陳建澍 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)