專利名稱：對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種能降解玉米赤霉烯酮的菌株及其應(yīng)用，尤其是一種對(duì)玉米赤霉 烯酮毒素降解的菌株及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ΖΕΑ)是由鐮刀菌產(chǎn)生的一種類雌激素樣真菌毒 素，其化學(xué)名為6-(10_羥基-6-氧基-十一碳烯基)β-雷鎖酸內(nèi)酯，廣泛存在于霉變 的玉米、高粱、小麥、燕麥、大麥等谷類作物以及奶制品中。產(chǎn)生玉米赤霉烯酮最常見 菌屬是禾谷鐮刀菌，此外為三線鐮刀菌、木賊鐮刀菌、雪腐鐮刀菌、粉紅鐮刀菌等。研 究表明，玉米赤霉烯酮具有很強(qiáng)的生殖毒性，能降低懷孕動(dòng)物的胚胎成活率及新生胎兒 的出生重，導(dǎo)致動(dòng)物的生產(chǎn)性能下降；而且該毒素，對(duì)肝臟及肝細(xì)胞具有強(qiáng)烈的毒害作 用，具有免疫抑制，對(duì)相關(guān)腫瘤的發(fā)生發(fā)展起促進(jìn)作用。由于飼料和食品生產(chǎn)中所用的谷物(如玉米、小麥)是ZEA產(chǎn)生的最好基質(zhì)，所 以谷物在田間、收獲過程、收獲后儲(chǔ)藏期間以及飼料和食品成品儲(chǔ)存、使用等諸多環(huán)節(jié) 中，都有可能受到ZEA的污染。王若軍(2003)對(duì)全國飼料原料及配合飼料檢測(cè)結(jié)果顯 示，玉米中ZEA檢出率達(dá)100%，含量范圍4.40 368.13 μ g/kg，平均104.99 μ g/kg ； 蛋白質(zhì)飼料中檢出率達(dá)92.9%，含量范圍0 476.0μ§/1^，平均110.0 μ g/kg ；配合飼料 中檢出率達(dá)100%，含量范圍39.22 230.30 μ g/kg，平均83.96 μ g/kg。由于玉米赤霉烯酮毒素在谷物中普遍存在，并且具有很大的危害性，因此找到 一種合適的能去除或降低該毒素毒性的方法顯得尤為重要。目前對(duì)ZEA毒素采用的脫 毒處理方法很多，包括石灰水浸泡法、氯化法、去皮法、脫胚去毒法、化學(xué)處理法、使 用吸附劑、脫霉劑等，雖然所有的這些處理都在一定程度上減輕毒素污染，但其最大的 不足是去毒效果有限、可能造成重要營養(yǎng)物質(zhì)的丟失、成本較高等。因此該領(lǐng)域有關(guān) 人士認(rèn)為脫毒的最佳方法是生物脫毒，即在溫和條件下，不用有害的化學(xué)藥品，不會(huì)造 成營養(yǎng)價(jià)值的丟失，也不會(huì)降低適口性，而使玉米赤霉烯酮毒素脫毒。由于微生物數(shù)量 大、種類多，基因資源豐富，降解有機(jī)污染物的潛力很大，幾乎所有導(dǎo)致環(huán)境污染的有 機(jī)物都能被微生物所分解，而且干凈徹底、無二次污染。因此，微生物去毒是目前消除 玉米赤霉烯酮毒素污染的最好辦法。我國是一個(gè)植物病害的重發(fā)區(qū)，而且在農(nóng)產(chǎn)品的晾曬和儲(chǔ)備方面的設(shè)備和技術(shù) 還是比較落后，這就造成我國農(nóng)產(chǎn)品中的毒素含量偏高，毒素的存在除了嚴(yán)重危害糧食 的產(chǎn)量和品質(zhì)，對(duì)人畜的健康，造成嚴(yán)重威脅以外，還限制著我國農(nóng)產(chǎn)品的出口貿(mào)易。 對(duì)于毒素的處理國內(nèi)還沒有切實(shí)可行的方法，市場(chǎng)上一些去毒素產(chǎn)品如天然霉菌毒 素吸附劑，微生物去毒劑等也是從國外進(jìn)口的，進(jìn)口產(chǎn)品的高昂價(jià)格阻礙了這些產(chǎn)品的 廣泛應(yīng)用。綜上所述，為了保障人們的食品安全和身體健康，并保證農(nóng)產(chǎn)品的順利出口， 有必要分離篩選高效降解玉米赤霉烯酮的菌株，研究其生物學(xué)特性，降解特性以及對(duì)玉米赤霉烯酮的解毒機(jī)理，并且把降解菌株和適當(dāng)?shù)牟牧辖Y(jié)合，選擇合適的劑型，制成霉 菌去毒劑，進(jìn)一步研究霉菌毒素去毒劑作為飼料添加劑和植物抑菌去毒劑的去毒效果。 最終為解決飼料中毒素污染問題，提高糧食的使用效率，保證畜牧業(yè)的安全生產(chǎn)，并對(duì) 糧食產(chǎn)量和食品質(zhì)量安全控制起到很大的推動(dòng)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)糧食生產(chǎn)和飼料加工和保存過程中玉米赤霉烯酮毒素 廣泛污染的問題，開發(fā)研制出能對(duì)玉米赤霉烯酮降解的菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一株對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株，其特征在 于該菌株的保藏號(hào)為CCTCC NO: M2010053,其生物學(xué)特性為菌株在營養(yǎng)肉汁瓊脂 平板上，30°C，培養(yǎng)24h:菌體呈桿狀，0.68 μ mX 2.13 3.22 μ m，革蘭氏染色陽性； 芽孢橢圓形，中生，孢囊不膨大；培養(yǎng)48h:菌落乳白色，干燥，不規(guī)則，扁平，不透 明，邊緣不整齊；能利用的碳源有甘油、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、葡萄糖、果 糖、甘露糖、肌醇、甘露醇、山梨醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、苦杏仁甙、七葉靈、柳 醇、纖維二糖、麥芽糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖、淀粉、糖原，不能利 用的碳源有甘油、赤癬醇、D-阿拉伯糖、L-木糖、阿東醇、β-甲基-D-木糖苷、半 乳糖、山梨糖、鼠李糖、衛(wèi)茅醇、α-甲基-D-甘露糖苷、N-乙酰-葡糖胺、熊果甙、 菊糖、松三糖、木糖醇、龍膽二糖、D-松二糖、D-來蘇糖、D-塔格糖、D-巖藻糖、 L-巖藻糖、D-阿拉伯糖醇、L-阿拉伯糖醇、葡萄糖酸鹽、2-酮基-葡萄糖酸鹽、5-酮 基_葡萄糖酸鹽。該菌株16S rDNA的Genbank登陸號(hào)為HM372880。一種上述能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于a)將菌株原種在培養(yǎng)皿上活化，并測(cè)定降解性能，接種于試管斜面上獲得試管 種備用；b)將試管種置于含有種子培養(yǎng)基的搖瓶中振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期，獲得菌種；c)將上述培養(yǎng)好的菌種接種入含有種子培養(yǎng)基的種子罐，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期， 獲得種子液； d)將獲得的種子液接種入含有發(fā)酵培養(yǎng)基的生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)，出罐形成能對(duì)玉 米赤霉烯酮毒素降解的液體菌劑。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中所述的種子培養(yǎng)基由下列組分 按照體積比組成的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨0.5%，牛肉膏3%，NaCl 0.5%,種子培養(yǎng) 基的pH為7.0 7.2;所述的發(fā)酵培養(yǎng)基由下列組分按照體積比組成葡萄糖1.0%， (NH4)2SO4 0.1%, K2HPO4 0.2%, MgSO4 0.02%, NaCl 0.01%, CaCO3 0.3%,蛋白胨 0.05%,蒸餾水適量；發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為7.2 7.5。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中所述的種子培養(yǎng)基需要121°C 高壓濕熱滅菌后冷卻至30 35°C使用；所述的菌種按種子罐中種子培養(yǎng)基的10%接種量 接種入種子罐；所述的種子液按生產(chǎn)罐中發(fā)酵培養(yǎng)基的10%接種量接種入生產(chǎn)罐。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中在種子罐的種子培養(yǎng)和生產(chǎn)罐 的發(fā)酵培養(yǎng)過程中無菌空氣的通氣量為1 0.6 1.2，攪拌速度為180 240轉(zhuǎn)/分，培 養(yǎng)溫度為30 35°C，它們的培養(yǎng)時(shí)間分別為48 60小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后獲得液體菌劑，液體菌劑中菌體數(shù)量至少達(dá)到IO9個(gè)/ml。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中將所述的液體菌劑稀釋后噴施 于到谷物中，降解谷物中的玉米赤霉烯酮毒素，稀釋后的液體菌劑中菌體數(shù)量至少達(dá)到 IO7 個(gè)/ml。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中將所述的液體菌劑與采用泥炭 或粘土吸附劑按1 4的重量比吸附，形成固體菌劑。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中所述的吸附劑為泥炭或粘土。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中在谷物中按照重量比5%加入 固體菌劑均勻混合，降解谷物中的玉米赤霉烯酮毒素；或在飼料中按照重量比5%加入 固體菌劑均勻混合，降解飼料中的玉米赤霉烯酮毒素。在能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用中所述的谷物為玉米，或小麥， 或大麥，或稻谷，或高粱，或小米。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于利用保藏號(hào)為CCTCC NO M2010053的菌株降解玉米赤 霉烯酮毒素，在解決毒素污染的過程中，不存在二次污染，從而提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，確 保人畜的食用安全；使用保藏號(hào)為CCTCC NO : M2010053的菌株生產(chǎn)降解玉米赤霉烯 酮毒素的各種制劑，具有生產(chǎn)使用成本低，使用安全。


圖1是ZDS-I液體菌劑在含有毒素的液體培養(yǎng)基中對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的 效果圖；圖2是是ZDS-I固體制劑在固體飼料中對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的效果圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1Bacillus sp.ZDS-1 的獲得從江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院的玉米地里采集土樣，在實(shí)驗(yàn)室中用玉米赤霉烯酮毒素進(jìn) 行多次傳代富集培養(yǎng)(30°C，每周傳代一次)，得到能夠降解玉米赤霉烯酮毒素的菌懸 液，把菌懸液在LB培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布培養(yǎng)(30°C，3天)，在平板上挑取不同的菌落， 一一驗(yàn)證對(duì)玉米赤霉烯酮毒素的降解效果，最終獲得能夠降解玉米赤霉烯酮毒素的菌 株，并將它定義為Bacillus sp.ZDS-1，加入甘油，在_70°C冰箱保存。通過測(cè)定Bacillussp.ZDS-1 的生理生化特性，克隆Bacillus sp.ZDS-1 的 16SrDNA 序列并對(duì)該16SrDNA序列進(jìn)行測(cè)序，把測(cè)序結(jié)果在Genbank進(jìn)行BLAST比較，確定了 Bacillus sp.ZDS-1的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化地位。通過Bacillus sp.ZDS-1的生理生化特征結(jié)果和 系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化地位等鑒定結(jié)果，最終把Bacillus sp.ZDS-1鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)(以下簡稱為ZDS-1)，并于2010年6月我們首次將ZDS-1的16S rDNA 登陸到Genbank，登陸號(hào)為HM372880。2010.03.13我們將Bacillus sp.ZDS-1寄存于中國武漢中國典型培養(yǎng)物保藏中心， 菌種保藏號(hào)為CCTCC NO: M2010053,主要生物學(xué)特性為菌株在營養(yǎng)肉汁瓊脂平板上， 30°C,培養(yǎng)24h:菌體呈桿狀，0.68μιηΧ2.13 3.22μιη，革蘭氏染色陽性；芽孢橢圓形，中生，孢囊不膨大。培養(yǎng)48h:菌落乳白色，干燥，不規(guī)則，扁平，不透明，邊緣 不整齊。能利用的碳源有甘油、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、葡萄糖、果糖、甘露 糖、肌醇、甘露醇、山梨醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、苦杏仁甙、七葉靈、柳醇、纖維 二糖、麥芽糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖、淀粉、糖原，不能利用的碳源 有甘油、赤癬醇、D-阿拉伯糖、L-木糖、阿東醇、β-甲基-D-木糖苷、半乳糖、 山梨糖、鼠李糖、衛(wèi)茅醇、α-甲基-D-甘露糖苷、N-乙酰-葡糖胺、熊果甙、菊糖、 松三糖、木糖醇、龍膽二糖、D-松二糖、D-來蘇糖、D-塔格糖、D-巖藻糖、L-巖藻 糖、D-阿拉伯糖醇、L-阿拉伯糖醇、葡萄糖酸鹽、2-酮基-葡萄糖酸鹽、5-酮基-葡 萄糖酸鹽。實(shí)施例2液體菌劑的制備種子培養(yǎng)基(營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基)為蛋白胨0.5%，牛肉膏3%，NaCl 0.5%,種 子培養(yǎng)基的ρΗ為7.0 7.2。發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖1.0%，(NH4)2SO4 0.1 %, K2HPO4 0.2 %, MgSO4 0.02%, NaCl 0.01%, CaCO3 0.3%,蛋白胨0.05%，蒸餾水適量；發(fā)酵培養(yǎng)基的ρΗ為 7.2 7.5。將ZDS-I菌株在種子培養(yǎng)基上活化，并測(cè)定降解性能，接種于試管斜面上獲得 試管種備用。將試管種接種于含200mL種子培養(yǎng)基的IOOOmL搖瓶中，恒溫振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù) 期，獲得菌種。采用500升的種子罐，種子培養(yǎng)基投料量400升，投料完畢后121°C高壓濕熱滅 菌，冷卻至33°C后，將上述培養(yǎng)好的菌種按種子罐中種子培養(yǎng)基的10%接種量接種入種 子罐，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期，獲得種子液，期間攪拌速度為220轉(zhuǎn)/分，無菌空氣通入量 為1 0.8，培養(yǎng)時(shí)間約48 60小時(shí)。生產(chǎn)罐容量為5噸，發(fā)酵培養(yǎng)基投料量4.0噸。投料后的生產(chǎn)罐l.lkg/cm2的 壓力下，121°C高壓濕熱滅菌，滅菌后冷卻至35°C以下，將種子液按生產(chǎn)罐中發(fā)酵培養(yǎng)基 的10%接種量接種入生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵結(jié)束后菌體數(shù)量達(dá)到10億個(gè)/ml以上，生產(chǎn) 罐的培養(yǎng)過程中無菌空氣的通氣量為1 0.8-1.0，攪拌速度為240轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)時(shí)間約 48 60小時(shí)，出罐后形成能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的液體菌劑。實(shí)施例3固體菌劑的制備1將實(shí)施例2生產(chǎn)出來的ZDS-I液體菌劑和采集來的過篩曬干的泥炭按照1 4的 重量比混合均勻后形成固體狀，從而制成ZDS-I的固體菌劑。實(shí)施例4固體菌劑的制備2將實(shí)施例2獲得的液體菌劑與市場(chǎng)上購買的粘土按照1 5的重量比混合后形成 固體狀，從而制成ZDS-I的固體菌劑。實(shí)施例5ZDS-I液體菌劑對(duì)玉米赤霉烯酮毒素的降解效果
含有玉米赤霉烯酮毒素培養(yǎng)基為(NH4)2SO4 0.5g/L，KH2PO4 0.5g/L, K2HPO4 1.5g/L，MgSO4 0.02g/L, NaCl 0.5g/L,蒸餾水適量；培養(yǎng)基的pH值7.0。在培養(yǎng)基中
分別加入的玉米赤霉烯酮毒素含量為lOmg/L (從Sigma公司購買)。將含有玉米赤霉烯酮毒素的培養(yǎng)基分成對(duì)照組和試驗(yàn)組進(jìn)行平行試驗(yàn)，將實(shí)施 例2獲得的液體菌劑按照的接種量接入試驗(yàn)組中含有毒素的培養(yǎng)基中，對(duì)照組接入
由實(shí)施例2提供的無菌的發(fā)酵培養(yǎng)基，對(duì)照組和試驗(yàn)組均置于30°C，180r/min,搖床 培養(yǎng)48小時(shí)后分別取樣，按1 1的比例加入甲醇混勻，過0.22 μ m液相色譜專用濾頭 后，進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖1，對(duì)照組的液體培養(yǎng)基中仍然存在大量的 玉米赤霉烯酮毒素，而試驗(yàn)組的液體培養(yǎng)基中已檢測(cè)不到玉米赤霉烯酮毒素，表明經(jīng)過 ZDS-I的作用能很好地降解液體培養(yǎng)基中的玉米赤霉烯酮毒素。實(shí)施例6ZDS-I固體制劑對(duì)飼料中玉米赤霉烯酮毒素的降解效果將ZEA感染的飼料分成對(duì)照組和試驗(yàn)組，將實(shí)施方案4制成的固體菌劑按照5% 的重量比加入到試驗(yàn)組飼料中，混勻，將對(duì)照組和試驗(yàn)組均按1 1的比例加入蒸餾水， 30°C作用2小時(shí)后，準(zhǔn)確稱取5g飼料樣品于三角瓶中，加入30mL甲醇，50g/L NaCl溶 液20mL后于搖床(180r/min)充分混勻5min，然后超聲提取30min，用濾紙過濾到分液 漏斗中，加入二氯甲烷(分3次，每次20mL)萃取，二氯甲烷層(下層)經(jīng)無水硫酸鈉 脫水并收集于磨口三角瓶中，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后，用4mL甲醇溶解殘?jiān)?，即得玉米?霉烯酮的粗提液，過自填硅膠柱進(jìn)行純化，洗脫液經(jīng)氮吹濃縮后過0.22 μ m液相色譜專 用濾頭后，進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)。結(jié)果見圖2 對(duì)照組的飼料中仍然存在大量的玉米 赤霉烯酮毒素，而試驗(yàn)組的飼料中，玉米赤霉烯酮毒素含量明顯降低，可見，ZDS-I固 體菌劑能很好地降解飼料中的玉米赤霉烯酮毒素，降解率可達(dá)70%。實(shí)施例7ZDS-I液體菌劑稀釋后對(duì)谷物中玉米赤霉烯酮毒素的降解效果。將實(shí)施例2獲得的ZDS-I液體菌劑用水溶液稀釋100倍備用，稀釋后的液體菌 劑中，菌體數(shù)量為IO7個(gè)/ml。將已經(jīng)被ZEA感染的玉米分成對(duì)照組和試驗(yàn)組，將稀釋100倍后的ZDS_1液體 菌劑按重量比1 1的比例噴灑到試驗(yàn)組中的玉米中，對(duì)照組按重量比1 1的比例噴灑 不含毒素的去離心水，對(duì)照組和試驗(yàn)組置于30°c作用2小時(shí)后，分別從對(duì)照組和試驗(yàn)組 準(zhǔn)確稱取5g樣品于三角瓶中，加入30mL甲醇，50g/L NaCl溶液20mL后于搖床(180r/ min)充分混勻5min，然后超聲提取30min，用濾紙過濾到分液漏斗中，加入二氯甲烷 (分3次，每次20mL)萃取，二氯甲烷層(下層)經(jīng)無水硫酸鈉脫水并收集于磨口三角瓶 中，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后，用4mL甲醇溶解殘?jiān)?，即得玉米赤霉烯酮的粗提液，過自填 硅膠柱進(jìn)行純化，洗脫液經(jīng)氮吹濃縮后過0.22 μ m液相色譜專用濾頭后，用高效液相色 譜檢測(cè)玉米中玉米赤霉烯酮毒素的含量。結(jié)果見表1 表 權(quán)利要求
1.一株對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株，其特征在于該菌株的保藏號(hào)為CCTCC NO: M2010053,其生物學(xué)特性為菌株在營養(yǎng)肉汁瓊脂平板上，30°C，培養(yǎng)24h 菌體 呈桿狀，0.68μιηΧ2.13 3.22μιη，革蘭氏染色陽性；芽孢橢圓形，中生，孢囊不膨 大；培養(yǎng)48h:菌落乳白色，干燥，不規(guī)則，扁平，不透明，邊緣不整齊；能利用的碳 源有甘油、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、肌醇、甘露醇、山 梨醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、苦杏仁甙、七葉靈、柳醇、纖維二糖、麥芽糖、乳糖、蜜 二糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖、淀粉、糖原；不能利用的碳源有甘油、赤癬醇、D-阿 拉伯糖、L-木糖、阿東醇、甲基-D-木糖苷、半乳糖、山梨糖、鼠李糖、衛(wèi)茅醇、 α-甲基-D-甘露糖苷、N-乙酰-葡糖胺、熊果甙、菊糖、松三糖、木糖醇、龍膽二糖、 D-松二糖、D-來蘇糖、D-塔格糖、D-巖藻糖、L-巖藻糖、D-阿拉伯糖醇、L-阿拉 伯糖醇、葡萄糖酸鹽、2-酮基-葡萄糖酸鹽、5-酮基-葡萄糖酸鹽；該菌株16SrDNA的 Genbank 登陸號(hào)為 HM372880。
2.一種如權(quán)利要求1所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于a)將菌株原種在培養(yǎng)皿上活化，并測(cè)定降解性能，接種于試管斜面上獲得試管種備用；b)將試管種置于含有種子培養(yǎng)基的搖瓶中振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期，獲得菌種；c)將上述培養(yǎng)好的菌種接種入含有種子培養(yǎng)基的種子罐，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期，獲得 種子液；d)將獲得的種子液接種入含有發(fā)酵培養(yǎng)基的生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)，出罐形成能對(duì)玉米赤 霉烯酮毒素降解的液體菌劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于 所述的種子培養(yǎng)基由下列組分按照體積比組成的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨0.5%，牛肉膏 3%, NaCl 0.5%,種子培養(yǎng)基的pH為7.0 7.2 ；所述的發(fā)酵培養(yǎng)基由下列組分按照體積 比組成葡萄糖 1.0%，(NH4)2SO4 0.1%, K2HPO4 0.2%, MgSO4 0.02%, NaCl 0.01%, CaCO3 0.3%,蛋白胨0.05%，蒸餾水適量；發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為7.2 7.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于 所述的種子培養(yǎng)基需要121°C高壓濕熱滅菌后冷卻至30 35°C使用；所述的菌種按種 子罐中種子培養(yǎng)基的10%接種量接種入種子罐；所述的種子液按生產(chǎn)罐中發(fā)酵培養(yǎng)基的 10%接種量接種入生產(chǎn)罐。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特 征在于在種子罐的種子培養(yǎng)和生產(chǎn)罐的發(fā)酵培養(yǎng)過程中無菌空氣的通氣量為1 0.6 1.2，攪拌速度為180 240轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度為30 35°C，它們的培養(yǎng)時(shí)間分別為48 60小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后獲得液體菌劑，液體菌劑中菌體數(shù)量至少達(dá)到IO9個(gè)/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于 將所述的液體菌劑稀釋后噴施于到谷物中，降解谷物中的玉米赤霉烯酮毒素；稀釋后的 液體菌劑中菌體數(shù)量至少達(dá)到IO7個(gè)/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于 將所述的液體菌劑與采用泥炭或粘土吸附劑按1 4的重量比吸附，形成固體菌劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在于 所述的吸附劑為泥炭或粘土。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征 在于在谷物中按照重量比5%加入固體菌劑均勻混合，降解谷物中的玉米赤霉烯酮毒 素；或在飼料中按照重量比5%加入固體菌劑均勻混合，降解飼料中的玉米赤霉烯酮毒素。
10.根據(jù)權(quán)利要求6或9所述的能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株的應(yīng)用，其特征在 于所述的谷物為玉米，或小麥，或大麥，或稻谷，或高粱，或小米。
全文摘要
本發(fā)明涉及一株對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的菌株，其特征在于該菌株的保藏號(hào)為CCTCC NOM2010053，該菌株16S rDNA的Genbank登陸號(hào)為HM372880。應(yīng)用時(shí)，將菌株制備成能對(duì)玉米赤霉烯酮毒素降解的液體菌劑或固體菌劑，用于降解谷物或飼料中的玉米赤霉烯酮毒素。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是利用該菌株降解玉米赤霉烯酮毒素的過程中，不存在二次污染，從而提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，確保人畜的食用安全；使用該菌株生產(chǎn)降解玉米赤霉烯酮毒素的各種制劑，不僅生產(chǎn)使用成本低，而且使用安全。
文檔編號(hào)A23L1/015GK102010838SQ201010266489
公開日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2010年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月27日
發(fā)明者史建榮, 吳季榮, 徐劍宏, 林凡云, 王宏杰, 祭芳 申請(qǐng)人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院