專利名稱：一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明方法涉及龜板深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種酶法提取龜板膠中龜板肽的 方法，是一種以龜板膠為原料，利用生物酶酶解龜板膠，從而提取龜板肽的方法。
背景技術(shù)：
龜板是龜科動(dòng)物烏龜?shù)母辜祝哂凶剃帩撽?、益腎強(qiáng)骨、養(yǎng)血補(bǔ)心的功效，是中醫(yī) 常用的名貴藥材之一。其主要的化學(xué)成分為氨基酸、蛋白質(zhì)、動(dòng)物膠、微量元素等。龜板膠 是我國傳統(tǒng)中藥中的上品，具有極好的滋補(bǔ)功能，對龜板膠進(jìn)行酶解可以制得龜板肽，而通 過酶切技術(shù)獲得的龜板肽不僅具有極好的消化吸收特性，還具有更有效的生理功能，將龜 板肽溶于酒后能改善酒的外觀品質(zhì)，提升酒的品格。龜板肽系列產(chǎn)品具有抑制血壓上升、保護(hù)胃粘膜、抗?jié)?、促進(jìn)皮膚膠原代謝，美 化皮膚、預(yù)防骨質(zhì)疏松等功效。從龜板膠中提取龜板肽大多采用以下方法龜板膠一堿處理一高溫蒸煮一酶解一 過濾一濃縮一噴霧干燥。提取過程中使用大量的堿處理，既對環(huán)境造成污染又對人體存在 安全隱患，還破壞了蛋白質(zhì)的成分；而濃縮操作容易破壞產(chǎn)品的品相，現(xiàn)有技術(shù)中沒有用到 膜分離技術(shù)，影響了產(chǎn)品的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種酶法提取龜板膠中龜 板肽的方法，無需用堿處理，而是利用復(fù)合酶酶解，然后再通過膜分離技術(shù)脫鹽和濃縮，提 取龜板肽，本方法的生產(chǎn)周期短、操作簡便、成本低、安全無毒副作用。為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施—種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其步驟如下1、以龜板膠(又稱龜甲膠)為原料，加入原料重量的5-7倍的蒸餾水?dāng)嚢杈鶆?，?溫至100°C蒸煮5-7h ；2、冷卻至45_60°C，調(diào)pH值為7_8，然后分別按原料龜板膠重量的1_3 %和 0. 5-1. 5%的比例加入堿性蛋白酶和胰蛋白酶，反應(yīng)過程中用氫氧化鈉溶液維持pH在7-8， 恒溫?cái)嚢杳附?-10h ；將得到的酶解液升溫至90-100°C，保持10-20min滅酶；3、將酶解液離心后過濾，除去蛋白酶，濾液中加入粉末狀活性炭進(jìn)行脫色，然后再 使用膜分離手段進(jìn)行分離，濃縮，干燥即得到龜板肽干品。本發(fā)明方法中使用的堿性蛋白酶和胰蛋白酶的活力分別為25U/mg和35U/mg。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法的優(yōu)點(diǎn)和有益效果如下1、有效避開了化學(xué)手段處理所帶來的環(huán)境污染及對人體傷害的問題；2、采用本發(fā)明方法生產(chǎn)出來的龜板肽產(chǎn)品的純度高，所得產(chǎn)品的總蛋白質(zhì)中分子 量在500-3000道爾頓的肽含量達(dá)到96%以上，分子量大于3000道爾頓的在4%以內(nèi)；3、采用本發(fā)明方法生產(chǎn)出來的龜板肽，分子量小，人體容易吸收，吸收率達(dá)90%以
3上；4、本發(fā)明采用了活性炭脫色，有效避免了使用過氧化氫脫色時(shí)殘留于產(chǎn)品中對人 體的傷害，且保證了產(chǎn)品的天然色澤度；5、本發(fā)明方法的生產(chǎn)周期短、操作簡便、成本低、安全無毒副作用，可廣泛用于多 功能保健品、藥品等領(lǐng)域。
具體實(shí)施例方式下面通過具體的實(shí)施例對本發(fā)明方法做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。實(shí)施例1 一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其步驟如下1、稱取龜板膠1kg，然后加入蒸餾水6kg，攪拌均勻后，升溫至IOCTC蒸煮5h ；2、冷卻至55°C，用0. IM的食品級片狀氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7_8，然后加入25g堿 性蛋白酶和IOg胰蛋白酶，在55°C下攪拌酶解10h，酶解過程中用上述0. IM氫氧化鈉溶液 保持反應(yīng)體系的PH值穩(wěn)定；然后升溫至95°C，保溫15min滅酶；3、將酶解液過濾，得上清液；上清液中加入25g粉末狀活性炭，95°C攪拌吸附Ih脫 色，濾除活性炭；濾液經(jīng)孔徑為Inm的納濾膜分離系統(tǒng)進(jìn)行分離，脫鹽并濃縮；濃縮液經(jīng)噴 霧干燥，得到412g白色(本發(fā)明中采用活性炭脫色，所得產(chǎn)品的色澤為白色，優(yōu)于國家標(biāo)準(zhǔn) 規(guī)定的淡黃色)粉末狀龜板肽，所得產(chǎn)品的檢測報(bào)告見表1。表1實(shí)施例1所得產(chǎn)品的檢測報(bào)告
權(quán)利要求
一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，步驟如下A、以龜板膠為原料，加入蒸餾水?dāng)嚢杈鶆蚝螅郎刂?00℃蒸煮；B、冷卻至45 60℃，調(diào)pH值為7 8，然后分別按原料龜板膠重量的1 3%和0.5 1.5%的比例加入25U/mg的堿性蛋白酶和35U/mg的胰蛋白酶，恒溫?cái)嚢杳附? 10h，酶解過程中用氫氧化鈉溶液保持反應(yīng)體系的pH值穩(wěn)定；然后將得到的酶解液升溫至90 100℃滅酶；C、將酶解液離心后過濾，濾液經(jīng)粉末狀活性炭脫色后，然后再通過膜分離來脫鹽和濃縮，所得濃縮液干燥后即得龜板肽。
2.如權(quán)利要求1所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述的蒸 餾水的加入量為原料重量的5-7倍。
3.如權(quán)利要求1或2所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述 的蒸煮的時(shí)間為5-7h。
4.如權(quán)利要求1或2所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述 的滅酶的時(shí)間為10-20min。
5.如權(quán)利要求1或2所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述 的粉末狀活性炭的加入量為原料龜板膠重量的2-2. 5%。
6.如權(quán)利要求1或2所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述 的膜分離操作采用的是孔徑為Inm的納濾膜。
7.如權(quán)利要求1或2所述的一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，其特征在于所述 的脫色為95°C下攪拌吸附Ih脫色。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種酶法提取龜板膠中龜板肽的方法，該方法采用龜板膠為主要原料，經(jīng)過配水升溫蒸煮、復(fù)合蛋白酶酶解、滅酶、脫色、膜分離，最后將得到的濾液干燥即得到產(chǎn)品龜板肽。本發(fā)明方法生產(chǎn)周期短、成本低、不產(chǎn)生任何有毒有害物質(zhì)，所得產(chǎn)品安全性高，可廣泛用于保健品、藥品等領(lǐng)域。
文檔編號C12P21/06GK101974594SQ201010540588
公開日2011年2月16日 申請日期2010年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月11日
發(fā)明者葉傳發(fā), 葉思, 張小東, 胡承四 申請人:湖北遠(yuǎn)成藥業(yè)有限公司