專利名稱：雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法
雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于營養(yǎng)品和保健品技術(shù)領(lǐng)域，涉用一種以雙孢菇為原料的口服液。
技術(shù)背景
活性肽是當(dāng)前國際藥學(xué)和食品界熱門的研究課題和極具發(fā)展前景的功能因子，既 容易被人體吸收，又具有延緩衰老、抑制腫瘤、調(diào)節(jié)激素、提高免疫、抗菌、抗病毒、降血壓和 降血脂等功能。目前已經(jīng)應(yīng)用于生物制藥、保健品、食品、生物試劑、動物飼料等領(lǐng)域，如胰 島素、腦活素、膠原肽、乳肽、鹿肽、大米肽、大豆肽、蛋清肽、血肽等。
雙孢菇是一種世界性栽培的重要食用菌，中國是世界上第一大雙孢菇的生產(chǎn)國和 出口國，但其深加工水平很落后，高附加值的產(chǎn)品幾乎沒有。雙孢菇蛋白質(zhì)含量居食用菌之 首，每IOOg干菇蛋白質(zhì)為38 40g，含有18種氨基酸，其中8種是人體必須的氨基酸，并且 賴氨酸和亮氨酸含量相當(dāng)豐富，還含有豐富的維生素B” B2、C、D、P，具有降血脂、抗病毒、抗 腫瘤、增強機體免疫力等保健功能。因此，用雙孢菇生產(chǎn)富含活性肽保健品具有很好的商業(yè) 價值和應(yīng)用前景，但國內(nèi)外關(guān)于雙孢菇蛋白酶解肽及其產(chǎn)品尚未見報道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種工藝簡單、易控制的雙孢菇蛋白酶解肽口 服液的制備方法。
解決以下問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備 方法，包括以下步驟原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1-1. 5的比例混 合，打漿得到雙孢菇漿液；酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 55% 0. 60%的 酸性蛋白酶和0. 20% 0. 25%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50 60°C，調(diào)節(jié)pH 值使其維持在4. 5 5. 5，攪拌下酶解5 Mi ；滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到95°C，加 熱lOmin，將蛋白酶滅活；離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢 菇混合肽；濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/2 1/4 ； 調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量5 10%蔗糖、1 3%蜂蜜、0. 2 0. 3% 檸檬酸、0. 05 0.洲黃原膠和羧甲基纖維素鈉，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液；澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0. 1 1%的食品級殼聚糖，高速攪拌均 勻，再靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，再進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。
做為優(yōu)選的方案，在原料預(yù)處理時，將雙孢菇原料切片后與水以1:1的比例混合， 打漿2-aiiin，得到雙孢菇漿液。
做為優(yōu)選的方案，在酶解時，將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確量取占雙孢菇 漿液質(zhì)量0. 58%的酸性蛋白酶和0. 22%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到55°C，用 0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié)pH值使其維持在5. 0，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和 PH值，酶解5 乩。
做為優(yōu)選的方案，濃縮時將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小 到原來的1/3。
本發(fā)明以雙孢菇為原料，采用復(fù)合酶生物酶解技術(shù)制備雙孢菇肽口服液，該方法 通過原料預(yù)處理，選擇合適的酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶進(jìn)行水解，優(yōu)化水解條件使蛋白質(zhì) 的水解率達(dá)到65%以上，再滅酶、離心分離、濃縮，所得產(chǎn)物采用kphadex-50凝膠柱層析分 析，所得肽分子量主要分布在600 3000D之間，制得的口服液色澤金黃、口感好、無腥味， 產(chǎn)品安全性好、營養(yǎng)價值高。
本發(fā)明所述方法的酶解反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)溫度低，時間短，產(chǎn)物容易控制，整個 生產(chǎn)過程無污染，產(chǎn)品安全性好，所得產(chǎn)品具有口感好、肽含量高、營養(yǎng)成分保存率高、易于 消化吸收，可用于生物制藥和營養(yǎng)保健品；并且具有工藝簡單，操作容易，設(shè)備投資少，生產(chǎn) 成本低的優(yōu)點，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施方式
實施例1原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1的比例混合，打 漿2-;3min，得到雙孢菇漿液。
酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 58%的酸 性蛋白酶和0. 22%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到55°C，用0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié) PH值使其維持在5. 0，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和pH值，酶解5 他。
滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到 95°C，加熱lOmin，將蛋白酶滅活。
離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢菇混合肽。
濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/3。
調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量8%蔗糖、洲蜂蜜、0.洲檸檬酸、0. 1% 黃原膠和羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)的混合物，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液。
澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0. 5%的食品級殼聚糖，高速攪拌均 勻，再靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。
實施例2原料預(yù)處理原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1的 比例混合，打漿得到雙孢菇漿液。
酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 55%的酸 性蛋白酶和0. 20%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50°C，用0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié) PH值使其維持在4. 5，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和pH值，酶解5 他。
滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到95°C，加熱lOmin，將蛋白酶滅活；離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢 菇混合肽；濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/2 ； 調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量5%蔗糖、1%蜂蜜、0.洲檸檬酸、0. 05%黃 原膠和羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)的混合物，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液；澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0. 1%的食品級殼聚糖，高速攪拌均勻， 再靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。
實施例3原料預(yù)處理原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1. 5 的比例混合，打漿得到雙孢菇漿液。
酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 6%的酸性 蛋白酶和0. 25%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50°C，用0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié)pH 值使其維持在5. 5，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和pH值，酶解5 他。
滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到 95°C，加熱lOmin，將蛋白酶滅活；離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢 菇混合肽；濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/4 ； 調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量10%蔗糖、3%蜂蜜、0. 3%檸檬酸、0.洲黃 原膠和羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)的混合物，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液；澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入1%的食品級殼聚糖，高速攪拌均勻，再 靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。
實施例4原料預(yù)處理原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1的 比例混合，打漿得到雙孢菇漿液。
酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 58%的酸 性蛋白酶和0. 20%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50°C，用0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié) PH值使其維持在5，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和pH值，酶解5 他。
滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到 95°C，加熱lOmin，將蛋白酶滅活；離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢 菇混合肽；濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/3 ； 調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量6%蔗糖、3%蜂蜜、0. 2%檸檬酸、0. 1%黃 原膠和羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)的混合物，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液；澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0. 4%的食品級殼聚糖，高速攪拌均勻， 再靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。權(quán)利要求
1.一種雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，其特征是包括以下步驟原料預(yù)處理選擇新鮮的雙孢菇原料，將雙孢菇原料切片后與水以1:1-1. 5的比例混 合，打漿得到雙孢菇漿液；酶解將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 55% 0. 60%的 酸性蛋白酶和0. 20% 0. 25%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50 60°C，調(diào)節(jié)pH 值使其維持在4. 5 5. 5，攪拌下酶解5 Mi ；滅酶當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時，停止攪拌，移出反應(yīng)器，迅速升溫到95°C，加 熱lOmin，將蛋白酶滅活；離心分離酶解液在4000 rpm離心20min，收集上清液，即為雙酶復(fù)合水解所得的雙孢 菇混合肽；濃縮將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/2 1/4 ；調(diào)配以上所得的濃縮液中加入占濃縮液質(zhì)量5 10%蔗糖、1 3%蜂蜜、0. 2 0. 3% 檸檬酸、0. 05 0.洲黃原膠和羧甲基纖維素鈉，調(diào)配雙孢菇蛋白酶解肽口服液；澄清將所得雙孢菇蛋白酶解肽口服液中加入0. 1 1%的食品級殼聚糖，高速攪拌均 勻，再靜置，自然澄清3 他，得到澄清透明上清液后，進(jìn)行灌裝、滅菌，即可得到成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，其特征在于在原料 預(yù)處理時，將雙孢菇原料切片后與水以1:1的比例混合，打漿2-aiiin，得到雙孢菇漿液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，其特征在于在 酶解時，將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量占雙孢菇漿液質(zhì)量0. 58%的酸性蛋白 酶和0. 22%的木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到55°C，用0. IM的HCl溶液調(diào)節(jié)pH值使 其維持在5. 0，酶解過程中要不斷攪拌，并維持穩(wěn)定的溫度和pH值，酶解5 他。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，其特征在于濃 縮時，將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/3。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，其特征在于濃縮時， 將離心收集的上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，使之體積減小到原來的1/3。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種雙孢菇蛋白酶解肽口服液的制備方法，選擇新鮮的雙孢菇原料打漿得到雙孢菇漿液，將雙孢菇漿液置于酶解反應(yīng)器中，準(zhǔn)確稱量酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶加入水解反應(yīng)器中，加熱到50～60℃，調(diào)節(jié)pH值使其維持在4.5～5.5，攪拌下酶解5～6h，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)酶解到預(yù)定水解度65%時將蛋白酶滅活，離心、濃縮，再經(jīng)過調(diào)配、澄清、灌裝、滅菌后即可得到成品。本發(fā)明所得肽含量高，制得的口服液色澤金黃、口感好、無腥味，產(chǎn)品安全性好、營養(yǎng)價值高，工藝簡單，操作容易，設(shè)備投資少，生產(chǎn)成本低的優(yōu)點，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A23L2/38GK102038264SQ20101061780
公開日2011年5月4日 申請日期2010年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月31日
發(fā)明者孟秀娟, 李桂峰, 王向東, 趙國建 申請人:山西師范大學(xué)