專利名稱：：共生組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及共生組合物(益生素(prebiotic)和益生菌(probiotic)的結(jié)合)及其制備方法。
背景技術(shù)：
：某些活微生物的攝入對人或動物健康的有益作用已經(jīng)久為人知。根據(jù)聯(lián)合國糧食和農(nóng)業(yè)組織，這些活微生物(被命名為“益生菌”)在以合適的量施用時向宿主提供健康益處。這些益生菌(如雙歧桿菌等)用于制造健康食品或藥物組合物。某些組合物包含經(jīng)包封益生菌和食物補充劑(維生素C和E、蛋白鋅(zincproteinate)、蛋白錳(manganeseproteinate)、硫酸亞鐵、蛋白銅(copperproteinate)、碘化鈣和亞硒酸鈉)(文件WO2007/126990)。在某些組合物中，食物補充劑延長了益生菌的壽命。通常認(rèn)為，通過攝入益生菌，可以實現(xiàn)以下效果保持或恢復(fù)人和動物中腸道菌群的平衡，這是通過刺激有益共生菌繁殖和抑制病原菌繁殖以改變腸道菌群的組成和/或活性來實現(xiàn)的；對腸上皮細胞發(fā)揮營養(yǎng)作用；通過釋放半乳糖苷酶來提高乳酸耐受性；刺激腸相關(guān)淋巴組織(GALT)中的局部免疫活性和全身性免疫活性(刺激巨噬細胞的活性、呈遞抗原、產(chǎn)生免疫球蛋白和細胞因子)；發(fā)揮抗腫瘤活性，同時降低腸道菌群中負(fù)責(zé)將前致癌物質(zhì)轉(zhuǎn)化成致癌物特別是用于原位合成維生素和氨基酸并提高其吸收及某些礦物質(zhì)的吸收的酶(β-葡糖醛酸酶、β-葡糖苷酶、偶氮還原酶和硝基還原酶、氧化還原酶)的活性。益生菌預(yù)防疾病病癥(包括胃腸道感染)、營養(yǎng)缺乏并向宿主提供健康和舒適益處，例如改善胃腸道輸送(提高運動性、降低輸送時間、減少糞便中致癌物與腸上皮之間的相互作用)和改善免疫系統(tǒng)。作為例子，大多數(shù)雙歧桿菌少量產(chǎn)生對宿主的健康和舒適而言必不可少的維生素(Bi、Β3、Β6、Β9、Β12)和消化酶；并且具有預(yù)防疾病和治療的有益作用。攝入益生素、食物或膳食物質(zhì)對宿主有益的作用也是已知的，所述益生素、食物或膳食物質(zhì)一般由基本上非淀粉和不可消化多糖和寡糖組成，或由在上消化道部分不吸收的非降解糖醇組成，并選擇性刺激腸中一種或有限數(shù)目的活微生物的生長和活性(Gibson等，J.Nutr,1995,125(6):1401-12,Dietarymodulationofthehumancolonicmicrobiota:introducingtheconceptofprebiotics)。益生素的特征在于具有1.5kcal/g左右的低熱值。益生素促進結(jié)腸中有益共生菌(主要是乳桿菌(lactcAacilli)和雙歧桿菌)的生長和代謝并損害致病菌，導(dǎo)致腸道菌群組成的再平衡。益生素在腸粘膜處具有局部免疫調(diào)節(jié)特性它們增加免疫球蛋白、細胞因子和T-淋巴細胞的產(chǎn)生。它們通過增加履狀上皮細胞(calceiformepithelialcell)的數(shù)目和促進更多酸性粘蛋白的產(chǎn)生(腸粘膜穩(wěn)定化的特征)來改變結(jié)腸上皮粘膜的厚度和組成。因此，穩(wěn)定化的腸道菌群有助于預(yù)防感染、氧化過程，尤其是改善腸的吸收功能。此外，益生素經(jīng)過共生菌群間接參與礦物質(zhì)如鐵、鈣、鎂和鋅的吸收，其對健康的益處是公認(rèn)的。研究表明，益生素(如低聚果糖)的存在顯著提高了股骨中鎂的吸收和磷的累積；此外，低聚果糖和鈣的大量組合攝入據(jù)認(rèn)為是最有利的膳食，尤其是對骨的固化和降低骨折風(fēng)險而言。最近已經(jīng)知道，益生素具有比胃腸系統(tǒng)更寬的作用部位，即皮膚、泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和女性生殖系統(tǒng)。益生素(尤其是食物果糖-寡糖)本身對腸上皮沒有內(nèi)在作用，而是通過腸道菌群(共生菌)和益生菌發(fā)揮作用；益生素提高益生菌的生存力并促進其在體內(nèi)的繁殖和代謝。益生菌和益生素的結(jié)合通常被稱為共生物(symbiotic)，用于人或動物的食物或治療中。在這些共生組合物中，益生素代表益生菌的選擇性能量源。共生物同時發(fā)揮益生素和益生菌活性。共生物刺激腸上皮相關(guān)的局部免疫系統(tǒng)以及全身免疫系統(tǒng)(特別是通過降低炎性細胞因子(IL-l、TNF-a)的產(chǎn)生)，這降低了感染的風(fēng)險。共生物增加人的糞便細菌(尤其是乳桿菌和雙歧桿菌)的數(shù)目和多樣性，增加腸易激綜合癥和便秘患者的排便次數(shù)，并且減輕腹痛和腸胃氣脹。共生物通過改變腸細菌的代謝而具有針對腫瘤形成的保護作用，它們誘導(dǎo)腸內(nèi)容物中葡糖醛酸酶和氨的濃度降低，降低形成異常隱窩病灶(被視為腫瘤的先兆)的發(fā)生率。然而，共生物的作用比單獨的益生菌或益生素的作用更明顯。它們的組合作用可以是加合的或協(xié)同的，并且提高腸功能活性的效率，例如改善營養(yǎng)物、維生素、礦物質(zhì)、氨基酸、微量元素的吸收過程。例如，文獻WO2007/125558描述了這種共生組合物。然而，現(xiàn)有技術(shù)中提出的共生組合物不完全令人滿意(i)在營養(yǎng)水平上，已知的共生物僅包括不可消化的益生素(因為其基本僅由纖維素組成)。共生物主要對腸道菌群的組成和代謝具有直接的營養(yǎng)活性；他們對宿主具有有限的營養(yǎng)活性。已經(jīng)描述了將某些共生組合物作為或不作為生物活性物質(zhì)的營養(yǎng)載體并添加到組合物中，以保證益生菌在儲存和攝入之后的增殖(文獻US2007/0166433和EP938850)。(ii)由于其獲得方法，已知的共生組合物不是均質(zhì)的制劑，因此益生素與益生菌通常通過即時混合而同時施用，或者(通過相似或不同的途徑)同時施用，或(通過相似或不同的途徑文獻WO2007/126990和WO2007/785970)依次施用。因此，需要提供對益生菌和宿主具有更佳營養(yǎng)特性的均質(zhì)共生組合物，并且需要提高共生組合物對腸道菌群和對宿主整體健康的有益作用。還需要改進共生物的制劑以用于多種用途和延伸用途，同時保證在微生物在到達腸作用部位之前為其提供針對外部介質(zhì)的保護。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明首先涉及一種組合物，其包含-干糖蜜(driedmolasses)；禾口-脫水且經(jīng)包封的活微生物。根據(jù)一個實施方案，所述組合物還包含多糖纖維。根據(jù)一個實施方案，所述多糖纖維是糊精或麥芽糊精纖維。根據(jù)一個實施方案，所述組合物包含小于或等于6%、優(yōu)選小于或等于5%、更優(yōu)選小于4%的總質(zhì)量比的水。根據(jù)一個實施方案，所述組合物包含(以質(zhì)量比計)(優(yōu)選由其組成)·10至50%、優(yōu)選15至45%、最優(yōu)選20至40%的干糖蜜；·15至70%、優(yōu)選25至65%、最優(yōu)選35至60%的多糖纖維；和·4至50%、優(yōu)選10至40%、最優(yōu)選20至30%的脫水且經(jīng)包封的活微生物。根據(jù)一個實施方案，所述糖蜜選自甜菜、甘蔗、水果、谷類的糖蜜及其混合物，優(yōu)選選自甜菜、甘蔗的糖蜜及其混合物，更優(yōu)選選自甘蔗糖蜜。根據(jù)一個實施方案，所述微生物是益生性微生物，其選自以下細菌或酵母雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、片球菌屬(Pediococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、丙酸菌屬(Propionibacterium)、酵母屬(Saccharomyces)、克魯維酵母菌屬(Kluyceromyces)及其混合物，優(yōu)選選自如下種長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)、瑞士乳桿菌(Lactobacillushelveticus)禾口(Saccharomycestorula)。根據(jù)一個實施方案，所述組合物包含至少105、優(yōu)選至少107、理想地至少5X107cfu/g的活微生物量。本發(fā)明還涉及包含上述組合物的食品或健康食品。本發(fā)明還涉及包含上述組合物的藥物，其為片劑、膠囊劑、粉劑或顆粒劑的形式。本發(fā)明還涉及制備組合物的方法，包括將糖蜜與脫水且經(jīng)包封的活微生物相混合以及干燥步驟。根據(jù)一個實施方案，前述方法依次包括-混合所述糖蜜、多糖纖維和任選的水，以獲得預(yù)混物；-向所述預(yù)混物添加脫水且經(jīng)包封的活微生物，以獲得中間組合物；和-干燥所述中間組合物。根據(jù)一個實施方案，所述中間混合物的干燥通過霧化來實施。根據(jù)一個實施方案，所述預(yù)混物的干物質(zhì)水平為30至60wt%，優(yōu)選40至50wt%。根據(jù)一個實施方案，所述組合物是上述組合物。利用本發(fā)明，還可以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點。更具體而言，其提供了具有更佳的營養(yǎng)和醫(yī)學(xué)特性的均質(zhì)共生組合物。這通過使用糖蜜作為益生素來實現(xiàn)。糖蜜是這樣的成分，其中具有營養(yǎng)學(xué)意義的要素(如糖、不可消化的纖維、礦物質(zhì)、微量元素、維生素和氨基酸)的含量極高。由于糖蜜為液體形式并且具有高密度，所以其不可能制備直接包含混有糖蜜的益生菌的組合物，因為穩(wěn)定化的微生物將因為滲透壓而不能存活。這是本發(fā)明僅使用脫水和經(jīng)包封形式的益生菌(以保護它們)以及干燥形式的糖蜜(以避免破壞膠囊)的原因。根據(jù)某些具體實施方案，本發(fā)明還具有以下一項(或優(yōu)選地多項)有利特征-糖蜜通過在組合物被攝入之后用作益生菌的生長支持物和刺激其活性而發(fā)揮益生素功能，并直接發(fā)揮用于人或動物的膳食補充功能或用于人或動物(獸醫(yī)應(yīng)用)的藥物功能。-糖蜜直接提供多種具有營養(yǎng)學(xué)意義的藥物，例如糖、纖維、礦物質(zhì)、維生素、微量元素和氨基酸，而不必向組合物中逐一添加這些要素。因此本發(fā)明具有經(jīng)濟性。-利用根據(jù)本發(fā)明方法轉(zhuǎn)化的糖蜜，共生混合物的多種應(yīng)用變得可能，開辟了用于人和動物的多種用途和施用方法。如此轉(zhuǎn)化的糖蜜保護經(jīng)包封益生菌免受在其配制中可能的多種支持物(例如乳粉)的可能變化。-活性物質(zhì)優(yōu)選通過并行的干燥和混合來充分均質(zhì)化。本發(fā)明的共生物解決了前述問題。實際上，本發(fā)明的共生物包含已知其對宿主健康之作用的經(jīng)包封益生菌和新的益生素，該益生素既是相關(guān)益生菌的能量源，也是宿主的直接能量源，因為其同時包含天然存在于益生素中的維生素、礦物質(zhì)、微量元素以及必需和非必需氨基酸，并且益生菌-益生素的組合有利于其吸收。維生素、礦物質(zhì)、微量元素以及必需和非必需氨基酸是健康或病理生物體的生理功能必不可少的生物活性物質(zhì)，并且其促進人和動物的一般健康狀況或整體健康。本發(fā)明的共生組合物因其維生素、礦物質(zhì)、微量元素以及必需和非必需氨基酸組成以及其低血糖指數(shù)而代表了非常有利于宿主健康的食物飲食。本發(fā)明的共生物具有雙重功能直接作用于腸道菌群和直接作用于宿主。此外，本發(fā)明的共生物滿足AFSSAPS(法國健康產(chǎn)品安全局)在條款6選擇營養(yǎng)物載體食物配對的說明中所規(guī)定的要求，其陳述了優(yōu)先考量天然包含營養(yǎng)物的食物。本發(fā)明的共生物因其制造方法而具有良好均質(zhì)性，并且允許即時和同時施用共生物的兩種組分。本發(fā)明共生物的制備包括利用混合器使成分均質(zhì)混合，然后通過霧化進行脫水。本發(fā)明的共生物是具有多樣性和多種醫(yī)學(xué)可能性的粉末。本發(fā)明的組合物可用于以下非治療和治療性的適應(yīng)癥，而無論其是預(yù)防性、治療性、姑息性的-關(guān)于消化領(lǐng)域改善便秘、減輕腸道下部的炎性過程、有益平衡脆弱人群(兒童、老人、康復(fù)期的人、病人)以及患有缺乏的任何人的腸道菌群。-關(guān)于運動表現(xiàn)穩(wěn)定血糖和增加糖原分解、提高肌肉的糖儲存能力；改善營養(yǎng)物的同化；降低(由于鎂濃度而)痙攣的頻率；改善恢復(fù)。-關(guān)于脂質(zhì)的產(chǎn)生降低總膽固醇和LDL濃度、增加HDL和改善LDL/HDL比、幫助控制肥胖和動脈粥樣硬化風(fēng)險、改善與代謝綜合癥相關(guān)的臨床體征。-關(guān)于免疫力對免疫力的刺激作用，降低傳染性階段的頻率和嚴(yán)重性。-關(guān)于腦功能改善心理功能(判斷、記憶、心理組織(mentalorganization)、空間和時間定向)以及感受功能(身體表征、空間表征)。-關(guān)于保健降低疲憊感、改善情緒、降低因壓力產(chǎn)生的腎上腺素的作用。-關(guān)于骨和軟組織改善骨折后的鞏固、關(guān)節(jié)的剛性、改善關(guān)節(jié)病和骨質(zhì)疏松。-關(guān)于衰老通過保持酸堿平衡(因為鉀的濃度)而起抗衰老作用；抗自由基作用(因為錳的濃度)。具體實施例方式在以下的說明中，將以非限制性方式更詳細地描述本發(fā)明。本發(fā)明的組合物包含干糖蜜、優(yōu)選的多糖纖維，以及脫水且經(jīng)包封的活微生物。“糖蜜”是指在制造來自植物的甜品(優(yōu)選單糖)時收集的不能結(jié)晶的糖槳殘渣所形成的副產(chǎn)物。相關(guān)的植物優(yōu)選可以是甜菜或甘蔗(在生產(chǎn)蔗糖的范圍內(nèi))，也可以是谷物(在生產(chǎn)葡萄糖的范圍內(nèi))或水果，特別是柑橘類水果(在生產(chǎn)濃縮漿的范圍內(nèi))。通常，在制糖過程中，提取汁并用石灰純化。經(jīng)純化的汁在壓力下濃縮，隨后真空處理并結(jié)晶。隨著糖晶體逐漸形成，殘渣濃縮在液體級分中。例如，結(jié)晶可以分三個階段完成，在每次對汁進行再次濃縮之前移出糖晶體。在最后一次結(jié)晶之后，殘汁即使再次濃縮也不再結(jié)晶。這種汁在本領(lǐng)域被稱為糖蜜(或粗糖蜜)。這些糖蜜通常包含65%至80%、優(yōu)選70至76%的干物質(zhì)；其通常包含10至20%(以干物質(zhì)計)、優(yōu)選12至15%的礦物質(zhì)；其通常包含2至20%、優(yōu)選5至16%(以干物質(zhì)計)的含氮物質(zhì)；并且其通常包含50至75%、優(yōu)選60至70%(以干物質(zhì)計)的糖。更具體而言，糖蜜通常包含以下化合物(濃度范圍彼此獨立提供)·30至66%、優(yōu)選35至40%(以干物質(zhì)計)的蔗糖；·1至10%、優(yōu)選2.5至5%(以干物質(zhì)計)的葡萄糖；·1至5%、優(yōu)選2.5至5%(以干物質(zhì)計)的果糖；·0.2至2%、優(yōu)選0.5至(以干物質(zhì)計)的鼠李糖；·0.2至1%、優(yōu)選0.4至0.7%(以干物質(zhì)計)的銅；·0.2至1%、優(yōu)選0.3至0.9%(以干物質(zhì)計)的鈣；·1至2%、優(yōu)選1.4至1.7%(以干物質(zhì)計)的鐵；·0.2至0.7%、優(yōu)選0.3至0.6%(以干物質(zhì)計)的錳；·3.5至8.5%、優(yōu)選4至5%(以干物質(zhì)計)的鉀；·0.2至1%、優(yōu)選0.2至0.5%(以干物質(zhì)計)的鎂；·0.2to1%、優(yōu)選0.2至0.5%(以干物質(zhì)計)的硫；·0.1至0.5%、優(yōu)選0.1至0.2%(以干物質(zhì)計)的吡哆醇(維生素B6)；·7至8%、優(yōu)選7至7.5%(以干物質(zhì)計)的膽堿；·0.1至1%、優(yōu)選0.5至0.7%(以干物質(zhì)計)的煙酸(維生素B3)；·0.1至0.3%、優(yōu)選0.1至0.2%(以干物質(zhì)計)的核黃素(維生素B2)；·0至1%、優(yōu)選0.7至0.9%(以干物質(zhì)計)的硫胺(維生素Bi)；·1至5%、優(yōu)選1.3至4%(以干物質(zhì)計)的天冬氨酸；·0.1至1%、優(yōu)選0.3至0.5%(以干物質(zhì)計)的精氨酸；·2至5%、優(yōu)選2.2至4.5%(以干物質(zhì)計)的谷氨酸；·0.1至0.5%、優(yōu)選0.11至0.21%(以干物質(zhì)計)的組氨酸。然而，糖蜜的確切組成取決于生產(chǎn)方法以及植物原材料。甜菜和甘蔗的糖蜜已知作為適口劑(palatableagent)和粘合劑用作動物食品組分；或者作為用于微生物(主要是面包酵母)的培養(yǎng)基；或者作為人類食品(特別是糕點)中的甜味劑。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，糖蜜用作益生素。在本發(fā)明的范圍中，術(shù)語“干糖蜜”是指與上述常規(guī)糖蜜具有相同組成(除水含量外，其小于上述常規(guī)糖蜜的水含量)的產(chǎn)品。因此，干糖蜜優(yōu)選具有大于或等于80%、更有選大于或等于85%、大于或等于90%、或甚至理想地大于或等于94^^95%或96%的干物質(zhì)含量。換言之，在本發(fā)明范圍內(nèi)使用的干糖蜜可以被描述為“粗條件下的干糖蜜”，本發(fā)明的干糖蜜與常規(guī)糖蜜之間的唯一組成差別在于水含量；與常規(guī)糖蜜相比，所述干糖蜜未發(fā)生任何化學(xué)轉(zhuǎn)化或任何組分的添加或去除。本發(fā)明中使用的干糖蜜優(yōu)選為粉末形式。在本發(fā)明中使用的干糖蜜優(yōu)選符合法國食品規(guī)范和/或歐洲食品規(guī)范。這通過在糖蜜來源處的進行植物培養(yǎng)時以及在其運輸和工業(yè)加工期間采取所需步驟來實現(xiàn)。特別地，干糖蜜基本上不含公共規(guī)范(CommunityRegulation)No.178/2006以及公共規(guī)范No.396/2005意義上的殺蟲劑和其它殘余物。本發(fā)明范圍內(nèi)使用的多糖纖維是水溶性食品級纖維。這些纖維在本發(fā)明組合物中發(fā)揮填充劑功能。它們是由通過0-糖苷鍵彼此鍵合的幾種糖組成的多聚體。這些糖可以是丙糖、丁糖、戊糖、己糖或庚糖，優(yōu)選己糖。在己糖中，優(yōu)選葡萄糖。因此，(優(yōu)選在本發(fā)明范圍內(nèi)使用的)多糖纖維是葡萄糖的多聚體，特別是淀粉、纖維素和糊精，以及淀粉水解產(chǎn)物如麥芽糊精。優(yōu)選糊精纖維。Roquette以商品名Nuriose銷售的產(chǎn)品是特別適合的糊精纖維。也可以使用上述纖維的混合物。本發(fā)明范圍內(nèi)使用的微生物可以是任何微生物，特別是已知其對人或動物健康的有益作用的所有微生物(益生微生物)。它們可以是細菌或酵母。在優(yōu)選的微生物屬中，特別值得一提的是以下屬雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、乳球菌屬、鏈球菌屬、片球菌屬、腸球菌屬、丙酸桿菌屬、酵母屬和克魯維酵母菌屬。優(yōu)選微生物種類的實例為嗜酸乳桿菌(LactcAacillusacidophilus)、植物乳桿菌(LactcAacillusρlantarum)、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、玉米乳桿菌(Lactobacilluszeae)、唾液乳桿菌(Lactobacillussalivarius)、乳酸乳桿菌(Lactobacilluslactis)、瑞士乳桿菌、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)、噬LIflif(Lactobacillusamylovorus)>^Iflif(Lactobacilluscrispatus)>Sf(^LIflif(Lactobacilluscurvatus)>^1Iflif(Lactobacillusdelbrueckii)(特別是德氏乳桿菌德式亞種(Lactobacillusdelbrueckiissp.delbrueckii)和德氏乳桿菌德氏保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckiissp.bulgaricus))、戈氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)、約氏乳桿菌(Lactobacillusjohnsonii)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)、短IL桿菌(Lactobacillusbrevis)、口譽熱Il求菌(Streptococcusthermophilus)、唾液鏈球菌(Streptococcussalivarius)、乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)(特別是乳酸乳球菌乳酸亞種(Lactococcuslactisssp.lactis)禾口乳酸乳球菌乳月旨亞種(Lactococcuslactisssp.cremoris))、明串珠菌(Leuconostocsp.)、屎腸球菌(Enterococcusfaecium)、戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)、兩歧雙歧桿菌(Bifidobacteriumbifidum)、嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacteriuminfantis)、IL雙歧桿菌(Bifidobacteriumlactis)、iiifdr雙歧桿菌(Bifidobacteriumhelveticus)、酉良酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、布拉酵母(Saccharomycesboulardii)以及它們的混合物。特別優(yōu)選長雙歧桿菌。本發(fā)明組合物中存在的微生物是活的、脫水且經(jīng)包封的微生物。術(shù)語“活的”是指至少一部分微生物是活的(即能夠在合適的培養(yǎng)基中生長)，應(yīng)理解，一定分?jǐn)?shù)的微生物必然以非活性形式存在。優(yōu)選地，所述組合物包含至少105、更具體而言至少107、理想地至少5XIO7CFU/克組合物的量的微生物。經(jīng)包封的形式保證更好地保存微生物，這通過保護微生物免受環(huán)境影響以及具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和良好的機械應(yīng)力抗性來實現(xiàn)。優(yōu)選地，這些活微生物為涂有疏水層的脫水團聚物的形式。疏水層可以優(yōu)選為脂肪酸層、蠟層或其混合物。涂覆的顆粒優(yōu)選具有100μm至5mm、最優(yōu)選300μm至2mm的平均直徑。再次參考文獻WO01/68808，其詳細描述了獲得這種脫水且經(jīng)包封的活微生物的方法。這些產(chǎn)品也可以商品獲得，特別是Lal1emand(Rosell研究所)的商品名ftObiocap。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物為粉末形式，其水(質(zhì)量)含量優(yōu)選小于或等于6%、更具體而言小于或等于5%、最優(yōu)選小于或等于4%。除維生素、礦物質(zhì)、微量元素和氨基酸之外，本發(fā)明的組合物還可以包含多種添加劑如一種或多種芳香物質(zhì)、賦形劑、著色劑和配方劑(formulationagent)以及任何天然來源的有機物、礦物質(zhì)和植物物質(zhì)，其質(zhì)量濃度優(yōu)選為0.01%至50%、更具體而言為0.1至10%。本發(fā)明的組合物可以通過包括混合上述糖蜜、上述脫水且經(jīng)包封的活微生物(優(yōu)選地和多糖纖維)的制造方法來獲得。優(yōu)選地，將糖蜜和多糖纖維先混合在一起以獲得預(yù)混物?？梢允褂萌魏晤愋偷某Ｒ?guī)混合器。在制備該預(yù)混物期間，用糖蜜浸漬多糖纖維。在該階段，在糖蜜不包含足量水的情況下，可以添加水以促進浸漬。為了最佳的浸漬，可以選擇將預(yù)混物的干物質(zhì)水平調(diào)節(jié)為30至60%、優(yōu)選40至50%(以質(zhì)量計)。在第二階段，向預(yù)混物中添加脫水且經(jīng)包封的活微生物，并且將其全部混合以獲得中間組合物。這可在制備預(yù)混物的同一混合器中進行。所添加微生物的量優(yōu)選為10至lOOmg、更優(yōu)選20至60mg、理想地30至50mg(干物質(zhì))/克預(yù)混物。兩個混合步驟均可以在室溫下實施。在第三階段中，干燥中間組合物。理想的是，在添加微生物之后盡可能快地進行干燥步驟，以避免其后與包含水和糖的介質(zhì)接觸時對微生物的任何損害或活性觸發(fā)。優(yōu)選地，添加微生物和干燥之間的間隔小于1小時/千克干物質(zhì)、更特別是小于30分鐘/千克干物質(zhì)、理想地小于15分鐘/千克干物質(zhì)。優(yōu)選地，添加微生物和干燥之間的間隔小于1小時、更具體而言小于30分鐘、理想地小于15分鐘或甚至小于10分鐘或5分鐘。干燥優(yōu)選通過霧化來進行，即將中間組合物以細霧形式與熱空氣流同時注入塔頂。在熱的作用下，水蒸發(fā)并使空氣中帶有水。經(jīng)干燥的組合物在霧化塔底部收集。在第四階段中，可將經(jīng)干燥的組合物過篩，以提供最終組合物。所獲得的組合物優(yōu)選為粉末的形式，并且可以包裝在袋、瓶成其它容器中。該組合物可以作為添加劑用于任何食品、營養(yǎng)品、食物或膳食補充劑(特別是能量棒形式、待稀釋的袋形式的膳食產(chǎn)品)；粉劑、膠囊、片劑；脫水產(chǎn)品如菊苣、巧克力、咖啡；脫水植物如茶、藥茶；乳制品、脫水乳制品如酸奶、粉末和豆制品；脫水蛋白質(zhì)；餅干；乳制品和新鮮豆制品；燉水果；乳蛋糕(custard)；冰淇淋；所有形式(塊狀、顆粒、片、粉末)的動物飼料產(chǎn)品。本發(fā)明的組合物可以直接銷售并由消費者直接添加到食品中。或者，可以在食品生產(chǎn)階段作為添加劑將組合物引入食品中。本發(fā)明的組合物還可以用于制造藥物直接作為待分散到水中的粉末(隨后將組合物與一種或多種可藥用添加劑和/或賦形劑組合或不與其組合)，或為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何劑型例如，用于局部施用途徑的制劑如軟膏、霜劑、陰道膠囊或明膠膠囊、貼劑、植入物、栓劑；優(yōu)選用于口服途徑的劑型，特別是明膠膠囊、膠囊、片劑或顆粒，與一種或更多種可藥用載體、添加劑和/或賦形劑組合。本發(fā)明的組合物具有令人滿意的穩(wěn)定性，或甚至與單獨施用的脫水且經(jīng)包封的微生物相比穩(wěn)定性更高，并且這持續(xù)至少一個月，優(yōu)選至少6個月，最優(yōu)選約1年，理想地約2年或甚至至少3年。穩(wěn)定性通過在制造之后以不同的連續(xù)日期測量組合物中活微生物的數(shù)目來評價。麗所述組合物本身以及由其獲得的食品/膳食產(chǎn)品或藥物適用于動物或人。所述組合物的兩種活性化合物(即糖蜜和微生物)具有加合作用或甚至協(xié)同作用，從而-預(yù)防疾病病癥；和/或-參與減肥和/或促進減肥和/或治療或預(yù)防肥胖和/或治療或減輕與肥胖或超重相關(guān)或由其引起的紊亂或疾?。缓?或-為面臨壓力、疲勞、不足狀況、情緒紊亂的機體提供補充；和/或-有助于保持內(nèi)穩(wěn)態(tài)，如幫助機體控制血壓；和/或-促進病后康復(fù)；和/或-刺激免疫防御；和/或-刺激消化功能并提高消化舒適性；和/或-確保營養(yǎng)物的更高生物利用度，并提高必要營養(yǎng)物的同化作用；和/或-向吸收慢的機體提供能量；和/或預(yù)防ENT領(lǐng)域和婦科領(lǐng)域的感染(陰道霉菌病......)。年輕對象、老年對象、患病對象、恢復(fù)期對象、缺乏對象、運動員對象是本發(fā)明組合物尤其有用的對象。推而廣之，想要照顧其健康和預(yù)防疾病病癥的任何對象都將發(fā)現(xiàn)本發(fā)明適于改善和保持其生理和心理的良好狀況。此外，組合物的銅含量(優(yōu)選大于0.4wt%)提供了賦予組合物以抗貧血、抗氧化、抗炎和抗感染作用的可能性。組合物的鐵含量(優(yōu)選大于1.4wt%)提供了賦予組合物以抗貧血作用的可能性。組合物的鈣含量(優(yōu)選大于0.3wt%)提供了賦予組合物以保持骨強度和密度、神經(jīng)傳導(dǎo)、肌肉收縮以及對酶活性和細胞膜的調(diào)節(jié)作用的可能性。組合物的鉀含量(優(yōu)選大于)提供了賦予組合物以調(diào)節(jié)神經(jīng)傳導(dǎo)、肌肉活性和酸堿平衡以及預(yù)防或治療動脈粥樣硬化、高血壓、腸慢性炎性疾病的可能性。組合物的錳含量(優(yōu)選大于0.3wt%)提供了賦予組合物以保護細胞免受自由基影響的酶活化作用的可能性。組合物的鎂含量(優(yōu)選大于0.2wt%)提供了調(diào)節(jié)神經(jīng)元和肌肉活性的可能性。組合物的果糖含量(優(yōu)選大于2.5wt%)提供了賦予組合物以低血糖和血糖穩(wěn)定作用、提高精力作用的可能性。組合物中膽堿的存在提供了改善機體恢復(fù)能力、預(yù)防肌肉疲勞、提高運動員的表現(xiàn)、延緩與年齡相關(guān)的身體和認(rèn)知行為降低的可能性。實施例以下實施例舉例說明本發(fā)明但不限制本發(fā)明。實施例1-制備組合物由以下化合物制備本發(fā)明的組合物-來自GardelSugarfactory(Guadeloupe)的特別用于所述制備的食物類型的粗制條件的甘蔗糖蜜；-脫水且經(jīng)包封的活微生物長雙歧桿菌型細菌，由Lallemand(法國)銷售，品名ProbiocapRosell_175ME；Lallemand提供的這種化合物的微生物學(xué)特性如下長雙歧桿菌>5X1010cfu/g；葡萄球菌(Staphylococci)<10cfu/g；酵母和真菌<103cfu/g；腐生植物<104cfu/g；假單胞菌(Pseudomonas)<25cfu/g；芽孢桿菌(Bacilli)<104cfu/g；沙門氏菌(Salmonellae)<lcfu/25g；大腸桿菌<lcfu/g。-多糖纖維Nutriose(Roquette，法國)的糊精纖維。糖蜜的微生物學(xué)表征在其使用之前實施。為此，在LTlOO肉湯中將糖蜜稀釋到1/10，然后接種-為計總需氧菌，接種在胰酶解酪蛋白大豆瓊脂(蛋白胨17.Og/L-豆粉蛋白胨3.Og/L:D(+)_葡萄糖2.5g/L-氯化鈉5.Og/L_磷酸氫二鉀:2.5g/L_水-lOOOmL，pH7.3士0.2)中的培養(yǎng)皿上；-為酵母和真菌，接種在葡萄糖氯胺苯醇沙保羅氏培養(yǎng)基-瓊脂培養(yǎng)基(SAB，Biomerieux，法國)上。在兩種情況下，將瓊脂培養(yǎng)基在37°C的烘箱中放置5天。然后計數(shù)菌落，并且以cfu/mL表示結(jié)果?？偧毦鷿舛刃∮趌OOOcfu/g，并且酵母和真菌的濃度小于lOOcfu/g。制備預(yù)混物將40%糖蜜與60%多糖纖維在預(yù)先消毒的不銹鋼三混合器爾21161-1^￥呼，111^-(310￥吐，美國)中混合。用水稀釋到10%。勻漿后，測量預(yù)混物的干物質(zhì)含量。為此，將預(yù)混物的一部分在105°C烘箱(MemmertGmbH，德國)中干燥2小時。利用Sartoriuskales測得干渣重182g，精度為10_4g。經(jīng)計算，預(yù)混物的干物質(zhì)(質(zhì)量)含量為40%至50%。中間組合物的制備向預(yù)混物中添加40mg/g(以干物質(zhì)計)益生菌，并且利用三混合器以IOOrpm的速度混合整個組合物，溫度不超過25°C。獲得最終組合物通過使中間組合物霧化來獲得最終組合物。霧化干燥塔包括用電阻器加熱和利用雙流體葉輪或噴嘴噴霧。在室中的滯留時間為15至M秒，空氣流速為約500kg/h。入口溫度為155°C，出口溫度為85°C。旋風(fēng)分離器的壓力差為200_Hg。最終處理將最終組合物在250μm不銹鋼振動篩(Vibrowest，意大利)上以1000-1450rpm、0.5-1.85kW、30s/kg過篩。然后，將組合物立即包裝到小袋中，以避免吸收任何濕度和任何污染物。最終獲得的組合物的表觀是具有糖蜜特征氣味的棕色細粉形式。干燥損失小于6%。所得粉末的溶解度為10%。在制備組合物的后15天，通過Lallemand測量組合物中長雙歧桿菌活益生菌的量。在三個不同的樣品上，估算出長雙歧桿菌的種群分別為4.2X107CfU/g、5.3X107CfU/g和2.35X107cfu/go實施例2-組合物對細胞生存力的作用通過還原MTT法(溴化噻唑藍四氮唑)，從以單層培養(yǎng)的、來自人結(jié)腸直腸癌細胞(Caco-2系，克隆TC-7)生存力的觀點評價實施例1中獲得的組合物。在添加有青霉素(Sigma，50IU/mL)、鏈霉素(Sigma，50mg/mL)、慶大霉素(Sigma，10mg/mL)和胎牛血清(Sigma,10%,ν/ν)的DMEM/AcaneMEM培養(yǎng)基中將細胞單層培養(yǎng)至匯合。將最終組合物稀釋到1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL、lmg/mL、lOmg/mL和IOOmg/mL，并且將細胞置于其中，在37°C、包含5%CO2的潮濕氣氛中放置48天。使用EGF(表皮生長因子)作為TC-7細胞增殖測試的參照物。根據(jù)MTT還原法測量細胞生存力。通過測量吸光度來評價MTT還原成甲臜藍(FormazanBlue)，所述吸光度與代謝活性細胞的數(shù)目成正比，通過分光光度法在MOnm處測得。結(jié)果以任意吸光度單位(0.D.)/樣品和相對于對照組的百分比變化來表示。對O.D.值進行統(tǒng)計檢測。不同對照組與“處理組”的平均值之差通過單因素多分析(Anova1，σ<0.05)確定，并且相對于對照組平均值的處理組平均值通過Durmett(σ<0.1)測試來確定。結(jié)果在下表1中示出。表1在48小時孵育之后實施例2的組合物對TC-7細胞生存力的影響權(quán)利要求1.一種組合物，其包含-干糖蜜；和-脫水且經(jīng)包封的活微生物。2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其還包含多糖纖維。3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中所述多糖纖維是糊精或麥芽糊精纖維。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項的組合物，其包含的水的總質(zhì)量比小于或等于6%、優(yōu)選小于或等于5%、更優(yōu)選小于4%。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項的組合物，其按以下質(zhì)量比包含10至50%、優(yōu)選15至45%、最優(yōu)選20至40%的干糖蜜；15至70%、優(yōu)選20至65%、最優(yōu)選35至60%的多糖纖維；和4至50%、優(yōu)選10至40%、最優(yōu)選20至30%的脫水且經(jīng)包封的活微生物。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項的組合物，其中所述糖蜜選自甜菜、甘蔗、水果、谷類的糖蜜及其混合物，優(yōu)選選自甜菜、甘蔗的糖蜜及其混合物，最優(yōu)選選自甘蔗糖蜜。7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項的組合物，其中所述微生物是益生性微生物，其選自以下屬的細菌或酵母雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)、乳桿菌屬(LactcAacillus)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、片球菌屬(Pediococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、丙酸菌屬(Propionibacterium)、酵母屬(Saccharomyces)、克魯維酵母菌屬(Kluyceromyces)及其混合物，優(yōu)選選自以下種長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、干酷乳桿菌(Lactobacilluscasei)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)、瑞士乳桿菌(Lactobacillushelveticus)禾口圓酵母(Saccharomycestorula)ο8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項的組合物，其包含的活微生物的量為至少105、優(yōu)選至少107、理想地至少5X107cfu/g。9.食品或膳食產(chǎn)品，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的組合物。10.藥物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項的組合物，所述藥物為片劑、明膠膠囊劑、粉劑或顆粒劑的形式。11.制備組合物的方法，包括將糖蜜與脫水且經(jīng)包封的活微生物混合，還包括干燥步馬聚O12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其依次包括-混合所述糖蜜、多糖纖維和任選的水，以獲得預(yù)混物；-向所述預(yù)混物中添加脫水且經(jīng)包封的活微生物，以獲得中間組合物；和-干燥所述中間混合物。13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述中間混合物的干燥通過霧化來實施。14.根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法，其中所述預(yù)混物的干物質(zhì)水平為以質(zhì)量計30至60wt%，優(yōu)選40至50wt%。15.根據(jù)權(quán)利要求11至14任一項的方法，其中所述組合物是根據(jù)權(quán)利要求1至8任一項的組合物。全文摘要本發(fā)明涉及組合物，其包含粉末形式的干糖蜜，以及脫水并經(jīng)包封的活微生物。本發(fā)明還涉及包含所述組合物的食品或膳食產(chǎn)品或藥物，以及制備所述組合物的方法，其包括混合所述糖蜜和所述脫水并經(jīng)包封的活微生物，以及干燥步驟。文檔編號A23L1/308GK102300472SQ201080007067公開日2011年12月28日申請日期2010年1月6日優(yōu)先權(quán)日2009年1月6日發(fā)明者布里吉特·阿萊曼德,弗洛倫斯·普塞申請人:玫瑰花蕾公司