專利名稱：轉氨酶多肽的制作方法
轉氨酶多肽1.相關申請的交叉引用本申請要求35U. S. C. § 119 (e)下2009年1月8日提交的申請序列號為 61/143,401的權益，其內容通過引用并入本文。2.參考序列表、表格或計算機程序序列表的正式復本作為ASCII格式化文本文件與說明書經(jīng)EFS-Web同時被提交， 文件名“376247-0；34. txt”，創(chuàng)建日期2010年1月8日，且大小為569千字節(jié)。經(jīng)EFS-Web 提交的序列表是說明書的一部分且通過引用全部并入本文。3.背景氨基轉移酶，還稱為轉氨酶(E.C.2.6. 1)，催化來自氨基供體底物的伯胺的氨基， 一對電子和質子向氨基受體分子的羰基轉移。Ω-轉氨酶(ω-轉氨酶)轉移與羰基間隔至少一個亞甲基插入的胺基團。通常的轉氨酶反應顯示在下面的反應I中。在這一反應中，氨基受體(I，酮基 (keto)或酮)，即期望的氨基酸產物的前體，與氨基供體(II)反應。轉氨酶交換氨基供體的氨基與氨基受體的酮基團。因此反應產生期望的手性胺產物(III)和作為副產物的新的氨基受體(酮)化合物(IV)。
權利要求
tttgcggaaccggtgatgggtgcgggcggtgttattccgccggcgaaaggctattttcag 720gcgattctgccgatcctgcgcaaatatgatattccggtgatcagcgatga agtgatttgc780ggctttggccgtaccggcaacacctggggctgcgtgacctatgattttac cccggatgcg 840attatt.agcagcaaaaacctgaccgcgggtttttttccgatgggcgcggtgattctgggt900ccggaactgagcaaacgtctggaaaccgcgattgaagcgatcgaagaatttccgcatggt960tttaccgcgagcggccatccggtgggttgtgcgattgcgctgaaagcgattgatgtggtg1020atgaacgaaggcctggccgaaaacgtgcgtcgtctggccccgcgttttga agaacgtctg1080aaacatattgcggaacgtccgaacattggcgaatatcgtggcattggctttatgtgggcg1140ctggaagcggtgaaagataa agcgagcaaaaccccgtttgatggcaacctgagcgtgagc1200gaacgtattgcgaacacctgcaccgatctgggcctgatttgccgtccgctgggccagagc1260gtggttctgtgcccgccgtttattctgaccgaagcgcagatggatgaaatgttcgataaa1320ctggaaaaagcgctggataaagtgtttgcggaagtggcgtaa1362<210> 2 <211> 453 <212> PRT <213>人丄序列<220> <223>來自河流弧菌(V. fluvialis)的轉氨酶 <400> 2Met Asn Lys Fro Gln Ser Trp Glu 15Tyr Gly Fhe Thr Asp Met Fro Ser 20Va丄 Thr His Gly Glu Giy Fro Tyr 3540Tyr Leu Asp Ala Asn Ser Gly Leu(5055His Lys Giy Leu lie Asp Ala Ala 6570Gly Tyr His Ala Fhe Fhe Gly Arg 85Ser Glu Lys Leu Val Glu Val Ser 100Tyr Thr Asn Ser Gly Ser Glu Ala 115120Trp Phe Leu His Ala Ala Glu Gly(130135Thr Arg Trp Asn Ala Tyr His Gly 145150Thr Gly Lys Pro Tyr Asn Ser Val
AlaLeu(25lieTrpLysMetPro 105 AsnLysValPheArg 10 HisValAsnAlaSer(90PheAspProThrGlyAla Gln Asp MetGln(75 AspAspThrGlnAla 155 LeuGluArgValVal 60 TyrGlnSerMetLys 140 ValProThrGlyAsn(45AlaGluThrGlyVal 125 ArgSerLeuTyrThr(30GlyGlyArgValArg 110 LysLysAlaProSer(15VaiArgFheFheMet(95ValMetlieSerGlvLeuValArgAspFro(80LeuPheLeuLeuMet 160 PheVal His LeuThr 180 Gln165CysIlc Gln 210 MeLVal 225 AlaGluThrAlaLys 305 PheIleAlaIleLys 385 GluLeuGlnGly lie Leu Pro lieVal TyrGly Ala GlyAsp 275 PheCys 260 PheThrAspProGly 370 AspArgGlyMetAla Ser ValArg 355 GluLyslieGlnlie 245 GlyGly 290Arg Leu Glu ThrVal 340 PheTyrAlaAlaSer 420 GluPhe Ala 450Asp 435Glu Val AlaPro His TyrThr Glu Glu 195Arg Glu GIy AlaGly 230 LeuPhe Pro Met GluGly 325 MetGluArgSerAsn 405 ValAsp 215 ValArg Phe Gly Thr Pro AspGly 295lieAla 310His ProAsnGluGlyLys 390 ThrVal Met PheGluArglie 375 ThrCysLeuAsp170ArgPhe Val Ala Arg 200 ThrTrp 185Leu AlaTyr Arg Ilc Ala GlyLys Tyr ArgAla 280 AlaGluValGlyLeu 360 GlyProThrCysLys 440Thr 265 lieValAlaGlyLeu 345 LysAsp 250 GlyCys 330 AlaPhePhe AspAsp Leu 410 Pro Pro 425Leu GluGly Glu GluPhc 220 Lyslie Pro Pro Ala 235lie Prolie Ser Ser lie Leu lieGlu 315 AlaGly 300 GluGlu His lie Met TrpGly 395 GlyPheLyslieAsnAlaAla 380 AsnLeulieAlaGlu 190 Glu175Gly Glu Glu ThrLeu 205Phc Ala Glu ProGly Val Asn Thr TrpTyr Plie lieGly 270 AsnSer 255 CysGln 240 AspVal Leu ThrLys 285Pro Glu Leu SerPhe Pro His Ala Leu ValLys 335 ArgGlu 365 LeuLeulieLeuLeu 445Arg 350Arg ProGluSerCysThr 430 AspAlaValArg 415 GluGly 320 AlaLeuAsnValSer 400 ProAla Lys Val<210> 3 <211> 1362 <212> DNA <213>人工序列
9全文摘要
本公開內容提供與天然存在的野生型轉氨酶相比具有改進的性質的工程轉氨酶。還提供了編碼所述工程轉氨酶的多核苷酸，能夠表達所述工程轉氨酶的宿主細胞和使用所述工程轉氨酶合成多種手性化合物的方法。
文檔編號C12N15/63GK102341494SQ201080010926
公開日2012年2月1日 申請日期2010年1月8日 優(yōu)先權日2009年1月8日
發(fā)明者伊什·庫馬爾·達萬, 張希云, 格雷戈里·米勒 申請人:科德克希思公司