專利名稱：含有牡荊素阿拉伯糖苷的口服用組合物的制造方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以使用白落葵(Basella alba)作為原料為特征的、含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷(Arabinofuranosyl vitexin)和/或作為其水解物的牡荊素的口服用組合物的制造方法，詳細(xì)地說，涉及含有上述化合物作為活性組分的、具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的口服用組合物的制造方法。另外，本發(fā)明涉及包含上述口服用組合物的飲食品、醫(yī)藥品。
背景技術(shù)：
類黃酮是主要在植物中被進(jìn)行生物合成的具有黃烷衍生物骨架的化合物的總稱。 類黃酮根據(jù)分子種類而存在具有優(yōu)異的生理活性作用的類型。一般來說，植物的類黃酮大多數(shù)情況下以容易接受酶作用的“黃酮類0-葡萄糖苷 (O-Glucoside Flavonoid) ” (具有0-葡萄糖苷骨架的黃酮類配糖體)、或水不溶性的“糖苷配基”(不含糖成分的類黃酮)的形態(tài)存在。相對于此，“黃酮類C-葡萄糖苷(C-Glucoside Flavonoid) ” (具有C-葡萄糖苷骨架的黃酮類配糖體)由于與糖成分的結(jié)合是C-糖苷鍵，因此是相對于加熱、水解、酶等難以被分解從而穩(wěn)定性高的化合物。另外，由于是配糖體，因此對水的溶解性優(yōu)異。而且，在其中某一分子種類的類型中，對抗氧化、細(xì)胞保護(hù)、抗炎癥、抗癌、睡眠、抗焦慮等具有優(yōu)異的生理活性作用的類型最近為人所知(參照非專利文獻(xiàn)1)。但是，就黃酮類C-葡萄糖苷而言，含有其的原料的植物本身及其含量都非常少 (非專利文獻(xiàn)2、，雖然也發(fā)現(xiàn)了效率高的萃取法的嘗試(專利文獻(xiàn)1)，但仍不是充分的狀況。另外，例如在稱為“Cotoneaster thymaefolia”的植物(薔薇科枸子屬、分布于中國喜馬拉雅山的灌木)的葉子中，已知含有作為黃酮類C-葡萄糖苷的一種的牡荊素 2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷的情況(參照非專利文獻(xiàn)3)，但是，植物原料的大量獲取是困難的。而且，該植物并非食用植物，萃取該植物的黃酮類C-葡萄糖苷作為原料的該植物的利用是不現(xiàn)實(shí)的。因此，作為類黃酮的利用，大部分都是從含有易被分解的黃酮類0-葡萄糖苷的形態(tài)、或水不溶性的糖苷配基形態(tài)的類型的植物中將這些進(jìn)行萃取或提純而利用于功能性原料等中，黃酮類C-葡萄糖苷的有效利用并未進(jìn)行。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1 日本特開2006-265250號公報(bào)非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)l:Cell Biol Int. (2009), 33 (2), 247-52非專利文獻(xiàn)2 日本食品科學(xué)工學(xué)會誌(日本食品科學(xué)工學(xué)會雜志)000；3)50(1)， 32-34非專利文獻(xiàn)3 =Phytochemistry (1994)，35 (5)，1381—
發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明所要解決的課題本發(fā)明的目的在于，解決上述課題，從“容易得到”且“ 口服方面的安全性高”的植物中，發(fā)現(xiàn)大量含有“具有優(yōu)異的生理活性作用”的黃酮類C-葡萄糖苷的植物，并制造含有上述黃酮類C-葡萄糖苷作為活性組分的口服用組合物(尤其是飲食品、醫(yī)藥品)。解決課題的手段本發(fā)明人鑒于這樣的情況對各種含有類黃酮的植物進(jìn)行了探索，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)在作為葉菜的食用植物白落葵(Basella alba)中大量含有作為黃酮類C-葡萄糖苷的牡荊素呋喃阿拉伯糖苷。另外，發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)為牡荊素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。而且，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在以比正位反射消失的給藥量少的用量對小鼠給予作為巴比妥類麻醉藥的戊硫代巴比妥時(shí)，觀察到了劇烈地打轉(zhuǎn)的行為，但是，通過麻醉前給予牡荊素阿拉伯糖苷，該行為被抑制，作為牡荊素阿拉伯糖苷的生理活性作用而具有鎮(zhèn)靜和睡眠導(dǎo)入作用。另外，發(fā)現(xiàn)牡荊素呋喃阿拉伯糖苷能夠通過水解而容易地分離為阿拉伯糖部分和牡荊素(黃酮類C-葡萄糖苷的主體)。 上述見解是本發(fā)明人最初發(fā)現(xiàn)的見解。然后，根據(jù)這些見解完成了本發(fā)明。也就是說，權(quán)利要求1涉及的本發(fā)明是提供含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷和/或作為其水解物的牡荊素的口服用組合物的制造方法，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作為原料。權(quán)利要求2涉及的本發(fā)明是提供權(quán)利要求1所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述牡荊素呋喃阿拉伯糖苷是牡荊素2" -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。權(quán)利要求3涉及的本發(fā)明是提供權(quán)利要求1或2所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序?qū)ι鲜鲎鳛樵系陌茁淇M(jìn)行切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理的工序；之后進(jìn)行溶液萃取而得到萃取液的工序。權(quán)利要求4涉及的本發(fā)明是提供權(quán)利要求1 3的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序使用乙醇或最終濃度為 55%以上的乙醇進(jìn)行溶液萃取而得到萃取液的工序。權(quán)利要求5涉及的本發(fā)明是提供權(quán)利要求1 4的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序在得到上述萃取液之后用柱進(jìn)行提純的工序。權(quán)利要求6涉及的本發(fā)明是提供權(quán)利要求1 5的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物是將牡荊素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷和/或作為其水解物的牡荊素作為活性組分，并具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的物質(zhì)。權(quán)利要求7涉及的本發(fā)明是提供包含通過權(quán)利要求1 6的任意一項(xiàng)所述的制造方法得到的口服用組合物的飲食品。權(quán)利要求8涉及的本發(fā)明是提供包含通過權(quán)利要求6所述的制造方法得到的口服用組合物的藥劑。權(quán)利要求9涉及的本發(fā)明是提供含有牡荊素2" -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷作為活性組分，并具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的藥劑。發(fā)明效果本發(fā)明能夠?qū)ⅰ叭菀椎玫健鼻摇翱诜矫娴陌踩愿摺钡闹参镒鳛樵希圃炀哂?“鎮(zhèn)靜和睡眠導(dǎo)入作用(優(yōu)異的生理活性作用)”的口服用組合物。也就是說，在本發(fā)明中，由于作為活性組分的萃取原料使用作為葉菜能夠容易地得到的白落葵，因此，原料的獲取極其容易。另外，在口服方面安全性也高。另外，本發(fā)明的活性組分的化合物(黃酮類C-葡萄糖苷)，由于具有“對水的溶解性也高”、進(jìn)而“作為配糖體難以分解而穩(wěn)定性高”的性質(zhì)，因此，在伴隨有各種處理等的廣泛的加工品中的應(yīng)用也成為可能。另外，本發(fā)明能夠制造包含上述口服用組合物的飲食品。另外，本發(fā)明能夠制造包含上述口服用組合物的醫(yī)藥品。


圖1是表示在實(shí)施例1中明確了的牡荊素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷的結(jié)構(gòu)的圖。圖2是表示實(shí)施例2中的牡荊素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的鎮(zhèn)靜和睡眠導(dǎo)入作用的圖。
具體實(shí)施例方式以下，對本發(fā)明詳細(xì)地進(jìn)行說明。本發(fā)明涉及以使用白落葵(Basella alba)作為原料為特征的、含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷(Arabinofuranosyl vitexin)和/或作為其水解物的牡荊素的口服用組合物的制造方法，詳細(xì)地說，涉及含有上述化合物作為活性組分的、具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的口服用組合物的制造方法。能夠用于本發(fā)明的原料是屬于落葵科落葵屬植物的白落葵(Basella alba)。另外，只要是屬于白落葵(Basella alba)種的物質(zhì)，也可以使用任何品種、種系的物質(zhì)(例如青莖種、紅莖種)。作為用作本發(fā)明原料的白落葵的植物體部位，可以使用植物體的任何部分，但是， 從其含量方面來看優(yōu)選地上部(主要為葉、莖)。另外，地上部(主要為葉、莖)是作為葉菜的白落葵的可食部分。另外，能夠使用生的植物體、干物、加熱處理品、冷凍品等，尤其優(yōu)選使用生的植物體、干物。另外，在后述的萃取工序中使用“完全不含水的溶劑”(例如100%的乙醇等)的情況下，作為原料也優(yōu)選使用不含水分的干物。在本發(fā)明的制造方法中，將上述作為原料的白落葵直接加以使用也可以，但優(yōu)選對上述作為原料的白落葵進(jìn)行切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理。該工序是包括將上述作為原料的白落葵稍大地切成若干碎片、切碎成細(xì)小的小片、粉碎、搗碎等廣泛行為的工序。優(yōu)選能夠通過形成為稍大地切成1 數(shù)cm左右的狀態(tài)進(jìn)行。上述白落葵的地上部(原料)，以每干重約0.5 1.5質(zhì)量％ (具體為約1質(zhì)量％)這樣的作為天然物非常高的含有率含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷(尤其是牡荊素 2" -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷 O”-0-α -D-Arabinofuranosyl vitexin))。因此，在本發(fā)明的口服用組合物的制造中，為了使其含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷， 只要使其含有上述白落葵的植物體原料(優(yōu)選如上述那樣進(jìn)行了將其切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理后的物質(zhì))即可，例如，也可以將該原料(優(yōu)選如上述那樣進(jìn)行了將其切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理后的物質(zhì))直接加以使用并含有而形成為組合物的形態(tài)。但是，從純度方面考慮，在本發(fā)明的口服用組合物的制造中，優(yōu)選進(jìn)行溶液萃取而得到萃取液。溶液萃取工序也可以直接對上述原料進(jìn)行，但在萃取效率方面進(jìn)一步優(yōu)選對上述原料進(jìn)行了切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理后而得到的物質(zhì)進(jìn)行。溶液萃取工序中所使用的溶劑能夠使用水、緩沖溶液、有機(jī)溶劑、或這些的含水溶劑。作為有機(jī)溶劑，例如可以舉出乙醇、甲醇、異丙醇、丁醇之類的低級脂肪族醇，或丙酮、乙酸乙酯、氯仿等。在這些溶劑中同樣，在萃取效率或操作容易度、安全性方面尤其優(yōu)選水、乙醇或含水乙醇。另外，由于通過使用最終濃度為55%以上、優(yōu)選最終濃度為60%以上、進(jìn)一步優(yōu)選最終濃度為80%以上的乙醇進(jìn)行萃取，能夠抑制作為雜質(zhì)的多糖類的洗脫，從而能夠提高牡荊素呋喃阿拉伯糖苷的萃取效率，因此尤其優(yōu)選。作為萃取條件，能夠通過相對于上述原料(優(yōu)選碎片化物質(zhì))加入1 50倍量 (重量比)、優(yōu)選2 15倍量的上述溶劑，并在0°C 溶劑沸點(diǎn)的溫度條件、優(yōu)選室溫 溶劑沸點(diǎn)以下的溫度下浸漬或振蕩5分鐘 1個(gè)月、優(yōu)選20分鐘 1周而進(jìn)行萃取。得到的萃取液，通過冷凍干燥或利用蒸發(fā)器等使其干燥，能夠形成為濃縮干物。另外，溶液萃取工序也可以利用多種不同的溶劑進(jìn)行多次。尤其在用水或低濃度的含水乙醇進(jìn)行了第一次萃取的情況下，通過接著進(jìn)行使用了上述特定濃度以上的乙醇的萃取，能夠使牡荊素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的萃取效率提高。該萃取也可以伴隨有如下的反應(yīng)，即，通過使用含有酶或酸(例如鹽酸等)的溶劑 (水或緩沖溶液)進(jìn)行萃取而進(jìn)行從上述原料中萃取出的“牡荊素呋喃阿拉伯糖苷”的水解，從而將作為黃酮類C-葡萄糖苷(C-Glucoside flavonoid)的主體的“牡荊素”分離的反應(yīng)。另外，利用酶或酸進(jìn)行的水解處理，既可以在上述萃取工序之后作為獨(dú)立的工序進(jìn)行，也可以在后述的提純工序后進(jìn)行。通過上述得到的萃取液、或使該萃取液干燥而得到的濃縮干物能夠直接形成為本發(fā)明的口服用組合物。另外，通過對這些進(jìn)行提純工序，能夠進(jìn)一步提高純度。作為提純工序，能夠通過液-液分離萃取、或利用硅膠、化學(xué)修飾硅膠、活性炭、合成吸附樹脂擔(dān)體等進(jìn)行的柱提純(Column purification)，而進(jìn)行高純度化。作為例子，例舉用于將“牡荊素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷”高純度化的提純條件。
首先，將未進(jìn)行上述水解處理的萃取液(具體為經(jīng)過了最終濃度為60%以上的乙醇萃取后的萃取液)的“濃縮干物”的水溶性物質(zhì)供給至利用水平衡化后的多孔性合成吸附樹脂(具體為夕· ^ ^ > (DIAION)HP-20[三菱化學(xué)公司制造])的柱中。然后，將水洗脫的成分除去后，通過將利用15 30%乙醇(具體為約20%乙醇)洗脫的洗脫液回收， 能夠得到高純度化了的“含牡荊素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的組合物(提純物)”。另外，通過在上述括號內(nèi)所述的適宜條件下進(jìn)行萃取和提純，能夠得到純度80% 以上的含牡荊素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷的組合物(提純物)。另外，對于“具有其他分子結(jié)構(gòu)的牡荊素呋喃阿拉伯糖苷”或“作為水解物的牡荊素”，除了乙醇的適宜范圍與上述稍有不同之外，也能夠通過與上述大致相同的操作來進(jìn)行提純。另外，如上述得到的含牡荊素呋喃阿拉伯糖苷的組合物(提純物)或含有牡荊素的組合物(提純物)，通過進(jìn)一步供給至薄層色譜儀(TLC)(氯仿/甲醇/水 (65 25 4))、或20% (V/V)乙腈與水的混合溶劑的0DS_HPLC(十八烷基硅烷鍵合硅膠-高效液相色譜儀)中并采集目標(biāo)峰值，能夠?qū)⒓兤穯坞x、或?qū)⒓兌蕊@著地提高至被認(rèn)為大致是純品的程度(作為單離物而得到)。通過上述得到的“牡荊素呋喃阿拉伯糖苷(具體為牡荊素2〃 -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷參照下述化學(xué)式1)”、或“牡荊素(具體為8-β-D-吡喃葡萄糖苷-芹菜素(8- β -D-glucopyranosyl-apigenin)參照下述化學(xué)式2)，是黃酮類C-葡萄糖苷(C-Glucoside Flavonoid)(具有C-葡萄糖苷(C-Glucoside)骨架的黃酮類配糖體 (Flavonoid glycoside))的一禾中。這些由于糖苷配基與糖成分(構(gòu)成糖，constituent sugar)的結(jié)合為C-糖苷 (C-glycoside)，因此是相對于加熱、水解、酶等難以被分解且作為黃酮類配糖體穩(wěn)定性高的化合物。另外，這些由于是配糖體，因此具有水溶解性，尤其是牡荊素呋喃阿拉伯糖苷的水溶解性優(yōu)異。
權(quán)利要求
1.一種口服用組合物的制造方法，所述口服用組合物含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷和/ 或作為其水解物的牡荊素，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作為原料。
2.如權(quán)利要求1所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述牡荊素呋喃阿拉伯糖苷是牡荊素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。
3.如權(quán)利要求1或2所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序?qū)ι鲜鲎鳛樵系陌茁淇M(jìn)行切碎、碎片化、或搗碎的任意一種處理的工序；之后進(jìn)行溶液萃取而得到萃取液的工序。
4.如權(quán)利要求1 3的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序使用乙醇或最終濃度為55%以上的乙醇進(jìn)行溶液萃取而得到萃取液的工序。
5.如權(quán)利要求1 4的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物的制造方法包括下述工序在得到上述萃取液之后用柱進(jìn)行提純的工序。
6.如權(quán)利要求1 5的任意一項(xiàng)所述的口服用組合物的制造方法，其中，上述口服用組合物是將牡荊素2" -O-α -D-呋喃阿拉伯糖苷和/或作為其水解物的牡荊素作為活性組分的、具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的物質(zhì)。
7.一種飲食品，其包含通過權(quán)利要求1 6的任意一項(xiàng)所述的制造方法得到的口服用組合物。
8.—種藥劑，其包含通過權(quán)利要求6所述的制造方法得到的口服用組合物。
9.一種藥劑，其含有牡荊素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷作為活性組分，并具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于，從容易得到且在口服方面安全性高的植物中，發(fā)現(xiàn)大量含有具有優(yōu)異的生理活性作用的黃酮類C-葡萄糖苷的植物，并制造含有上述黃酮類C-葡萄糖苷作為活性組分的口服用組合物(尤其是飲食品、醫(yī)藥品)。本發(fā)明提供口服用組合物的制造方法，所述口服用組合物含有牡荊素呋喃阿拉伯糖苷和/或作為其水解物的牡荊素，并具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作為原料；包含通過上述制造方法得到的口服用組合物的飲食品；以及包含通過上述制造方法得到的組合物的具有鎮(zhèn)靜作用和/或睡眠導(dǎo)入作用的藥劑。
文檔編號A23L1/30GK102387806SQ201080016900
公開日2012年3月21日 申請日期2010年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月10日
發(fā)明者草野崇一 申請人:富士產(chǎn)業(yè)株式會社