專利名稱：使用tlr7和tlr9的免疫調(diào)節(jié)寡核苷酸(iro)拮抗劑強(qiáng)化自身免疫性及炎癥性疾病治療的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及免疫學(xué)和免疫治療領(lǐng)域，更具體地，涉及通過腫瘤壞死因子a的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑治療自身免疫性和炎癥性疾病。
背景技術(shù)：
炎癥是身體組織對(duì)原炎劑例如病原體的一種復(fù)雜的生物學(xué)反應(yīng)。在這種反應(yīng)中， 在康復(fù)過程開始時(shí)，身體試圖去除該原炎劑。在某些具有炎癥要素的疾病(例如，自身免疫性疾病)中，身體的免疫系統(tǒng)對(duì)非外來(lái)物質(zhì)響應(yīng)不適當(dāng)。在這種情況下，免疫系統(tǒng)造成對(duì)身體自身組織的損害。歷史上，自身免疫性和炎癥性疾病已采用非甾體抗炎劑(NSAID-例如阿司匹林、 布洛芬或萘普生)、類固醇(例如強(qiáng)的松)、抗瘧疾藥物(例如羥基氯喹)或其他非特異性藥物治療。非特異性藥物包括甲氨蝶呤、柳氮磺胺吡啶、來(lái)氟米特、環(huán)磷酰胺和霉酚酸。然而，這些療法效果有限。最近，腫瘤壞死因子a (TNF-a)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑已被開發(fā)作為對(duì)自身免疫性和炎癥性紊亂的高特異性的療法。所述競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑包括依那西普(etanercept) (Embrel )、因福利美(infliximab) (Remicade )和阿達(dá)木單抗(adalimubab) (Humira ⑧)。這些制劑通過與TNF-a結(jié)合從而使其不能被其受體利用以及防止其開始炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)而起作用，并在自身免疫性和炎癥性紊亂的治療中表現(xiàn)出實(shí)質(zhì)性的改進(jìn)。這樣的TNF-a的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑已被批準(zhǔn)用于治療范圍廣泛的這類疾病，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、銀屑病、葡萄膜炎、強(qiáng)直性脊柱炎、節(jié)段性回腸炎和肉狀瘤病?，F(xiàn)已表明TNF-a的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑在其他應(yīng)用中也是有用的。Popivanova等在 (2008) J. Clin. Invest. 118 :560-70中提出老鼠體內(nèi)TNF-a的阻擋減少了與慢性結(jié)腸炎有關(guān)的結(jié)直腸癌變。Fries 等在(2008) Int. J. Med. Sci. 5 :169-80 及(2008)Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 294 :G938_G947中分別提出因福利美和依那西普減少了老鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎腸上皮細(xì)胞的死亡并防止了腸上皮細(xì)胞緊密連接中遮光蛋白和閉鎖小帶-I 的受損。Coppieters 等在(2006)Arthritis&Rheumatism 54 :1856-66 中提出駱駝科動(dòng)物抗-TNF VHH蛋白超過類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎老鼠模型中的因福利美和阿達(dá)木單杭。 Zalevsky等在(2007) J. Immunol. 179 :1872-83中提出TNF的顯性失活抑制劑減輕了老鼠模型的實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎。Rubbert-Roth 和 Finckh 在(2009) Arthritis Res. Ther. 11 (Suppl I) :S1中審視了 FDA批準(zhǔn)的TNF-a的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑效果的局限性。在可替選的方法中，Newton等人在(2001)Ann. Rheum. Dis. 60 :iii25_iii32 中提出了 TACE的抑制劑，使前體TNF- a向TNF- a轉(zhuǎn)換的酶對(duì)關(guān)節(jié)炎老鼠模型有效。可惜的是，所有目前經(jīng)批準(zhǔn)的TNF- a的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑都與嚴(yán)重感染例如結(jié)核病、 敗血癥和真菌感染的發(fā)展有夫。白血球、紅血球和血小板數(shù)量及某些癌癥事件的增加也與使用這些藥物的治療有夫。Toll樣受體(TLR)存在于免疫系統(tǒng)的眾多細(xì)胞上，并且已表明與先天免疫反應(yīng)有關(guān)(Homung等人，(2002) J. Immunol. 168 :4531-37)。在脊椎動(dòng)物體內(nèi)，這個(gè)家族包括被稱作TLRl到TLRlO的10種蛋白，已知它們可以從細(xì)菌、真菌、寄生生物和病毒中識(shí)別出與分子模型相關(guān)的病原體(Poltorak 等人(1998) Science 282 :2085-88 ；Underhill 等人(1999)Nature 401 :811-15 ；Hayashi 等人(2001)Nature 410 :1099-103 ；Zhang 等人 (2004)Science 303 :1522-26 ；Meier 等人(2003)Cell. Microbiol. 5 :561-70 ；Campos 等人(2001)J. Immunol. 167 :416-23 ;Hoebe 等人(2003)Nature 424:743-48 ;Lund(2003) J. Exp. Med. 198 :513-20 ；Heil 等人(2004)Science 303 :1526-29 ；Diebold 等人(2004) Science303 :1529-31 ；Homung 等人(2004)J. Immunol. 173 :5935-43)。TLR 是關(guān)鍵手段，哺乳動(dòng)物通過這種手段可以識(shí)別外來(lái)分子并對(duì)其生成免疫反應(yīng)，并且還提供了用于先天性適應(yīng)性免疫反應(yīng)結(jié)合的手段(Akira et a. I. (2001)Nat. Immunol. 2 :675-80 ； Medzhitov (2001)Nature Rev. Immunol. I :135-45)。TLR 也顯不出在許多疾病的發(fā)病機(jī)理 (Cook等人(2004)Nat. Immunol. 5 :975-79)中發(fā)揮作用，這些疾病包括自身免疫、傳染性疾病和炎癥，并且，使用適當(dāng)制劑對(duì)TLR介導(dǎo)活化的調(diào)節(jié)可提供疾病干預(yù)手段。ー些TLR位于細(xì)胞表面以檢測(cè)細(xì)胞外病原體并對(duì)其作出反應(yīng)，且其它TLR位于細(xì)胞內(nèi)以檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)病原體并對(duì)其作出反應(yīng)。表I提供了 TLR、包括受體的細(xì)胞類型及其已知的激動(dòng)劑的表不(Diebold 等人(2004) Science303 :1529-31 ;Liew 等人(2005) Nature 5 :446-58 ；Hemmi 等人(2002) Nat. Tmmuno1. 3 :196-200 ； Jurk 等人(2002) Nat. Tmmuno1. 3 499 ；Lee 等人(2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 100 :6646-51) ； (Alexopoulou (2001) Nature 413 :732-38)。表I:
權(quán)利要求
1.一種有效治療患具有自身免疫性或炎癥性要素的疾病的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括以藥學(xué)有效劑量對(duì)哺乳動(dòng)物組合施用IRO化合物與抑制TNF的抗炎劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中所述IRO化合物和抑制TNF的抗炎劑與一種或多種疫苗、抗原、抗體、細(xì)胞毒素劑、過敏原、抗生素、反義寡核苷酸、TLR激動(dòng)劑、TLR拮抗劑、 肽、蛋白質(zhì)、基因治療載體、DNA疫苗、佐劑、激酶抑制劑、抗病毒劑或共刺激分子組合施用。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中施用所述IRO和抑制TNF的抗炎劑的途徑獨(dú)立地為腸外、粘膜傳遞、ロ服、舌下、經(jīng)皮、局部、吸入、鼻內(nèi)、噴霧、眼內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道、通過基因槍、皮膚貼片或滴眼劑或漱ロ水形式。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中抑制TNF的抗炎劑是依那西普、因福利美或阿達(dá)木單抗。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中具有自身免疫性或炎癥性要素的疾病是風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、銀屑病、葡萄膜炎、強(qiáng)直性脊柱炎、節(jié)段性回腸炎、肉狀瘤病、結(jié)腸炎或)85怔。
6.一種用于在具有患具有自身免疫性或炎癥性要素的疾病或紊亂的風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物中預(yù)防該疾病或紊亂的方法，該方法包括以藥學(xué)有效劑量對(duì)哺乳動(dòng)物施用IRO化合物和抑制TNF的抗炎劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述IRO化合物和抑制TNF的抗炎劑與一種或多種疫苗、抗原、抗體、細(xì)胞毒素劑、過敏原、抗生素、反義寡核苷酸、TLR激動(dòng)劑、TLR拮抗劑、 肽、蛋白質(zhì)、基因治療載體、DNA疫苗、佐劑、抗病毒劑或共刺激分子組合施用。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中施用所述IRO和抑制TNF的抗炎劑的途徑獨(dú)立地為腸外、粘膜傳遞、ロ服、舌下、經(jīng)皮、局部、吸入、鼻內(nèi)、噴霧、眼內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道、通過基因槍、皮膚貼片或滴眼劑或漱ロ水的形式。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中抑制TNF的抗炎劑是依那西普、因福利美或阿達(dá)木單抗。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中具有自身免疫性或炎癥性要素的疾病是風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、銀屑病、葡萄膜炎、強(qiáng)直性脊柱炎、節(jié)段性回腸炎、肉狀瘤病、結(jié)腸炎或癌癥。
11.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中所述IRO化合物包括結(jié)構(gòu)S-Nm-N3N2N1CGN1N2N3-Nm-S'其中，CG是寡核苷酸基序，且C是胞嘧啶或ー種嘧啶核苷酸衍生物或非核苷酸連接子，而G是鳥苷或一種嘌呤核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；N1-N3和N1-N3在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為核苷酸或核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；Nffl和Nm在毎次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為核苷酸或核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；規(guī)定N1到N3和/或C和/或G中的至少ー個(gè)是核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；其中，如果沒有核苷酸衍生物或非核苷酸連接子，所述寡核苷酸基序會(huì)有免疫刺激并且，其中m是從0到約30的數(shù)字。
12.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述IRO化合物包括結(jié)構(gòu)S-Nm-N3N2N1CGN1N2N3-Nm-S'其中CG是寡核苷酸基序，且C是胞嘧啶或ー種嘧啶核苷酸衍生物或非核苷酸連接子，G是鳥苷或ー種嘌呤核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；N1-N3和N1-N3在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為核苷酸或核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；Nffl和Nm在毎次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為核苷酸或核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；規(guī)定N1到N3和/或C和/或G中的至少ー個(gè)是核苷酸衍生物或非核苷酸連接子；其中，如果沒有核苷酸衍生物或非核苷酸連接子，所述寡核苷酸基序會(huì)有免疫刺激并且，其中m是從0到約30的數(shù)字。
全文摘要
本發(fā)明提供了免疫調(diào)節(jié)寡核苷酸(IRO)作為TLR拮抗劑和抑制TNF的抗發(fā)炎劑的增強(qiáng)劑用于預(yù)防和治療炎癥性和自身免疫性疾病的用途抗發(fā)炎劑。
文檔編號(hào)C12N15/117GK102612561SQ201080024338
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2010年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月1日
發(fā)明者?？钒汀·坎迪馬拉, 朱富剛, 薩迪爾·阿格拉瓦爾 申請(qǐng)人:艾德拉藥物股份有限公司