專利名稱：具有增強的體內(nèi)穩(wěn)定性的抗神經(jīng)生長因子(ngf)抗體的制作方法
具有增強的體內(nèi)穩(wěn)定性的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體
背景技術(shù)：
神經(jīng)生長因子(NGF)是分泌型蛋白質(zhì)，其在50多年前被發(fā)現(xiàn)為促進感覺和交感神經(jīng)元的存活和分化的分子。NGF的β鏈獨自負(fù)責(zé)NGF的神經(jīng)生長刺激活性。β鏈同源二聚化并且合并到較大的蛋白質(zhì)復(fù)合物中。NGF是被稱為神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的神經(jīng)營養(yǎng)因子家族的成員。NGF以高親和力與被稱為TrkA的原肌球蛋白受體激酶結(jié)合。NGF還能夠結(jié)合被稱為Ρ75ΝΤΚ的受體，所述受體是腫瘤壞死因子受體超家族的一員并且還和其它神經(jīng)營養(yǎng)蛋白相互作用。NGF的結(jié)構(gòu)和功能概述于例如Sofroniew，Μ. V.等人Q001)Annu. Rev. Neurosci. M :1217-1281 ；ffeismann, C.禾 Π de Vos, A.M. (2001) Cell. Mol. Life Sci. 58 748-759 ；Fahnestock, Μ. (1991) Curr. Top. Microbiol. Immunol. 165 1-26 中。盡管NGF最初是根據(jù)它能夠促進神經(jīng)元的存活和分化而鑒定的，但是越來越多的證據(jù)表明這些發(fā)育方面的作用僅僅是NGF生物學(xué)的一個方面。具體來說，NGF牽涉到持續(xù)性或慢性疼痛的傳播和維持當(dāng)中。例如，已證明局部和全身性施用NGF能引發(fā)痛覺過敏和異常疼痛(Lewin,G. R.等人(1994) Eur. J. Neurosci. β 1903-1912)。在人體內(nèi)靜脈內(nèi)輸注 NGF 引起全身肌痛，而局部施用除全身性效應(yīng)外還誘發(fā)注射部位痛覺過敏和異常疼痛(Apfel， S. C.等人(1998)Neurology^! :695-702)。此外，在某些形式的癌癥中，過量NGF促進神經(jīng)纖維的生長和浸潤，從而誘發(fā)癌痛(Zhu, Z.等人(1999) J. Clin. Oncol. U =241-228) 0NGF參與慢性疼痛引起人們對基于抑制NGF作用的治療方法有了廣泛的關(guān)注(參見例如 Saragovi，H. U.和 Gehring，K. (2000) Trends Pharmacol, ki. :93-98)。例如， 使用TrkA受體的可溶性形式來阻斷NGF的活性，顯示顯著減少導(dǎo)致神經(jīng)性疼痛的神經(jīng)瘤的形成，而對病變神經(jīng)元的細(xì)胞體不造成損傷(Kryger，G. S.等人Q001)J.Hand Surg. (Am. )26 :635-644)。中和NGF活性的另一方法是使用抗NGF抗體，所述抗體的實例已有描述(參見例如 PCT 公布 No. WO 2001/78698、WO 2001/64247、WO 2002/096458、WO 2004/032870, WO 2005/061540、W02006/13195U WO 2006/110883 ；美國專利 No. 7，449，616 ；美國公布 No. US 20050074821、US 20080033157、US 20080182978 和 US20090041717)。在神經(jīng)性疼痛的動物模型(例如，神經(jīng)干或脊神經(jīng)結(jié)扎)中，全身性注射針對NGF的中和抗體預(yù)防異常疼痛與痛覺過敏(Ramer，M. S.和 Bisby，Μ. A. (1999) Eur. J. Neurosci. 11 :837-846 ；Ro, L. S.等人 (1999)Pain 79 =265-274) 0此外，在鼠類癌痛模型中用中和型抗NGF抗體進行治療使疼痛顯著減輕(Sevcik, Μ. Α.等人(2005)Painll5 :128-141)。因此，鑒于以上所述，還需要其它NGF拮抗劑。發(fā)明概述本發(fā)明提供顯示增強的體內(nèi)穩(wěn)定性的抗NGF抗體。具體來說，本發(fā)明提供包含人 IgG4恒定區(qū)的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變，優(yōu)選為鉸鏈區(qū)突變，并且其中所述抗體顯示出異常長的終末消除半衰期，如在食蟹猴(cynomolgus monkey)體內(nèi)的終末消除半衰期為至少15天且通常在約15天至約22天的范圍內(nèi)(或在15天至22天的范圍內(nèi))，或在約15天至觀天的范圍內(nèi)(或在15天至觀天的范圍內(nèi))，或在約21天至約觀天的范圍內(nèi)(或在21天至觀天的范圍內(nèi))。這種穩(wěn)定化抗NGF抗體(例如，鉸鏈穩(wěn)定化抗體)還顯示在大鼠中的終末消除半衰期為至少8天，通常在約8天至約9天的范圍內(nèi) (或在8天至9天的范圍內(nèi))。在其它實施方案中，穩(wěn)定化抗NGF抗體(例如，鉸鏈穩(wěn)定化抗體)在人體內(nèi)可以顯示至少10天至30天、或至少10天、至少15天、至少20天、至少25 天、至少30天或約10天至約40天范圍內(nèi)、或約15天至約30天范圍內(nèi)(或10天至40天范圍內(nèi)或15天至30天范圍內(nèi))的平均終末消除半衰期。在其它實施方案中，穩(wěn)定化抗NGF 抗體(例如，鉸鏈穩(wěn)定化抗體)在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、 或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。優(yōu)選地，IgG4恒定區(qū)中的突變?yōu)殂q鏈區(qū)突變。甚至更優(yōu)選地，IgG4恒定區(qū)中的鉸鏈區(qū)突變包含對應(yīng)于SEQ ID N0:9(所述序列顯示人IgG4恒定區(qū)的野生型氨基酸序列)的氨基酸位置108的氨基酸位置處的絲氨酸的突變。因此，本發(fā)明提供具有人IgG4恒定區(qū)的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，所述人IgG4恒定區(qū)含有包含對應(yīng)于SEQ ID NO :9的氨基酸位置108的氨基酸位置處的絲氨酸突變的鉸鏈區(qū)突變。更優(yōu)選地，對應(yīng)于SEQ ID NO 9的氨基酸位置108的氨基酸位置處的絲氨酸突變成脯氨酸。在一優(yōu)選實施方案中，抗NGF抗體的人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列。可選地，本文中描述其它可能的IgG4 穩(wěn)定化突變。本發(fā)明的一優(yōu)選抗NGF抗體是抗體PG110，其重鏈氨基酸序列示于SEQ ID NO 13 中且其輕鏈氨基酸序列示于SEQ ID N0:16中。因此，本發(fā)明提供包含人IgG4恒定區(qū)的抗 NGF抗體，其中所述抗體包含含有SEQ ID NO 13的氨基酸序列的重鏈和含有SEQ ID NO 16 的氨基酸序列的輕鏈。在另一實施方案中，本發(fā)明提供包含人IgG4恒定區(qū)的抗NGF抗體， 其中所述抗體包含由SEQ ID NO: 11的核苷酸序列編碼的重鏈和由SEQ ID N0:14的核苷酸序列編碼的輕鏈。在另一實施方案中，本發(fā)明提供包含含有SEQ ID N0:13的氨基酸序列的重鏈的抗NGF抗體，其中所述抗體在食蟹猴體內(nèi)具有至少15天的終末消除半衰期(且通常在約15天至約22天范圍內(nèi)、或在15天至22天范圍內(nèi)、或在約15天至觀天范圍內(nèi)、或在15天至28天范圍內(nèi)、或在約21天至約觀天范圍內(nèi)、或在21天至觀范圍內(nèi))，和/或在人體內(nèi)至少10至30天的終末消除半衰期(或至少10天、或至少15天、或至少20天、或至少25天、或至少30天、或在約10天至約40天范圍內(nèi)、或在約15天至約30天范圍內(nèi)、或在 10天至40天范圍內(nèi)、或在15天至30天范圍內(nèi))。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。優(yōu)選地，重鏈由SEQ ID NO :11的核苷酸序列編碼。優(yōu)選地，所述抗體包含含有SEQ ID NO: 16的氨基酸序列的輕鏈。優(yōu)選地，輕鏈由SEQ ID NO 14的核苷酸序列編碼。在另一實施方案中，抗NGF抗體包含含有SEQ ID NO :1 (其顯示PGllO的重鏈可變區(qū))的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在另一實施方案中，抗NGF抗體包含含有SEQ ID NO 2 (其顯示PGllO的輕鏈可變區(qū))的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。在另一實施方案中，抗NGF 抗體包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。在另一實施方案中，抗NGF抗體與包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與NGF的結(jié)合。在另一實施方案中，抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID N0:3、4和5的 CDR 1、2和3的重鏈可變區(qū)(其中SEQ ID NO :3、4和5分別顯示PGllO的重鏈可變區(qū)⑶R 1、2和3)。在另一實施方案中，抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和 8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)(其中SEQ ID NO :6、7和8分別顯示PGllO的輕鏈可變區(qū) ⑶R 1、2和3)。在另一實施方案中，抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、 4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)并且包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，所述抗NGF抗體具有一種或多種以下功能性質(zhì)a)結(jié)合人NGF但不結(jié)合人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3 (NT-3) 或人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白4(NT-4)；b)以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF ；c)抑制 NGF 與 1TrkA 或 p75NTK 的結(jié)合；d)抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖；e)抑制NGF依賴性雞背根神經(jīng)節(jié)存活；f)抑制NGF依賴性PCI2細(xì)胞神經(jīng)突增生。在另一實施方案中，本發(fā)明的抗NGF抗體在施用于受試者時不顯示反彈效應(yīng)。例如，可選擇施用抗體的劑量和給藥頻率以使得抗體在施用于受試者時不顯示反彈效應(yīng)。在另一實施方案中，在向受試者施用單一劑量的抗NGF抗體后本發(fā)明的抗NGF抗體能夠長期緩解受試者的疼痛，例如持續(xù)時間為至少約一周、或至少約兩周、或至少約四周、或至少約八周、或至少約十二周、或至少約一周至約十二周、或至少約四周至約十二周、 或至少約八周至約十二周，或持續(xù)時間為至少一周、或至少兩周、或至少四周、或至少八周、 或至少十二周、或至少一周至十二周、或至少四周至十二周或至少八周至十二周。在一特別優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供具有延長的終末消除半衰期和延長的疼痛緩解持續(xù)時間的組合有利特征的抗NGF抗體。因此，本發(fā)明還提供包含人IgG4恒定區(qū)的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變(優(yōu)選為鉸鏈區(qū)突變)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天、或至少10天、或至少15天、或至少20天、或至少25天、或至少30天、或在約10天至約40天范圍內(nèi)、或在約15天至約30天范圍內(nèi)(或在10天至40 天范圍內(nèi)或在15-30天范圍內(nèi))的終末消除半衰期，并且其中在向人受試者施用單一劑量的抗體后所述抗體緩解疼痛的持續(xù)時間為至少約一周至約十二周、或至少一周至十二周、 或至少約四周至約十二周或至少四周至十二周(或在向人受試者施用單一劑量的抗體后持續(xù)時間為至少一周、或至少兩周、或至少四周、或至少八周、或至少十二周、或一周至十二周、或四周至十二周或八周至十二周)。優(yōu)選地，鉸鏈區(qū)突變包含對應(yīng)于SEQ ID N0:9的氨基酸位置108的氨基酸位置處絲氨酸的突變，優(yōu)選為對應(yīng)于SEQ ID NO 9的氨基酸位置108 的氨基酸位置處絲氨酸到脯氨酸的突變。更優(yōu)選地，所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO=IO 的氨基酸序列。在各個實施方案中，抗體可顯示一種或多種本文所述的功能性質(zhì)。在一優(yōu)選實施方案中，所述抗體與包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與NGF的結(jié)合。在另一實施方案中，本發(fā)明提供包含人IgG4恒定區(qū)的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，并且其中所述抗體以IOOpM 或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合， 并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。優(yōu)選地，所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天、或至少10天、或至少15天、或至少20天、或至少25天、或至少 30天或約10天至約40天范圍內(nèi)或約15天至約30天范圍內(nèi)(或10天至40天范圍內(nèi)或15 天至30天范圍內(nèi))的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、 或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。所述抗體可以進一步顯示一種或多種另外的功能性質(zhì)， 如結(jié)合人NGF而不結(jié)合人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3 (NT-3)或人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白4(NT-4)；抑制NGF依賴性雞背根神經(jīng)節(jié)存活；和/或抑制NGF依賴性PCI2細(xì)胞神經(jīng)突增生。優(yōu)選地，在向受試者施用單一劑量的抗NGF抗體后，所述抗體緩解疼痛的持續(xù)時間為至少約一周至約十二周、或至少約四周至約十二周、或至少約八周至約十二周、或至少一周至十二周、或至少四周至十二周或至少八周至十二周(或至少一周、或至少四周、或至少八周、或至少十二周、或一周至十二周、或四周至十二周或八周至十二周)。優(yōu)選地，所述抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，或所述抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)， 或所述抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的⑶Rl、2和3的重鏈可變區(qū)以及含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地， 所述抗體包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，或所述抗體包含含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，或所述抗體包含含有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)以及含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，或者所述抗體與包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與NGF的結(jié)合。在各個優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明提供具有以下特征的抗NGF抗體一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、 或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，( )含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)， 其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO :10的氨基酸序列，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。
一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，( )含有SEQ ID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。 另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF， 以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75NTK的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、 或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi) (或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO :10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，( )含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)， 其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以 50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與1TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或ρ75·的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM 或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合， 并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)包含鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl 抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變，并且其中所述抗體在食蟹猴體內(nèi)具有至少15天的終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。在各個實施方案中，本發(fā)明的抗NGF抗體可以是例如嵌合抗體、人源化抗體或人抗體，或為已經(jīng)去除了潛在T細(xì)胞表位的抗體。在另一方面，本發(fā)明提供包含本發(fā)明的抗NGF抗體和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。在另一方面，本發(fā)明提供減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的方法，所述方法包含向受試者施用本發(fā)明的抗NGF抗體。NGF相關(guān)性疾病和病狀的非限制性實例包括炎性痛、手術(shù)后疼痛、神經(jīng)性疼痛、骨折痛、痛風(fēng)關(guān)節(jié)痛、皰疹后神經(jīng)痛、癌痛、骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎痛、坐骨神經(jīng)痛、與鐮狀細(xì)胞危象相關(guān)的疼痛、頭痛、痛經(jīng)、子宮內(nèi)膜異位、 肌肉骨骼痛、慢性下背痛、纖維肌痛、扭傷、內(nèi)臟痛、卵巢囊腫、前列腺炎、膀胱炎、間質(zhì)性膀胱炎、切口疼痛、偏頭痛、三叉神經(jīng)痛、燒傷和/或創(chuàng)傷引起的疼痛、與外傷相關(guān)的疼痛、與肌肉骨骼疾病相關(guān)的疼痛、強直性脊柱炎、圍關(guān)節(jié)病變、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、HIV引起的疼痛、紅斑性肢痛病或由胰腺炎或腎結(jié)石引起的疼痛。NGF相關(guān)性疾病和病狀的其它實例包括惡性黑色素瘤、肖格倫綜合癥(Sjogren’ s syndrome)和哮喘，如具有嚴(yán)重氣道高反應(yīng)性的不受控制性哮喘和頑固性咳嗽。根據(jù)本發(fā)明的方法治療的特別優(yōu)選的疾病和病狀包括炎性痛(特別是骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疼痛)、肌肉骨骼痛(特別是慢性下背痛)、神經(jīng)性疼痛(特別是糖尿病性神經(jīng)疾病)、癌痛和骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎/疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位和/或子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛以及手術(shù)后疼痛。抗體可例如靜脈內(nèi)、皮下(例如，通過注射筆或皮下植入物)、肌肉內(nèi)或關(guān)節(jié)內(nèi)施用，不過本文也描述其它合適的施用途徑。優(yōu)選地，抗體以0. lmg/kg至;3mg/kg范圍內(nèi)的劑量或0. lmg/kg至30mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用?？贵w可以例如約3 μ g/kg至約3000 μ g/kg 范圍內(nèi)的劑量施用，其中優(yōu)選劑量包括100 μ g/kg或300 μ g/kg。在其它實施方案中，抗體以 0. lmg/kg 至 30mg/kg 范圍內(nèi)、或 0. lmg/kg 至 20mg/kg 范圍內(nèi)、或 0. lmg/kg 至 10mg/kg 范圍內(nèi)、或lmg/kg至30mg/kg范圍內(nèi)、或lmg/kg至20mg/kg范圍內(nèi)或lmg/kg至10mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用，不過本文也描述其它適合劑量和劑量范圍。此外，可使用抗體的固定劑量制劑?？贵w可單獨施用或與一種或多種另外的藥劑組合施用。例如，第二藥劑如NSAID、 止痛劑(例如，阿片類止痛劑)、局部麻醉劑、神經(jīng)阻斷劑、酚阻斷劑、治療性抗體、抗驚厥齊U、抗抑郁劑、局部外用辣椒素、類固醇或抗病毒劑可以與本發(fā)明的抗NGF抗體組合施用。 用于與本發(fā)明的抗體組合治療的特別優(yōu)選的第二藥劑包括阿片類止痛劑，如嗎啡等。用于組合治療的其它優(yōu)選的第二藥劑包括TrkA抑制劑和蛋白激酶C(H(C)抑制劑。在一優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供減弱或抑制受試者的疼痛的方法，所述方法包含向受試者施用包含人IgG4恒定區(qū)的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其中所述人IgGtg 定區(qū)包含SEQ ID NO :10的氨基酸序列，并且其中在向受試者施用單一劑量的抗NGF抗體后，所述抗體緩解受試者的疼痛的持續(xù)時間為至少四周至十二周(或至少一周至十二周、 或至少八周至十二周、或四周至十二周、或一周至十二周、或八周至十二周、或至少一周、或至少四周、或至少八周、或至少十二周)。優(yōu)選地，抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為 SEQ ID NO :3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)和含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 6、7和8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，抗NGF抗體包含含有SEQ ID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。優(yōu)選地，抗體以0. lmg/kg至 3mg/kg范圍內(nèi)的劑量或0. lmg/kg至30mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用。優(yōu)選地，抗體通過靜脈內(nèi)或皮下施用。優(yōu)選地，抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天(或至少10天、或至少15天、 或至少20天、或至少25天、或至少30天或約10天至約40天范圍內(nèi)、或約15天至約30天范圍內(nèi)、或10天至40天范圍內(nèi)、或15天至30天范圍內(nèi))的終末消除半衰期。在另一優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供減弱或抑制受試者的神經(jīng)生長因子(NGF) 相關(guān)性疾病或病狀以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的方法，所述方法包含向受試者施用包含人IgG4恒定區(qū)的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含鉸鏈區(qū)突變，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天(或至少10天、或至少15天、或至少20天、或至少25 天、或至少30天、或在約10天至約40天范圍內(nèi)、或約15天至約30天范圍內(nèi)、或10天至40 天范圍內(nèi)、或15天至30天范圍內(nèi))的終末消除半衰期，并且其中所述抗體以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的劑量和頻率施用。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、 或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))、或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。優(yōu)選地，人IgG4恒定區(qū)在對應(yīng)于SEQ ID N0:9的氨基酸位置108的氨基酸位置處包含突變。優(yōu)選地，對應(yīng)于SEQ ID NO 9的氨基酸位置108的氨基酸位置處的絲氨酸突變成脯氨酸。優(yōu)選地，所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID N0:10的氨基酸序列。優(yōu)選地，抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)和含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，抗NGF抗體包含含有SEQ ID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有 SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。優(yōu)選地，所述抗體與包含含有SEQ ID N0:1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與 NGF的結(jié)合。優(yōu)選地，NGF相關(guān)性疾病或病狀是選自由以下組成的組的疼痛骨關(guān)節(jié)炎疼痛、 慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。優(yōu)選地，抗NGF抗體以0. lmg/kg至;3mg/kg范圍內(nèi)或0. lmg/kg至 30mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用。優(yōu)選地，抗體通過靜脈內(nèi)或皮下施用。在另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的 NGF相關(guān)性疾病或病狀的藥物的用途。NGF相關(guān)性疾病和病狀的非限制性實例包括上文所述的那些。優(yōu)選的NGF相關(guān)性疾病或病狀是疼痛。優(yōu)選地，疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。在另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的疼痛的藥物的用途，以使得在向受試者施用單一劑量的抗NGF抗體后，受試者的疼痛減弱或抑制的持續(xù)時間為至少約一周至約十二周、或至少約四周至約十二周、或至少約八周至約十二周(或持續(xù)時間為一周至十二周、或四周至十二周、或八周至十二周、或至少一周、 或至少兩周、或至少四周、或至少八周或至少十二周)。在另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的藥物的用途，以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)。具體來說，抗體以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的劑量和頻率施用。在其它方面，本發(fā)明提供編碼本發(fā)明的抗NGF抗體的重鏈和/輕鏈的核酸分子，以及包括所述載體的載體(例如，表達(dá)載體)，包含所述載體的宿主細(xì)胞，和使用本發(fā)明的宿主細(xì)胞表達(dá)抗NGF抗體的方法。在另一方面，本發(fā)明提供減弱或抑制受試者的神經(jīng)生長因子(NGF)相關(guān)性疾病或病狀以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的方法。所述方法包含向受試者施用包含人IgG4 恒定區(qū)的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變(優(yōu)選為鉸鏈區(qū)突變)并且其中所述抗體在食蟹猴體內(nèi)具有至少15天、更優(yōu)選至少21天的終末消除半衰期，且其中所述抗體以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的劑量和頻率施用。在另一實施方案中，抗體在食蟹猴體內(nèi)具有在約15天至約22天(或15天至22天)范圍內(nèi)、或約15天至約觀天(或15天至觀天)范圍內(nèi)或約21天至約觀天(或21天至觀天)范圍內(nèi)的終末消除半衰期。在另一實施方案中，抗體在大鼠體內(nèi)具有至少8天的終末消除半衰期。在另一實施方案中，抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天(或至少10天、或至少15天、或至少20天、或至少25 天、或至少30天或在約10天至約40天范圍內(nèi)、或約15天至約30天范圍內(nèi)、或10天至40 天范圍內(nèi)或15天至30天范圍內(nèi))的平均終末消除半衰期。另外地或可選地，所述抗體在人體內(nèi)可以顯示至少30天、或至少35天、或至少40天、或至少四周至六周范圍內(nèi)(或四周至六周范圍內(nèi))、或至少四周至七周范圍內(nèi)(或四周至七周范圍內(nèi))或至少四周至八周范圍內(nèi)(或四周至八周范圍內(nèi))的平均藥理學(xué)半衰期。優(yōu)選的突變包括上文所述的那些突變。 優(yōu)選的抗體包括具有如上文所述的序列和/或其它功能性質(zhì)的那些抗體。NGF相關(guān)性疾病和病狀的非限制性實例包括上文所述的那些。本發(fā)明還提供本發(fā)明的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的藥物的用途，以使得在受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)。本文還提供包含本發(fā)明的抗NGF抗體的試劑盒。例如，試劑盒可以包含抗NGF抗體和所述抗體用于治療NGF相關(guān)性疾病或病狀的使用說明。附圖簡述

圖1是顯示如通過ELISA所測定，PGllO與人神經(jīng)生長因子(NGF)結(jié)合而不與人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3(NT-3)或人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白4(NT_4)結(jié)合的圖。圖2A是顯示如通過放射性標(biāo)記配體結(jié)合實驗所測定，PGl 10抗體抑制NGF與TrkA 受體結(jié)合的圖。圖2B是顯示如通過放射性標(biāo)記配體結(jié)合實驗所測定，PGl 10抗體抑制NGF與p75N 受體結(jié)合的圖。圖3A是顯示PGllO抗體對由人NGF刺激的TF-I細(xì)胞增殖的抑制作用的圖。圖;3B是顯示PGllO抗體對由大鼠NGF刺激的TF-I細(xì)胞增殖的抑制作用的圖。圖3C是顯示PGllO抗體對由小鼠NGF刺激的TF-1細(xì)胞增殖的抑制作用的圖。圖4是顯示PGllO抗體處理對大鼠的皮膚病變的作用的圖。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及如通過例如在食蟹猴體內(nèi)異常長的終末消除半衰期所證明顯示增強的體內(nèi)穩(wěn)定性的抗神經(jīng)生長因子抗體。本發(fā)明的抗體包括通過將突變引入IgG4恒定區(qū)中， 優(yōu)選引入所述恒定區(qū)的鉸鏈區(qū)中對所述抗體的人IgG4恒定區(qū)進行的修飾。為使本發(fā)明可以更容易被人理解，首先定義某些術(shù)語。另外的定義在整個詳細(xì)描述中闡述。I.定義術(shù)語“神經(jīng)生長因子”或“NGF”在本文中可互換使用并且包括變體、同種型、同源物、直系同源物和旁系同源物。例如，對人NGF特異的抗體在某些情況下可以與來自除人之外的其它物種的NGF交叉反應(yīng)。在其它實施方案中，對人NGF特異的抗體可對人NGF完全特異并且可能不顯示物種或其它類型的交叉反應(yīng)性。術(shù)語“人NGF”是指如包含人NGF-β 鏈的氨基酸序列的人序列NGF，其前體形式的Genbank登記號為ΝΡ_002497，并且由Genbank 登記號ΝΜ_002506的核苷酸序列編碼。人NGF- β鏈序列可能與Genbank登記號ΝΡ_002497 的人NGF-β的不同之處在于例如具有保守取代或在非保守區(qū)中具有取代，其中所述人 NGF-β具有與Genbank登記號ΝΡ_002497的人NGF-β基本上相同的生物功能。術(shù)語“大鼠NGF”是指如包含大鼠NGF- β鏈的氨基酸序列的大鼠序列NGF，其前體形式的Genbank登記號為ΧΡ_227525，并且由Genbank登記號ΧΡ_227525的核苷酸序列編碼。術(shù)語“小鼠NGF” 是指如包含小鼠NGF-β鏈的氨基酸序列的小鼠序列NGF，其前體形式的Genbank登記號為 ΝΡ_038637,并且由Genbank登記號ΝΜ_013609的核苷酸序列編碼。本文所用的術(shù)語“TrkA受體”是指NGF受體，在本領(lǐng)域中也稱為原肌球蛋白激酶受體A和1型神經(jīng)營養(yǎng)酪氨酸激酶受體(NTRKl)。人TrkA受體的示例性非限制性序列包括 Genbank 登記號 NP_001012331 (同種型 1)、NP_002520 (同種型 2)和 NP_001007793 (同種型3)的氨基酸序列。本文所用的術(shù)語“p75N 受體”是指分子量為約75kDa并且結(jié)合NGF和其它神經(jīng)營養(yǎng)蛋白的神經(jīng)營養(yǎng)蛋白受體，這種受體描述于例如Bottiwell，M. (1996) Science 272 506-507中。人p75 受體的示例性非限制性序列為Genbank登記號NP_002498的氨基酸序列，由Genbank登記號NM_002507的核苷酸序列編碼。本文關(guān)于抗NGF抗體所用的術(shù)語“終末消除半衰期”是指如在已施用了抗體的受試者的血清中所測量的一旦抗體吸收和重新分布完成后抗體濃度降低一半所需要的時間量。當(dāng)使用一組受試者時，可使用所述受試者體內(nèi)的終末消除半衰期的幾何平均值作為抗體的終末消除半衰期的量度。本文中關(guān)于抗NGF抗體所用的術(shù)語“藥理學(xué)半衰期”是指在體內(nèi)維持藥效的平均時間量(藥效的MRT)。其可使用以下公式計算為第一時刻基線校正效應(yīng)-時間曲線的面積 (AUMEC)與隨時間累積的基線校正藥物效應(yīng)曲線的面積(效應(yīng)時間曲線下的面積，AUEC)的比率
權(quán)利要求
1.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、 4禾口 5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的 ⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
2.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)， 其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO :10的氨基酸序列，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
3.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、 4禾口 5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的 CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
4.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
5.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、 4禾口 5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的 CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
6.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
7.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID N0:10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以 250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制 TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
8.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、 4禾口 5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的 ⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或ρ75·的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
9.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)人IgG4恒定區(qū)， 其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQID NO 10的氨基酸序列，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以 50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
10.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與1TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
11.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或ρ75·的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
12.—種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含⑴含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO 3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，(ii)含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8 的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM 或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合， 并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
13.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含(i)含有SEQ ID NO=I的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，(ii)含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和(iii)含有鉸鏈區(qū)突變的恒定區(qū)，其中所述抗體以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF，以250pM或以下的IC5tl 抑制NGF與TrkA或p75N 的結(jié)合，并且以50ng/ml或以下的IC5tl抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖。
14.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其具有人IgG4恒定區(qū)，所述人IgG4恒定區(qū)含有包含對應(yīng)于SEQ ID NO 9的氨基酸位置108的氨基酸位置處的絲氨酸突變的鉸鏈區(qū)突變。
15.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的平均終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
16.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含突變，并且其中所述抗體在食蟹猴體內(nèi)具有至少15天的終末消除半衰期。
17.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體在食蟹猴體內(nèi)具有約15天至約觀天范圍內(nèi)的終末消除半衰期。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體在大鼠體內(nèi)具有至少8天的終末消除半衰期。
19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，其中所述突變是鉸鏈區(qū)突變。
20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，其中所述鉸鏈區(qū)突變包含SEQID NO 9的氨基酸位置108處絲氨酸的突變。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的抗NGF抗體，其中對應(yīng)于SEQID NO 9的氨基酸位置108的所述氨基酸位置處的所述絲氨酸突變成脯氨酸。
22.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列。
23.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體具有一種或多種以下功能性質(zhì)a)結(jié)合人NGF但不結(jié)合人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3(NT-3)或人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白4(NT-4)；b)以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF；c)抑制NGF與TrkA或p75NTE的結(jié)合；d)抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖；e)抑制NGF依賴性雞背根神經(jīng)節(jié)存活；f)抑制NGF依賴性PC12細(xì)胞神經(jīng)突增生。
24.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體在施用于受試者時不顯示反彈效應(yīng)。
25.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，在向受試者施用單一劑量的所述抗NGF抗體后，所述抗NGF抗體緩解疼痛的持續(xù)時間為至少約四周至約十二周。
26.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的CDR 1、2和3的重鏈可變區(qū)。
27.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。
28.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)，并且所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7和8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。
29.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有SEQID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。
30.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有SEQID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
31.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有SEQID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
32.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體與包含含有SEQID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與NGF的結(jié)合。
33.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含鉸鏈區(qū)突變，其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期，并且其中在向人受試者施用單一劑量的所述抗體后，所述抗體緩解疼痛的持續(xù)時間為至少約四周至約十二周。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的抗NGF抗體，其中所述鉸鏈區(qū)突變包含SEQID NO :9的氨基酸位置108處的絲氨酸的突變。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的抗NGF抗體，其中對應(yīng)于SEQID NO 9的氨基酸位置108的所述氨基酸位置處的所述絲氨酸突變成脯氨酸。
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的抗NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQID NO 10 的氨基酸序列。
37.根據(jù)權(quán)利要求33所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體具有一種或多種以下功能性質(zhì)a)結(jié)合人NGF但不結(jié)合人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3(NT-3)或人神經(jīng)營養(yǎng)蛋白4(NT-4)；b)以IOOpM或以下的Kd結(jié)合人或大鼠NGF；c)抑制NGF與TrkA或p75NTE的結(jié)合；d)抑制TF-I細(xì)胞的NGF依賴性增殖；e)抑制NGF依賴性雞背根神經(jīng)節(jié)存活；f)抑制NGF依賴性PC12細(xì)胞神經(jīng)突增生。
38.根據(jù)權(quán)利要求33所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體與包含含有SEQID NO :1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與 NGF的結(jié)合。
39.根據(jù)權(quán)利要求33所述的抗NGF抗體，在向人受試者施用單一劑量的所述抗體后，所述抗NGF抗體緩解疼痛的持續(xù)時間為至少十二周。
40.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含含有SEQ ID NO :13的氨基酸序列的重鏈， 其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少10天至30天的血清半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的抗NGF抗體，其中所述重鏈由SEQID NO 11的核苷酸序列編碼。
42.根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的抗NGF抗體，所述抗NGF抗體包含含有SEQID NO 16的氨基酸序列的輕鏈。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的抗NGF抗體，其中所述輕鏈由SEQID NO 14的核苷酸序列編碼。
44.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體包含含有 SEQ ID NO 13的氨基酸序列的重鏈和含有SEQ ID NO 16的氨基酸序列的輕鏈。
45.一種抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其包含人IgG4恒定區(qū)，其中所述抗體包含由SEQ ID NO 11的核苷酸序列編碼的重鏈和由SEQ ID NO 14的核苷酸序列編碼的輕鏈。
46.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的抗NGF抗體，其中所述抗體是嵌合抗體、人源化抗體或人抗體，或為已去除潛在T細(xì)胞表位的抗體。
47.一種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體和藥學(xué)上可接受的載體。
48.一種試劑盒，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體和所述抗體用于治療NGF相關(guān)性疾病或病狀的使用說明。
49.一種減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的方法，所述方法包括向所述受試者施用根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的方法，其中所述NGF相關(guān)性疾病或病狀是疼痛。
51.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、 慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。
52.根據(jù)權(quán)利要求49至51中任一項所述的方法，其中所述抗NGF抗體以0.lmg/kg至 :3mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用。
53.根據(jù)權(quán)利要求49至52中任一項所述的方法，其中所述抗體是靜脈內(nèi)施用。
54.根據(jù)權(quán)利要求49至52中任一項所述的方法，其中所述抗體是皮下或關(guān)節(jié)內(nèi)施用。
55.根據(jù)權(quán)利要求49至M中任一項所述的方法，其中向所述受試者施用第二藥劑。
56.根據(jù)權(quán)利要求55所述的方法，其中所述第二藥劑選自由以下組成的組NSAID、包括阿片類止痛劑和非典型止痛劑在內(nèi)的止痛劑、局部麻醉劑、神經(jīng)阻斷劑、酚阻斷劑、治療性抗體、類固醇、抗驚厥劑、抗抑郁劑、局部外用辣椒素、抗病毒劑、TrkA抑制劑和PKC抑制劑。
57.一種減弱或抑制受試者的疼痛的方法，所述方法包括向所述受試者施用包含人 IgG4恒定區(qū)的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQ ID NO 10的氨基酸序列，并且其中在向受試者施用單一劑量的所述抗NGF抗體后，所述抗體緩解所述受試者的疼痛的持續(xù)時間為至少約四周至約十二周。
58.根據(jù)權(quán)利要求57所述的方法，其中所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :3、4和5的CDR 1、2和3的重鏈可變區(qū)和含有氨基酸序列分別為SEQ ID NO :6、7禾口 8的⑶R 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。
59.根據(jù)權(quán)利要求57或58所述的方法，其中所述抗NGF抗體包含含有SEQID N0:1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
60.根據(jù)權(quán)利要求57至59中任一項所述的方法，其中所述疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。
61.根據(jù)權(quán)利要求57至60中任一項所述的方法，其中所述抗NGF抗體以0.lmg/kg至 :3mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用。
62.根據(jù)權(quán)利要求57至61中任一項所述的方法，其中所述抗體是靜脈內(nèi)或皮下施用。
63.一種減弱或抑制受試者的神經(jīng)生長因子(NGF)相關(guān)性疾病或病狀以使得在所述受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的方法，所述方法包括向所述受試者施用包含人IgG4恒定區(qū)的抗 NGF抗體，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含鉸鏈區(qū)突變，并且其中所述抗體在人體內(nèi)具有至少 10天至30天的終末消除半衰期或者在人體內(nèi)具有至少30天的平均藥理學(xué)半衰期，并且其中所述抗體以使得在所述受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)的劑量和頻率施用。
64.根據(jù)權(quán)利要求63所述的方法，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含對應(yīng)于SEQID NO :9的氨基酸位置108的氨基酸位置處的突變。
65.根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中對應(yīng)于SEQID NO :9的氨基酸位置108的所述氨基酸位置處的絲氨酸突變成脯氨酸。
66.根據(jù)權(quán)利要求63至65中任一項所述的方法，其中所述人IgG4恒定區(qū)包含SEQIDNO :10的氨基酸序列。
67.根據(jù)權(quán)利要求63至66中任一項所述的方法，其中所述抗NGF抗體包含含有氨基酸序列分別為SEQ ID N0:3、4和5的⑶R 1、2和3的重鏈可變區(qū)和含有氨基酸序列分別為 SEQ ID NO :6、7和8的CDR 1、2和3的輕鏈可變區(qū)。
68.根據(jù)權(quán)利要求63至67中任一項所述的方法，其中所述抗NGF抗體包含含有SEQID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO 2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。
69.根據(jù)權(quán)利要求63至67中任一項所述的方法，其中所述抗體與包含含有SEQID NO 1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)和含有SEQ ID NO :2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)的抗體競爭與NGF的結(jié)合。
70.根據(jù)權(quán)利要求63至69中任一項所述的方法，其中所述NGF相關(guān)性疾病或病狀是選自由以下組成的組的疼痛骨關(guān)節(jié)炎疼痛、慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。
71.根據(jù)權(quán)利要求63至70中任一項所述的方法，其中所述抗NGF抗體以0.lmg/kg至 :3mg/kg范圍內(nèi)的劑量施用。
72.根據(jù)權(quán)利要求63至71中任一項所述的方法，其中所述抗體是靜脈內(nèi)或皮下施用。
73.根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體，其用于治療NGF相關(guān)性疾病或病狀。
74.根據(jù)權(quán)利要求73所述的抗NGF抗體，其中所述NGF相關(guān)性疾病或病狀是疼痛。
75.根據(jù)權(quán)利要求74所述的抗NGF抗體，其中所述疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。
76.根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的藥物的用途。
77.根據(jù)權(quán)利要求76所述的用途，其中所述NGF相關(guān)性疾病或病狀是疼痛。
78.根據(jù)權(quán)利要求77所述的用途，其中所述疼痛選自由以下組成的組骨關(guān)節(jié)炎疼痛、 慢性下背痛、糖尿病性神經(jīng)性疼痛、癌痛、骨轉(zhuǎn)移引起的疼痛、間質(zhì)性膀胱炎、疼痛性膀胱綜合癥、與慢性非細(xì)菌性前列腺炎相關(guān)的疼痛、與子宮內(nèi)膜異位相關(guān)的疼痛、與子宮纖維瘤相關(guān)的疼痛和手術(shù)后疼痛。
79.根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的疼痛的藥物的用途，使得在向受試者施用單一劑量的所述抗NGF抗體后，所述受試者的疼痛被減弱或抑制的持續(xù)時間為至少約四周至約十二周。
80.根據(jù)權(quán)利要求1至46中任一項所述的抗NGF抗體用于制造用于減弱或抑制受試者的NGF相關(guān)性疾病或病狀的藥物的用途，使得在所述受試者體內(nèi)避免反彈效應(yīng)。
81.—種表達(dá)載體，其編碼抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，其中所述載體包含編碼抗體重鏈的SEQ ID NO 11的核苷酸序列和編碼抗體輕鏈的SEQ ID NO 14的核苷酸序列。
82.—種宿主細(xì)胞，其包含根據(jù)權(quán)利要求81所述的表達(dá)載體。
83.—種表達(dá)抗NGF抗體的方法，包括培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求82所述的宿主細(xì)胞以使得包含由SEQ ID NO 11編碼的重鏈和由SEQ ID NO 14編碼的輕鏈的抗NGF抗體得以表達(dá)。
全文摘要
本發(fā)明提供含有包含穩(wěn)定化鉸鏈區(qū)突變的IgG4恒定區(qū)的抗神經(jīng)生長因子(NGF)抗體，并且其中所述抗體在食蟹猴體內(nèi)顯示異常長的血清半衰期。還提供包含所述抗NGF抗體的藥物組合物，編碼所述NGF抗體的核酸，表達(dá)所述NGF抗體的宿主細(xì)胞和使用所述抗體來治療NGF相關(guān)性疾病或病狀的方法。
文檔編號C12N15/13GK102459337SQ201080027785
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月4日
發(fā)明者A·拜斯特, D·卡森, J·A·豪爾, J·鮑威爾, M·馬金, S·杜塔, W·劉 申請人:雅培研究有限責(zé)任公司