專利名稱：防治生姜青枯病的生防菌株3yw8的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8，屬于植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域，專用 于生姜青枯病的無公害防治。背景技術(shù)：
生姜青枯病俗稱“姜瘟病，，，是由茄科勞爾氏菌(Malstonia soIanacearum)^\起的一種 細(xì)菌性病害。這種土傳病原菌主要分布于熱帶亞熱帶，其寄主范圍十分廣泛，可以侵染50 多個科300多種作物。該病原菌主要由土壤傳播，根部侵染后在維管束中大量繁殖造成維 管束的堵塞，影響寄主作物的水分運(yùn)輸，從而造成萎蔫死亡。這種病害由于地理分布范圍 廣，寄主范圍廣，所以一旦侵染非常容易造成毀滅性打擊，到目前為止還沒有有效的防治手 段。生姜是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物，姜瘟病在20世紀(jì)50年代既有報道，近年來發(fā)病趨勢 逐漸嚴(yán)重，據(jù)調(diào)查，田間一般發(fā)病株率為10% 20%，重病田高達(dá)30% 40%，局部地塊甚 至絕產(chǎn)失收。而且由于發(fā)病降低品質(zhì)，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。長期以來，國內(nèi)外對姜瘟病的防治多從農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治出發(fā)，防治效果不 明顯，而且造成了一定程度的環(huán)境污染。因此，生物防治由于其自身的優(yōu)點開始受到越來 越多的重視。綜上所述，開發(fā)新的、更為高效和安全的微生物殺菌劑控制姜瘟病的發(fā)生是提 高社會生產(chǎn)總量的需要，同時更是農(nóng)業(yè)安全可持續(xù)發(fā)展的需要，符號社會發(fā)展需求。
三
發(fā)明內(nèi)容
1技術(shù)問題
針對現(xiàn)有技術(shù)中沒有對生姜青枯病有較高防效的生防制劑的現(xiàn)狀，提供開發(fā)一種防治 生姜青枯病的單一生防菌菌株及其菌劑，該菌劑對這種重要土傳病害的防效可以達(dá)到50% 以上。技術(shù)方案
防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8，為擬氣味類香菌菌O^roiife1S odoratiminius), 于2010年8月3日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市 朝陽區(qū)北辰西路1號院中科院微生物研究所，菌種保藏號為CGMCC NO. 4042。生防菌株3YW8用于制備生防菌劑的方法為
將上述生防菌株3YW8在LB培養(yǎng)液180 rpm振蕩培養(yǎng)12-16 h，然后6000 rpm離 心10 min，然后6000 rpm離心10 min，用滅菌水進(jìn)行稀釋制成菌劑，菌劑成品中活菌總濃 度為 IXlO9 -IXlO10 CFU/mL。上述生防菌劑在防治生姜青枯病方面的應(yīng)用方法為3YW8菌株制劑在作物移栽 前浸種使用半小時，或者每畝9升3YW8菌株制劑，稀釋100倍后在移栽時灌根使用。
3有益效果本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果表現(xiàn)在本發(fā)明是專門針對生姜青枯病開發(fā)的生防制劑。由 于是生物制劑，完全沒有因化學(xué)農(nóng)藥的使用所帶來的一系列問題，因而有利于蔬菜的無公 害生產(chǎn)，農(nóng)民可以不用或減少其他化學(xué)農(nóng)藥的用量，這不僅可為農(nóng)民節(jié)省開支，而且有利于 蔬菜的出口。同時，該菌劑還有增產(chǎn)功能，可為農(nóng)民增加收入。溫室實驗表明該菌制劑能顯著降低生姜上青枯病的發(fā)生。該菌劑可以稀釋100 倍后在生姜種植時浸種處理姜塊，或者在移栽時灌根處理。在溫室條件下對于生姜青枯病 的防效可以達(dá)到53. 36% (表1)。四
具體實施例方式
1 3YW8生防菌劑的制備
本發(fā)明涉及一種防治生姜青枯病的生防菌株3YW8，為2008年在山東萊蕪生姜病田健 株上分離得到。將上述生防菌株3YW8在LB培養(yǎng)液180 rpm振蕩培養(yǎng)12-16 h，然后6000 rpm離心10 min，然后6000 rpm離心10 min，用滅菌水進(jìn)行稀釋制成菌劑，菌劑成品中活菌 總濃度為 1 X IO9 -1 X 101° CFU/mL。
2溫室盆缽試驗檢測3YW8生防菌劑對生姜青枯病的防效
移栽之前，用生防菌3YW8 (IO7 CFU/mL)浸種處理姜塊30min;移栽時采用20mL IO7 CFU/mL菌劑灌根處理，移栽一周后接種IO7 CFU/mL青枯菌Tfe/sioflia solanacearum 3721 (J G Li ete厶2008)菌懸液20mL。另外不用生防菌3YW8處理，直接接種青枯菌處理的作 為對照處理。每個處理組M株，三次重復(fù)。在溫度25 28°C，相對濕度40%，光照12h/12h 條件下，培養(yǎng)4周后調(diào)查病級數(shù)，計算病害嚴(yán)重度和防效。按照Kempe和kqueria 1983年提出的病害分級標(biāo)準(zhǔn)，病害嚴(yán)重度和防效的計算 公式如下
DI 0，無發(fā)?。?
DI 1，<25%的葉片萎蔫;
DI 2,25 - 50%的葉片萎蔫；
DI 3，50 - 75%的葉片萎蔫；
DI 4，75 - 100% 的葉片萎蔫(Kempe and Sequeria, 1983)。
權(quán)利要求
1.一種防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8，為擬氣味類香菌Qiyroides odomtimimus),干2QYQ年8月3日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中 心，菌種保藏號為CGMCC NO. 4042。
2.用權(quán)利要求1所述防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8制備的生防菌劑。
3.用權(quán)利要求1所述防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8制備生防菌劑的方法，其特 征在于將權(quán)利要求1所述防治溫室蔬菜生姜青枯病的生防菌株3YW8在LB培養(yǎng)液180 rpm振蕩培養(yǎng)12-16 h，然后6000 rpm離心10 min，用滅菌水進(jìn)行稀釋制成菌劑，菌劑成品 中活菌總濃度為1 X IO9 -1 X 101° CFU/mL。
4.權(quán)利要求2或3所述生防菌劑在防治生姜青枯病方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種防治溫室生姜青枯病的生防菌株3YW8，屬于植物保護(hù)技術(shù)領(lǐng)域。3YW8菌株在LB培養(yǎng)液28℃180rpm振蕩培養(yǎng)12-16小時，然后6000rpm離心10min，其菌劑成品中活菌總濃度為1×109-1×1010CFU/mL，稀釋10-100倍后在生姜種植時浸種處理，或者在移栽時進(jìn)行灌根處理，對生姜青枯病的防效在59.68%。
文檔編號C12N1/20GK102146350SQ20111000471
公開日2011年8月10日 申請日期2011年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月12日
發(fā)明者楊威, 郭堅華 申請人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)