專利名稱：一種海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB及其表達(dá)基因xynB與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶及其表達(dá)基因xynB與應(yīng)用，屬于生物技術(shù)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
β-木聚糖酶是由細(xì)菌和真菌分泌的能夠降解木聚糖的糖苷水解酶，絕大多數(shù)屬于糖苷水解酶第10家族和第11家族，近幾年發(fā)現(xiàn)少數(shù)β -木聚糖酶屬于第5，7，8和43家族。其中第8家族大部分是纖維素酶，也包括一部分幾丁質(zhì)酶和木聚糖酶，目前經(jīng)過(guò)性質(zhì)研究的第八家族木聚糖酶只有2個(gè)，分別是來(lái)自I^seudoalteromonas. haloplanktis TAH3a 的PXyl和來(lái)自環(huán)境基因組文庫(kù)的Xyn8。根據(jù)對(duì)pXyl的晶體結(jié)構(gòu)分析結(jié)果，第8家族木聚糖酶可能折疊成扭曲的(a/a)6桶狀結(jié)構(gòu)，由外層和內(nèi)層各6個(gè)a螺旋圍繞而成，這種拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)也曾在第9家族內(nèi)切葡聚糖酶，第15家族淀粉酶和第65家族麥芽糖磷酸化酶中發(fā)現(xiàn)。 與第11家族木聚糖酶類似，第8家族木聚糖酶含有一個(gè)較大的底物結(jié)合裂縫，能容下至少 6個(gè)木糖殘基，起催化作用的氨基酸殘基是谷氨酸和天冬氨酸，兩者相距很近且位于三維結(jié)構(gòu)裂縫的中央位置。與第10和11家族木聚糖酶的retaining催化機(jī)制不同，第8家族木聚糖酶采取相反的inverting的方式。根據(jù)已有的研究結(jié)果，第8家族木聚糖酶作用的底物專一性比較強(qiáng)，一般只對(duì)木聚糖有水解作用，對(duì)纖維素等其它聚糖類沒(méi)有作用。β -木聚糖酶在造紙、食品和飼料等行業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用前景。在制漿造紙行業(yè)中，β-木聚糖酶的使用可以減少紙漿漂白過(guò)程中酸性漂白劑(如氯氣、二氧化氯)的用量，降低污染。在食品行業(yè)中，木聚糖酶可以從棉籽殼、甘蔗渣和玉米芯等天然半纖維素中分解得到低聚木糖，該糖是當(dāng)前最受眾人矚目的一種功能性低聚糖。其甜度為蔗糖的 40%，食用后不會(huì)導(dǎo)致血漿中葡萄糖水平大幅度上升。用低聚木糖可制成不同甜度的食品， 可代替葡萄糖，作為糖尿病人的療效食品。在飼料行業(yè)中木聚糖酶的使用可以將飼料中的非淀粉多糖轉(zhuǎn)化為營(yíng)養(yǎng)性物質(zhì)，消除其抗?fàn)I養(yǎng)作用，從而提高飼料的轉(zhuǎn)化率。將木聚糖酶應(yīng)用于苧麻脫膠，可以減少環(huán)境污染，降低脫膠工藝對(duì)纖維的損傷。由于木聚糖酶的廣泛用途，對(duì)β-木聚糖酶的研究和開發(fā)一直都被世界各國(guó)科學(xué)家所重視。開發(fā)具有新的用途的新型木聚糖酶具有非常重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。自20世紀(jì)70年代以來(lái)，隨著基因重組技術(shù)和分子生物學(xué)的發(fā)展，許多木聚糖酶的編碼基因和一級(jí)結(jié)構(gòu)被詳細(xì)研究，并且有少數(shù)酶被結(jié)晶。在β-木聚糖酶中適冷木聚糖酶由于在低溫下具有很高的活性，因此在紙漿漂白，木寡糖生產(chǎn)，面粉改性以及飼料等行業(yè)比中溫木聚糖酶更具優(yōu)越性，已經(jīng)受到研究者的廣泛關(guān)注。近些年的研究表明，極地存在著大量的微生物，這些微生物長(zhǎng)期生長(zhǎng)在低溫的極端環(huán)境下，形成了適應(yīng)低溫的特殊結(jié)構(gòu)和特殊機(jī)制，因此，極地微生物是發(fā)現(xiàn)新型適冷酶的好材料。但由于采樣和培養(yǎng)等困難，目前對(duì)極地微生物的研究相對(duì)地較少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種海洋適冷內(nèi)切β -木聚糖酶XynB及其表達(dá)基因xynB與應(yīng)用。本發(fā)明使用的技術(shù)術(shù)語(yǔ)1. CTAB/NaCl法是指針對(duì)含多糖類物質(zhì)較多的細(xì)菌，在提取細(xì)菌基因組DNA常規(guī)方法基礎(chǔ)上，加入CTAB (溴化十六烷三甲基銨)和氯化鈉來(lái)去除多糖類物質(zhì)，從而達(dá)到較好的提取效果的一種方法。2. PCR技術(shù)鏈?zhǔn)骄酆厦阜磻?yīng)，利用DNA聚合酶，模板，引物以及dNTP進(jìn)行體外擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)。3.⑶D分析軟件NCBI網(wǎng)站上提供的一種用來(lái)推測(cè)和分析特定氨基酸序列形成的結(jié)構(gòu)域信息的軟件。一種海洋適冷內(nèi)切β -木聚糖酶XynB，氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。編碼上述海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB的基因xynB，核苷酸序列如SEQ ID NO. 2所示。一種含有SEQ ID No. 2所示核苷酸序列的表達(dá)載體。含有上述SEQ ID No. 2所示核苷酸序列或上述表達(dá)載體的重組細(xì)胞。上述海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB和/或上述基因xynB在紙漿漂白、木寡糖生產(chǎn)、面粉改性或飼料生產(chǎn)行業(yè)中水解燕麥木聚糖、山毛櫸木聚糖、樺木木聚糖方面的應(yīng)用。本發(fā)明海洋適冷內(nèi)切木聚糖酶的基因xynB是從保存于德國(guó)微生物菌種保藏中心，菌種保藏號(hào)為150 的細(xì)菌Glaciecola mesophila KMM241提取的基因組 DNA。Glaciecolamesophila KMM241是從北極海水無(wú)脊椎動(dòng)物體內(nèi)分離得到的。根據(jù)與 Glaciecola mesophilaKMM241 的 16S rDNA序列相似性最高的一株細(xì)菌I^seudoalteromonas atlantica T6c的基因組中一個(gè)第八家族木聚糖酶基因序列設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)從 Glaciecola mesophilaKMM241的基因組DNA中克隆了編碼海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶xynB 的基因。對(duì)該基因的核酸序列進(jìn)行了測(cè)定。測(cè)序結(jié)果表明獲得的DNA片段中含有一個(gè)具有 2739個(gè)核苷酸的開放閱讀框架，該開放閱讀框架即是編碼木聚糖酶XynB的基因xynB，共編碼912個(gè)氨基酸。因此，木聚糖酶XynB是一個(gè)含有912個(gè)氨基酸的多肽。木聚糖酶XynB 的前體的結(jié)構(gòu)包括信號(hào)肽和成熟酶兩部分。成熟酶含有869個(gè)氨基酸，是糖苷水解酶第八家族中的一個(gè)尚未報(bào)道的具有新的序列的木聚糖酶。有益效果1、本發(fā)明所述的β-木聚糖酶XynB在0_35°C具有比較高的催化效率，應(yīng)用于紙漿漂白，木寡糖生產(chǎn)，面粉改性等可在室溫下進(jìn)行，可以省去傳統(tǒng)工藝的升溫步驟，從而節(jié)約能源；2、本發(fā)明所述的β-木聚糖酶XynB是一種嚴(yán)格的內(nèi)切酶，水解木聚糖可產(chǎn)生木三糖，木四糖等寡糖，可廣泛應(yīng)用于木寡糖的生產(chǎn)過(guò)程中；3、本發(fā)明所述的β -木聚糖酶XynB在低溫下有較高酶活性，中高溫下極不穩(wěn)定， 中溫就可以使其完全失活，從而保證了其使用的安全性。


圖 1、提取的 Glaciecola mesophila KMM241 的基因組 DNA 的電泳圖；其中1、Glaciecolamesophila KMM241 的基因組 DNA，2、DNA 分子量標(biāo)記 (marker)；圖2、通過(guò)PCR擴(kuò)增克隆的編碼XynB的基因片段的電泳圖；其中1、DNA分子量標(biāo)記(marker)，2、擴(kuò)增的DNA片段；圖3、在大腸桿菌中進(jìn)行異源表達(dá)和純化的適冷β -木聚糖酶XynB電泳圖；Μ、蛋白質(zhì)分子量標(biāo)記(marker) ；1、含表達(dá)質(zhì)粒的大腸桿菌BL21經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)菌體超聲波破碎后的上清液電泳圖；2、上清液經(jīng)過(guò)陰離子交換層析后的電泳圖；3、樣品經(jīng)過(guò)鎳柱親和層析純化后的純?chǔ)?木聚糖酶XynB電泳圖；圖4、是適冷β -木聚糖酶XynB的酶活溫度曲線；圖5、是適冷β -木聚糖酶XynB的酶活ρΗ曲線；
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明所保護(hù)范圍不限于此。實(shí)施例1 一種海洋適冷內(nèi)切β -木聚糖酶XynB，氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。編碼上述海洋適冷內(nèi)切β -木聚糖酶XynB的基因xynB，核苷酸序列如SEQ ID NO. 2所示。基因xynB共2739bp，其中含有一個(gè)2739bp的開放閱讀框架編碼適冷內(nèi)切木聚糖酶XynB，起始密碼子位于lbp，終止密碼子位于2737bp，共編碼912個(gè)氨基酸。實(shí)施例2 基因xynB的克隆方法菌種來(lái)源Glaciecola mesophila KMM241購(gòu)自德國(guó)微生物菌種保藏中心(DSM)， 菌種保藏號(hào)為15(^6。具體步驟如下1.適冷內(nèi)切木聚糖酶XynB編碼基因的克隆1. 1 Glaciecola mesophila KMM241基因組DNA的提取參照《精編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南》(1)培養(yǎng)50ml細(xì)菌培養(yǎng)物至飽和狀態(tài)，取15ml的培養(yǎng)物12000g離心5min ；(2)沉淀物加入5670 μ 1 ΤΕ，用吸管反復(fù)吹打使之重懸，然后，加入300 μ 1 10% SDS 禾口 30 μ 1 20mg/mL 蛋白酶 K，混勻，37°C溫育 2. 5_3h ；(3)加入1000 μ 1 5Μ NaCl，充分混勻，再加入800 μ 1 CTAB/NaCl溶液，混勻，于 65°C溫育 30-60min ；(4)加入等體積的混合液(該混合液由氯仿/異戊醇按體積比對(duì)1混合制得)， 混勻，4°C，12000g離心20min，將上清液轉(zhuǎn)入一個(gè)新管中；( 加入等體積的混合液(氯仿/異戊醇按體積比對(duì)1混合)，混勻，4V， 14000g離心30min，將上清轉(zhuǎn)到一只新管中；(6)加入等體積的混合液(氯仿/異戊醇按體積比對(duì)1混合)，混勻，4V， 16000g離心30min，將上清轉(zhuǎn)到一只新管中；(7)加入0. 6倍體積異丙醇，輕輕混合(緩慢上下顛倒3min)，置于4°C冰箱中保持 lOmin，用一細(xì)彎玻棒將絮狀沉淀溝出，轉(zhuǎn)入一 5ml的離心管中；
(8)用3ml的70%乙醇洗滌2次，再用無(wú)水乙醇洗滌2次，各12000g離心aiiin，棄上清，沉淀即為DNA，DNA在超凈工作臺(tái)上風(fēng)干；(9)加入 100-200 μ 1 TE 緩沖液，4°C 過(guò)夜溶解 DNA ；(10)加 10mg/ml RNase 至終濃度為 50 μ g/mL，37°C溫育 Ih ；(11)加等體積酚/氯仿/異戊醇(按體積比1 1 1混合)抽提1次，上清液再用氯仿/異戊醇(按體積比111混合)抽提1次；(12)向上清中加入1/10體積3M NaAc (pH5. 2)和2倍體積預(yù)冷的無(wú)水乙醇，倒置混合；(13)離心后輕輕棄去上清，DNA沉淀用70%乙醇和無(wú)水乙醇各洗滌1次，稍干后溶于適量TE buffer中，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定DNA濃度及純度后置于4°C冰箱保存(可于-20°C長(zhǎng)期保存)。1.2引物設(shè)計(jì)與合成根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)中已有的Pseudoalteromonas atlantica T6c菌的β _木聚糖酶基因序列設(shè)計(jì)兩條特異性引物F8X1 :ATGAGCACTTTATCAGTCAG (SEQ ID NO. 3) ；F8X4 TTATTCAGGCTCGTTTTC(SEQ ID NO. 4)，該引物由上海生工生物技術(shù)公司合成；1. 3利用PCR進(jìn)行基因序列擴(kuò)增(1)以F8X1和F8X2為引物，以基因組DNA為模板，做PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件為 95°C，5分鐘；然后95°C，1分鐘；50°C，1分鐘；72°C，4分鐘，32個(gè)循環(huán)后，72°C，延伸10分鐘。(2)對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1 %瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果表明獲得一條約2700bp的DNA 片段。然后用Omega公司的DNA回收試劑盒按照其說(shuō)明回收擴(kuò)增DNA片段。2.基因序列測(cè)定(I)DNA片段與克隆載體連接將回收DNA片段連接到!Iomega公司的pGEMT載體上。連接反應(yīng)體系連接酶Buffer1 μ 1載體pGEMT1 μ 1外源DNA片段3μ1T4 連接酶1 μ 1補(bǔ)力口ddH20至 10 μ 1蓋緊蓋子，手指輕彈離心管，混勻樣品，在離心機(jī)上轉(zhuǎn)2秒，把樣品集中在管底， 16 °C連接過(guò)夜。(2)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上制備大腸桿菌感受態(tài)的方法制備大腸桿菌DH5 α感受態(tài)。(3)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上的熱激轉(zhuǎn)化方法將連接好的重組pGEMT載體轉(zhuǎn)至大腸桿菌DH5a感受態(tài)。(4)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌DH5a涂于含100 μ g/L氨芐青霉素的麥康凱培養(yǎng)基，37°C過(guò)夜培養(yǎng)，挑選白色轉(zhuǎn)化子作為模板，用F8X1和F8X2作為引物，通過(guò)菌落PCR驗(yàn)證白色轉(zhuǎn)化子中質(zhì)粒是否含有PCR擴(kuò)增的DNA片段。( 將質(zhì)粒含有PCR擴(kuò)增的DNA片段的轉(zhuǎn)化子送上海生工生物技術(shù)有限公司測(cè)序。因此，獲得木聚糖酶XynB編碼基因xynB的序列2739bp。序列如SEQ ID NO. 1所示。通過(guò) NCBI網(wǎng)站的blastX軟件分析發(fā)現(xiàn)其中含有一個(gè)2739bp的編碼木聚糖酶XynB的開放閱讀框架。起始密碼子位于lbp，終止密碼子位于1270bp，共編碼912個(gè)氨基酸。實(shí)施例3 木聚糖酶XynB的異源表達(dá)與純化3.基因xynB在大腸桿菌中的表達(dá)3. 1表達(dá)載體pet-22b_xynB的構(gòu)建(1)利用小劑量質(zhì)粒提取試劑盒，按照說(shuō)明書的步驟，從含有重組PGEMT質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子中提取重組質(zhì)粒pGEMT-xynB.(2)根據(jù)測(cè)序結(jié)果設(shè)計(jì)兩條特異性引物XYBl CGACGGATCCGAGCACTTTATCAGTCAG (SEQ ID NO. 5)用下劃線標(biāo)出的是 BamHI 酶切位點(diǎn)。XYB2 CGACGCTCGAGTTCAGGCTCGTTTTC (SEQ ID NO. 6)用下劃線標(biāo)出的是 XhoI 酶切位點(diǎn)。上述引物由上海生工生物技術(shù)公司合成。(3)利用PCR進(jìn)行基因序列擴(kuò)增，以XYBl和XYB2為引物，以重組pGEMT質(zhì)粒為模板，做PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件為:95°C，5分鐘；然后95°C，1分鐘；50°C，1分鐘；72°C，4分鐘，32個(gè)循環(huán)后，72 °C，延伸10分鐘。(4)對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1 %瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果表明獲得一條約2700bp的DNA 片段。然后用Omega公司的DNA回收試劑盒按照其說(shuō)明回收擴(kuò)增DNA片段。(5)用限制性內(nèi)切酶BamHI和BioI對(duì)回收片段和質(zhì)粒pet_22b進(jìn)行雙酶切。酶切反應(yīng)體系如下
酶切緩沖液 2 μ 1 酶切緩沖液 2 μ 1 內(nèi)切酶 BamHI 1 μ 1 內(nèi)切酶BamHI XhoI 1 μ 1 內(nèi)切酶BioI 回收DNA 10 μ 1 質(zhì)粒 pet-22b 6 μ 1 補(bǔ)加 ddH20 至 20 μ 1 補(bǔ)加ddH20 至 20 μ 1 放在37°C水浴中反應(yīng)3個(gè)/J·
時(shí)。對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，然后用Omega公司的DNA回收試劑盒按照其說(shuō)明回收擴(kuò)增DNA片段。 (6)將經(jīng)過(guò)雙酶切的xynB基因片段連接到pet-22b載體上。連接反應(yīng)體系 連接酶Buffer 1 μ 1 載體 pet-22b 1 μ 1 xynA基因片段 3 μ 1 T4連接酶 1 μ 1 補(bǔ)加ddH20 至 10 μ 1 蓋緊蓋子，手指輕彈離心管，混勻樣品，在離心機(jī)上轉(zhuǎn)2秒，把樣品集中在管底， 16°C搖床中連接過(guò)夜。(7)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上制備大腸桿菌感受態(tài)的方法制備大腸桿菌DH5 α感受態(tài)；(8)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上的熱激轉(zhuǎn)化方法將連接好的重組pet_22b載體轉(zhuǎn)至大腸桿菌DH5 α感受態(tài)；(9)將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌DH5 α涂于含100 μ g/mL氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基中，37 °C過(guò)夜培養(yǎng)；(10)在平板上挑取單菌落，接于5mL含100 μ g/mL氨芐青霉素的LB液體培養(yǎng)基中，37 °C過(guò)夜培養(yǎng)；(11)收集3mL菌液，12000g離心2min，得到菌體，用試劑盒提取重組質(zhì)粒 pet-22b-xynB。置于 _20°C保存。3. 2表達(dá)載體pet-22b_xynB轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21 (DE3)中(1)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上制備大腸桿菌感受態(tài)的方法制備大腸桿菌BL21感受態(tài)；(2)按《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》上的熱激轉(zhuǎn)化方法將連接好的重組pet_22b載體轉(zhuǎn)至大腸桿菌BL21感受態(tài)；(3)將轉(zhuǎn)化的大腸桿菌BL21涂于含100 μ g/mL氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基中，37°C過(guò)夜培養(yǎng)。3. 3基因xynB在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)與純化(1)在平板上挑取單菌落，接于20mL含100 μ g/mL氨芐青霉素的LB液體培養(yǎng)基中，37 °C過(guò)夜培養(yǎng)；(2) 1 %接種量轉(zhuǎn)接到含100 μ g/mL氨芐青霉素的新鮮LB培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)至菌濃度0D0. 8，加入IPTG至終濃度為0. 5mmol/L，繼續(xù)在15°C搖床培養(yǎng)20h ；(3)收集經(jīng)過(guò)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)的500mL LB培養(yǎng)液，12000g離心lOmin，收集菌體；(4)用20mL的Binding緩沖液懸浮菌體；(5)將重新懸浮的菌液進(jìn)行超聲波破碎G00W，10min)；(6)將破碎后的菌液12000g離心lOmin，收集上清液；(7)將上清液按照說(shuō)明書的要求進(jìn)行鎳柱親和層析；(8)層析后收集的樣品用SDS-PAGE檢測(cè)純度，證明已經(jīng)獲得木聚糖酶XynB的電泳純酶(圖3)。用20mmol/L的Tris-HCl (pH7. 5)緩沖液透析3_4次。最后置于_20°C保存實(shí)施例4 木聚糖酶XynB的性質(zhì)測(cè)定4.1底物特異性(1)用50mmol/L磷酸鈉緩沖液(ρΗ7. 0)配制濃度為1 %的不同底物溶液，包括燕麥木聚糖，山毛櫸木聚糖，樺木木聚糖，醋酸纖維素，海藻多糖，甘露聚糖，幾丁質(zhì)，淀粉；(2)在20mL的定量管中加入0. 9mL不同的底物溶液，置于30°C水浴中預(yù)熱5min， 加入0. ImL純酶液，反應(yīng)lOmin，然后加入1. 5mLDNS溶液終止反應(yīng)，將定量管置于沸水浴中加熱5min，最后加入蒸餾水定容到15mL ；(3)通過(guò)測(cè)定550nm處吸光值計(jì)算產(chǎn)生的還原糖的量來(lái)表征水解程度。該酶對(duì)不同底物的水解活性如表1所示。表權(quán)利要求
1.一種海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB，氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB的基因xynB，核苷酸序列如 SEQ ID NO. 2 所示。
3.一種含有SEQ ID No. 2所示核苷酸序列的表達(dá)載體。
4.含有權(quán)利要求2所述SEQID No. 2核苷酸序列或權(quán)利要求3所述表達(dá)載體的重組細(xì)胞。
5.權(quán)利要求1所述海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB和/或權(quán)利要求2所述基因xynB 在紙漿漂白、木寡糖生產(chǎn)、面粉改性或飼料生產(chǎn)行業(yè)中水解燕麥木聚糖、山毛櫸木聚糖、樺木木聚糖方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶及其表達(dá)基因xynB與應(yīng)用，屬于生物技術(shù)技術(shù)領(lǐng)域。一種海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。以及編碼上述海洋適冷內(nèi)切β-木聚糖酶XynB的基因xynB，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本發(fā)明所述的β-木聚糖酶XynB在0-35℃具有比較高的催化效率，應(yīng)用于紙漿漂白，木寡糖生產(chǎn)，面粉改性等可在室溫下進(jìn)行，可以省去傳統(tǒng)工藝的升溫步驟，從而節(jié)約能源。
文檔編號(hào)C12N15/56GK102174494SQ20111004885
公開日2011年9月7日 申請(qǐng)日期2011年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月1日
發(fā)明者何海倫, 周百成, 張熙穎, 張玉忠, 石梅, 解彬彬, 郭兵, 陳秀蘭 申請(qǐng)人:山東大學(xué)