專利名稱：一種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，屬應(yīng)用微生物檢測方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在科研和生產(chǎn)實際工作中，常常需要對微生物的數(shù)量進行測定。如對水體、空氣、土壤等環(huán)境中的微生物的測定有利于監(jiān)測和評價其污染程度；對飲用水和エ業(yè)循環(huán)冷卻水中的微生物的測定可以評價其是否達標；對油田污水注水中的微生物數(shù)量的測定則有助于評價污水注水的水質(zhì)等。因此，微生物數(shù)量的測定對科研和生產(chǎn)實際工作具有十分重要的 指導(dǎo)作用和現(xiàn)實意義。微生物測定常用的方法有平板菌落計數(shù)法和絕跡稀釋法。平板菌落計數(shù)法是根據(jù)每個活的細菌能長出ー個菌落的原理設(shè)計的，取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)及稀釋倍數(shù)，計算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)；而絕跡稀釋法是將待測定的水樣逐級注入到試管中進行接種稀釋，直到最后ー個試管中無菌生長為止，然后根據(jù)細菌生長情況和稀釋倍數(shù)，計算出水樣中細菌的數(shù)目。這兩種方法都有明顯的不足，平板菌落計數(shù)法測定結(jié)果誤差較大，而絕跡稀釋法操作極為繁瑣、費時。在エ業(yè)循環(huán)冷卻水中普遍存在著硫細菌，硫細菌是一群在有氧條件下將元素硫、硫化氫、硫代硫酸鹽氧化產(chǎn)生硫酸的細菌總稱，它們能在局部區(qū)域形成PH值小于I的極酸環(huán)境。因此，硫細菌的存在不僅會污染冷卻水水質(zhì)，而且可造成設(shè)備、管道的嚴重腐蝕。為了有效控制硫細菌危害，需對硫細菌進行準確測定。目前，國內(nèi)外普遍采用絕跡稀釋法測定エ業(yè)循環(huán)冷卻水中的硫細菌，但該法測定結(jié)果誤差較大，并繁瑣、費吋。因此，現(xiàn)有的傳統(tǒng)檢測技術(shù)存在明顯缺陷，遠不能滿足實際生產(chǎn)的要求，研制用于檢測エ業(yè)循環(huán)冷卻水中硫細菌的新方法具有重要的實際意義。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，使所生產(chǎn)的測試瓶能夠快速準確地測定水樣中的硫細菌的菌數(shù)。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)上述目的的。在常溫下，按重量百分比分別取硫代硫酸鈉0.5 %、氯化胺0.01 %、碳酸氫鈉0. I %、氯化鎂0. 01 %、磷酸氫ニ鈉0. 02%、蒸餾水99. 36% ;將硫代硫酸鈉、氯化胺、碳酸氫鈉、氯化鎂、磷酸氫ニ鈉依次用蒸餾水溶解，加入到容器中混合、充分搖勻，并用0. 5mol/L鹽酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到6. 0—6. 2，即配制成制取硫細菌測試瓶所需的培養(yǎng)液；將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶9. Oml培養(yǎng)液裝入瓶中，然后加蓋、封ロ ；將經(jīng)加蓋封ロ的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、0. 105MPa條件下進行高溫滅菌18分鐘，冷卻后即制成硫細菌測試瓶。本發(fā)明與現(xiàn)有的技術(shù)相比具有如下有益效果
I、本發(fā)明所生產(chǎn)的硫細菌測試瓶，能夠快速準確地測定硫細菌的菌數(shù)、生長指示明顯、操作簡單、可大大提高工作效率。2、培養(yǎng)液為硫細菌專用培養(yǎng)液，只適合硫細菌生長，所培養(yǎng)出的微生物只是硫細菌，測試工作不會受其它細菌的干擾。
具體實施例方式在常溫下(以配制IL培養(yǎng)液為例，以此類推)，按重量百分比分別稱取硫代硫酸鈉
5.0g、氯化胺0. lg、碳酸氫鈉I. 0g、氯化鎂0. lg、磷酸氫ニ鈉0. 2g，將硫代硫酸鈉、氯化胺、碳酸氫鈉、氯化鎂、磷酸氫ニ鈉依次用蒸餾水溶解，并加入到IL容量瓶中混合、再用蒸餾水定容到IL刻度線，充分搖勻，測定其酸堿度并用0. 5mol/L鹽酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到
6.0—6. 2，即配制成制取硫細菌測試瓶所需的培養(yǎng)液。將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶
9.Oml裝入瓶中，然后用A-13型藥用膠塞加蓋、用普通抗生素玻璃瓶鋁蓋經(jīng)專用封ロ器封ロ ；最后將經(jīng)加蓋、封ロ的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、0. 105MPa條件下進行集中高溫滅菌18分鐘，冷卻后即制成硫細菌測試瓶。采用硫細菌測試瓶測定待測水樣中的硫細菌的菌數(shù)時，采用絕跡稀釋法原理，將待測水樣用無菌注射器逐級注入測試瓶中稀釋培養(yǎng)，直到最后ー個測試瓶無菌生長為止，可根據(jù)稀釋的倍數(shù)計算出待測水樣中硫細菌的數(shù)目?？刹捎靡韵碌姆椒ê筒襟E(I)準備數(shù)支相同的Iml醫(yī)用注射器，用蒸餾水清洗干凈后高溫滅菌(高壓蒸汽滅菌鍋121°C、0. 105MPa下滅菌15分鐘)，冷卻備用；(2)根據(jù)待測水樣中硫細菌的大致多少，將數(shù)個上述所制成的硫細菌測試瓶排成ー組，并依次編上序號1、2、3、4......;(3)用上述滅菌后的無菌注射器取I. OmL待測水樣并注入到I號硫細菌測試瓶內(nèi)，充分震蕩10秒；(4)另取ー支無菌注射器從搖勻后的I號硫細菌測試瓶內(nèi)取出I. OmL液體注入到2號硫細菌測試瓶內(nèi)，充分震蕩10秒；(5)再另取ー支無菌注射器從搖勻后的2號硫細菌測試瓶內(nèi)取出I. OmL液體注入到3號硫細菌測試瓶內(nèi)，充分震蕩10秒；(6)依次重復(fù)上述操作程序，一直到最后ー瓶為止；(7)把上述加入待測水樣后的一組硫細菌測試瓶放在30°C (或現(xiàn)場溫度)的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，經(jīng)過14天后觀察測試瓶內(nèi)的變化，判斷細菌的生長情況；(8)判斷標準在經(jīng)過14天培養(yǎng)后的硫細菌測試瓶中，注入I. 0%氯化鋇溶液
0.2mL并搖勻靜置，無菌存在的硫細菌測試瓶內(nèi)培養(yǎng)液無明顯變化，而有菌存在的測試瓶內(nèi)培養(yǎng)液搖勻時變渾變濁、靜置時出現(xiàn)白色沉淀，且再注入10%鹽酸溶液0. 2mL并搖勻，白色沉淀不消失。因此，硫細菌測試瓶中的培養(yǎng)液注入1.0%氯化鋇溶液后搖勻時變渾變濁、靜置時出現(xiàn)白色沉淀，且再注入10%鹽酸溶液0. 2mL并搖勻，白色沉淀不消失，表示有硫細菌生長。(9)根據(jù)硫細菌測試瓶內(nèi)指示細菌生長的情況和有菌生長的測試瓶的瓶數(shù)，查表I可計算出待測水樣中的硫細菌菌數(shù)。表I單瓶細菌最大可能值
權(quán)利要求
1.一種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，其特征在于在瓶中加入由硫代硫酸鈉、氯化胺、碳酸氫鈉、氯化鎂、磷酸氫ニ鈉和蒸餾水制成的培養(yǎng)液，經(jīng)加蓋、封ロ、高溫蒸汽滅菌制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，其特征在于在常溫下，按重量百分比分別取硫代硫酸鈉0. 5%、氯化胺0. 01%、碳酸氫鈉0. 1%、氯化鎂0. 01%、磷酸氫ニ鈉0. 02%、蒸餾水99. 36%;將硫代硫酸鈉、氯化胺、碳酸氫鈉、氯化鎂、磷酸氫ニ鈉依次用蒸餾水溶解，加入到容器中混合、充分搖勻，并用0. 5mol/L鹽酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到6. 0—6. 2，即配制成制取硫細菌測試瓶所需的培養(yǎng)液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，其特征在于將12ml模制西林瓶清洗干凈、干燥，用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶9. Oml裝入瓶中，然后加蓋、封□。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ー種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，其特征在于將經(jīng)加蓋、封ロ的測試瓶用高溫蒸汽滅菌鍋在121°C、0. 105MPa條件下進行高溫滅菌18分鐘，冷卻后即制成硫細菌測試瓶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種硫細菌測試瓶的生產(chǎn)方法，其特征在于在常溫下，按重量百分比分別取硫代硫酸鈉0.5％、氯化胺0.01％、碳酸氫鈉0.1％、氯化鎂0.01％、磷酸氫二鈉0.02％、蒸餾水99.36％；將硫代硫酸鈉、氯化胺、碳酸氫鈉、氯化鎂、磷酸氫二鈉依次用蒸餾水溶解，加入到容器中混合、充分搖勻，并用0.5mol/L鹽酸溶液將溶液的pH值調(diào)節(jié)到6.0-6.2，即配制成制取硫細菌測試瓶所需的培養(yǎng)液；用液體分裝器將所配制的培養(yǎng)液按每瓶9.0ml裝入西林瓶中，然后經(jīng)加蓋、封口、高溫滅菌，冷卻后即制成硫細菌測試瓶。本發(fā)明所生產(chǎn)的硫細菌測試瓶，能夠快速準確地測定硫細菌的菌數(shù)、操作簡單、能滿足實際生產(chǎn)的要求。
文檔編號C12M1/24GK102653718SQ201110051208
公開日2012年9月5日 申請日期2011年3月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月3日
發(fā)明者易紹金 申請人:長江大學(xué)