專利名稱：用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及免疫原 的制備方法。
背景技術(shù)：
各種各樣的微生物存在于我們的生活空間中，如空氣、水和物體表面等。在利用微生物進(jìn)行生產(chǎn)過程中，如菌種保藏、微生物轉(zhuǎn)接、菌種活化等都涉及無菌操作這一環(huán)節(jié)，包括使用超凈臺、操作前使用紫外燈照射、化學(xué)滅菌、高溫滅菌、火焰滅菌等。我們在進(jìn)行操作過程中發(fā)現(xiàn)，即使經(jīng)過認(rèn)真仔細(xì)的操作也會經(jīng)常被一種雜菌污染，并且在其他實驗室操作過程中也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象。這種雜菌的污染會干擾欲保存菌種的轉(zhuǎn)接、分離與純化，甚至使這種雜菌成為優(yōu)勢菌種，而導(dǎo)致保藏菌株不純或產(chǎn)生死亡的現(xiàn)象。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決目前無菌操作中常被一株污染菌污染的問題，提供用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法。本發(fā)明中污染菌為產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I (Candida utilis JTW-1)，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路1 號院3號，保藏日期為2011年3月21日，保藏編號為CGMCC No. 4700。本發(fā)明用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、制備菌懸液將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，然后放置于80 300r/min的搖床上，于28°C培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物，將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物溶于無菌水中制成密度為 1 X IO7 1 X IO9個/mL的菌懸液；二、制備免疫原將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比1 1 4混均，得混合液，然后按每ImL混合液加入Ig羊毛脂的比例向混合液中加入羊毛脂混勻，形成乳化液即為免疫原。本發(fā)明用于生成污染菌抗血清的免疫原的另一種制備方法，按以下步驟進(jìn)行將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，于28°C培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物；將產(chǎn)朊假絲酵母 JTff-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為0. 5 % 20 %的戊二醛水溶液中，產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 1 IOOmL,然后在室溫下于80 300r/min的搖床上振蕩16h，收集產(chǎn)物；然后將產(chǎn)物用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾，濾去液體部分，再以抽濾方式用去離子水洗滌，然后濾去水分，得到交聯(lián)酵母菌；按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 1 IOOmL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌，震蕩混勻后形成的懸液即為免疫原。利用本發(fā)明制備的免疫原制成污染菌抗血清，再將抗血清加入到易受污染的培養(yǎng)基中，可有效抑制產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I的污染，解決了目前無菌操作中常被污染菌產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I污染的問題。本發(fā)明的方法簡單，易于操作。


圖1為具體實施方式
一中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基中生長的菌落形態(tài)圖；圖2為具體實施方式
一中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I的細(xì)胞形態(tài)圖。
具體實施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的任意組合。
具體實施方式
一本實施方式用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、制備菌懸液將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，然后放置于80 300r/min的搖床上，于28°C培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物，將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物溶于無菌水中制成密度為IX IO7 IX IO9個/mL的菌懸液；二、制備免疫原將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比1 1 4混均，得混合液，然后按每ImL混合液加入Ig羊毛脂的比例向混合液中加入羊毛脂混勻，形成乳化液即為免疫原。利用本實施方式的免疫原進(jìn)行污染菌抗血清的制備，方法如下取2 4公斤重的健康雄性家兔，對家兔進(jìn)行耳靜脈注射本實施方式制得的免疫原，每只家兔每天同一時間注射1次，每次每只注射1 3mL，連續(xù)注射6天；對經(jīng)過上述免疫后的家兔進(jìn)行無菌取血， 然后放置分層，離心后取上清，即得到污染菌抗血清。將污染菌抗血清加入易受污染的培養(yǎng)基中，可有效抑制產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I的污染，解決了目前無菌操作中常被雜菌產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I污染的問題。本發(fā)明的方法簡單， 易于操作。本實施方式步驟一所述的產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I (Candida utilis JTW-1)，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏日期為2011年3月21日，保藏編號為CGMCC No. 4700。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I在麥芽汁液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)不產(chǎn)醭，管底有菌體沉淀；在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，菌落呈乳白色，平滑有光澤，邊緣整齊(如圖1)，以分裂和多端出芽的營養(yǎng)體方式繁殖； 在加蓋玻片的玉米粉瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，形成大量假菌絲。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I細(xì)胞呈圓形或橢圓形(如圖2)，大小為(3 5) μπιΧ(7 13) μ m。發(fā)酵糖實驗表明，產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I可以發(fā)酵葡萄糖和蔗糖，但不能發(fā)酵 半乳糖、麥芽糖、纖維二糖、海藻糖、乳糖、蜜二糖、松三糖、菊糖或棉籽糖。同化碳源實驗表明， 產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I對葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、麥芽糖、菊糖、松三糖、纖維二糖、甘油利用良好，但不能利用半乳糖、乳糖、蜜二糖、可溶性淀粉。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I的同化硝酸鉀陽性，可在無維生素的培養(yǎng)基中生長。能夠良好利用硫酸銨、硝酸銨、氯化銨、尿素。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I耐氯化鈉濃度最高為8%。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I可在麥芽汁培養(yǎng)基、玉米粉瓊脂培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中生長。產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I在43°C下能夠生長。對照《酵母菌的特征與鑒定手冊》、《菌種保藏手冊》和《真菌鑒定手冊》中對酵母形態(tài)特征和生理特征的描述，可以鑒定此菌株為產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)。
本實施方式步驟一所述的產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I是由受污染的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中分離得到。挑取馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中白色的單個污染菌落，經(jīng)多次馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板劃線培養(yǎng)，得到單菌落的純培養(yǎng)物產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I。 制得的污染菌抗血清可以稀釋1 256倍使用，使用時將稀釋后的抗血清與培養(yǎng)基按體積比1 4 20混合。
具體實施方式
二本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中放置于 100 250r/min的搖床上。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中放置于 150 200r/min的搖床上。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一至三之一不同的是步驟一中制成密度為IX IO8個/mL的菌懸液。其它與具體實施方式
一至三之一相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是步驟二中將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比12混均。其它與具體實施方式
一至四之一相同。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是步驟二中將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比13混均。其它與具體實施方式
一至四之一相同。
具體實施方式
七本實施方式用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、制備菌懸液將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，然后放置于120r/min的搖床上，于28°C培養(yǎng)3天，用0. 45 μ m微孔濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物，將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物溶解于無菌水中制成密度為IX IO8個/mL的菌懸液；二、制備免疫原將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比1 1混均，得混合液，然后按每ImL混合液加入Ig羊毛脂的比例向混合液中加入羊毛脂混勻，形成乳化液即為免疫原。利用本實施方式的免疫原進(jìn)行污染菌抗血清的制備，方法如下取3公斤重的健康雄性家兔，對家兔進(jìn)行耳靜脈注射本實施方式制得的免疫原，每只家兔每天同一時間注射1次，每次每只注射2mL，連續(xù)注射6天；對經(jīng)過上述免疫后的家兔進(jìn)行無菌取血，然后放置分層，離心后取上清，即得到污染菌抗血清。將4mL馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基高溫滅菌，涼至40 50°C，將上述污染菌抗血清稀釋10倍，無菌操作取0. 5mL稀釋后抗血清加入到4mL馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，混勻， 制成斜面培養(yǎng)基；將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I溶解于無菌水中制成密度為1 X IO7 1 X IO9個/ mL的菌懸液，挑取一環(huán)菌懸液接種于斜面培養(yǎng)基，劃線28°C培養(yǎng)2天之后，未有污染酵母菌落出現(xiàn)；而未加入污染菌抗血清的斜面培養(yǎng)基，接種上述菌懸液一環(huán)，劃線28°C培養(yǎng)2天， 則出現(xiàn)污染酵母菌落。將20mL馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基高溫滅菌，涼至40 50°C，將上述污染菌抗血清稀釋10倍，無菌操作取2. 5mL稀釋后的抗血清加入到20mL馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，混勻，制成平板培養(yǎng)基；將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I溶解于無菌水中制成密度為IXlO7 IXlO9 個/mL的菌懸液，挑取一環(huán)菌懸液接種于平板培養(yǎng)基，劃線28°C培養(yǎng)2天之后，未有污染酵母菌落出現(xiàn)；而未加入污染菌抗血清的平板培養(yǎng)基，接種上述菌懸液一環(huán)，劃線28°C培養(yǎng)2天，則出現(xiàn)污染酵母菌落。

具體實施方式
八本實施方式用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，于 28°C培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物；二、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為0. 5% 20%的戊二醛水溶液中， 產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 1 IOOmL,然后在室溫下于80 300r/min的搖床上振蕩16h，收集產(chǎn)物；三、然后將產(chǎn)物用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾，濾去液體部分，再以抽濾方式用去離子水洗滌，然后濾去水分，得到交聯(lián)酵母菌；四、 按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 1 IOOmL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌，震蕩混勻后形成的懸液即為免疫原。利用本實施方式的免疫原進(jìn)行污染菌抗血清的制備，方法如下選擇體重在2 3kg健壯的家兔，第1天每只兔子四足掌各注射0. 2mL免疫原，背部皮下4點注射，每點 0. 2mL免疫原，第3天每只兔四足掌各注射0. ImL免疫原，背部皮下4點注射，每點0. ImL免疫原；第5天每只兔四足掌各注射0. ImL免疫原，背部皮下4點注射，每點0. ImL免疫原；兩天后無菌取血，然后放置分層，離心后取上清，即得到抗血清。將污染菌抗血清加入易受污染的培養(yǎng)基中，可有效抑制產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I的污染，解決了目前無菌操作中常被雜菌產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I污染的問題。本發(fā)明的方法簡單， 易于操作。本實施方式步驟一所述的產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I (Candida utilis JTW-1)，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏日期為2011年3月21日，保藏編號為CGMCC No. 4700。制得的污染菌抗血清可以稀釋1 1024倍使用，使用時將稀釋后的抗血清與培養(yǎng)基按體積比1 4 20混合。
具體實施方式
九本實施方式與具體實施方式
八不同的是步驟二中將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為 15%的戊二醛水溶液中。其它與具體實施方式
八相同。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
八不同的是步驟二中將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為5% 10%的戊二醛水溶液中。其它與具體實施方式
八相同。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
八不同的是步驟二中將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為8%的戊二醛水溶液中。其它與具體實施方式
八相同。
具體實施方式
十二 本實施方式與具體實施方式
八至十一之一不同的是步驟二中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 10 80mL。其它與具體實施方式
八至十一之一相同。
具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
八至十一之一不同的是步驟二中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 30 60mL。其它與具體實施方式
八至十一之一相同。
具體實施方式
十四本實施方式與具體實施方式
八至十一之一不同的是步驟二中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 50mL。其它與具體實施方式
八至十一之一相同。
具體實施方式
十五本實施方式與具體實施方式
八至十四之一不同的是步驟四中按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 10 90mL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌。其它與具體實施方式
八至十四之一相同。
具體實施方式
十六本實施方式與具體實施方式
八至十四之一不同的是步驟四中按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 30 70mL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌。其它與具體實施方式
八至十四之一相同。
具體實施方式
十七本實施方式與具體實施方式
八至十四之一不同的是步驟四中按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 50mL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌。其它與具體實施方式
八至 十四之一相同。
具體實施方式
十八本實施方式用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中， 于28°C培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物；二、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為10%的戊二醛水溶液中，產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 1 IOOmL,然后在室溫下于 100r/min的搖床上振蕩16h，收集產(chǎn)物；三、然后將產(chǎn)物用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾，濾去液體部分，再以抽濾方式用去離子水洗滌，然后濾去水分，得到交聯(lián)酵母菌；四、按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 1 IOOmL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌，震蕩混勻后形成的懸液即為免疫原。將4mL麥芽汁培養(yǎng)基高溫滅菌，涼至40 50°C，將上述污染菌抗血清稀釋200倍， 無菌操作取0. 5mL稀釋后抗血清加入到4mL麥芽汁培養(yǎng)基中，混勻，制成斜面培養(yǎng)基；將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I溶解于無菌水中制成密度為1 X IO7 1 X IO9個/mL的菌懸液，挑取一環(huán)菌懸液接種于斜面培養(yǎng)基，劃線28°C培養(yǎng)2天之后，未有污染酵母菌落出現(xiàn)；而未加入污染菌抗血清的斜面培養(yǎng)基，接種上述菌懸液一環(huán)，劃線28°C培養(yǎng)2天，則出現(xiàn)污染酵母菌落。將20mL麥芽汁培養(yǎng)基高溫滅菌，涼至40 50°C，將上述污染菌抗血清稀釋200 倍，無菌操作取2. 5mL稀釋后的抗血清加入到20mL麥芽汁培養(yǎng)基中，混勻，制成平板培養(yǎng)基；將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I溶解于無菌水中制成密度為1 X IO7 1 X IO9個/mL的菌懸液， 挑取一環(huán)菌懸液接種于平板培養(yǎng)基，劃線28°C培養(yǎng)2天之后，未有污染酵母菌落出現(xiàn)；而未加入污染菌抗血清的平板培養(yǎng)基，接種上述菌懸液一環(huán)，劃線28°C培養(yǎng)2天，則出現(xiàn)污染酵母菌落。
權(quán)利要求
1.用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、制備菌懸液將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，然后放置于80 300r/min的搖床上，于28°C培養(yǎng)3 天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物，將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物溶于無菌水中制成密度為1 X IO7 1 X IO9個/mL的菌懸液；二、制備免疫原將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比1 1 4混均，得混合液，然后按每 ImL混合液加入Ig羊毛脂的比例向混合液中加入羊毛脂混勻，形成乳化液即為免疫原。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟一中放置于100 250r/min的搖床上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟一中制成密度為1 X IO8個/mL的菌懸液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟二中將步驟一制得的菌懸液與液體石蠟按體積比12混均。
5.用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，按以下步驟進(jìn)行一、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I接種在經(jīng)過滅菌的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，于28°c培養(yǎng)3天，用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾除去培養(yǎng)基，收集到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物；二、將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為0. 5% 20%的戊二醛水溶液中，產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為 Ig 1 IOOmL,然后在室溫下于80 300r/min的搖床上振蕩16h，收集產(chǎn)物；三、然后將產(chǎn)物用孔徑0. 45 μ m的濾膜過濾，濾去液體部分，再以抽濾方式用去離子水洗滌，然后濾去水分，得到交聯(lián)酵母菌；四、按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 1 IOOmL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌，震蕩混勻后形成的懸液即為免疫原。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟二中將產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物加入到體積濃度為 15%的戊二醛水溶液中。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟二中產(chǎn)朊假絲酵母JTW-I培養(yǎng)物的重量與戊二醛水溶液的體積比為Ig 30 6 OmL ο
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，其特征在于步驟四中按交聯(lián)酵母菌重量與去離子水體積比為Ig 30 70mL的比例向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌。
全文摘要
用于生成污染菌抗血清的免疫原的制備方法，涉及免疫原的制備方法。本發(fā)明是要解決目前無菌操作中常被一株污染菌污染的問題。方法一、制備菌懸液；二、將菌懸液與液體石蠟混均得混合液，向混合液中加入羊毛脂，形成乳化液即為免疫原。另一種方法一、得到產(chǎn)朊假絲酵母JTW-1培養(yǎng)物；二、將培養(yǎng)物加入到戊二醛水溶液中，搖床振蕩收集產(chǎn)物；三、將產(chǎn)物過濾，洗滌，去水分得到交聯(lián)酵母菌；四、向去離子水中加入交聯(lián)酵母菌，震蕩混勻后形成的懸液即為免疫原。利用本發(fā)明制備的免疫原生成抗血清，將抗血清加入到易受污染的培養(yǎng)基中，可有效抑制產(chǎn)朊假絲酵母JTW-1的污染，解決了目前無菌操作中常被雜菌產(chǎn)朊假絲酵母JTW-1污染的問題。
文檔編號C12R1/72GK102226153SQ20111012009
公開日2011年10月26日 申請日期2011年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月10日
發(fā)明者金濤 申請人:黑龍江大學(xué)