專利名稱：一種從甜茶葉中提取甜茶素的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物化學的技術領域，具體涉及一種從甜茶葉中提取甜茶素的方法。
背景技術：
甜茶是薔薇科多年生藤木，為廣西特有的一種野生甜味植物，主產(chǎn)于我區(qū)大瑤山， 由于其味甜，故名甜茶。與羅漢果、甜葉菊并稱廣西三大甜味植物，在我區(qū)民間具有悠久的應用歷史，長期以來當?shù)厝藗円恢碑敳栾嬘?，亦用來代糖加工食品，還可入藥。1979年廣西分析測試研究中心就甜茶進行了化學成份分析，確定其含甜味物質(zhì)的化學結(jié)構與甜葉菊甙一致，甜度是蔗糖的300倍，而熱值僅是蔗糖的5%。經(jīng)鑒定，其甜茶素(甜茶糖甙)含量高達6-7%。經(jīng)藥理試驗，具有降血糖、降血壓、促進新陳代謝抑制胃酸過多，清熱潤肺、生津解渴、并有高甜度，低熱值的特性，可作糖尿病、肥胖癥的輔助治療。對熱感、熱咳具有較好的療效，經(jīng)毒理試驗無毒副作用，是世界上一種新型的高級甜味保健飲品?？诟星逄鹚?，老少皆宜。經(jīng)常飲用，能強身健體。國內(nèi)外對甜茶素的分離提取、測試及藥理等方面進行了研究，對小規(guī)模提取較高純度的甜茶素也有報道，但是在提取分離過程中采用大量的有毒試劑進行分離提純，對甜茶素應用于食品方面有明顯限制。為此，我們以甜茶葉為原料，采用柱層析、結(jié)晶與重結(jié)晶等手段進行大規(guī)模的制備甜茶素純品，作為食品添加劑進行添加，廣泛應用于肥胖、高血壓、糖尿病及心臟病等患者的保健食品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是要提供一種方法簡單、成本低、便于工業(yè)化生產(chǎn)，所得產(chǎn)品純度高、無雜質(zhì)的甜茶素純品的制備方法。本發(fā)明采用的技術方案包括干燥過后的甜茶葉經(jīng)用乙醇溶液提取、過濾、減壓濃縮，然后用樹脂吸附、乙醇洗脫、將洗脫液濃縮，脫色，結(jié)晶和重結(jié)晶制得甜茶素純品。因此，本發(fā)明提供一種從甜茶葉中提取甜茶素的方法，步驟包括(1)粉碎干燥甜茶，并將甜茶、45%乙醇按重量(kg)/體積比(V) = 1 1-3進行混合，加熱回流提取；(2)過濾除渣后，減壓濃縮至無乙醇味；(3)上大孔吸附樹脂LSA_40(西安藍曉科技有限公司提供)進行吸附分離，并將洗脫物減壓濃縮干燥，其中洗脫液為乙醇溶液，將洗脫物進行濃縮至干；(4)加入70%乙醇進行加熱溶解，然后加入活性碳進行脫色，再進行濃縮直至獲得干燥物；(5)加入90%乙醇進行加熱溶解，然后加入熱水調(diào)節(jié)乙醇終濃度為40-50%，室溫
過夜結(jié)晶，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得甜茶素純品。在一個實施方案中，步驟1中為45 %的乙醇，優(yōu)選在65°C下進行加熱攪拌提取。
在一個實施方案中，步驟2的過濾過程是紗布過濾、陶瓷膜過濾。其中，優(yōu)選是三層紗布過濾2次、陶瓷膜過濾1次。在一個實施方案中，其中步驟3中，LSA-40層析柱的洗脫液為30-80%的乙醇溶液。在一個實施方案中，步驟5的乙醇終濃度為45%。在另一個實施方案中，步驟4中所加入的70%乙醇、活性碳，其體積(V)/重量 (kg)比=16-10 1。在另一個具體實施方案中，步驟6的結(jié)晶和重結(jié)晶溫度是4°C直至室溫。技術效果1、本發(fā)明方法中所用的原料、設備均為常見的普通原料、設備，避免了工業(yè)化生產(chǎn)過程中對于昂貴原材料、儀器的依賴，大大地降低了生產(chǎn)成本；2、本純化過程中采用的分離材料是大孔吸附樹脂LSA-40，其分離操作過程簡單， 易得便宜，易控制。3、采用結(jié)晶和重結(jié)晶進行純化，工藝簡單，易于操作，純化效率高。4、本發(fā)明所用的試劑均為無毒、廉價、量產(chǎn)的化學試劑，整個過程中可利用成熟的試劑回收的常規(guī)技術，這極大地降低了向環(huán)境排放廢棄物。5、經(jīng)過長期摸索，本發(fā)明確定了采用40-50% (優(yōu)選45% )乙醇終濃度在室溫條件下進行結(jié)晶，甜茶素的純度是最高，可達到98. 57-99. 53%。


圖1 從甜茶中提取甜茶素的純度HPLC曲線圖，其中縱坐標表示峰面積，橫坐標表示分離時間。圖2 甜茶素標準品的HPLC曲線圖，其中縱坐標表示峰面積，橫坐標表示分離時間。
具體實施例方式下面，本發(fā)明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。實施例1 粉碎干燥甜茶100kg，加入45%乙醇300L，65°C加熱回流提取池，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾，減壓濃縮至50L (無乙醇味)，然后濃縮液上大孔吸附樹脂 LSA-40柱，用70%乙醇洗脫得到洗脫物，將洗脫物進行濃縮至干。再用70%乙醇80L加熱溶解，加5kg顆粒活性碳進行脫色30min，再濃縮至干，90%乙醇2L加熱溶解后，再加熱水混勻，直至乙醇終濃度50%，然后室溫結(jié)晶Mh，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得到甜茶素樣
P
BFI ο經(jīng)檢測，AgilentllOO高效液相色譜儀，色譜柱為 Hypersil 0DS(150mmX4. 6mm, 5 μ m)，流動相為65%甲醇的水溶液；檢測波長為210nm ；流速為lml/min ；進樣量為20 μ L。 甜茶素樣品的純度為97. 27%，結(jié)果如表1和圖1所示。實施例2 粉碎干燥甜茶500kg，加入45%乙醇600L，65°C加熱回流提取2h，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾，減壓濃縮至100L (無乙醇味)，然后濃縮液上大孔吸附樹脂LSA-40柱， 用70%乙醇洗脫得到洗脫物，將洗脫物進行濃縮至干。再用70%乙醇150L加熱溶解，加 15kg活性碳進行脫色30min，再濃縮至干，90%乙醇6L加熱溶解后，再加熱水直至乙醇終濃度47%，室溫結(jié)晶Mh，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得到甜茶素樣品。按照實施例1的方法進行純度檢測，純度為97. 82%，結(jié)果如表1所示。實施例3:粉碎干燥甜茶200kg，加入45%乙醇200L，65°C加熱回流提取2h，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾，減壓濃縮至50L (無乙醇味)，然后濃縮液上大孔吸附樹脂LSA-40柱，用 70%乙醇洗脫得到洗脫物，將洗脫物進行濃縮至干。再用70%乙醇100L加熱溶解，加^g 活性碳進行脫色30min，再濃縮至干，90%乙醇3L加熱溶解后，再加熱水直至乙醇終濃度 40%，室溫結(jié)晶24h，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得到甜茶素樣品。按照實施例1的方法進行純度檢測，純度為98. 95%，結(jié)果如表1所示。實施例4 粉碎干燥甜茶300kg，加入45%乙醇300L，65°C加熱回流提取2h，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾，減壓濃縮至80L (無乙醇味)，然后濃縮液上大孔吸附樹脂LSA-40柱，用 70%乙醇洗脫得到洗脫物，將洗脫物進行濃縮至干。再用70%乙醇120L加熱溶解，加IOkg 活性碳進行脫色30min，再濃縮至干，90%乙醇2L加熱溶解后，再加熱水混勻直至乙醇終濃度45%，室溫結(jié)晶Mh，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得到甜茶素純品。按照實施例1的方法進行純度檢測，純度為99. 45%，結(jié)果如表1所示。表 權利要求
1.本發(fā)明提供一種從甜茶提取甜茶素的方法，步驟包括(1)粉碎干燥甜茶，并將甜茶、45%乙醇按重量(kg)/體積比(V)= 1 1-3進行混合， 加熱回流提?。?2)過濾除渣后，減壓濃縮至無乙醇味；(3)上大孔吸附樹脂LSA-40(西安藍曉科技有限公司提供)進行吸附分離，并將洗脫物減壓濃縮干燥，其中洗脫液為乙醇溶液，將洗脫物進行濃縮，直至獲得干燥物；(4)加入70%乙醇進行加熱溶解，然后加入活性碳進行脫色，再進行濃縮，直至獲得干燥物；(5)加入90%乙醇進行加熱溶解，然后加入熱水調(diào)節(jié)乙醇終濃度為40-50%，室溫過夜結(jié)晶，過濾得結(jié)晶物，再進行重結(jié)晶得甜茶素純品。
2.根據(jù)權利要求1的方法，其中步驟1中為45%的乙醇，在65°C下進行加熱攪拌提取。
3.根據(jù)權利要求1或2的方法，其中步驟2中過濾過程是紗布過濾、陶瓷膜過濾。其中是三層紗布過濾2次、陶瓷膜過濾1次。
4.根據(jù)權利要求3的方法，其中步驟3中LSA-40層析柱的洗脫液為30-80%的乙醇溶液。
5.根據(jù)權利要求4的方法，其中步驟4中所加入的70%乙醇、活性碳，其體積(V)/重量(kg)比=16-10 1。
6.根據(jù)權利要求5的方法，其中步驟5中乙醇終濃度為45%。
7.根據(jù)權利要求6的方法，其中步驟6中結(jié)晶和重結(jié)晶溫度是4°C直至室溫。全文摘要
本發(fā)明提供了一種從甜茶葉中提取甜茶素的方法，屬于天然產(chǎn)物化學的技術領域。干燥過后的甜茶葉經(jīng)用乙醇溶液提取、過濾、減壓濃縮，然后用樹脂吸附、乙醇洗脫、將洗脫液減壓濃縮，脫色，結(jié)晶和重結(jié)晶制得甜茶素純品。結(jié)晶和重結(jié)晶純化甜茶素工藝簡單，易于操作，純化度高。
文檔編號A23L1/09GK102239983SQ20111012442
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月16日 優(yōu)先權日2011年5月16日
發(fā)明者唐忠海 申請人:向華