專利名稱：微生物細胞固定化載體及相關(guān)應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及細胞固定技術(shù)領域，特別涉及微生物細胞固定技術(shù)領域，更具體地，是指一種微生物細胞固定化載體及相關(guān)應用。
背景技術(shù)：
細胞的固定化在細胞催化工業(yè)應用中扮演著重要角色。目前，細胞的固定化主要有物理和化學兩種方法(Food MiCrObiOlOgH2004)，21 :377-397)。物理方法主要是采用有機和無機多孔材料吸附或大分子包埋等手段對細胞進行固定化。吸附固定細胞是利用多孔材料和細胞表面之間的靜電引力作用將細胞固定在多孔材料的表面，雖然對細胞的活性影響最小，但固定化效率不高，且細胞與載體之間的弱作用力導致在進行反應時由于攪拌或溶劑的作用等造成細胞脫落，影響細胞的重復利用率。而包埋法雖然細胞可以被牢牢地固定在載體內(nèi)，固定化效率較高，但由于細胞被完全包裹，影響底物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的傳遞，造成固定化細胞的催化效率較低?；瘜W交聯(lián)方法是采用化學交聯(lián)劑通過共價鍵將細胞固定在載體的表面，該方法雖然可以將細胞很好固定，也不存在底物和產(chǎn)物的傳輸問題，但交聯(lián)通常需要有機溶劑和化學交聯(lián)劑參與，而有機溶劑和化學交聯(lián)劑對細胞毒性較大，對細胞的生物催化活性會產(chǎn)生不利的影響。此外，還有細胞自凝聚固定化方法，但這項技術(shù)只適合某些表面能夠表達凝聚蛋白的特定細胞，不具備普遍性。縱觀細胞固定化技術(shù)，雖然最近十年來得到了很大的發(fā)展、應用。但到目前為止，仍然停留在原有技術(shù)原理的基礎上，沒有出現(xiàn)概念新穎的細胞固定化技術(shù)手段。生物仿生黏附材料是最近十幾年，通過對海洋貽貝類生物黏附蛋白結(jié)構(gòu)組成的剖析研究基礎上發(fā)展而來。研究發(fā)現(xiàn)在海洋貽貝類生物黏附蛋白中富含3，4_ 二羥基苯丙氨酸(DOPA)，進一步的研究發(fā)現(xiàn)DOPA及其鄰苯二酚衍生物具有一個關(guān)鍵的特性，即能與有機體和無機物表面形成強烈的粘連，是貽貝類生物以及其它生物黏附蛋白中的重要的黏附功能性基團，它能與金屬及其氧化物表面耦合，還能在弱堿性或若氧化劑存在的條件下與有機物表面的氨基或巰基發(fā)生Michael加成或希夫堿反應，牢固地粘附在這些物體的表面。更為重要的是這種黏附是可以在水溶液環(huán)境下進行，且在一般情況下是不可逆的 (Science (2007), 318 :426-430) 0這一特性使得這種新型仿生材料在醫(yī)學、工程、涂料等領域具有良好的應用前景。已有國外研究者將該仿生材料應用于人體組織裂痕修復。但沒見到將這種新型仿生材料用于細胞固定化的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服了上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺點，提供一種微生物細胞固定化載體及相關(guān)應用，該微生物細胞固定化載體設計巧妙，能夠簡單方便地將微生物細胞固定在有機或無機載體上，且固定化效率高，細胞活性不受影響，適于大規(guī)模推廣應用。為了實現(xiàn)上述目的，在本發(fā)明的第一方面，提供了一種微生物細胞固定化載體，其特點是，所述微生物細胞固定化載體采用含有鄰苯二酚(catechol)結(jié)構(gòu)的化合物修飾無機載體或有機載體而得到。較佳地，所述的含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的化合物是多巴(DOPA)、多巴胺(dopamine)、 3，4- 二羥基苯甲胺、3，4- 二羥基苯甲醛、3，4- 二羥基苯乙醛、3，4- 二羥基苯甲酸或3，4- 二
羥基苯乙酸。較佳地，所述無機載體是硅藻土、硅膠粉、湖珊瑚石、分子篩、高嶺土、金屬氧化物、 金屬氧化物納米粒子、微孔陶瓷或微孔玻璃。較佳地，所述有機載體為高分子聚合物或多糖。更佳地，所述高分子聚合物為大孔樹脂類、離子交換樹脂類、環(huán)氧樹脂類或氨基樹脂。更佳地，所述多糖為纖維素、纖維素衍生物、殼聚糖、殼聚糖衍生物、環(huán)糊精、變性淀粉、褐藻膠、角叉藻膠或瓊脂。在本發(fā)明的第二方面，提供了上述的微生物細胞固定化載體在固定化微生物細胞中的應用。較佳地，所述微生物細胞為細菌細胞、霉菌細胞或酵母菌細胞。更佳地，所述細菌細胞為球菌、螺旋菌、放線菌、桿菌或其基因工程菌；，所述霉菌細胞為根霉、毛霉、青霉、曲霉、木霉、或頭孢霉；所述酵母細胞為畢赤酵母。更進一步地，所述桿菌包括大腸桿菌、醋酸桿菌、氧化葡糖酸桿菌、結(jié)核桿菌和乳酸桿菌。本發(fā)明的有益效果具體在于本發(fā)明的微生物細胞固定化載體采用含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的化合物修飾無機載體或有機載體而得到，該微生物細胞固定化載體設計巧妙，能夠簡單方便地將微生物細胞固定在有機或無機載體上，且固定化效率高，細胞活性不受影響， 適于大規(guī)模推廣應用。
具體實施例方式為了能夠更清楚地理解本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容，特舉以下實施例詳細說明。應理解，實施例僅是用于說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制。實施例1以納米氧化鐵為例固定化大腸桿菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入1. Og磁性納米氧化鐵，用0. Imol/ L NaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌1小時，用磁鐵分離，用純水洗滌2次固體，對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的磁性納米氧化鐵。2、將大腸桿菌(E. coli)加水配成0D_為20左右的溶液，取5ml菌體加入上述5ml 磁性氧化鐵材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用磁鐵分離固體，用純水洗滌2次固體，測上清液OD值，通過間接方法即得固定化的大腸桿菌(E. coli)，有多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為96. 4%，對照組的固定化率為79. 6%。3、測定細胞固定化率采用下式計算
....................縫又OD 4、活性評價本實驗用的大腸桿菌是產(chǎn)腈水解酶重組的大腸桿菌，能催化3-氰基吡啶生成尼克酸。將上述固定化的細胞加入到30ml pH7.0的PB緩沖液中，3-氰基吡啶初始濃度為lmol/L的體系中，每隔5小時取樣，通過Agilent 1100HPLC測產(chǎn)物含量。檢測條件分析柱為安捷倫)(DB-C18，流速0. 8ml/min,檢測波長230nm，流動相為體積比5 95的乙腈與0. 1 %稀磷酸，柱溫30°C。固定化細胞在催化4 后轉(zhuǎn)化率為73. 45%,對照組的只有 53. 28% ·實施例2以納米氧化鐵為例固定化酵母菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入0. 5g磁性納米氧化鐵，用0. Imol/ LNaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌1小時，用磁鐵分離，用純水洗滌2次固體，對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的磁性納米氧化鐵。2、將酵母菌加水配成OD6tltl為20左右的溶液，取5ml菌體加入上述5ml磁性氧化鐵材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用磁鐵分離固體，用純水洗滌2次，測上清液OD值，通過計算即得固定化的酵母菌，含多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為95.6%，對照組的固定化率為80. 3%03、活性評價通過酵母菌轉(zhuǎn)化L-苯丙氨酸生成2-苯乙醇。將上述固定的細胞加入30mlpH6. 8，L-苯丙氨酸濃度10g/L的PB緩沖液中催化反應40小時，產(chǎn)物進行氣相色譜分析。檢測條件色譜柱為PEG20M(30mX0. 53mmX 1. 5nm)，F(xiàn)ID檢測器，載氣為N2，柱箱溫度采用程序控溫，初始溫度為80°C，初始溫度保持時間2min，終止溫度為220°C，升溫速率為10°C、min，終止溫度保持時間為5min，進樣器和檢測口溫度均為250°C。固定化細胞的轉(zhuǎn)化率達到41. 47%，對照組的轉(zhuǎn)化率為26. 78%。實施例3以納米氧化鐵為例固定化氧化葡萄糖酸桿菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入0. 5g磁性納米氧化鐵，用0. Imol/ L NaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌1小時，用磁鐵分離，用純水洗滌2次固體，對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的磁性納米氧化鐵。2、將氧化葡萄糖酸桿菌濕菌體G加水配成OD6tltl為3的溶液，取5ml菌液加入上述 5ml磁性氧化鐵材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用磁鐵分離固體，用純水洗滌2次，即得固定化的氧化葡萄糖酸桿菌。測上清液OD值，計算獲得固定化率為98. 9%，對照組的固定化率為84.8%。3、活性評價通過氧化葡萄糖酸桿菌轉(zhuǎn)化甘油生成2-羥基丙酮。取5ml甘油溶于 30mlpH = 6. 5的磷酸鹽緩沖液中，加入上述固定的細胞進行連續(xù)培養(yǎng)反應。每隔2小時取樣，通過Agilent 1100HPLC測2-羥基丙酮的含量。分析條件為色譜柱為ICE-99-9861， ICSep Coregel87H3，柱溫 35°C，流動相為 0. 004mol/L 的 H2SO4,流速為 0. 4ml/min，進樣量為10 μ 1，波長為210nm。結(jié)果反應15批次后，含多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵轉(zhuǎn)化率可達69%， 對照組的轉(zhuǎn)化率為40%。實施例4以納米氧化鐵為例固定化巴氏畢赤酵母1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入0. 5g磁性納米氧化鐵，用0. Imol/ L NaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌1小時，用磁鐵分離，用純水洗滌2次固體，對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的磁性納米氧化鐵。2、將巴氏畢赤酵母(Pichia Pastoris)配制成120g/L的溶液，取5ml菌液加入上述制備的5ml磁性氧化鐵材料中，室溫(25°C )震搖30分鐘，用磁鐵分離固體，用純水洗滌2次，測上清液OD值，通過間接方法即得固定化的巴氏畢赤酵母，含有多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為93. 7%，對照組固定化率為81%。3、生物催化畢赤酵母轉(zhuǎn)化5-鄰苯二甲酰亞胺-3-氧代戊酸乙酯為(S)-3_羥基-5-鄰苯二甲酰亞胺基戊酸乙酯。將上述固定的細胞加入IOml 7g/L的5_鄰苯二甲酰亞胺_3_氧代戊酸乙酯中， 35°C震搖12h，轉(zhuǎn)速169rpm，通過Agilent 1100HPLC測定產(chǎn)物的含量，實驗平行3次。分析條件色譜柱為XDB-C18 (4. 6mmX 250mm, 5um)，流動相甲醇/水(體積比50/50)，流速 lmL/min,柱溫30°C，進樣量2uL，波長219nm。游離酵母的產(chǎn)率為94. 94%,固定化酵母的產(chǎn)率為95.31%，ee值均大于99%。實施例5以殼聚糖為例固定化氧化葡萄糖酸桿菌1、將5g脫乙酰殼聚糖(脫乙酰度大于90%)加入500ml純水中，加入醋酸10ml， 室溫攪拌溶解，加入用10g3，4-二羥基苯甲醛溶于50mlDMF配成的溶液，室溫攪拌6小時， 用0. Imol/LNaOH調(diào)pH為6. 5，過濾，固體用純水洗滌3次，每次50ml。2、將上述制備的固體加到500ml純水中，加入醋酸10ml，室溫攪拌溶解，加入醋酸硼氰化鈉，室溫攪拌6小時，用0. Imol/LNaOH調(diào)pH為6. 5，過濾，固體用純水洗滌3次，每次 50ml。即得含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的殼聚糖。3、將0.4g上述制備的殼聚糖溶于IOOml的質(zhì)量分數(shù)2 %的乙酸中，用0. lmol/L NaOH調(diào)節(jié)pH = 5，加入3ml菌液，邊攪拌邊用NaOH調(diào)節(jié)pH至7，測上清液OD值，計算細胞固定化率，對照組是沒有修飾過的殼聚糖。含有多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為63.7%， 對照組固定化率為21%。4、活性評價氧化葡萄糖酸桿菌轉(zhuǎn)化甘油生成2-羥基丙酮。取5ml甘油溶于60ml PH = 6. 5的磷酸鹽緩沖液中，加入上述固定的細胞進行連續(xù)培養(yǎng)反應。每隔12小時取樣， 通過AgilentllOOHPLC測2-羥基丙酮的含量。檢測條件同實施例3。結(jié)果反應8批次后， 含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的殼聚糖轉(zhuǎn)化率可達67 %，對照組的轉(zhuǎn)化率為51 %。實施例6以納米氧化鐵為例固定化青霉菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入0. 5g磁性納米氧化鐵，用0. Imol/ L NaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌1小時，用磁鐵分離，用純水洗滌2次固體，對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的磁性納米氧化鐵。2、將青霉菌配制成OD6tltl約為20的溶液，取5ml菌液加入上述制備的5ml磁性氧化鐵材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用磁鐵分離固體，用純水洗滌2次，測上清液OD值， 通過間接方法即得固定化的青霉菌，有多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為85.6%，對照組的固定化率為64.8%。3、活性評價采用鄰一聯(lián)(二)茴香胺分光光度法測定葡萄糖氧化酶的活性，即在有氧存在條件下，葡萄糖氧化酶催化葡萄糖脫氫產(chǎn)生H2O2，在過氧化物酶(POD)作用下，氧供體即鄰一聯(lián)(二)茴香胺被氧化成棕色產(chǎn)物。于436nm處測量吸光率的變化，即可換算為葡萄糖氧化酶的活性。定義酶活單位為26°C每分催化釋放一微克分子H2O2所需要的酶量。將上述固定的細胞加入到30ml pH為7的緩沖液中，葡萄糖的濃度為0.4mol/L。30分鐘后于436nm處測定吸光度的變化，結(jié)果表明固定化的細胞的酶活比對照組的酶活提高了 46. 45%o實施例6以大孔樹脂為例固定化氧化葡萄糖酸桿菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入6g大孔樹脂，用0. Imol/LNaOH調(diào) PH為8. 5，室溫攪拌3小時，抽濾，固體用純水洗滌3次，每次50ml。對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的大孔樹脂。2、將氧化葡萄糖酸桿菌濕菌體G加水配成OD6tltl為3溶液，取Iml菌液加入上述制備的0.5g(濕重)固體材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用砂芯漏斗分離固體，測上清液 OD值，通過間接方法即得固定化的氧化葡萄糖酸桿菌，有多巴胺鹽酸鹽的氧化鐵的固定化率為91. 9%，對照組的固定化率為55. 8%。3、活性評價氧化葡萄糖酸桿菌轉(zhuǎn)化甘油生成2-羥基丙酮。取5ml甘油溶于60ml PH = 6. 5的磷酸鹽緩沖液中，加入上述固定的細胞進行連續(xù)培養(yǎng)反應。每隔12小時取樣， 通過AgilentllOOHPLC測2-羥基丙酮的含量。檢測條件同實施例3。結(jié)果反應6批次后， 含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的殼聚糖轉(zhuǎn)化率可達49. 23%，對照組的轉(zhuǎn)化率為33. 89%。實施例8以硅藻土為例固定化氧化葡萄糖酸桿菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入8g硅藻土，用0. Imol/LNaOH調(diào)pH 為8. 5，室溫攪拌3小時，抽濾，固體用純水洗滌3次，每次50ml。對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的硅藻土。2、將氧化葡萄糖酸桿菌濕菌體G加水配成OD6tltl為3的溶液，取Iml菌液加入上述制備的0.5g(濕重)固體材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用砂芯漏斗分離固體，測上清液OD值，通過間接方法即得固定化的氧化葡萄糖酸桿菌，有多巴胺鹽酸鹽的硅藻土的固定化率為95. 8%，對照組的固定化率為79. 82%。3、活性評價氧化葡萄糖酸桿菌轉(zhuǎn)化甘油生成2-羥基丙酮。取5ml甘油溶于60ml PH = 6. 5的磷酸鹽緩沖液中，加入上述固定的細胞進行連續(xù)培養(yǎng)反應。每隔12小時取樣， 通過AgilentllOOHPLC測2-羥基丙酮的含量。檢測條件同實施例3。結(jié)果反應8批次后， 含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的殼聚糖轉(zhuǎn)化率可達％ 48.四％，對照組的轉(zhuǎn)化率為35. 16%。實施例9以氨基樹脂為例固定化大腸桿菌1、將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于500ml純水中，加入6g氨基樹脂，用0. Imol/LNaOH調(diào) PH為8. 5，室溫攪拌3小時，抽濾，固體用純水洗滌3次，每次50ml。對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的氨基樹脂。2、將大腸桿菌(E. coli)加水配成濃度OD6tltl約為20的溶液，取Iml菌液加入上述制備的0.5g(濕重)固體材料中，室溫(25°C)震搖30分鐘，用砂芯漏斗分離固體，測上清液OD值，通過間接方法即得固定化的大腸桿菌(E. coli)，有多巴胺鹽酸鹽的氨基樹脂的固定化率為80. 1%，對照組的固定化率為73. 8%。3、活性評價本實驗是用的大腸桿菌是產(chǎn)腈水解酶重組的大腸桿菌，能催化3-氰基吡啶生成尼克酸。將上述固定化的細胞加入到30mlPH7. 0的PB緩沖液中，3-氰基吡啶初始濃度為lmol/L的體系中，每隔5小時取樣，通過Agilent 1100HPLC測產(chǎn)物含量。分析條件分析柱為安捷倫)(DB-C18，流速0. 8ml/min,檢測波長230nm，流動相為體積比5 95的乙腈與0. 1 %稀磷酸，柱溫30°C。固定化細胞在催化4 后轉(zhuǎn)化率為41. 92%,對照組的只有 35. 85%。實施例10以珊瑚石為例固定化酵母菌1、將珊瑚石破碎，用40目篩子篩選出粒徑差不多大的珊瑚石。將Ig多巴胺鹽酸鹽溶于200ml純水中，加入IOg珊瑚石，用0. Imol/LNaOH調(diào)pH為8. 5，攪拌3小時，過濾，固體用純水洗滌3次，每次50ml。對照組是不加多巴胺鹽酸鹽的珊瑚石。2、將酵母菌加水配成OD6tltl約為20的溶液，取Iml菌體加入上述2g材料中，室溫 (250C )震搖30分鐘，過濾，測上清液OD值，通過間接方法即得固定化的酵母菌，有多巴胺鹽酸鹽的珊瑚石的固定化率為30%左右，對照組固定化率為4. 1%。3、活性評價通過酵母菌轉(zhuǎn)化L-苯丙氨酸生成2-苯乙醇。將上述固定的細胞加入 30mlPH6. 8，L-苯丙氨酸濃度10g/L的PB緩沖液中催化反應40小時，產(chǎn)物進行氣相色譜分析。檢測條件同實施例2。固定化細胞的轉(zhuǎn)化率達到36. 81%，對照組的轉(zhuǎn)化率為4. 36%。因此，本發(fā)明克服現(xiàn)有細胞固定化技術(shù)的不足，提供一種新的微生物細胞固定化載體，使微生物細胞可以在水溶液環(huán)境下簡單、方便地固定在有機或無機載體上。主要包括兩個方面，首先是將多巴(DOPA)或多巴胺(dopamine)或含有鄰苯二酚(catechol)結(jié)構(gòu)的化合物與無機或有機載體進行反應，在這些載體的表面或多孔結(jié)構(gòu)的內(nèi)部表面形成多個鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的粘性界面，從而制得微生物細胞固定化載體；然后，在弱堿性條件下，將表面富含多巴或多巴胺或鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的載體即微生物細胞固定化載體與細胞懸濁液混合，通過一定時間的攪拌后，對活細胞進行固定，采用過濾等手段對固定后的細胞進行分離。這種微生物細胞固定化載體可以將活細胞固定在載體表面，有利于底物和產(chǎn)物的傳遞，不影響細胞的催化活性，催化效率高，且具有操作簡便、易于分離、有利于重復使用等優(yōu)勢，是一種創(chuàng)新性的微生物細胞固定化載體。綜上，本發(fā)明的微生物細胞固定化載體設計巧妙，能夠簡單方便地將微生物細胞固定在有機或無機載體上，且固定化效率高，細胞活性不受影響，適于大規(guī)模推廣應用。在此說明書中，本發(fā)明已參照其特定的實施例作了描述。但是，很顯然仍可以作出各種修改和變換而不背離本發(fā)明的精神和范圍。因此，說明書應被認為是說明性的而非限制性的。
權(quán)利要求
1.一種微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述微生物細胞固定化載體采用含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的化合物修飾無機載體或有機載體而得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述的含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的化合物是多巴、多巴胺、3，4_ 二羥基苯甲胺、3，4_ 二羥基苯甲醛、3，4_ 二羥基苯乙醛、3，4- 二羥基苯甲酸或3，4- 二羥基苯乙酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述無機載體是硅藻土、硅膠粉、湖珊瑚石、分子篩、高嶺土、金屬氧化物、金屬氧化物納米粒子、微孔陶瓷或微孔玻璃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述有機載體為高分子聚合物或多糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述高分子聚合物為大孔樹脂類、離子交換樹脂類、環(huán)氧樹脂類或氨基樹脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述多糖為纖維素、纖維素衍生物、殼聚糖、殼聚糖衍生物、環(huán)糊精、變性淀粉、褐藻膠、角叉藻膠或瓊脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微生物細胞固定化載體在固定化微生物細胞中的應用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應用，其特征在于，所述微生物細胞為細菌細胞、霉菌細胞或酵母菌細胞。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述細菌細胞為球菌、 螺旋菌、放線菌、桿菌或其基因工程菌；，所述霉菌細胞為根霉、毛霉、青霉、曲霉、木霉、或頭孢霉；所述酵母細胞為畢赤酵母。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的微生物細胞固定化載體，其特征在于，所述桿菌包括大腸桿菌、醋酸桿菌、氧化葡萄糖酸桿菌、結(jié)核桿菌和乳酸桿菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種微生物細胞固定化載體，其采用含有鄰苯二酚(catechol)結(jié)構(gòu)的化合物修飾無機載體或有機載體而得到，較佳地，含有鄰苯二酚結(jié)構(gòu)的化合物是多巴(DOPA)、多巴胺(dopamine)、3，4-二羥基苯甲胺、3，4-二羥基苯甲醛、3，4-二羥基苯乙醛、3，4-二羥基苯甲酸或3，4-二羥基苯乙酸；無機載體是硅藻土、硅膠粉、湖珊瑚石、分子篩、高嶺土、金屬氧化物、金屬氧化物納米粒子、微孔陶瓷或微孔玻璃；有機載體為高分子聚合物或多糖，還提供了上述的微生物細胞固定化載體在固定化微生物細胞中的應用。本發(fā)明的微生物細胞固定化載體設計巧妙，能夠簡單方便地將微生物細胞固定在有機或無機載體上，且固定化效率高，細胞活性不受影響，適于大規(guī)模推廣應用。
文檔編號C12R1/19GK102373193SQ201110296918
公開日2012年3月14日 申請日期2011年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月27日
發(fā)明者任宇紅, 倪克奉, 周勖, 王存勛, 魏東芝, 魯慧敏 申請人:華東理工大學