專利名稱：一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于衛(wèi)生用品檢測(cè)方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
根據(jù)研究表明，經(jīng)血中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，是細(xì)菌大肆孳生的“培養(yǎng)基”，而積存在衛(wèi)生巾上的經(jīng)血使會(huì)陰部濕度大大提高，透氣性變差，更有利于細(xì)菌的繁殖。而普通衛(wèi)生巾在連續(xù)使用兩小時(shí)后，表層細(xì)菌總數(shù)可達(dá)107cfU/cm2，芯層是表層的十幾倍。一些特殊職位的女性或者在夜間的時(shí)候，根本無法做到兩小時(shí)就更換一次衛(wèi)生巾，女性的健康情況令人擔(dān)憂。隨著抗菌市場的發(fā)展，抗菌型衛(wèi)生巾、護(hù)墊在市面上已經(jīng)層出不窮，這些抗菌型產(chǎn)品大多采用噴灑液體抗菌劑來達(dá)到抗菌的目的，但是液體制劑，所添加的化學(xué)成分，是與人體直接接觸的，人的體質(zhì)不同，可能會(huì)有過敏現(xiàn)象產(chǎn)生。基于這種情況，現(xiàn)在市面上出現(xiàn)了添加在芯層的抗菌劑，然而對(duì)于新研制的這種添加至芯層的抗菌劑，國標(biāo)還沒有給出具體的檢測(cè)方法，有必要研發(fā)一種方法，該方法適用于檢測(cè)添加至衛(wèi)生巾芯層抗菌劑的抗菌效果，通過模擬人體的使用情況，客觀的反應(yīng)出了產(chǎn)品的抑菌性能。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種能夠客觀反映一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法。本發(fā)明提供一種一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，包括以下步驟1)細(xì)菌微生物的檢測(cè)A、大腸桿菌監(jiān)測(cè)a.配制1號(hào)模擬經(jīng)血、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；b.配制大腸桿菌菌液，將菌液加入到1號(hào)模擬經(jīng)血中，菌液與1號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為6. 6 X ΙΟ"7 6. 7 X ΙΟ"7,配制成1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；C.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將步驟c進(jìn)行接種的樣液與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察結(jié)果；B、金黃色葡萄球菌的檢測(cè)a.配制1號(hào)模擬經(jīng)血、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；b.配制金黃色葡萄球菌菌液，將菌液加入到1號(hào)模擬經(jīng)血中，菌液與1號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為6. 6 X ΙΟ"7 6. 7 X ΙΟ"7,配制成1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將步驟c進(jìn)行接種的樣液與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察結(jié)果；2)真菌微生物的檢測(cè)a.配制2號(hào)模擬經(jīng)血、沙氏瓊脂培養(yǎng)基、生理鹽水、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣品及空白樣片；b.配制白色念珠菌菌液，將菌液與2號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為6. 6X10_7 6. 7 X ΙΟ"7,配制成2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將c步驟進(jìn)行接種的樣液與沙氏瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，72小時(shí)后觀察結(jié)果。優(yōu)選，所述1號(hào)模擬經(jīng)血為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)將蛋白胨10份、牛肉浸粉3份、氯化鈉5份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121°C下進(jìn)行高壓滅菌15分鐘)。優(yōu)選，所述2號(hào)模擬經(jīng)血為沙氏液體培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)將蛋白胨10份、葡萄糖40份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在115°C下進(jìn)行高壓滅菌20分鐘。優(yōu)選，所述營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)取蛋白胨10份、牛肉浸粉3份、氯化鈉5份、瓊脂14份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121°C進(jìn)行高壓滅菌15分鐘。優(yōu)選，所述PBS緩沖溶液，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)取無水磷酸氫二鈉2. 83份、磷酸二氫鉀1. 36份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121 °C高壓滅菌15分鐘。優(yōu)選，所述沙氏瓊脂培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)蛋白胨10份、葡萄糖40份、瓊脂20份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在115°C高壓滅菌 20分鐘。所述大腸桿菌菌液、金黃色葡萄球菌是分別將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌加入PBS 緩沖液中，兩種菌液的菌落的回收菌數(shù)為IX 104CfU/ml 9X104cfu/ml。優(yōu)選，所述菌液是將白色念珠菌菌液加入到PBS緩沖液中，菌落的回收菌數(shù)為 1 X 104cfu/ml 9 X 104cfu/ml。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及效果合理的配制模擬經(jīng)血，模擬經(jīng)血中含有的營養(yǎng)物質(zhì)可以模擬人體血液提供給菌良好的生長環(huán)境，并給予樣片接近人體的環(huán)境，更好的模擬一次性衛(wèi)生用品的應(yīng)用環(huán)境，保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
具體實(shí)施例方式為了理解本發(fā)明，下面通過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例一一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，包括以下步驟1)細(xì)菌微生物的檢測(cè)A、大腸桿菌的檢測(cè)a.用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配制1號(hào)模擬經(jīng)血，以及配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖液和生理鹽水，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；1號(hào)模擬經(jīng)血的配制過程如下取蛋白胨10g、牛肉浸粉3g、氯化鈉5g加入到IL蒸餾水中，在121°C下高壓滅菌 15分鐘備用；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制過程如下取蛋白胨10g、牛肉浸粉3g、氯化鈉5g、瓊脂14g加入到IL蒸餾水中，在121°C高壓滅菌15分鐘；PBS緩沖液的配制過程如下取無水磷酸氫二鈉2. 83g、磷酸二氫鉀1. 36g加入到IL蒸餾水中，在121°C高壓滅菌15分鐘備用。b.配制大腸桿菌，將大腸桿菌加入PBS緩沖液中，菌落的回收菌數(shù)為IXlO4Cfu/ ml 9X104cfu/ml，然后取上述大腸桿菌菌液10 μ 1加入到15ml 1號(hào)模擬經(jīng)血中，配制成 1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入15ml 1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將c步驟進(jìn)行接種的樣液與沙氏瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察平皿培養(yǎng)結(jié)果；B、金黃色葡萄球菌的檢測(cè)a.用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配制1號(hào)模擬經(jīng)血，以及配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖液和生理鹽水，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；1號(hào)模擬經(jīng)血的配制過程如下取蛋白胨10g、牛肉浸粉3g、氯化鈉5g加入到IL蒸餾水中，在121°C下高壓滅菌 15分鐘備用；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制過程如下取蛋白胨10g、牛肉浸粉3g、氯化鈉5g、瓊脂14g加入到IL蒸餾水中，在121°C高壓滅菌15分鐘；PBS緩沖液的配制過程如下取無水磷酸氫二鈉2. 83g、磷酸二氫鉀1. 36g加入到IL蒸餾水中，在121°C高壓滅菌15分鐘備用。b.配制金黃色葡萄球菌菌液，將金黃色葡萄球菌加入PBS緩沖液中，菌落的回收菌數(shù)為1 X 104cfu/ml 9 X 104cfu/ml，然后取上述金黃色葡萄球菌菌液10 μ 1加入到15ml1號(hào)模擬經(jīng)血中，配制成1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入15ml 1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將c步驟進(jìn)行接種的樣液與沙氏瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察平皿培養(yǎng)結(jié)果；2)真菌微生物的檢測(cè)a.用沙氏液體培養(yǎng)基配制2號(hào)模擬經(jīng)血，配制沙氏瓊脂培養(yǎng)基，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣品及空白樣片；2號(hào)模擬經(jīng)血的配制過程如下取蛋白胨10g、葡萄糖40g加入到IL蒸餾水中，115°C高壓滅菌20分鐘備用；沙氏瓊脂培養(yǎng)基的配制過程如下蛋白胨10g、葡萄糖40g、瓊脂20g加入到IL蒸餾水中115°C高壓滅菌20分鐘備用；b.配制白色念珠菌菌液，將白色念珠菌加入到PBS緩沖液中，所用PBS緩沖液與步驟1)用到的PBS緩沖液為一種，菌落的回收菌數(shù)為IX 104Cfu/ml 9X104cfu/ml。將上述菌液取10 μ 1加入到15ml 2號(hào)模擬經(jīng)血中，配制成2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入15ml 2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將步驟c進(jìn)行接種的樣液與沙氏瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，72小時(shí)后觀察平皿培養(yǎng)結(jié)果。結(jié)果評(píng)價(jià)的方法按照GB15979-2002菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)1)、細(xì)菌微生物的結(jié)果按下式進(jìn)行計(jì)算
權(quán)利要求
1.一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于包括以下步驟1)細(xì)菌微生物的檢測(cè)A、大腸桿菌監(jiān)測(cè)a.配制1號(hào)模擬經(jīng)血、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；b.配制大腸桿菌菌液，將菌液加入到1號(hào)模擬經(jīng)血中，菌液與1號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為 6. 6 X 10_7 6. 7 X 10_7，配制成1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將步驟c進(jìn)行接種的樣液與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察結(jié)果；B、金黃色葡萄球菌的檢測(cè)a.配制1號(hào)模擬經(jīng)血、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣片及空白樣片；b.配制金黃色葡萄球菌菌液，將菌液加入到1號(hào)模擬經(jīng)血中，菌液與1號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為6. 6X 10_7 6. 7X 10_7，配制成1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入1號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將步驟c進(jìn)行接種的樣液與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，48小時(shí)后觀察結(jié)果；2)真菌微生物的檢測(cè)a.配制2號(hào)模擬經(jīng)血、沙氏瓊脂培養(yǎng)基、生理鹽水、PBS緩沖溶液，準(zhǔn)備試驗(yàn)樣品及空白樣片；b.配制白色念珠菌菌液，將菌液與2號(hào)模擬經(jīng)血的體積比為6.6X 10_7 6. 7 X ΙΟ"7,配制成2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血；c.在空白樣片、試驗(yàn)樣片上分別加入2號(hào)帶菌模擬經(jīng)血，將每片樣片折疊后放入塑料袋中，將塑料袋放入到設(shè)定值為33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，到特定時(shí)間將試驗(yàn)樣片、空白樣片取出，按照菌落總數(shù)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)；d.將c步驟進(jìn)行接種的樣液與沙氏瓊脂培養(yǎng)基混合的平皿放入33°C 37°C的生化培養(yǎng)箱中，72小時(shí)后觀察結(jié)果。
2.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述1 號(hào)模擬經(jīng)血為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)將蛋白胨 10份、牛肉浸粉3份、氯化鈉5份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121°c下進(jìn)行高壓滅菌15分鐘)。
3.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述2 號(hào)模擬經(jīng)血為沙氏液體培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)將蛋白胨 10份、葡萄糖40份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在115°C下進(jìn)行高壓滅菌20分鐘。
4.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)取蛋白胨10份、牛肉浸粉3份、氯化鈉5份、瓊脂14份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121°C進(jìn)行高壓滅菌 15分鐘。
5.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述 PBS緩沖溶液，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)取無水磷酸氫二鈉2. 83 份、磷酸二氫鉀1. 36份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在121°C高壓滅菌15分鐘。
6.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述沙氏瓊脂培養(yǎng)基，其配制方法如下，其中各原料的量均為重量份數(shù)蛋白胨10份、葡萄糖40 份、瓊脂20份加入到1000份蒸餾水中，將上述溶液在115°C高壓滅菌20分鐘。
7.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述大腸桿菌菌液、金黃色葡萄球菌是分別將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌加入PBS緩沖液中，兩種菌液的菌落的回收菌數(shù)為lX104cfu/ml 9X104cfu/ml。
8.如權(quán)利要求1所述的一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，其特征在于所述菌液是將白色念珠菌菌液加入到PBS緩沖液中，菌落的回收菌數(shù)為lX104cfu/ml 9X104cfu/ml。
全文摘要
本發(fā)明公開了一次性衛(wèi)生用品抗菌性的微生物檢測(cè)方法，包括細(xì)菌微生物的檢測(cè)和真菌微生物的檢測(cè)，分別用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基和沙氏液體培養(yǎng)基配制模擬經(jīng)血，模擬經(jīng)血中含有的營養(yǎng)物質(zhì)可以模擬人體血液提供給菌良好的生長環(huán)境，并給予樣片接近人體的環(huán)境，更好的模擬一次性衛(wèi)生用品的應(yīng)用環(huán)境，保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
文檔編號(hào)C12R1/19GK102373264SQ20111029710
公開日2012年3月14日 申請(qǐng)日期2011年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月30日
發(fā)明者張巍, 胡宗香, 韓海星 申請(qǐng)人:天津市中科健新材料技術(shù)有限公司