專(zhuān)利名稱(chēng)：一種eb病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種病理特征分析方法，具體而言，涉及EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法。
背景技術(shù)：
胃癌是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其死亡率占所有惡性腫瘤的第二位， 每年有876000例新發(fā)病例，多數(shù)文獻(xiàn)認(rèn)為EB病毒感染胃癌的構(gòu)成比約為10%，這部分胃癌禾爾為 EB 病毒相關(guān)胃癌(Epstein-Barr virus-associated gastric cancinoma, EBVaGC)。 明確EB病毒在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其臨床病理特征。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供用原位雜交法檢測(cè)胃癌組織芯片中EB病毒編碼的小RNA (EBERs)，分析EB病毒相關(guān)胃癌病理形態(tài)及患者年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況等臨床特征。為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn) 一種EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法
步驟1、臨床資料，收集醫(yī)院手術(shù)切除胃癌標(biāo)本若干例，標(biāo)本中位年齡58 68歲，所有標(biāo)本均經(jīng)兩位病理專(zhuān)家進(jìn)行組織病理證實(shí)，患者術(shù)前均未進(jìn)行放療和化療；
步驟2、組織芯片的構(gòu)建，組織標(biāo)本經(jīng)1 7%的甲醛固定、常規(guī)石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對(duì)應(yīng)找出蠟塊上相應(yīng)部位并做標(biāo)記，選取無(wú)壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個(gè)組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；
步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；
步驟4、原位雜交染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，僅為細(xì)胞核著棕褐色為陽(yáng)性，細(xì)胞漿和細(xì)胞膜在核分裂時(shí)可以有陽(yáng)性著色，但視為陰性；
步驟5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，所有實(shí)驗(yàn)均采用統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間差異采用X2檢驗(yàn)，以P小于等于0. 1被認(rèn)為差異有顯著性。進(jìn)一步的，所述步驟1標(biāo)本中位年齡63歲。進(jìn)一步的，所述步驟2標(biāo)本經(jīng)4%的甲醛固定。進(jìn)一步的，所述步驟2自制10X 16和10X9的組織陣列。進(jìn)一步的，所述步驟2的組織陣列為6個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊75例X 2點(diǎn)和1個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊40例X 2點(diǎn)的組織陣列。進(jìn)一步的，所述步驟2每例組織塊取2個(gè)組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。進(jìn)一步的，所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認(rèn)為差異有顯著性。進(jìn)一步的，所述步驟5采用SPSSl 1. 0統(tǒng)計(jì)軟件分析。本發(fā)明的有益效果是
EB病毒獨(dú)立存在于胃癌及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞核中，提示EB病毒和腫瘤細(xì)胞同時(shí)復(fù)制；與非EB病毒感染胃癌相比，EB病毒相關(guān)胃癌具有獨(dú)特的臨床病理特征。
具體實(shí)施例方式一種EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法
步驟1、臨床資料，收集醫(yī)院手術(shù)切除胃癌標(biāo)本若干例，標(biāo)本中位年齡58 68歲，所有標(biāo)本均經(jīng)兩位病理專(zhuān)家進(jìn)行組織病理證實(shí)，患者術(shù)前均未進(jìn)行放療和化療；
步驟2、組織芯片的構(gòu)建，組織標(biāo)本經(jīng)1 7%的甲醛固定、常規(guī)石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對(duì)應(yīng)找出蠟塊上相應(yīng)部位并做標(biāo)記，選取無(wú)壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個(gè)組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；
步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；
步驟4、原位雜交染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，僅為細(xì)胞核著棕褐色為陽(yáng)性，細(xì)胞漿和細(xì)胞膜在核分裂時(shí)可以有陽(yáng)性著色，但視為陰性；
步驟5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，所有實(shí)驗(yàn)均采用統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間差異采用X2檢驗(yàn)，以P小于等于0. 1被認(rèn)為差異有顯著性。進(jìn)一步的，所述步驟1標(biāo)本中位年齡63歲。進(jìn)一步的，所述步驟2標(biāo)本經(jīng)4%的甲醛固定。進(jìn)一步的，所述步驟2自制IOX 16和10X9的組織陣列。進(jìn)一步的，所述步驟2的組織陣列為6個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊75例X2點(diǎn)和1個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊40例X 2點(diǎn)的組織陣列。進(jìn)一步的，所述步驟2每例組織塊取2個(gè)組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。進(jìn)一步的，所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認(rèn)為差異有顯著性。進(jìn)一步的，所述步驟5采用SPSSl 1. 0統(tǒng)計(jì)軟件分析。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于步驟1、臨床資料，收集醫(yī)院手術(shù)切除胃癌標(biāo)本若干例，標(biāo)本中位年齡58 68歲，所有標(biāo)本均經(jīng)兩位病理專(zhuān)家進(jìn)行組織病理證實(shí)，患者術(shù)前均未進(jìn)行放療和化療；步驟2、組織芯片的構(gòu)建，組織標(biāo)本經(jīng)1 7%的甲醛固定、常規(guī)石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對(duì)應(yīng)找出蠟塊上相應(yīng)部位并做標(biāo)記，選取無(wú)壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個(gè)組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；步驟4、原位雜交染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，僅為細(xì)胞核著棕褐色為陽(yáng)性，細(xì)胞漿和細(xì)胞膜在核分裂時(shí)可以有陽(yáng)性著色，但視為陰性；步驟5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，所有實(shí)驗(yàn)均采用統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間差異采用X2檢驗(yàn)，以P小于等于0. 1被認(rèn)為差異有顯著性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟1標(biāo)本中位年齡63歲。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2標(biāo)本經(jīng)4%的甲醛固定。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2自制IOX 16禾口 10X9的組織陣列。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、4所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2的組織陣列為6個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊75例X2點(diǎn)和1個(gè)蠟塊每個(gè)蠟塊40例X2點(diǎn)的組織陣列。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2每例組織塊取2個(gè)組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認(rèn)為差異有顯著性。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟5采用SPSSl 1. 0統(tǒng)計(jì)軟件分析。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種EB病毒相關(guān)胃癌臨床病理特征分析方法，臨床資料，收集醫(yī)院手術(shù)切除胃癌標(biāo)本若干例；組織芯片的構(gòu)建，組織標(biāo)本經(jīng)甲醛固定、常規(guī)石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對(duì)應(yīng)找出蠟塊上相應(yīng)部位并做標(biāo)記，選取無(wú)壞死的腫瘤組織，自制組織陣列；試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA；原位雜交染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，僅為細(xì)胞核著棕褐色為陽(yáng)性，細(xì)胞漿和細(xì)胞膜在核分裂時(shí)可以有陽(yáng)性著色，但視為陰性；統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，所有實(shí)驗(yàn)均采用統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間差異采用χ2檢驗(yàn)。本發(fā)明提供了用原位雜交法檢測(cè)胃癌組織芯片中EB病毒編碼的小RNA，分析EB病毒相關(guān)胃癌病理形態(tài)及患者年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況等臨床特征。
文檔編號(hào)C12Q1/70GK102505046SQ201110321390
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年10月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月21日
發(fā)明者郭云娣 申請(qǐng)人:蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院