專利名稱:一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域,特別是涉及一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法。
背景技術(shù):
微生物檢測的傳統(tǒng)方法是倒平板法,配制培養(yǎng)基需經(jīng)過原料稱取、煮沸、滅菌等步驟,待培養(yǎng)基冷卻至55°C左右,將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi),冷卻制成平板,適溫下進(jìn)行培養(yǎng)、觀察、計數(shù)和記錄。使用傳統(tǒng)培養(yǎng)基檢測微生物步驟繁瑣,培養(yǎng)基需要現(xiàn)配現(xiàn)用,費工費時,并且不易長期保存、易失水。微生物大量存在于空氣中,傳統(tǒng)培養(yǎng)基要現(xiàn)配現(xiàn)用,野外檢測易失水,不易用于環(huán)境微生物檢測。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法,能夠有效解決傳統(tǒng)培養(yǎng)基不易長期保存、易失水的問題。本發(fā)明提供的一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法,依次通過以下步驟實現(xiàn)
(1)根據(jù)所檢測的微生物選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基配方;
(2)按常規(guī)操作制成培養(yǎng)液,制作過程中按每IOOOmL培養(yǎng)液加入2.0-8. 0 g聚丙烯酸
鈉;
(3)將培養(yǎng)液放入高壓滅菌鍋中,于壓強1.035X105Pa、溫度121°C 士 1°C下滅菌20-30 分鐘,然后自然冷卻;
(4)滅菌后的培養(yǎng)液冷卻至55°C士5°C時,調(diào)節(jié)適合所檢測微生物生長的pH值;
(5)在無菌條件下,將滅菌后的吸水性紙片放入培養(yǎng)皿中,取6-8mL步驟(4)所得培養(yǎng)液浸潤紙片,50-80°C烘干M-48小時。步驟(5)所述的吸水性紙片是指含20%丙綸、80%棉的吸水性紙片。本發(fā)明提供的一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基,使用時只需加入6_8mL無菌水即可使用,其保水性能好,可與特制培養(yǎng)皿(專利號201020233237. 1)配套使用,也可與傳統(tǒng)培養(yǎng)皿一起聯(lián)用,使用方便,便于攜帶。本發(fā)明具有如下優(yōu)點
1、本發(fā)明的吸附墊型培養(yǎng)基成本低廉,制備簡單,可長期保存,使用時吸水后不易失水。2、本發(fā)明的吸附墊型培養(yǎng)基使用方便,操作簡單,無需專門的技術(shù)培訓(xùn),易于推廣應(yīng)用。3、本發(fā)明的吸附墊型培養(yǎng)基可裝入前述的特制配套培養(yǎng)皿中,用于微生物的采集,使用時既可平放,也可懸掛。
具體實施例方式實施例1(真菌培養(yǎng)基)
配方豆芽150g,蔗糖20g,鏈霉素0. 33g,孟加拉紅0. 33g,瓊脂18g和聚丙烯酸鈉 5. 0g,加水至 IOOOmL,調(diào)節(jié) PH 值為 8. 0-11.0。制備方法
(1)取新鮮的豆芽,洗凈后晾干表面水分,稱取150g,加水至IOOOmL,煮沸40分鐘,雙層紗布過濾;
(2)濾液中加入蔗糖20g,孟加拉紅0.33g,瓊脂18g和聚丙烯酸鈉5. 0g,煮沸后補足水量lOOOmL,制成培養(yǎng)液;
(3)將培養(yǎng)液放入高壓滅菌鍋中,于壓強1.035X105Pa、溫度121°C 士 1°C下滅菌20-30 分鐘,然后自然冷卻;
(4)滅菌后的培養(yǎng)液冷卻至55°C士5°C時,每IOOOmL培養(yǎng)液加入剛配制的質(zhì)量比濃度為3%的鏈霉素溶液10mL,調(diào)節(jié)最終pH值為8. 0-11. 0 ;
(5 )在無菌條件下,將滅菌后的含2 0 %丙綸、8 0 %棉的吸水性紙片放入培養(yǎng)皿中,取 6-8mL步驟(4)所得培養(yǎng)液浸潤紙片,50-80°C烘干M-48小時。實施例2 (真菌培養(yǎng)基)
同實施例1,不同的是配方及步驟(2)所用聚丙烯酸鈉為2. 0g。實施例3 (細(xì)菌培養(yǎng)基)
配方牛肉膏3.0g,蛋白胨10g,氯化鈉5. 0g,瓊脂18. 0g,聚丙烯酸鈉8. 0g,加水至 1000mL。制備方法
(1)稱取牛肉膏3.Og,蛋白胨10. Og,氯化鈉5. Og,瓊脂18. Og和聚丙烯酸鈉8. Og,加水煮沸,煮沸后補足水量lOOOmL,制成培養(yǎng)液;
(2)將培養(yǎng)液放入高壓滅菌鍋中,于壓強1.035X105Pa、溫度121°C 士 1°C下滅菌20-30 分鐘,然后自然冷卻;
(3)滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至55°C士5°C,在無菌條件下,將滅菌后的含20%丙綸、80%棉的吸水性紙片放入培養(yǎng)皿中,取6-8mL步驟(4)所得培養(yǎng)液浸潤紙片,50-80°C烘干M-48小時。實施例4 (細(xì)菌培養(yǎng)基)
同實施例3,不同的是配方及步驟(1)所用聚丙烯酸鈉為6. 0g。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于依次通過以下步驟實現(xiàn)(1)根據(jù)所檢測的微生物選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基配方;(2)按常規(guī)操作制成培養(yǎng)液,制作過程中按每IOOOmL培養(yǎng)液加入2.0-8. 0 g聚丙烯酸鈉;(3)將培養(yǎng)液放入高壓滅菌鍋中,于壓強1.035X105Pa、溫度121°C 士 1°C下滅菌20-30 分鐘,然后自然冷卻;(4)滅菌后的培養(yǎng)液冷卻至55°C士5°C時,調(diào)節(jié)適合所檢測微生物生長的pH值;(5)在無菌條件下,將滅菌后的吸水性紙片放入培養(yǎng)皿中,取6-8mL步驟(4)所得培養(yǎng)液浸潤紙片,50-80°C烘干M-48小時。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,步驟(5)所述的吸水性紙片是指含20%丙綸、80%棉的吸水性紙片。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于檢測微生物的吸附墊型培養(yǎng)基的制備方法,該吸附墊型培養(yǎng)基將添加了聚丙烯酸鈉的培養(yǎng)液吸入吸水性紙片特別是含20%丙綸、80%棉的吸水性紙片后干燥制成,可較長時期的保存和使用,使用時只需加一定量的無菌水即可。進(jìn)行微生物采集和檢測時省去了配制培養(yǎng)基、消毒等大量輔助性工作,具有操作簡單、使用方便、保水性能好等優(yōu)點。
文檔編號C12Q1/04GK102337324SQ20111032509
公開日2012年2月1日 申請日期2011年10月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月24日
發(fā)明者萬永繼, 張冉, 楊俐, 汪靜杰, 高紅 申請人:西南大學(xué)