專利名稱：一種用復(fù)合酶水解乳清蛋白及制備蛋白胨的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛋白胨生產(chǎn)方法，具體地涉及一種用復(fù)合酶水解乳清蛋白、并利用超濾技術(shù)制備蛋白胨的方法。
背景技術(shù)：
蛋白胨作為培養(yǎng)基的主要成分之一，正廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、微生物培養(yǎng)、生物發(fā)酵等很多領(lǐng)域。一種好的蛋白胨產(chǎn)品不僅價(jià)格要低廉，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也要很高。目前，生產(chǎn)蛋白胨的主要原料多為大豆、及動(dòng)物產(chǎn)品生產(chǎn)加工過(guò)程中的邊角料,如骨頭、血液、內(nèi)臟等，由于原材料及生產(chǎn)工藝的不同，蛋白胨產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量各異，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也有所區(qū)別。目前，生產(chǎn)蛋白胨常用的工藝方法有:酸水解法、堿水解法和蛋白酶水解法。酸、堿水解工藝生產(chǎn)蛋白胨過(guò)程中雖然得率較高，但水解時(shí)嚴(yán)重破壞了產(chǎn)品中的氨基酸，使蛋白胨產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低，另外該方法生產(chǎn)過(guò)程中還會(huì)帶入大量鹽分，必要時(shí)還要做脫鹽處理。相比之下，酶法生產(chǎn)蛋白胨的工藝條件較為緩和，生產(chǎn)過(guò)程中不會(huì)造成氨基酸的破壞，同時(shí)在生產(chǎn)過(guò)程中還會(huì)產(chǎn)生一定量的多肽，所以酶法制得的蛋白胨產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。CN 1418562A和CN 1393148A公開(kāi)了兩種以大豆為原料生產(chǎn)蛋白胨的工藝方法，兩種方法制得的試劑級(jí)蛋白胨的得率最高只有30%，且兩種方法并沒(méi)有對(duì)大豆原料的水解程度進(jìn)行詳細(xì)描述。CN 101548709A和CN 101538601A分別公布了以動(dòng)物血液和骨頭為原料生產(chǎn)蛋白
胨的生產(chǎn)工藝，兩種工藝的蛋白胨得率最高為15%左右，且加工過(guò)程中需要高溫高壓蒸煮，工藝較為復(fù)雜。 US 6372452 BI公布了一種復(fù)合酶水解和膜濾分離技術(shù)生產(chǎn)蛋白胨類產(chǎn)品的工藝，但此工藝所用的原料為葵花籽、油菜籽和葡萄廢料等植物性原料，且蛋白胨產(chǎn)品主要應(yīng)用于臨床治療中使用的保健品。US 6787168 BI公布了一種利用酶解技術(shù)水解乳清濃縮蛋白(WPC)為生產(chǎn)蛋白胨的工藝，此工藝的主要目的是為了水解乳清蛋白中的過(guò)敏性蛋白，產(chǎn)品主要作為乳制品生產(chǎn)中的配料進(jìn)行使用?？梢钥闯?，目前蛋白胨的工藝生產(chǎn)，主要是以大豆、植物種子、骨頭、血液、內(nèi)臟等為生產(chǎn)原料，雖然價(jià)格低廉，但是蛋白質(zhì)含量較低，且氨基酸組成搭配也不是很合理，蛋白胨產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值不高，同時(shí)，蛋白胨的得率也都不是很高。因此，本發(fā)明旨在提供一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高、蛋白胨得率更高的乳清蛋白胨粉劑及其制備方法。在該制備方法中，本發(fā)明采用了現(xiàn)有技術(shù)中尚無(wú)報(bào)道的堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶在堿性起始PH值下對(duì)乳清蛋白進(jìn)行組合水解，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)按本發(fā)明的水解方法得到的乳清蛋白水解產(chǎn)物的水解度要明顯高于現(xiàn)有技術(shù)中用單一酶或復(fù)合酶得到的乳清蛋白水解產(chǎn)物的水解度，并且寡肽含量更高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種酶法制備乳清蛋白水解產(chǎn)物的方法，以使乳清蛋白的水解程度較高，水解產(chǎn)物寡肽的含量較多，并獲得較高的產(chǎn)品得率。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種由乳清蛋白水解產(chǎn)物制成的蛋白胨類產(chǎn)品，其中寡肽含量較高，氨基酸搭配合理，且營(yíng)養(yǎng)豐富。一方面，本發(fā)明提供了一種酶法制備乳清蛋白水解產(chǎn)物的方法，該方法主要利用堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶復(fù)合使用，在堿性起始PH值下對(duì)乳清蛋白進(jìn)行深度水解，并進(jìn)行超濾，所得到的水解產(chǎn)品中的寡肽含量在90 %以上，水解產(chǎn)物的水解度在60 %以上，最終制得的蛋白胨產(chǎn)品得率在50%以上。另一方面，本發(fā)明還提供了一種蛋白胨產(chǎn)品，其是按照本發(fā)明所述酶法水解乳清蛋白的方法得到的水解產(chǎn)物濃縮液經(jīng)凍干制得的。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明中所用乳清蛋白可以是通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法生產(chǎn)得到的乳清蛋白，如乳清分離蛋白(WPI)或乳清濃縮蛋白(WPC)等。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，可利用純水將乳清蛋白溶解為2% 10% (重量/重量，按總固形物的含量計(jì)算)的蛋白溶液進(jìn)行酶解，優(yōu)選的乳清蛋白溶液的濃度為8% 10%。除特別注明外，本發(fā)明中所述含量與比例均為重量含量與比例。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明中將配制好的乳清蛋白溶液離心脫脂，脫脂后溶液中脂肪含量小于0.09 蛋白腺粉劑廣品中脂肪含量小于I %。具體可以米用本領(lǐng)域中常用的脫脂操作方法和參數(shù)。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明中將離心脫脂后的乳清蛋白溶液在60°C 90°C的條件下保溫5分鐘 20分鐘，以使乳清蛋白充分變性。本發(fā)明所提供的酶法水解乳清蛋白的方法，主要包括以下步驟:將欲進(jìn)行酶解的乳清蛋白溶解成乳清蛋白水溶液，將兩種酶同時(shí)加入到所述水溶液中進(jìn)行水解。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明是采用微生物蛋白酶對(duì)乳清蛋白進(jìn)行水解，更具體地，所述微生物蛋白酶為:堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶。這些蛋白酶均可商購(gòu)獲得，例如諾維信(中國(guó))有限公司的Alcalase 和Flavourzyme 。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，復(fù)合酶的總添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白重量的2% 5%，優(yōu)選的實(shí)施方案中，添加的復(fù)合酶的量為4% 5%。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明中，在使乳清蛋白熱變性后、在添加復(fù)合酶進(jìn)行水解前，將乳清蛋白溶液的PH值調(diào)為8.0 10.0，該pH在本申請(qǐng)中稱為“起始pH值”。調(diào)節(jié)pH值的調(diào)節(jié)劑可以采用所屬領(lǐng)域中常用的調(diào)節(jié)劑，如IM NaOH溶液、IM HCl溶液等。發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，作為內(nèi)切酶的堿性蛋白酶優(yōu)先作用于底物，隨著底物中多肽含量的增加，風(fēng)味蛋白酶，即外切酶開(kāi)始發(fā)揮作用；而隨著水解反應(yīng)的進(jìn)行，溶液PH值也逐漸降低，開(kāi)始適合于風(fēng)味蛋白酶的最佳作用條件。因 此本發(fā)明選定的起始PH值同時(shí)考慮了堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶各自的最適PH，從而使得可以將最適pH不一致的兩種酶組合起來(lái)進(jìn)行水解。將乳清蛋白溶液調(diào)節(jié)至適合于酶解的溫度，即可加入蛋白酶進(jìn)行酶解。本發(fā)明中優(yōu)選的酶解溫度為50°C 60°C。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明的方法中是采用堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶同時(shí)添加進(jìn)行水解。發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的水解條件下，本發(fā)明中兩種酶同時(shí)加入可以在更短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到較高的水解度，并且終止水解時(shí)水解產(chǎn)物的水解程度更高。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明中，堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.4 1: 1，優(yōu)選為0.6 1:1。本發(fā)明在實(shí)施時(shí)，將乳清蛋白溶液溫度調(diào)節(jié)為50°C 60°C，再將堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶同時(shí)加入，水解2小時(shí) 5小時(shí)。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，復(fù)合蛋白酶優(yōu)選控制水解度達(dá)到60%以上時(shí)，熱滅活蛋白酶，從而終止酶解的進(jìn)行。本發(fā)明中具體的熱滅活溫度可控制為75°C 95°C，優(yōu)選為85°C 95°C ;熱滅活時(shí)間為5分鐘 20分鐘，優(yōu)選為5分鐘 15分鐘。根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方案，本發(fā)明將滅酶活后的溶液冷卻至室溫，再進(jìn)行超濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為5萬(wàn)Da 20萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.20MPa 0.50MPa,出膜工作壓力為0.05MPa 0.20MPa，超濾膜的工作溫度為30°C 50°C。將超濾后的透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，最后利用凍干技術(shù)制得蛋白胨粉劑的形式。本發(fā)明中，采用高效液相色譜法對(duì)水解產(chǎn)物的分子量分布進(jìn)行了測(cè)定。本發(fā)明的乳清蛋白水解產(chǎn)物，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為在90%以上，分子量小于180Da的游離氨基酸含量< 5·%。綜上所述，按照本發(fā)明生產(chǎn)的蛋白胨產(chǎn)品水解度在60%以上，產(chǎn)品易溶于水，蛋白胨得率在50 %以上，且質(zhì)量好，其中寡肽含量在90%以上，易于消化吸收，氨基酸搭配合
理，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。以下通過(guò)具體實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)及特點(diǎn)，旨在幫助閱讀者更好地理解本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)和所能產(chǎn)生的有益效果，但不能將以下實(shí)施例理解為對(duì)本發(fā)明實(shí)施范圍的限定。實(shí)施例參數(shù)測(cè)定方法1、水解度測(cè)定方法:本方法是通過(guò)測(cè)定水解前后乳中游離氨基氮的含量，來(lái)計(jì)算蛋白水解度的一種方法。在水解牛乳樣中加入三氯乙酸(TCA)溶液使蛋白沉淀，然后過(guò)濾掉沉淀的蛋白，通過(guò)水解后在三氯乙酸(TCA)溶液中增加的游離氨基酸與三硝基苯磺酸鈉(TNBS)反應(yīng)的顏色變化來(lái)測(cè)定蛋白水解度。蛋白質(zhì)水解度按下式計(jì)算
7 Ζ_Γ (C2 -C1) X 0.1DH =-XlOO
^oxhtot其中:DH為水解度％C1-水解前樣品中游離氨基氮的含量，單位為mmol/L ；C2-水解后樣品中游離氨基氮的含量，單位為mmol/L ；Pro-樣品中蛋白質(zhì)的濃度，單位g/100ml，通過(guò)凱氏定氮法測(cè)得；htot-每克蛋白質(zhì)的肽鍵的毫摩爾數(shù)，11_對(duì)于某一特定蛋白質(zhì)來(lái)講是一個(gè)常數(shù)(乳清蛋白的 htQt = 8.8mmol/g)。2、分子量分布測(cè)定方法采用高效凝膠過(guò)濾色譜法測(cè)定乳蛋白肽分子量分布，通過(guò)峰面積歸一化法得到不同分子量范圍肽的相對(duì)百分比；并用GPC軟件處理數(shù)據(jù)得到不同分子量范圍肽的數(shù)均分子量(Mn)和重均分子量(Mw)。3、得率計(jì)算方法得率=反應(yīng)后凍干粉的質(zhì)量(W)/反應(yīng)前原料的質(zhì)量(w) X 100%實(shí)施例1將乳清蛋白用水配制成8重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在80°C熱水浴中保溫15分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至9.0;然后，加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的5%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.6: I ;將此溶液在55°C的條件下水解4.0小時(shí)，在85°〇的條件下水浴滅活10分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為20萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.40MPa，出膜工作壓力為0.05MPa，超濾膜的工作溫度為420C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品O本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為67.24%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為95.1 %，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為4.98% ;制得的蛋白胨回收率為58.5%。實(shí)施例2 將乳清蛋白用水配制成2重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在60°C熱水浴中保溫10分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至8.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的2%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.4: I ;將此溶液在50°C的條件下水解3.0小時(shí)，在80°C的條件下水浴滅活10分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為5萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.30MPa，出膜工作壓力為0.20MPa，超濾膜的工作溫度為30°C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為60.57%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為90.6%，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為3.59% ;制得的蛋白胨回收率為51.1%。實(shí)施例3將乳清蛋白用水配制成10重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在90°C熱水浴中保溫20分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至10.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的4%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.7: I;將此溶液在60°C的條件下水解5.0小時(shí)，在90°C的條件下水浴滅活10分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為20萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.40MPa，出膜工作壓力為
0.lOMPa，超濾膜的工作溫度為50°C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。
本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為66.31 %，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為93.2%，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為4.75% ;制得的蛋白胨回收率為57.3%。
實(shí)施例4將乳清蛋白用水配制成5重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在70°C熱水浴中保溫5分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至8.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的3%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為1:1 ;將此溶液在50°C的條件下水解2.0小時(shí)，在75°C的條件下水浴滅活15分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為10萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.50MPa，出膜工作壓力為0.20MPa，超濾膜的工作溫度為35V ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為65.12%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為92.1 %，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為4.56% ;制得的蛋白胨回收率為55.3%。實(shí)施例5將乳清蛋白用水配制成5重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在70°C熱水浴中保溫10分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至8.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的3%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.5: I ;將此溶液在55°C的條件下水解4.0小時(shí)，在95°C的條件下水浴滅活5分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為5萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.40MPa，出膜工作壓力為0.1OMPa,超濾膜的工作溫度為45°C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為63.12%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為91.5%，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為4.32% ;制得的蛋白胨回收率為53.87%。對(duì)比例1
將乳清蛋白用水配制成I重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在50°C熱水浴中保溫10分鐘，用lmol/L的鹽酸溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至6.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的1%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為1.5: I ;將此溶液在55°C的條件下水解
4.0小時(shí)，在95°C的條件下水浴滅活5分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為I萬(wàn)Da，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.40MPa，出膜工作壓力為0.lOMPa，超濾膜的工作溫度為20°C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。
本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為42.75%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為70.2%，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為3.25% ;制得的蛋白胨回收率為40.87%。對(duì)比例2將乳清蛋白用水配制成12重量％的溶液，并將該溶液離心脫脂(5000r/min，55°C，處理能力為20t/h)，將脫脂后的溶液在55°C熱水浴中保溫5分鐘，用lmol/L的氫氧化鈉水溶液將該脫脂后的溶液的PH值調(diào)至7.0 ;然后，向上述乳清蛋白溶液中加入堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的復(fù)合酶，復(fù)合酶的總的添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的1%，其中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的添加比例為0.2: I;將此溶液在40°C的條件下水解4.0小時(shí)，在90°C的條件下水浴滅活5分鐘，再利用超濾膜將此溶液膜濾處理，超濾膜的膜分子量孔徑為6kDa，超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.30MPa，出膜工作壓力為
0.050MPa，超濾膜的工作溫度為 25°C ;再將透過(guò)液利用反滲透膜進(jìn)行濃縮處理，凍干濃縮液制得本實(shí)施例的蛋白胨粉劑樣品。本實(shí)施例酶解后水解產(chǎn)物的水解度為45.75%，其中分子量為180 2000Da的寡肽含量為73.6%，分子量小于180Da的游離氨基酸含量為3.53% ;制得的蛋白胨回收率為43.69%。
權(quán)利要求
1.一種用復(fù)合酶水解乳清蛋白的方法，該方法包括以下步驟: A配制乳清蛋白水溶液，并離心脫脂； B將A中得到的溶液置于熱水浴中進(jìn)行溫育； C調(diào)節(jié)溫育后的溶液的pH值至8.0 10.0，隨后加入由堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶組成的復(fù)合酶進(jìn)行水解，而后進(jìn)行熱滅活處理終止水解； D將C中制得的溶液用超濾膜進(jìn)行超濾過(guò)濾并進(jìn)行反滲透濃縮處理，從而得到水解產(chǎn)物的濃縮液。
2.根據(jù)權(quán)利要求 1所述的方法，其中，所述乳清蛋白水溶液含2重量％ 10重量％的乳清蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，在所述離心脫脂后，A中得到的溶液中的脂肪含量小于0.09重量％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，B中所述的熱水浴的溫度為60V 90°C，B中所述的溫育的持續(xù)時(shí)間為5分鐘 20分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述復(fù)合酶的總添加量為配制乳清蛋白水溶液時(shí)加入的乳清蛋白的重量的2% 5%，優(yōu)選為4% 5%;所述堿性蛋白酶與所述風(fēng)味蛋白酶的添加重量比為0.4 1: 1，優(yōu)選為0.6 1:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，C中所述的水解的溫度為50°C 60°C，持續(xù)時(shí)間為2小時(shí) 5小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述熱滅活處理的溫度為75°C 95°C，優(yōu)選為85°C 95°C，持續(xù)時(shí)間為5分鐘 20分鐘，優(yōu)選為5分鐘 15分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述超濾膜的膜分子量孔徑為5萬(wàn)Da 20萬(wàn)Da ;所述超濾膜的進(jìn)膜工作壓力為0.20MPa 0.50MPa，出膜工作壓力為0.05MPa 0.20MPa ;所述超濾膜的工作溫度為30°C 50°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求1 8中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述乳清蛋白為乳清分離蛋白或乳清濃縮蛋白。
10.一種乳清蛋白水解產(chǎn)物，所述乳清蛋白水解產(chǎn)物是按照權(quán)利要求1 9中任一項(xiàng)所述的方法制得的水解產(chǎn)物。
11.一種制備乳清蛋白水解產(chǎn)物的蛋白胨粉劑的方法，所述方法為:先按照權(quán)利要求1 9中任一項(xiàng)所述的方法制備乳清蛋白的水解產(chǎn)物，再將該水解產(chǎn)物凍干制成蛋白胨粉劑。
12.一種乳清蛋白水解產(chǎn)物的蛋白胨粉劑，所述蛋白胨粉劑是按照權(quán)利要求11所述的方法制得的。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用復(fù)合酶水解乳清蛋白的方法，該方法利用復(fù)合酶水解乳清蛋白，并隨后用水解產(chǎn)物生產(chǎn)蛋白胨產(chǎn)品。所述方法包括以下步驟配制一定濃度的乳清蛋白水溶液，離心脫脂，熱水浴加熱保溫一段時(shí)間后，調(diào)節(jié)料液pH值及溫度，加入一定量的內(nèi)切與外切蛋白酶復(fù)合水解一段時(shí)間后，將水解液升溫至約90℃，保溫約10分鐘滅酶活，再經(jīng)過(guò)超濾過(guò)濾與反滲透濃縮，最后凍干制得乳清蛋白胨粉劑。按照本發(fā)明生產(chǎn)的蛋白胨產(chǎn)品水解度在60％以上，產(chǎn)品易溶于水，蛋白胨得率在50％以上，且質(zhì)量好，其中寡肽含量在90％以上，易于消化吸收。
文檔編號(hào)C12P21/06GK103074404SQ20111032575
公開(kāi)日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2011年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月25日
發(fā)明者石丹, 王彩云, 云戰(zhàn)友, 高海燕, 秦文林, 漆曉明 申請(qǐng)人:內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司