專利名稱：胡蘆巴黃酮提取物制備方法及其降血糖應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種黃酮提取物的制備方法，尤其涉及胡蘆巴黃酮提取物制備方法及其降血糖應(yīng)用。
背景技術(shù)：
胡蘆巴(Trigonella foenum-graecum L.)是豆科蝶形花亞科胡蘆巴屬的一種一年生草本植物，其干燥成熟種子作為常用中藥被收入《中華人民共和國藥典》。研究表明胡蘆巴含有多種生物活性物質(zhì)，如黃酮、皂苷、生物堿、香豆素和多糖等多種活性成分。其中， 黃酮作為一大類活性物質(zhì)，具有降血糖和抗氧化等作用。黃酮類化合物的提取方法現(xiàn)在一般采用水煮提取、有機(jī)溶劑提取和超聲提取等方法。水煮和超臨界CO2流體提取的方法存在諸多局限，沒有被廣泛應(yīng)用。超聲提取是在相對(duì)較低的溫度下進(jìn)行的，節(jié)省能源，也有利于對(duì)熱不穩(wěn)定黃酮化合物的提取，并且超聲提取由于空化效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)等的作用，加強(qiáng)了溶劑的擴(kuò)散和有效成分的溶解，從而縮短提取時(shí)間。同時(shí)超聲法節(jié)省溶劑，操作步驟簡化，提高工作效率。此外，超聲提取過程無化學(xué)反應(yīng)，被浸提的生物活性物質(zhì)在短時(shí)間內(nèi)保持不變，生物活性不減。因此，超聲提取是一種快速、高效、易于放大、綠色安全的方法。高血糖是糖尿病的臨床表現(xiàn)之一，持續(xù)的高血糖會(huì)引起起糖代謝、脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂，并導(dǎo)致一系列心腦血管疾病、腎功能衰竭等，近年來研究發(fā)現(xiàn)，中藥降糖作用溫和持久、副作用小，且作用機(jī)理具有多效應(yīng)、多位點(diǎn)、多功能的綜合作用。因此，開發(fā)具有降血糖的中藥提取物及其制劑具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種快速、高效、易于放大、綠色安全的胡蘆巴黃酮提取物制備方法。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供該提取物在降血糖藥物或保健食品中的應(yīng)用。為解決上述問題，本發(fā)明所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，包括以下步驟(1)將干燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子用質(zhì)量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質(zhì)量體積比為1 5 1 20、提取時(shí)間為0.5 池的條件下進(jìn)行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經(jīng)濃縮后用質(zhì)量濃度為70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，并過濾， 得到濃縮液；該濃縮液依次通過質(zhì)量濃度為95%的乙醇、純水、質(zhì)量濃度為5%的鹽酸、純水、質(zhì)量濃度為2%的氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用質(zhì)量濃度為10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脫至無黃酮流出并收集洗脫液；(4)蒸發(fā)回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；
(5)經(jīng)所述黃酮溶液經(jīng)濃縮、真空干燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。用下述制備方法代替權(quán)利要求1中所述步驟(1)將干燥、粉碎成粒度為20 60 目的胡蘆巴種子先用超臨界(X)2萃取提取油脂后，再用質(zhì)量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質(zhì)量體積比為1 5 1 20、提取時(shí)間為0. 5 池的條件下進(jìn)行超聲提取，得到提取液。所述步驟(3)中極性大孔吸附樹脂為DM130型。所述步驟O)中的濃縮溫度為50 60°C。所述步驟(4)中的蒸發(fā)回收溫度為45 60°C。所述步驟(5)中的真空干燥溫度為50 60°C。如上所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖藥物中的應(yīng)用。所述降血糖藥物中含有質(zhì)量30 60%的胡蘆巴黃酮提取物和藥學(xué)可接受的輔料。如上所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖保健食品中的應(yīng)用。所述降血糖保健食品中含有質(zhì)量20 50%的胡蘆巴黃酮提取物和保健食品可接受的添加劑。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明首次對(duì)胡蘆巴種子的黃酮類化合物的超聲提取制備過程進(jìn)行了研究，對(duì)影響提取得率及黃酮含量的各個(gè)參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，從而確定了最優(yōu)條件；同時(shí)提高了黃酮類物質(zhì)得率，并減小了工業(yè)消耗、降低了生產(chǎn)成本。2、本發(fā)明采用乙醇為溶劑，安全可靠、易于工業(yè)化生產(chǎn)。3、本發(fā)明是在相對(duì)較低的溫度下進(jìn)行的，節(jié)省能源，也有利于對(duì)熱不穩(wěn)定黃酮化合物的提取。4、本發(fā)明節(jié)省溶劑，操作步驟簡化，提高了工作效率，是一種快速、高效、易于放大、綠色安全的方法。5、本發(fā)明胡蘆巴黃酮提取物經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明具有顯著的降血糖的生物學(xué)活性，可明顯降低糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量、改善小鼠和大鼠的葡萄糖耐量、提高糖尿病小鼠胰腺重量指數(shù)、促進(jìn)肝糖原的合成，可廣泛應(yīng)用于各種胡蘆巴黃酮類降血糖的藥物及保健食品開發(fā)需求。降血糖的生物學(xué)活性實(shí)驗(yàn)(1)糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量實(shí)驗(yàn)①昆明種小鼠，雌雄各半，體重為18 22g，隨機(jī)分為對(duì)照組和造模組。待造模組小鼠禁食(不禁水)1 后，尾靜脈快速注射四氧嘧啶生理鹽水溶液。3d后尾尖取血測(cè)定小鼠血糖，選定血糖值> 20. Ommol/L，同時(shí)伴有多飲、多尿癥狀的小鼠為糖尿病小鼠。灌胃途徑給予糖尿病小鼠胡蘆巴黃酮提取物，劑量為250mg Ag4，連續(xù)14d。陽性對(duì)照組給予格列齊特40mg/kg。給藥第7天和第14天時(shí)分別測(cè)定血糖1次，結(jié)果發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠血糖顯著降低(P < 0.01)，結(jié)果見表1。表1胡蘆巴黃酮提取物對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響(n = 10,x±s)
權(quán)利要求
1.胡蘆巴黃酮提取物制備方法，包括以下步驟(1)將干燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子用質(zhì)量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質(zhì)量體積比為1 5 1 20、 提取時(shí)間為0. 5 池的條件下進(jìn)行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經(jīng)濃縮后用質(zhì)量濃度為70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，并過濾，得到濃縮液；該濃縮液依次通過質(zhì)量濃度為95%的乙醇、純水、質(zhì)量濃度為5%的鹽酸、純水、質(zhì)量濃度為2%的氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用質(zhì)量濃度為 10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脫至無黃酮流出并收集洗脫液；(4)蒸發(fā)回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；(5)經(jīng)所述黃酮溶液經(jīng)濃縮、真空干燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。
2.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，其特征在于用下述制備方法代替權(quán)利要求1中所述步驟(1)將干燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子先用超臨界 CO2萃取提取油脂后，再用質(zhì)量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質(zhì)量體積比為1 5 1 20、提取時(shí)間為0.5 池的條件下進(jìn)行超聲提取，得到提取液。
3.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，其特征在于所述步驟(2)和(3) 中極性大孔吸附樹脂為DM130型。
4.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，其特征在于所述步驟O)中的濃縮溫度為50 60°C。
5.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，其特征在于所述步驟中的蒸發(fā)回收溫度為45 60°C。
6.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法，其特征在于所述步驟(5)中的真空干燥溫度為50 60°C。
7.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖藥物中的應(yīng)用。
8.如權(quán)利要求7所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述降血糖藥物中含有質(zhì)量30 60 %的胡蘆巴黃酮提取物和藥學(xué)可接受的輔料。
9.如權(quán)利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖保健食品中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的胡蘆巴黃酮提取物制備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在制備降血糖保健食品中的應(yīng)用其特征在于所述降血糖保健食品中含有質(zhì)量20 50%的胡蘆巴黃酮提取物和保健食品可接受的添加劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種胡蘆巴黃酮提取物制備方法，該方法包括以下步驟(1)將干燥、粉碎的胡蘆巴種子用乙醇溶液進(jìn)行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經(jīng)濃縮后用乙醇醇沉、過濾，得到濃縮液；該濃縮液依次通過乙醇、純水、鹽酸、純水、氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用乙醇洗脫至無黃酮流出并收集洗脫液；(4)蒸發(fā)回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；(5)經(jīng)所述黃酮溶液經(jīng)濃縮、真空干燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。本發(fā)明具有快速、高效、易于放大、綠色安全的特點(diǎn)，所得提取物具有顯著的降血糖生物學(xué)活性，可廣泛應(yīng)用于各種胡蘆巴黃酮類降血糖的藥物及保健食品開發(fā)需求。
文檔編號(hào)A23L1/29GK102441026SQ201110375609
公開日2012年5月9日 申請(qǐng)日期2011年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月22日
發(fā)明者楊仁明, 王洪倫, 索有瑞 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院西北高原生物研究所