專利名稱：低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌及分離培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株紅球菌及用途及分離培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
低溫對(duì)生物處理能力產(chǎn)生重大影響的原因是由于溫度的降低影響了微生物的生長及代謝并使污水處理系統(tǒng)中微生物群系發(fā)生了改變。在溫度下降過程中，中溫菌的代謝活性逐漸下降，到一定溫度時(shí)便失去活性，而適于低溫環(huán)境的低溫微生物的數(shù)量由于自身的生理特性及各種生態(tài)因子的抑制作用，在數(shù)量上無法達(dá)到優(yōu)勢菌群的地位，從而導(dǎo)致污水處理廠冬季出水水質(zhì)下降。因此亟需一種能在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的菌株。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的用途。本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Iihodococcus sp.)硝深-lCGMCCNo. 5277，其具有在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的能力。一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Iihodococcus sp.)硝深-lCGMCCNo. 5277在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的用途。所述低溫優(yōu)選8 12°C。低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，包括如下步驟(1)將10 20mL污水處理廠曝氣池污泥接種至裝有250mL硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液的錐形瓶中，所述硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鈉中氮濃度為50mg/L，在8 12°C，搖床轉(zhuǎn)速為 120 140rpm搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到80 90%時(shí)，靜置，去除上清液，將錐形瓶底部的污泥接種至裝有250mL第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中，所述第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鹽氮濃度為150mg/L，在8 12°C，在轉(zhuǎn)速為120 140rpm的搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到80 90%時(shí)，即得到含有耐低溫細(xì)菌的硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液；(2)取IOmL步驟(1)獲得的培養(yǎng)液，加入己裝有90mL滅菌蒸餾水和20 30粒滅菌玻璃珠的250mL錐形瓶中，振蕩10 30min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置20 40min，取ImL上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋，一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)2 3周；(4)從步驟(3)中的硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落， 在硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離3-4次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為硝深-1，經(jīng)鑒定為低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp.)。所述硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0. 25g、乙酸鈉2g、MgS047H20 0. 05g、 K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 O.Olg、FeSO4 0. 01g、加蒸餾水至 1000mL。所述第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0. 74g、乙酸鈉2g、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 O.Olg、加蒸餾水至 1000mL。所述硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基由下述組分組成=NaNO2 0. 5g、乙酸鈉2g、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 0. 01g、瓊月旨 20g、加蒸餾水至1000mL。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明盡管受到低溫環(huán)境的明顯抑制，投加本發(fā)明的一種去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp.)硝深-ICGMCC No. 5277，在低溫下，特別是在8_12°C 的條件下，對(duì)污水中亞硝酸鹽氮去除有明顯的強(qiáng)化作用，接種本發(fā)明的紅球菌與未接種菌的污水進(jìn)行比較，亞硝酸鹽氮去除率提高了約為10%。


圖1為低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的一種去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的馴化分離培養(yǎng)流程圖。圖2為硝深-1對(duì)亞硝酸鹽氮去除試驗(yàn)。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，包括如下步驟(1)將15mL天津紀(jì)莊子污水處理廠曝氣池的污泥接種至裝有250mL硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液的錐形瓶中，所述硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鈉中氮濃度為50mg/L，在10°C，搖床轉(zhuǎn)速為130rpm搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到90%時(shí)，靜置，去除上清液，將錐形瓶底部的污泥接種至裝有250mL第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中，所述第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鹽氮濃度為150mg/L，在10°C，在轉(zhuǎn)速為130rpm的搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到 90%時(shí)，即得到含有耐低溫細(xì)菌的硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液；(2)取IOmL步驟(1)獲得的培養(yǎng)液，加入己裝有90mL滅菌蒸餾水和30粒滅菌玻璃珠的250mL錐形瓶中，振蕩20min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置30min，取ImL 上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋，一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)3周；
(4)從步驟(3)中的硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落， 在硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離3次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為硝深-1，經(jīng)鑒定為低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp.)。各實(shí)施例中所采用的硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0. 25g、乙酸鈉2g、 MgS047H20 0. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、加蒸餾水至 1000mL。第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0. 74g、乙酸鈉2g、MgS047H20 0. 05g、K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、加蒸餾水至 IOOOmL0硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基由下述組分組成=NaNO2 0. 5g、乙酸鈉2g、MgS047H20 0. 05g、 K2HPO4 0.2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. Olg、FeSO4 0. Olg、瓊脂 20g、加蒸餾水至 IOOOmL0本發(fā)明的紅球菌(Iihodococcus sp.)具有以下微生物學(xué)特性1.形態(tài)學(xué)特性在顯微鏡下觀察，為球狀，直徑為0. 7 μ m ；在硝酸細(xì)菌培養(yǎng)基上形成米黃色菌落。2.培養(yǎng)學(xué)特性在10°C下，在硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，本發(fā)明的Iihodococcus sp.菌株具有以下特性。表面較光滑，干燥，邊緣整齊規(guī)則，個(gè)體微小呈圓形，菌體呈米黃色。3.生理特性好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽的革蘭氏陽性細(xì)菌，接觸酶陰性、甲基紅試驗(yàn)陰性、不水解淀粉、不液化明膠、產(chǎn)生吲哚、生長PH值為6 8，生長溫度5 30°C。
權(quán)利要求
1.一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Iihodococcus sp.)硝深-lCGMCCNo. 5277，其具有在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的能力。
2.權(quán)利要求1的一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Iihodococcussp.) 硝深-ICGMCC No. 5277在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的用途。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征是所述低溫為8 12°C。
4.低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，其特征是包括如下步驟(1)將10 20mL污水處理廠曝氣池污泥接種至裝有250mL硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液的錐形瓶中，所述硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鈉中氮濃度為50mg/L，在8 12°C，搖床轉(zhuǎn)速為120 140rpm搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到80 90%時(shí)，靜置，去除上清液，將錐形瓶底部的污泥接種至裝有250mL第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中，所述第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液中的亞硝酸鹽氮濃度為150mg/L，在8 12°C，在轉(zhuǎn)速為120 140rpm的搖床中馴化，待亞硝酸鹽氮降解率達(dá)到80 90%時(shí)，即得到含有耐低溫細(xì)菌的硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液；(2)取IOmL步驟(1)獲得的培養(yǎng)液，加入己裝有90mL滅菌蒸餾水和20 30粒滅菌玻璃珠的250mL錐形瓶中，振蕩10 30min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置20 40min，取ImL上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋，一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)2 3周；(4)從步驟(3)中的硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落，在硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離3-4次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為硝深-1，經(jīng)鑒定為低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp.)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，其特征是所述硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0.258、乙酸鈉28、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 O.Olg、加蒸餾水至 1000mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，其特征是所述第二種硝酸細(xì)菌培養(yǎng)液由下述組分組成=NaNO2 0. 74g、乙酸鈉2g、 MgS047H20 0. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 0. 01g、加蒸餾水至 1000mL。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌的分離培養(yǎng)方法，其特征是所述硝酸細(xì)菌固體培養(yǎng)基由下述組分組成=NaNO2 0.58、乙酸鈉28、 MgS047H200. 05g、K2HPO4 0. 2g、NaCl 0. 12g、MnS044H20 0. 01g、FeSO4 0. 01g、瓊月旨 20g、加蒸餾水至lOOOmL。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌及分離培養(yǎng)方法，低溫條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp)硝深-1CGMCC No.5277，其具有在低溫好氧條件下去除污水中亞硝酸鹽氮的能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明盡管受到低溫環(huán)境的明顯抑制，投加本發(fā)明的一種去除污水中亞硝酸鹽氮的紅球菌(Rhodococcus sp)硝深-1CGMCCNo.5277，在低溫下，特別是在8-12℃的條件下，對(duì)污水中亞硝酸鹽氮去除有明顯的強(qiáng)化作用，接種本發(fā)明的紅球菌與未接種菌的污水進(jìn)行比較，亞硝酸鹽氮去除率提高了約為10％。
文檔編號(hào)C12R1/01GK102424805SQ20111041689
公開日2012年4月25日 申請(qǐng)日期2011年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月14日
發(fā)明者姜秀光, 田青, 郝赟, 陳愛因 申請(qǐng)人:建設(shè)部水處理新技術(shù)產(chǎn)業(yè)化基地(天津港保稅區(qū)水處理新技術(shù)產(chǎn)業(yè)化基地)