專利名稱：用于選擇性細(xì)胞治療的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般地涉及細(xì)胞和生物體的個體基因型-特異性(Ideotype-Specific)治療，更具體地涉及使用經(jīng)過工程改造的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(IdeotypicallyModulated Pharmacoeffectors, IMP)對細(xì)胞和生物體的個體基因型-特異性治療。
背景技術(shù)：
在人體中，每個細(xì)胞類型表達(dá)獨特組合的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖、核苷酸序列和其它代謝物。這些中的每一種都是潛在抗原，具有可以與具有預(yù)定親和力的分子相互作用的表位。所述抗原的表達(dá)受細(xì)胞狀態(tài)和它的環(huán)境修飾。當(dāng)病毒或細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌隨著它們的感染將外來物引入細(xì)胞時，該表達(dá)進(jìn)一步受到修飾。具體地，病毒劫持細(xì)胞機(jī)制，并生產(chǎn)許多病毒粒子拷貝，所述拷貝從所述細(xì)胞出芽脫離，并感染其它細(xì)胞。當(dāng)人受到病毒感染時，免疫系統(tǒng)具有多種嘗試檢測和破壞受感染細(xì)胞的機(jī)制。不幸的是，許多病毒具有適應(yīng)機(jī)制以避開這種保護(hù)，并發(fā)送復(fù)制的病毒粒子來感染其它細(xì)胞。這些適應(yīng)獲得了成功，因為病毒具有兩個重要特征:迅速的復(fù)制和快速的突變速率。類似的屬性也是癌癥、武器化的生物制劑和其它感染的特征。

發(fā)明內(nèi)容
在一個方法實施方案中，方法包括將多個經(jīng)過工程改造的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物αΜΡ)引入細(xì)胞 群體中。每個MP可以包括檢測域和激活域。該檢測域結(jié)合一個或更多個表位。所述激活域響應(yīng)于所述結(jié)合而被激活。在一個系統(tǒng)實施方案中，多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物中的每一個包括檢測域和激活域。所述檢測域具有對表位的親和力。所述激活域被構(gòu)造為當(dāng)它被激活時，它將在細(xì)胞群體中引起下游效應(yīng)。在另一個系統(tǒng)實施方案中，存在關(guān)于生產(chǎn)多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的指令。該多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物中的每一個包括檢測域和激活域。該多個生產(chǎn)的頂P的亞群中的每個頂P的檢測域被構(gòu)造以結(jié)合一個或更多個表位。該多個生產(chǎn)的IMP的亞群中的每個MP的激活域被構(gòu)造以在細(xì)胞群體中激活和引起下游效應(yīng)。所述方法的某些實施方案可以具有許多技術(shù)優(yōu)點。例如，一些實施方案可以能夠終結(jié)患病的或引起疾病的細(xì)胞。一些其它的實施方案可以包括增強(qiáng)細(xì)胞。一些其它的實施方案可以能夠消除人獸互傳的疾病的攜帶者。再其它的實施方案可以減少與移植物有關(guān)的并發(fā)癥。不同的實施方案可以包括一些或全部上述優(yōu)點，或者不包括上述優(yōu)點。特定實施方案可以包括其它優(yōu)點。


為了更完整地理解本公開內(nèi)容和其優(yōu)點，現(xiàn)在結(jié)合附圖做出下述描述，在附圖中，相同的附圖標(biāo)記代表相同的部件:
圖1顯示了根據(jù)一個實施方案，包括檢測域和激活域的經(jīng)過工程改造的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的一個實施例；圖2A顯示了根據(jù)一個實施方案，可以引入細(xì)胞群體中的多個未結(jié)合的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的一個實施例；圖2B顯示了根據(jù)一個實施方案，多個鄰近的個體基因型表位與多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的檢測域結(jié)合的一個實施例；圖2C顯示了根據(jù)一個實施方案，多聚化的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物與內(nèi)源級聯(lián)介質(zhì)的相互作用；圖3A顯示了根據(jù)一個實施方案，可以引入細(xì)胞群體中的多個未結(jié)合的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的一個實施例；圖3B顯示了根據(jù)一個實施方案，多個鄰近的個體基因型表位與多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的檢測域結(jié)合的一個實施例；圖3C顯示了根據(jù)一個實施方案，多聚化的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物與內(nèi)源級聯(lián)介質(zhì)的相互作用；圖4顯示了根據(jù)一個實施方案，能夠封閉含有許多效應(yīng)分子的聚合物袋的孔的抗體或抗體樣復(fù)合物；圖5顯示了根據(jù)一個實施方案，通過接頭與激活域相連的檢測域；圖6顯示了根據(jù)一個實施方案，多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物與引起個體基因型疾病的B細(xì)胞的表面抗原受體的結(jié)合；圖7顯示了根據(jù)一 個實施方案，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的一個實施例質(zhì)粒構(gòu)建體，其給靶細(xì)胞發(fā)出將個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物引入所述細(xì)胞中的指令；圖8A顯示了來自圖7的一個實施例質(zhì)粒構(gòu)建體的產(chǎn)物的一個實施例；和圖8B顯示了在圖8A中所示的部件的自裝配組合的一個實施例。
具體實施例方式下面討論的圖1-8B和用于描述本專利文件的公開內(nèi)容的原理的不同實施方案僅僅用作例證，不應(yīng)以任何方式解釋為限制本公開內(nèi)容的范圍。本領(lǐng)域技術(shù)人員會理解，本公開內(nèi)容的原理可以以任意適當(dāng)安排的配置來實現(xiàn)。但是，本發(fā)明可以以許多不同的形式體現(xiàn)，且不應(yīng)理解為限于本文所述的實施方案。相反，提供公開的實施方案是為了使本公開內(nèi)容徹底和完整，并向本領(lǐng)域技術(shù)人員傳達(dá)本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的原理和特征可以用于多樣的且眾多的實施方案中，而不脫離本發(fā)明的范圍。圖1顯示了根據(jù)一個實施方案，經(jīng)過工程改造的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(I)的一個實施例。在該圖解的實施例中，頂Pd)包括檢測域(2)和激活域(3)。本文使用的術(shù)語“檢測域”表示對目標(biāo)分子具有親和力的任意分子(例如蛋白、核苷酸序列、脂質(zhì))。本文使用的術(shù)語“激活域”表示可以響應(yīng)于檢測域的結(jié)合而被激活從而與細(xì)胞或它的環(huán)境相互作用的任意分子(例如蛋白、核苷酸序列、物質(zhì))。在某些實施方案中，“經(jīng)過工程改造的”個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物或IMP (I)可以表示具有獨特用途的生物物質(zhì)的非天然存在的制品或組合物。在其它實施方案中，可以將MP或生產(chǎn)MP的物質(zhì)(例如核苷酸)引入體內(nèi)，用于生產(chǎn)它們的部件；例如，可以引入編碼MP的質(zhì)粒。下面描述了不同的實施方案。圖2A顯示了根據(jù)一個實施方案，可以引入細(xì)胞群體中的多個未結(jié)合的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(la，lb)的一個實施例。當(dāng)存在于特定個體基因型的細(xì)胞中時，這些頂P(la，lb)的檢測域(2a，2b)具有對預(yù)定靶抗原(4)上的鄰近表位的親和力。本文使用的術(shù)語“表位”表示如上定義的檢測域會與其相互作用或結(jié)合的任何目標(biāo)分子部分。本文使用的術(shù)語“個體基因型”、“個體基因型的”和“個體基因型地”表示在細(xì)胞亞群內(nèi)部或表面上表達(dá)的抗原(和它們的伴隨表位)的集合的獨特性或差異表達(dá)。本文使用的術(shù)語“抗原”表示具有表位的任意目標(biāo)分子。所述檢測域(2a，2b)可以是相同的或不同的，取決于應(yīng)用。例如，在檢測具有重復(fù)表位的抗原(4)時，相同的檢測域(2a，2b)可以是有利的。超過一個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(la，lb)與鄰近表位的結(jié)合，導(dǎo)致激活域(3a，3b)的二聚化或多聚化，如圖2B所示。本文使用的術(shù)語“二聚化”和“多聚化”表示同源的或異源的分子的共定位，從而改變所述分子的活性。像檢測域一樣，激活域可以是相同的或不同的，取決于應(yīng)用。例如，用于誘導(dǎo)細(xì)胞 死亡的激活域(3a，3b)可以是無活性的胱天蛋白酶-9單體，其當(dāng)二聚化時，會將自身轉(zhuǎn)化成活性形式。在該情況下，相同的激活域可以是有利的。圖2C顯示了根據(jù)一個實施方案，多聚化的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物與來自細(xì)胞的內(nèi)源級聯(lián)介質(zhì)(5)的相互作用。這會在含有目標(biāo)抗原(4)的表位的細(xì)胞中誘導(dǎo)期望的下游效應(yīng)級聯(lián)。本文使用的術(shù)語“下游效應(yīng)”可以表示激活域(3a，3b)與內(nèi)源分子(5)的相互作用的任何生物學(xué)結(jié)果。在某些情況下，目標(biāo)抗原(4)的表位可以在希望的靶細(xì)胞類型(即個體基因型)中表達(dá)，所述靶細(xì)胞類型無論是病毒的、癌性的，還是在其它方面感興趣的。結(jié)果，可以在這些靶細(xì)胞中誘導(dǎo)這些下游效應(yīng)，從而提供下游效應(yīng)的特異性。在有些實施方案中，某類接頭(例如膠原)可以綴合檢測域和激活域，如圖5所示。可以調(diào)節(jié)該接頭的長度，以使下游效應(yīng)最大化。存在許多用于生產(chǎn)個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(I)的方法。在一個實例中，通過合成綴合方法，用膠原接頭可以使具有對靶表位的特異性親和力的FAb抗體片段與效應(yīng)物域共價地綴合。在其它情況下，氨基膦酸酯基團(tuán)可以使FAb片段的C端與無活性的胱天蛋白酶的N端化學(xué)連接。在另一個實例中，可以將整個復(fù)合物的遺傳密碼引入細(xì)菌、人或其它有機(jī)物種中，其可以大量生產(chǎn)所述復(fù)合物，作為單位或作為將在以后綴合的亞單位。在另一個實例中，可以使對細(xì)胞中的核苷酸序列的靶表位特異性的反義核苷酸序列(2a，2b)與激活域(3a，3b)化學(xué)綴合。這可以通過碳二亞胺或其它可用的綴合方式來實現(xiàn)。作為非限制性實施例，在一個實例中，核苷酸檢測域(2a, 2b)含有疊氮化物,其可以通過Staudinger連接化學(xué)連接到在激活域(3a，3b)上的激活的酯基團(tuán)。在另一個實例中，核苷酸檢測域(2a, 2b)可以含有苯甲醛基團(tuán)，其可以在冰醋酸中通過改進(jìn)的Pictet-Spengler連接連接到在激活域(3a，3b)上的末端組氨酸殘基。本公開內(nèi)容的申請人已經(jīng)使用前述兩種連接方法生產(chǎn)工作原型。在其它實例中，可以使用其它連接方法。這些實例僅僅是可以生產(chǎn)所述實施方案的一些方法，不應(yīng)視作限制性的。下文參考圖2A-6，描述了生產(chǎn)MP的其它實施例。圖3A顯示了根據(jù)一個實施方案，可以引入細(xì)胞群體中的多個未結(jié)合的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(la，lb)的一個實施例。在該實施方案中，檢測域(2a，2b)可以包含反義核苷酸鏈。本文使用的術(shù)語“反義”和“互補(bǔ)”表示具有對另一條核苷酸鏈的編碼的親和力的任意長度的核苷酸序列；作為一個非限制性實例，序列5’ -ATGCC-3’與序列5’-GGCAT-3’互補(bǔ)或反義。在有些實施方案中，激活域(3a，3b)可以執(zhí)行與圖1-2C所示的激活域基本上相同的功能。在化學(xué)方法中，通過碳二亞胺或通過一些其它的官能團(tuán)或接頭，可以綴合這些元件(2a，3a和2b，3b)以形成頂P (la，lb)。圖3B顯示了根據(jù)一個實施方案，多個鄰近的個體基因型表位(4)與多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的檢測域(2a，2b)結(jié)合的一個實施例。在可以使用二聚化或多聚化方法的該實施方案中，表位(4)可以包含目標(biāo)靶細(xì)胞獨有的核苷酸鏈。在一個實施方案中，例如，這些鏈可以包含病毒在感染細(xì)胞時引入的核苷酸序列。在這樣的情況下，所述檢測域(2a，2b)可以是與病毒引入的核苷酸序列互補(bǔ)的反義核苷酸序列。圖3C顯示了根據(jù)一個實施方案，多聚化的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(la，lb)與內(nèi)源級聯(lián)介質(zhì)(5)的相互作用。在某些情況下，所述核苷酸表位(4)可以在特定靶細(xì)胞類型(即個體基因型)中表達(dá)，所述靶細(xì)胞類型無論是病毒的、癌性的，還是在其它方面感興趣的。在某些其它情況下，所述核苷酸表位可以在特定靶細(xì)胞類型或個體基因型中以不同的水平表達(dá)。圖4顯示了根據(jù)一個實施方案，能夠封閉含有許多效應(yīng)分子(9)的聚合物袋(6)的孔(7)的抗體或抗體樣復(fù)合物。在某些實施方案中，這些抗體或抗體樣復(fù)合物被Fe-相關(guān)的支持分子(8)保持在孔(7)中。在有些實施方案中，該支持分子可以是金黃色葡萄球菌的表面蛋白A?？?7)的這種封閉，可以避免效應(yīng)分子(8)與細(xì)胞環(huán)境相互作用。一個實施方案的檢測域(2)可以是對目標(biāo)表位特異性的，正如在之前的實施方案中提及的那些一樣。目標(biāo)表位的結(jié)合，會誘導(dǎo)復(fù)合物的剩余部分(即激活域(3))的構(gòu)象變化。這會解離支持分子(8)，進(jìn)而使孔(7)對效應(yīng)分子(9)開放。效應(yīng)分子(9)逃逸進(jìn)環(huán)境中并相互作用，引起下游效應(yīng)。如在之前的實施方案中一樣，這會導(dǎo)致細(xì)胞的死亡或一些其它下游效應(yīng)。圖7顯示了根據(jù)一個實施方案，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物的一個實施例質(zhì)粒構(gòu)建體(13)，其給靶細(xì)胞發(fā)出將個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物引入所述細(xì)胞中的指令。除了其它功能以外，存在于質(zhì)粒上的各種核苷酸序列(15)會促進(jìn)核苷酸序列檢測域(2a, 2b)和蛋白激活域(3)的表達(dá)。根據(jù)圖8A所示的一個實施方案，激活域(3a，3b)可以包含核糖核蛋白亞單位(17a，b)和胱天蛋白酶的融合體。本文使用的術(shù)語“核糖核蛋白”和“核蛋白”表示任何核苷酸結(jié)合蛋白或蛋白亞單位；它們可以人工地生產(chǎn)，或天然地存在(例如核糖開關(guān))。使用可廣泛得到的重組基因技術(shù)可以生產(chǎn)這樣的融合體。檢測域(2a，2b)可以包含核糖核蛋白結(jié)合特異性的核糖核苷酸序列(16a，16b)和與在目標(biāo)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的靶序列的互補(bǔ)序列的融合體。在一個實例中，可以由質(zhì)粒誘導(dǎo)細(xì)胞，以將檢測域和激活域引入細(xì)胞中。因為激活域含有亞單位核糖核蛋白(17a，b)，后者結(jié)合在檢測域中存在的核糖核蛋白-特異性的核糖核苷酸序列(16a，b)，所以IMP可以自裝配(如圖SB所示)并起作用，非常類似于在圖3C中描繪的實施方案。各種攝取序列(14)可以是質(zhì)粒的一部分，以誘導(dǎo)攝入細(xì)胞中。本文使用的術(shù)語“攝取序列”表示用于誘導(dǎo)細(xì)胞以將質(zhì)粒輸入所述細(xì)胞中的序列。在有 些實施方案中可能需要將MP導(dǎo)入細(xì)胞中用于檢測在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的表位，這可以通過許多機(jī)理來實現(xiàn)。修飾的病毒載體(在該實施方案中替代核苷酸材料)可以將實施方案細(xì)胞特異性的或泛化的引入到細(xì)胞中。這樣的構(gòu)建體已經(jīng)被開發(fā)用于基因治療，且可以被修飾用于該目的。不同于將核苷酸材料注射后插入宿主基因組中，這些構(gòu)建體可以含有MP。其它潛在方法包括受體介導(dǎo)的胞吞，這也被細(xì)胞和病毒等用于攝入外源物。在一個實例中，IMP可以具有這樣的亞單位:所述亞單位具有對所有細(xì)胞或細(xì)胞亞群上的表面受體的親和力。作為結(jié)合的結(jié)果，頂P可以被帶到細(xì)胞內(nèi)。在一個實例中，質(zhì)?？梢院斜荒承┘?xì)胞識別和攝入的序列(“攝取序列”)。如上所述，本文使用的術(shù)語“攝取序列”表示用于誘導(dǎo)細(xì)胞以將質(zhì)粒輸入所述細(xì)胞中的序列。在某些情況下，可以將實施方案包囊在膠體懸浮液中，其可以使所述實施方案具有足夠的兩親性，以允許與脂質(zhì)雙層的結(jié)合。類似地，可以用這樣的材料包被含有一個或多個IMP的脂質(zhì)體:所述材料可以使它們更可能被細(xì)胞攝入。例如，在含有一個實施方案的脂質(zhì)體上的正電荷陣列可以允許非特異性的細(xì)胞雙層結(jié)合和融合。特定肽的結(jié)合也可以幫助促進(jìn)脂質(zhì)體內(nèi)容物的攝入。不同的細(xì)胞隔室可能需要不同的遞送方法。這些方法僅僅是可以將所述實施方案引入細(xì)胞中的一些方法，不應(yīng)視作限制性的。此外，并非所有實施方案都需要攝入細(xì)胞中才會產(chǎn)生作用。下文參考圖2A-6，描述了細(xì)胞進(jìn)入機(jī)制的其它實施例。A.可以用于病毒性疾病中的實施方案在不同的實施方案中，可以治療包括但不限于HIV的病毒性疾病。例如，使用如在圖1和2中所示的那些實施方案可以造成HIV感染的細(xì)胞通過細(xì)胞凋亡而死亡。本文使用的術(shù)語“細(xì)胞凋亡”表示程序化的細(xì)胞死亡，其中通過內(nèi)部和/或外部信號傳遞誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。本文使用的術(shù)語“凋亡(apoptose)”表示細(xì)胞的細(xì)胞凋亡動作。在一個實施方案中，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(I)的檢測域(2)可以是對HIV逆轉(zhuǎn)錄酶(HIV RT)上的鄰近表位(4)具有特異性的抗體片段。HIV RT會表達(dá)獨特的且在正常的未感染的人細(xì)胞中不存在的表位。這可以允許區(qū)分細(xì)胞的2個個體基因型:被感染的和未感染的。如之前所述，本文使用的術(shù)語“個體基因型”表示在一組細(xì)胞中或其上表達(dá)的抗原組的獨特性。HIVRT是病毒實現(xiàn)成功的細(xì)胞侵入所必需的，并因此存在于每個HIV感染的細(xì)胞中。實施方案的激活域(3)可以是具有 死亡域的Fas相關(guān)蛋白(FADD)。當(dāng)足夠數(shù)目的FADD在細(xì)胞中天然地三聚化時，它會引起誘導(dǎo)死亡的信號傳遞復(fù)合物(DISC)的裝配，所述復(fù)合物向下游發(fā)信號以終結(jié)細(xì)胞。這樣，當(dāng)3個MP(I)結(jié)合HIV RT上的鄰近表位(4)時，3個FADD激活域
(3)可以三聚化以引起下游DISC形成。這可以造成在其中形成了足夠DISC的那些細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，所述細(xì)胞可以是受感染的個體基因型的細(xì)胞。另一個類似的實施方案可以用于病毒性疾病中。檢測域(2a，2b)可以包含RNA或DNA的反義核苷酸鏈，如圖3A-C所示。在HIV感染中，例如，存在作為感染的結(jié)果被引入細(xì)胞中或由細(xì)胞生成的非常保守的RNA序列。一個實施方案的檢測域(2a，2b)可以包含這樣的反義核苷酸鏈:其與個體基因型病毒核苷酸的鄰近保守序列(4)互補(bǔ)。通過使用PCR，或通過轉(zhuǎn)染細(xì)菌來生產(chǎn)它們，可以生產(chǎn)這些鏈。一個實施方案的激活域(3a，3b)可以是胱天蛋白酶-9的無活性單體。當(dāng)胱天蛋白酶-9自然地二聚化時，它會變得自活化，并引起細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。使用在冰醋酸中的改進(jìn)的Pictet-Spengler反應(yīng),通過與在激活域上的N-端組胺殘基相互作用的苯甲醛基團(tuán)，可以將檢測域(2)和激活域(3a，3b)綴合到一起。在該人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與在HIV-特異性的核苷酸鏈上的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a，3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。
另一個類似的實施方案可以用于病毒性疾病中。檢測域(2a，2b)可以包含RNA或DNA的反義核苷酸鏈，如圖3A-C所示。在HIV感染中，例如，存在作為感染的結(jié)果被引入細(xì)胞中或由細(xì)胞生成的非常保守的RNA序列。可以在質(zhì)粒上編碼檢測域(2)和激活域(3a，3b)，正如在圖7所示的一個實施方案。所述質(zhì)?？梢院性鰪?qiáng)向目標(biāo)細(xì)胞中的攝入的序列。所述質(zhì)?？梢跃幋a如圖8A所示的檢測域(2a，2b)和激活域(3)。在該人工實施方案中，激活域可以包含胱天蛋白酶原-9亞單位和核糖核蛋白亞單位(17a，b)的融合體。檢測域可以包含識別HIV-特異性的核苷酸鏈的反義核苷酸鏈與核糖核蛋白結(jié)合的鏈(16a，b)的融合體，所述核糖核蛋白結(jié)合的鏈(16a，b)特異于在激活域中存在的核糖核蛋白亞單位。在該人工實施方案中，含有質(zhì)粒的細(xì)胞生產(chǎn)域，所述域通過檢測域的核糖核蛋白結(jié)合的核苷酸部分(16a，b)與激活域的核糖核蛋白亞單位部分(17a，b)的相互作用，如圖SB所示地自裝配。在該人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與HIV-特異性的核苷酸鏈的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a，3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。盡管現(xiàn)有的治療也可以用于對抗包括HIV的病毒性疾病，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物αΜΡ)會提供許多勝過這些治療的優(yōu)點。首要的是，本公開內(nèi)容的不同的實施方案可以在病毒產(chǎn)生逃逸變體之前終結(jié)受感染的細(xì)胞。因為可以選擇由MP檢測的表位，使得它們是保守的，所以，即使是任何給定病毒的廣泛突變株，仍然可以表達(dá)它們。此外，當(dāng)細(xì)胞凋亡時，可以破壞給定細(xì)胞中的所有病毒株，甚至具有可能使它們成為優(yōu)異的逃逸變體的突變的那些。這意味著，與現(xiàn)有治療不同，頂P不會天然地選擇進(jìn)化上優(yōu)異的病毒株。這可以進(jìn)一步意味著，IMP既不會引起病毒發(fā)展出的抗性機(jī)制，也不會受病毒發(fā)展出的抗性機(jī)制影響。這與目前可利用的抗病毒劑和抗生素正相反。MP的另一個優(yōu)點可以是它們的有效性范圍。大部分現(xiàn)有的抗病毒藥物僅僅干擾病毒的生長，MP則可以完全清除感染。這會提供另一個優(yōu)點，即MP可以比現(xiàn)有治療遠(yuǎn)遠(yuǎn)節(jié)省成本，因為MP可以不需要長期治療。另外，疾病的徹底清除可以消除進(jìn)一步傳播的風(fēng)險。與所有上述優(yōu)點相關(guān)的是，IMP可以避免其它治療的令人不悅的副作用。這些可以包括脂質(zhì)營養(yǎng)不良、肝毒性和炎癥以及其它。這些副作用會導(dǎo)致大部分患者放棄治療(例如因為HIV感染而接受HAART的患者中的25% )。沒有這些副作用，IMP可以導(dǎo)致更高的治療順應(yīng)性。

盡管上述實施例敘稱，IMP會靶向HIV表位，可以調(diào)整這些和其它實施方案以用于其它病毒性疾病。這可以包括，例如，造成普通感冒的病毒、登革熱病毒、Epstein-Barr病毒、HPV、漢坦病毒、各種形式的肝炎病毒、皰疹病毒、流感病毒、輪狀病毒和其它病毒。因而，本實施方案不限于這些實施例。這些也不是可以用于對抗HIV的MP的僅有實施方案。還可以同時使用不同的實施方案(即不同的檢測域和多種激活域)。這可以提供優(yōu)點，即它可以提供針對潛在抗性機(jī)理的冗余度。B.可以用于其它傳染性細(xì)胞內(nèi)疾病中的實施方案IMP的各個實施方案也可以針對引起細(xì)胞內(nèi)疾病的生物體(如細(xì)菌或寄生物)起作用。這些造成疾病的病原體(包括立克次氏體屬(Rickettsiae)和衣原體屬(Chlamydia)某些種)可以造成與病毒的那些類似的問題。它們也會表達(dá)在正常的未感染的細(xì)胞中不存在的獨特表位。如前所述，可以將細(xì)胞分類為感染的和未感染的個體基因型。在治療衣原體感染的一個具體實施方案中，可以存在是凝集素的檢測域(2)。凝集素存在于自然界中，且能夠結(jié)合特定的糖，如經(jīng)常表達(dá)在特定細(xì)菌表面上的糖。例如，有些凝集素對在衣原體屬的某些種上表達(dá)的糖是高度特異性的。在該實施方案中的激活域(3)可以包括各種抗微生物劑。在一個實施方案中，使用圖4所示的基于袋的實施方案，效應(yīng)分子(9)可以包括抗微生物劑，如肽聚糖裂合酶。肽聚糖裂合酶是消化在大多數(shù)細(xì)菌的表面上存在的保護(hù)屏障的酶。在凝集素(2)與在個體基因型細(xì)胞中的侵入細(xì)菌細(xì)胞壁上存在的特定糖結(jié)合以后，會釋放出肽聚糖裂合酶以消化細(xì)菌細(xì)胞屏障。
盡管上述實施例描述了使用針對衣原體感染的一個實施方案的MP，許多不同的實施方案可能用于不同的細(xì)胞內(nèi)病原體。例如，激活域可以在細(xì)胞中發(fā)出細(xì)胞凋亡的信號，所述細(xì)胞的死亡也可以消除細(xì)胞內(nèi)的病原體。
C.可以用于治療癌癥的實施方案
IMP的各個實施方案也可以用于治療和/或預(yù)防癌癥。惡性細(xì)胞可以是個體基因型，因為它們可以表達(dá)這些細(xì)胞獨有的或富集的表位。本文使用的術(shù)語“惡性細(xì)胞”或“癌性細(xì)胞”表示由細(xì)胞中的遺傳變化和/或代謝變化導(dǎo)致的失控地增殖的任何細(xì)胞。這些表位可以在它們的表達(dá)水平和分布方面(隨情況而定)存在差異。有些表位在所有或大部分癌癥類型中表達(dá)，而其它表位僅存在于幾種癌癥類型中。有些表位可以從未在非惡性細(xì)胞中表達(dá)，而其它表位可以僅在惡性細(xì)胞中具有升高的表達(dá)水平。
在一個消除癌性細(xì)胞的具體實施方案中，可以存在是抗體片段的檢測域(2)，所述抗體片段對在某些癌癥中發(fā)現(xiàn)的突變形式的蛋白P53(4)是特異性的。激活域(3)可以包含無活性的胱天蛋白酶-9單體。在惡性的個體基因型的細(xì)胞中，多個IMP(I)的檢測域(2)可以結(jié)合突變的p53(4)。它們的激活域(3)可以二聚化，以在細(xì)胞中引起下游信號傳遞。當(dāng)這種信號傳遞達(dá)到足夠的水平時，所述細(xì)胞可以凋亡。
在另一個消除前列腺癌的實施方案中，檢測域(2)可以包含特異于PSA(前列腺特異性抗原)的抗體片段。盡管PSA是所有前列腺細(xì)胞(而不僅僅是癌性細(xì)胞)的個體基因型，在已經(jīng)診斷出前列腺癌以后，可以更有效地應(yīng)付前列腺癌。激活域(3)可以包含無活性的胱天蛋白酶-9單體。如果以更小的量施用，該實施方案可以降低天然細(xì)胞自殺的閾值。在癌性細(xì)胞中，這可以在比未患病的細(xì)胞中較低的水平誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。
在另一個消除慢性髓性白血病(CML)的實施方案中，癌性的未成熟的白細(xì)胞作為易位的結(jié)果而失控地增殖。該易位會建立斷裂點簇區(qū)和Abll的融合體，從而導(dǎo)致失調(diào)的生長。與圖1中的實施方案類似 的檢測域(2a，2b)可以是針對Abll蛋白的一部分和斷裂點簇區(qū)蛋白的一部分(4)的抗體FAb片段。與圖3C中的實施方案類似的檢測域(2a，2b)可以包含針對Abll核苷酸序列的一部分和斷裂點簇區(qū)核苷酸序列的一部分的特異性核苷酸序列。激活域(3a，3b)可以包含無活性的胱天蛋白酶-9單體。在個體基因型的CML細(xì)胞(即表達(dá)融合蛋白的那些)中，兩個不同的檢測域(2a，2b)可以結(jié)合以使兩個激活域(3a，3b)聚到一起。這些激活域可以相互作用，從而造成細(xì)胞死亡。這可以消除癌性細(xì)胞。
在另一個實施方案中，檢測域(2a，2b)可以包含RNA或DNA的反義核苷酸鏈，如圖3A-C所示。在CML中，例如，存在非常保守的序列，其由細(xì)胞生成作為癌癥的一部分?？梢栽谫|(zhì)粒上編碼檢測域(2)和激活域(3a，3b)，正如在圖7所示的一個實施方案。所述質(zhì)?？梢院性鰪?qiáng)向目標(biāo)細(xì)胞中的攝入的序列。所述質(zhì)?？梢跃幋a圖8A所示的檢測域(2a，2b)和激活域(3)。在這人工實施方案中，激活域可以包含核糖核蛋白亞單位(17a，b)和胱天蛋白酶原-9亞單位的融合體。檢測域可以包含特異于在激活域中存在的核糖核蛋白亞單位的核糖核蛋白結(jié)合的鏈(16a，b)與一個或多個反義核苷酸鏈的融合體，所述反義核苷酸鏈識別由細(xì)胞生成作為癌癥的一部分的核苷酸序列。在這人工實施方案中，含有質(zhì)粒的細(xì)胞生成域，所述域通過檢測域的核糖核蛋白結(jié)合的核苷酸部分(16a，b)與激活域的核糖核蛋白亞單位部分(17a，b)的相互作用，如圖SB所示地自裝配。在這人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與核苷酸鏈的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a，3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。
在治療癌癥中，頂P可以具有獨特的優(yōu)點，即它們可以基本上僅僅影響靶向的個體基因型癌細(xì)胞。這可以使非惡性細(xì)胞免受治療影響?，F(xiàn)有的癌癥治療經(jīng)常采用破壞細(xì)胞生長的藥物，但是這種破壞會引起嚴(yán)重的附隨損傷和副作用。通過赦免非惡性細(xì)胞，IMP可以防止化療劑和放射療法的主要副作用。此外，化療劑和放射療法采用針對增殖中的細(xì)胞的鳥槍(shotgun)方案。較新的療法和人免疫系統(tǒng)實際上嘗試通過從外表識別這樣的細(xì)胞建立更靶向的應(yīng)答，但是癌性細(xì)胞快速地突變，并且它們的表面抗原經(jīng)常被隱藏。另一方面，通過識別在癌性細(xì)胞內(nèi)部的表位(這些在癌性細(xì)胞內(nèi)部的表位被隱藏或可突變的可能性較低)，IMP可以靶向所有的癌性細(xì)胞，而不僅僅靶向癌性細(xì)胞亞群。治療特異性和效力的這種改進(jìn)組合，可以在某些患者中導(dǎo)致癌癥的徹底根除。
盡管上述實施例使用針對特定癌癥相關(guān)抗原的實施方案描述了 MP，許多不同的實施方案可能用于不同的癌癥和患者類型。此外，異常的核苷酸鏈或其它代謝物可以提供同樣有效的待測表位。上面的這些實施例不應(yīng)解釋為限制靶向癌癥的其它實施方案。
D.可以用于治療細(xì)胞外細(xì)菌感染的實施方案
MP的各個實施方案也可以用于治療細(xì)胞外感染。像抗病毒劑一樣，細(xì)菌性疾病的現(xiàn)有治療(即抗生素)會造成進(jìn)化出抗性機(jī)理的病原體的天然選擇?？股乜剐允且粋€常見的問題，特別是在抗生素和多個致病生物體經(jīng)常發(fā)生接觸的環(huán)境(如醫(yī)院)中。與抗生素有關(guān)的一個問題是，它們對毒性細(xì)菌的非特異性。本文使用的術(shù)語“毒性的”表示任何寄生生物體(resident organism)的狀態(tài),其中所述生物體表達(dá)基因,所述基因幫助它在宿主生物體中造成疾病。在人類體內(nèi)和體表上發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)細(xì)菌不是毒性的，有時稱作“無毒性的”菌株。不幸的是，抗生素通常靶向毒性的和無毒性的生物體。此外，許多毒性菌株(包括XDR結(jié)核病和MRSA)是已經(jīng)發(fā)展出對現(xiàn)有抗生素的最強(qiáng)抗性機(jī)理的菌株。因而，用抗生素治療個體，可以通過除去競爭相同資源的無毒菌株而在實際上幫助毒性菌株傳播。
使事情進(jìn)一步復(fù)雜化的是，任何給定的細(xì)菌可以通過表達(dá)致病基因從無毒性轉(zhuǎn)換成有毒性。本文使用的術(shù)語“致病基因”和“致病因子”表示寄生生物體的基因和基因產(chǎn)物，它們幫助所述寄生生物體在宿主生物體中引起疾病。致病因子可以包括各種毒素、粘附分子(透明質(zhì)酸酶)、分泌系統(tǒng)蛋白質(zhì)、酶、莢膜蛋白和免疫抑制劑，僅舉幾個例子。并非給定物種的所有細(xì)菌菌株在任何給定時間都表達(dá)或甚至具有致病基因。但是，在任何給定時間具有毒性的所有生物體都表達(dá)某些致病基因。這些致病基因的mRNA和蛋白的高水平表達(dá)，可以是毒性細(xì)胞所獨有的，這使得它們成為個體基因型。應(yīng)當(dāng)指出，這些特定個體基因型細(xì)胞不是人的，而是細(xì)菌細(xì)胞。
在靶向有毒性的金黃色葡萄球菌的IMP(la，2b)的一個具體實施方案中，檢測域(2a, 2b)可以包含對a-溶血素或Hla特異性的抗體片段(4) 。Hla是僅在有毒性的金黃色葡萄球菌中表達(dá)、且不在相同細(xì)菌的無毒菌株中表達(dá)的一種特別有效的毒素。激活域(3)可以包含僅作為二聚體時才有效的抗細(xì)菌毒素的單體。如果檢測域(2a，2b)在有毒性的個體基因型的金黃色葡萄球菌細(xì)胞內(nèi)檢測到在a-溶血素上的鄰近表位，可以使激活域(3a，3b)接觸和二聚化。這可以引起毒性細(xì)菌的死亡，但是赦免無毒菌株和物種。
MP的上述實施方案和其它實施方案可以具有許多勝過現(xiàn)有抗生素的優(yōu)點。首先，IMP可以回避目前的抗性細(xì)菌的抗性機(jī)制。其次，在潛在毒性菌株中，IMP可以幫助天然地選擇不表達(dá)致病因子的變體菌株。這意味著，由MP施加的進(jìn)化壓力可以與經(jīng)典的抗生素的進(jìn)化壓力正好相反。經(jīng)典的抗生素選擇可以表達(dá)直接使所述抗生素失活的致病基因的菌株，而MP可以選擇完全避免表達(dá)致病因子的菌株。第三，MP不會影響無毒性的共生生物體。這意味著，使用IMP的患者不會易感其它感染，而當(dāng)使用抗生素時他們會易感其它感染。IMP實際上可以為無毒性的共生生物體提供勝過毒性生物體的進(jìn)化優(yōu)點，從而保持患者的細(xì)菌群落平衡處于良好平衡中。
E.可以用于根除媒介傳播的寄生物的實施方案
IMP的不同實施方案也可以用于治療媒介傳播的寄生物。本文使用的術(shù)語“媒介傳播的寄生物”表示這樣的寄生生物:其可以通過“媒介”生物體如蚊子、扁虱或一些其它媒介轉(zhuǎn)移給人類和/或其它動物。這些寄生物可以包括細(xì)菌、真菌、酵母和原生動物。這些疾病提出特殊的問題，因為經(jīng)常存在巨大的傳染庫。本文使用的術(shù)語“庫”表示除了人類以外的動物，寄生生物可以在所述動物中生長和繁殖，并最終通過媒介轉(zhuǎn)移至其它動物或人類。庫可以經(jīng)歷或沒有經(jīng)歷由所述寄生物導(dǎo)致的疾病狀態(tài)。這樣的寄生物和它們的疾病的實例包括:昏睡病和恰加斯病(分別由來自采采蠅和獵蝽的錐蟲引起)、萊姆病(由來自扁虱的布氏疏螺旋體(Borrelia burgdorferi)引起)和土拉菌病(由來自不同節(jié)肢動物的土拉熱弗朗西斯氏菌(Francisella tularensis)引起)，僅舉幾個例子。
已經(jīng)使用媒介消滅計劃對抗這樣的寄生物，特別是引起瘧疾的原生動物寄生物惡性痕原蟲(Plasmodium falciparum)。攜帶痕疾的蚊子已經(jīng)成為這樣的計劃的祀標(biāo),其中使用化學(xué)試劑來消除潛在媒介群體。不幸的是，這尚未根除該疾病。首先，殺死給定物種的所有蚊子是非常困難的。其次，因為蚊子填補(bǔ)的生態(tài)位，殺死給定物種的絕大多數(shù)蚊子會具有料想不到且潛在危險的環(huán)境后果。殺死媒介從其獲得疾病的庫動物，會具有同樣可怕的后果。
在MP的一個具體實施方案中，可以靶向攜帶瘧疾的蚊子。在這里應(yīng)當(dāng)指出，整個生物體(蚊子)可以分成2種指定的個體基因型:攜帶者和非攜帶者。檢測域(2)可以包含對在原生動物表面上豐富地表達(dá)的var基因產(chǎn)物特異性的抗體片段。激活域(3a，3b)可以包含節(jié)肢動物-特異性的毒素的無活性亞單位。在該實施方案中，異源二聚化或異源多聚化可以生成有活性的毒素。這樣的一個實施方案可以如下引入蚊子中:把它注射進(jìn)媒介蚊子通常當(dāng)作食物的物種中。隨著蚊子攝入所述動物的血液,它也攝入頂P(I)。還可以如下引入:把它提供在可得到的水源中。在瘧原蟲沒有寄生的蚊子(即非攜帶者個體基因型)中，所述IMP(I)沒有表位(4)可供結(jié)合，因此可以是無活性的。但是，在攜帶者蚊子中，激活域(3a，3b)可以二聚化或多聚化以形成完整的毒素。在有足夠的毒素存在下，攜帶者蚊子可以死亡。
靶向攜帶瘧疾的蚊子的一個類似實施方案可以具有相同的檢測域(2)，但是在不同的MP上具有由原毒素或減弱的酶組成的激活域(3a，3b)，以將毒素轉(zhuǎn)化成它的活性形式。隨著2個不同的IMP(la,lb)的檢測域(2)與鄰近表位(4)結(jié)合，原毒素(3a)和弱酶(3b)相互作用，因為所述酶的相對非特異性，所述相互作用不太可能發(fā)生在溶液中。一旦轉(zhuǎn)化原毒素的量足夠，攜帶者可以死亡。
針對媒介傳播的寄生物的攜帶者的MP的上述實施方案和其它實施方案可以具有許多優(yōu)點。MP可以僅靶向?qū)嶋H上屬于攜帶者個體基因型的那些媒介。因為這可以僅僅是媒介群體的一部分，可以使被消滅的攜帶者所騰出的生態(tài)位由相同物種的非攜帶者無縫地填補(bǔ)。這可以使治療的環(huán)境影響最小化。此外，在該實施例中的IMP可以促進(jìn)其本身可抗寄生物寄生的任何給定物種的媒介的天然選擇。在有些疾病中，已經(jīng)描述了可抗寄生的物種。因為額外的進(jìn)化優(yōu)點，可以在針對攜帶者進(jìn)行選擇的區(qū)域中富集這些群體。這些治療的最終目標(biāo)可以是，消除向人宿主的傳播。通過切斷寄生物的媒介源，寄生物不再被傳播。沒有這樣的傳播，可以從單個地區(qū)或從世界的大多數(shù)地方完全根除該疾病。另外，所有這些可以在不給人群體免疫接種的情況下實現(xiàn)。
上述實施例是使用MP對抗媒介傳播的瘧疾的示例。但是，以不同方式靶向不同寄生性疾病的MP的許多其它實施方案是可能的。此外，可以使用其它實施方案來靶向瘧疾。例如,通過不同的其它方式,包括通過給媒介直接飼喂含有MP的溶液,可以將一個實施方案引入潛在攜帶者媒介群體中。可以保護(hù)這些飼料，使得飼喂地點本身不會被寄生物定居。因而，上述實施例 不應(yīng)視作限制性的。
F.可以用于自身免疫障礙中的實施方案
IMP的各種實施方案也可以用于治療多種自身免疫障礙。本文使用的術(shù)語“自身免疫障礙”、“自身免疫病”或“自身免疫綜合征”表示其中人免疫系統(tǒng)會造成或加重該疾病的任何疾病。這可以包括經(jīng)典的自身免疫障礙如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和I型糖尿病以及免疫增生性障礙(涉及免疫細(xì)胞的癌癥)、移植性疾病(transplantscenarios)、變態(tài)反應(yīng)和其中主要傷害是由免疫系統(tǒng)造成的感染性疾病。
免疫系統(tǒng)的B和T細(xì)胞是人體中的兩種重要且獨特的細(xì)胞。它們表達(dá)多種稱作抗原受體的受體，所述受體會結(jié)合遍布于體內(nèi)的各種抗原。本文使用的術(shù)語“抗原受體”表示:在B細(xì)胞上的受體，其經(jīng)常也稱作B細(xì)胞受體(BCR)、膜結(jié)合的Ig(mlg)和抗體(Ab);以及在T細(xì)胞上的受體，其也稱作T細(xì)胞受體(TCR)。B或T細(xì)胞的每個克隆群體僅表達(dá)一種對特定抗原特異性的抗原受體。本文使用的術(shù)語“克隆”表示，來自相同親本B或T細(xì)胞的一組細(xì)胞?？寺〖?xì)胞可以是單個個體基因型的細(xì)胞，這是指表達(dá)類似表位(例如抗原受體)的細(xì)胞。
圖5顯示了根據(jù)一個實施方案，通過接頭(10)與激活域(3)相連的檢測域(2)。檢測域(2)可以是抗原，細(xì)胞的克隆的(和個體基因型的)亞群表達(dá)所述抗原的特定抗原受體。激活域(3)可以是FasL。FasL是這樣的分子:當(dāng)三聚化時，其可以與在有核細(xì)胞的表面上的受體Fas相互作用，以誘導(dǎo)引起細(xì)胞死亡的下游信號。
圖6顯示了根據(jù)一個實施方案，多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(I)與引起個體基因型疾病的B細(xì)胞(11)的表面抗原受體(4)的結(jié)合。如在圖5中一樣，檢測域(2)可以是抗原，細(xì)胞的克隆的(和個體基因型的)亞群表達(dá)所述抗原的特定抗原受體，以及激活域(3)可以是FasL。所述檢測域(2)可以結(jié)合致病細(xì)胞(11)的抗原受體(4)。當(dāng)多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物結(jié)合時，所述FasL激活域(3)三聚化。當(dāng)FasL已經(jīng)三聚化時，它可以與在細(xì)胞表面上的受體Fas (12)相互作用，以誘導(dǎo)下游信號。這些下游信號可以引起細(xì)胞的死亡。
在治療免疫增生性障礙(如伯基特淋巴瘤)的一個具體MP實施方案中，惡性的B或T細(xì)胞群源自單個細(xì)胞。這意味著，惡性的細(xì)胞群是克隆的，并且這些細(xì)胞中的每一個表達(dá)相同的或密切相關(guān)的抗原受體(即具有相同的個體基因型)。所述實施方案的檢測域(2)可以是抗原，癌性細(xì)胞的抗原受體(4)對所述抗原是特異性的。就免疫增生性障礙而言，潛在抗原的ELISA篩選可以闡明這應(yīng)當(dāng)是何種抗原。所述實施方案的激活域(3)可以是FasL，所述FasL是當(dāng)三聚化時可以與在所有有核細(xì)胞的表面上存在的Fas受體相互作用的配體。靶向的抗原受體(4)可以通過檢測域(2)與在個體基因型的致病細(xì)胞上的MP相互作用。這可以使多個激活域(3)靠近，它們可以三聚化。作為該三聚化的結(jié)果，這些激活域可以與在所述細(xì)胞的表面上的Fas受體(12)相互作用，以引起下游誘導(dǎo)細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡信號的傳遞。這些細(xì)胞的死亡可以清除疾病。
就前述的實施方案和下面的幾個實施方案而言，如果所述實施方案是針對B細(xì)胞惡性腫瘤，在所述B細(xì)胞的表·面上的抗體(抗原受體)實際上可以提供所述檢測域(2)所結(jié)合的表位(4)。另一方面,在前面列出的其它實施方案中,抗體可以是所述實施方案的檢測域的一部分。但是，在該實施例中，所述檢測域(2)可以包含所述抗原受體(4)對其特異性的抗原。在針對B細(xì)胞惡性腫瘤的一個實施方案中，所述檢測域(2)也可以包含抗體，所述抗體對膜結(jié)合的抗體是特異性的?？梢允褂闷渌麵MP實施方案來治療具有經(jīng)典自身免疫障礙(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE))的患者。在對自身抗原具有反應(yīng)性的B和T細(xì)胞的篩選中，經(jīng)典地定義的自身免疫疾病通常遵循錯誤模式。本文使用的術(shù)語“自身抗原”表示由人體生成的蛋白質(zhì)和其它代謝物。當(dāng)B和T細(xì)胞可與自身抗原反應(yīng)時，這樣的細(xì)胞稱作“自體反應(yīng)的”。當(dāng)這些細(xì)胞逃過身體的篩選過程時，它們可以造成損傷，并中斷身體的重要過程。例如，在具有SLE的患者中，疾病相關(guān)的B和T細(xì)胞對核抗原是自體反應(yīng)的。一個實施方案的檢測域⑵可以包含這樣的核抗原。這些可以通過ELISA來確定。一個實施方案的激活域(3)可以包含F(xiàn)asL，正如在某些前述的實施方案中一樣。一旦引入血流或淋巴中，多個IMP(I)結(jié)合自體反應(yīng)的細(xì)胞個體基因型(11)的抗原受體(4)。這會使多個頂P(I)的激活域(3)聚到一起以三聚化。三聚化的激活域(3)可以與所述細(xì)胞上的Fas受體(12)相互作用，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。由于所述表位(即對檢測域特異性的抗原受體)可能不存在于不會促成疾病的細(xì)胞的表面上，這些細(xì)胞可以被赦免。在有些自身免疫障礙中，可以存在多個個體基因型，且可以用單獨的實施方案靶向。
T細(xì)胞抗原受體(TCR)與B細(xì)胞受體(BCR)的差別在于，在其它細(xì)胞上的MHC分子的背景下，它們會識別抗原。因此，在靶向自體反應(yīng)的T細(xì)胞中，可能必需對檢測域做出某種調(diào)整，以適應(yīng)該差異。這可以包括將MHC基序添加到檢測域(2)上。
在用于治療自身免疫障礙的另一個實施方案中，檢測域(2a，2b)可以包含在圖3A-C中所示的RNA或DNA的反義核苷酸鏈，它們對存在于自身免疫B和/或T細(xì)胞中的序列是特異性的。作為病毒變化或體細(xì)胞重組的結(jié)果，自身免疫B和T細(xì)胞具有獨特的核苷酸序列。本文使用的術(shù)語“體細(xì)胞重組”表示，在B和T細(xì)胞受體成熟過程中發(fā)生的V(D) J重組。這些獨特序列是使用具有互補(bǔ)核苷酸鏈的MP可以利用的個體基因型變化。使用簡單的和充分理解的技術(shù)，諸如基因測序和減除雜交，可以為自身免疫B或T細(xì)胞的任何給定個體基因型確定這些序列?？梢詮幕颊咧谢驈募?xì)胞培養(yǎng)物中提取這樣的細(xì)胞，用于這些研究。從這些獨特序列，可以簡單地反向工程改造檢測域。可以在質(zhì)粒上編碼檢測域(2)和激活域(3a，3b)，正如在圖7所示的一個實施方案中一樣。所述質(zhì)粒可以含有增強(qiáng)向目標(biāo)細(xì)胞中的攝入的序列。所述質(zhì)?？梢跃幋a圖8A所示的檢測域(2a，2b)和激活域(3)。在該人工實施方案中，激活域可以包含核糖核蛋白亞單位(17a，b)和胱天蛋白酶原-9亞單位的融合體。檢測域可以包含對在激活域中存在的核糖核蛋白亞單位特異性的結(jié)合核糖核蛋白的鏈(16a，b)與一個或多個反義核苷酸鏈的融合體，所述反義核苷酸鏈識別在靶細(xì)胞中的上面討論的核苷酸序列。在該人工實施方案中，含有質(zhì)粒的細(xì)胞生成域，其通過檢測域的結(jié)合核糖核蛋白的核苷酸部分(16a，b)與激活域的核糖核蛋白亞單位部分(17a，b)的相互作用，如圖SB所示地自裝配。在該人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與核苷酸鏈的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a，3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。可以使用其它頂P實施方案來對抗變態(tài)反應(yīng)。本文使用的術(shù)語“變態(tài)反應(yīng)”表示針對本來無害的外來抗原的免疫應(yīng)答。術(shù)語“外來抗原”表示不是由身體生成的代謝物(例如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物)。無害的外來抗原經(jīng)常存在于體內(nèi)，且通常不會引起免疫應(yīng)答。生產(chǎn)針對這些抗原的某類抗體的B細(xì)胞是許多這樣的超敏反應(yīng)的一個重要部分。如之前提及的實施方案一樣，用于清除造成變態(tài)反應(yīng)的個體基因型的B細(xì)胞目的的一個實施方案可以具有是外來抗原的檢測域(2)。如之前一樣，激活域(3)可以是FasL。如之前一樣，檢測域⑵可以僅結(jié)合個體基因型的致病細(xì)胞(11)的抗原受體(即表位)。所述激活域(3)可以三聚化，并與在細(xì)胞表面上的Fas受體(12)相互作用，從而造成細(xì)胞凋亡。
可以進(jìn)一步使用其它MP實施方案來對抗移植物抗宿主病(GVHD)。在GVHD中，移植的組織在新宿主中保留它們的免疫原性，并引起對宿主的現(xiàn)有組織的損傷。這通常被視作移植排斥的反面，其中所述移植物實際上排斥宿主。供體組織的天然殺傷和NK T細(xì)胞(它們具有對供體細(xì)胞的獨有MHC分子特異性的稱作KIR的抗原受體)不能識別新的宿主組織，并因此確定新的宿主組織是外來的。這會導(dǎo)致供體組織對宿主的“排斥”，并產(chǎn)生針對所述宿主的免疫應(yīng)答。 在一個實施方案中，所述檢測域(2)可以是供體細(xì)胞的MHC分子。所述激活域(3)可以是FasL。如在之前的實施例中一樣，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(I)可以結(jié)合引起疾病的(NK和NK T)細(xì)胞(11)的抗原受體。所述激活域(3)又可以三聚化，并通過Fas受體(12)發(fā)出死亡信號。這可以清除不希望的免疫細(xì)胞的供體組織，且可以防止GVHD。
另一方面，也可以使用其它MP實施方案對抗移植排斥。移植排斥是宿主對供體組織的排斥，這由宿主細(xì)胞的至少2個個體基因型集合處理。一個亞群是具有抗原受體(TCR)的宿主T細(xì)胞，所述抗原受體識別供體組織的獨特MHC。另一個亞群是生產(chǎn)抗-供體-MHC抗體的宿主B細(xì)胞。這些抗體是接受移植物的患者在前一次排斥以后在供體預(yù)約名單中長期等待的一個常見原因。當(dāng)供體組織的MHC不與宿主的MHC匹配時，這些細(xì)胞會在供體細(xì)胞中誘導(dǎo)死亡。用于對抗移植排斥的一個MP實施方案可以具有這樣的檢測域(2):它是供體的MHC分子的模擬物。激活域(3)可以是FasL。所述檢測域(2)可以結(jié)合宿主T和B細(xì)胞的抗原受體(4)，無論是TCR還是BCR。所述激活域(3)可以三聚化，并與在討厭的T和B細(xì)胞(11)上的Fas受體(12)相互作用。這可以發(fā)出細(xì)胞凋亡信號。如果這些宿主細(xì)胞亞群被除去，則可以避免移植物排斥。
應(yīng)當(dāng)指出，在任一個上述實施方案或與抗原受體有關(guān)的其它實施方案中，在用血漿去除術(shù)或一些其它方法處理之前，可能需要清除可溶性的B細(xì)胞受體(即分泌的抗體)，以便使一個實施方案暢通地接近膜結(jié)合的受體。
在用于治療或預(yù)防移植相關(guān)發(fā)病的另一個實施方案中，檢測域(2a，2b)可以包含在圖3A-C中所示的RNA或DNA的反義核苷酸鏈，它們對存在于排斥性的B和/或T細(xì)胞中的序列是特異性的。作為病毒變化或體細(xì)胞重組的結(jié)果，排斥性的B和T細(xì)胞具有獨特的核苷酸序列。本文使用的術(shù)語“體細(xì)胞重組”表示在B和T細(xì)胞受體成熟過程中發(fā)生的V(D)J重組。這些獨特序列是使用具有互補(bǔ)核苷酸鏈的MP可以利用的個體基因型變化。使用簡單的和充分理解的技術(shù)，諸如基因測序和減除雜交，可以為排斥性的B或T細(xì)胞的任何給定個體基因型確定這些序列?？梢詮幕颊咧谢驈募?xì)胞培養(yǎng)物中提取這樣的細(xì)胞用于這些研究。從這些獨特序列，可以簡單地反向工程改造檢測域?？梢栽谫|(zhì)粒上編碼檢測域(2)和激活域(3a，3b)，正如在圖7所示的一個實施方案。所述質(zhì)?？梢院性鰪?qiáng)向目標(biāo)細(xì)胞中的攝入的序列。所述質(zhì)粒可以編碼圖8A所示的檢測域(2a，2b)和激活域(3)。在該人工實施方案中，激活域可以包含核糖核蛋白亞單位(17a，b)和胱天蛋白酶原-9亞單位的融合體。檢測域可以包含對在激活域中存在的核糖核蛋白亞單位特異性的結(jié)合核糖核蛋白的鏈(16a，b)與一個或多個反義核苷酸鏈的融合體，所述反義核苷酸鏈識別在靶細(xì)胞中的上面討論的核苷酸序列。在該人工實施方案中，含有質(zhì)粒的細(xì)胞生成域，所述域通過檢測域的結(jié)合核糖核蛋白的核苷酸部分(16a，b)與激活域的核糖核蛋白亞單位部分(17a，b)的相互作用，如圖SB所示地自裝配。在該人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與核苷酸鏈的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a，3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。
各種自身免疫障礙的實施方案的前述實施例不應(yīng)解釋為限制性的。可以使用不同的檢測域(2)和激活域(3)組合，且不同的實施方案和應(yīng)用是可能的。這些實施例實施方案和在這里沒有列出的其它實施方案中的每一個可以提供許多優(yōu)點,所述優(yōu)點大部分與治療特異性和效力有關(guān)。就免疫增生性障礙而言，IMP實施方案可以清除惡性腫瘤，并使患者恢復(fù)至正常狀態(tài)，且沒有化 療 和放療方法的副作用。就自身免疫障礙而言，實施方案可以清除在所述障礙中起中樞作用的討厭的自體反應(yīng)的B和/或T細(xì)胞，改善征狀或治愈該疾病。就GVHD和移植排斥的孿生疾病而言，這些組合的實施方案可以增加移植成功的可能性。所有這些可以在沒有免疫抑制的情況下實現(xiàn)，所述免疫抑制是這組疾病的大多數(shù)治療的一個共同特征。這可以是特別重要的，因為許多這樣的患者已經(jīng)免疫受損。
G.可以用于改善細(xì)胞疾病和/或增強(qiáng)細(xì)胞功能的實施方案
在有些細(xì)胞疾病中，某些細(xì)胞亞群出現(xiàn)故障。這些細(xì)胞可能具有給定的任務(wù)，如給周圍組織提供結(jié)構(gòu)強(qiáng)度，或給身體的其它部分提供重要的激素或代謝物。許多實施方案可以在這樣的細(xì)胞中誘導(dǎo)代謝物的生成，以改善它們的功能。例如，肌萎縮發(fā)生在許多疾病中。一個實施方案可以具有肌鈣蛋白(4)的檢測域(2)，所述肌鈣蛋白是在肌細(xì)胞中大量生成的代謝物。激活域(3)可以是輔助裝配肌動蛋白亞單位的酶的亞單位，在激活域聚到一起時增加所述肌肉的強(qiáng)度。
有些實施方案可以在具有II型糖尿病的患者中是有效的。在該型糖尿病中，生產(chǎn)胰島素的胰腺P細(xì)胞被血液中的高糖和脂質(zhì)水平造成的生產(chǎn)需求壓倒。MP可以如下幫助:通過促進(jìn)這些個體基因型胰腺3細(xì)胞或它們的干細(xì)胞祖細(xì)胞繁殖，或可能通過增加現(xiàn)有@細(xì)胞中的抗細(xì)胞凋亡途徑。這些MP可以延長這些細(xì)胞的壽命，且可以防止或延遲疾病的嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)作。
脂肪細(xì)胞也可以為用于對抗脂質(zhì)營養(yǎng)不良性疾病的一些實施方案提供良好靶標(biāo)。在這樣的疾病中，脂肪細(xì)胞不能處理血流中的脂肪容量。這導(dǎo)致疾病。通過與這樣的細(xì)胞特異性地相互作用，可以調(diào)節(jié)它們的能力，或可以支持它們的存活途徑。有些MP實施方案的激活域(3)可以與細(xì)胞途徑相互作用，以降低細(xì)胞中的能量消耗效率，從而減少多余的能量儲存。
作為附隨的細(xì)胞損傷的結(jié)果，細(xì)胞疾病的一些現(xiàn)有治療具有非最佳的成功率，特別是在特定細(xì)胞亞群中。通過支持特定細(xì)胞亞群(即神經(jīng)元、肌細(xì)胞等)經(jīng)受治療作用，有些實施方案可以和其它治療協(xié)同幫助改善這些副作用。不同細(xì)胞應(yīng)用的實施方案的前述實施例不應(yīng)解釋為限制性的。這些實施例實施方案和在這里沒有列出的其它實施方案中的每一個可以提供許多優(yōu)點，所述優(yōu)點大部分與治療特異性和效力有關(guān)。
H.可以用于研究用途的實施方案
IMP的各個實施方案可以用于研究應(yīng)用中。例如，一個實施方案可以具有這樣的檢測域:其對在細(xì)胞分化中涉及的蛋白質(zhì)是特異性的。激活域(3)可以是熒光蛋白的無活性單體?？梢詫⑺鰧嵤┓桨敢爰?xì)胞組織培養(yǎng)物中。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)(4)存在于任何給定細(xì)胞中時，檢測域(2)可以與它結(jié)合。鄰近的激活域可以二聚化，以形成有活性的熒光二聚體，允許觀察所述細(xì)胞中的蛋白質(zhì)的位置和濃度以及觀察表達(dá)所述蛋白質(zhì)的細(xì)胞。
另一個實施方案可以具有針對編碼某些蛋白質(zhì)的mRNA的檢測域。檢測域⑵可以是針對mRNA(4)的反義核苷酸鏈。激活域(3)可以是切割mRNA的酶的無活性亞單位。在這情況下，當(dāng)在細(xì)胞中生成mRNA時，所述檢測域可以結(jié)合鄰近的RNA序列。這可以使亞單位聚到一起，其可以繼續(xù)切割mRNA，并限制它在細(xì)胞中的表達(dá)。
上述實施例僅僅是可以在實驗室配置中使用MP的幾種方式的示例?？梢源嬖谟糜诟鞣N其它潛在研究用途的許多其它實施方案。
1.可以用于新出現(xiàn)的或武器化的疾病中的實施方案
IMP的各個實施方案可以用于對抗新出現(xiàn)的或武器化的疾病。例如，作為人類對以前未定居的領(lǐng)域的侵犯的結(jié)果，已經(jīng)出現(xiàn)了各種病毒性疾病的爆發(fā)。相關(guān)的是，各個恐怖組織已經(jīng)表達(dá)出在突變現(xiàn)有媒介(agent)方面的興趣和/或能力，用于武器化和攻擊市區(qū)人群的目的。
盡管現(xiàn)有的工具也可以用于對抗新出現(xiàn)的和武器化的疾病，個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物aMP)會提供勝過這些治療的重要優(yōu)點。例如，新出現(xiàn)的疾病的快速突變和武器化的疾病的人工突變，使得使用目前可得到的方法難以產(chǎn)生新治療。但是，使用MP的某些實施方案，對抗這些疾病的個體可以利用檢測域的可容易地改變的特異性，以便改造一個MP實施方案用于對抗變化中的威脅?？梢赃M(jìn)一步快速地生產(chǎn)這些實施方案用于緊急情況，并根據(jù)需要 進(jìn)行調(diào)整。
作為用于治療已經(jīng)被軍事實體武器化和突變的病毒疾病的一個實例實施方案，圖7所示的實施方案可以包含編碼不同域的質(zhì)粒。檢測域(2a，2b)可以包含圖3A-C所示的反義核苷酸，所述反義核苷酸對目標(biāo)武器化的病毒是特異性的。使用簡單的和充分理解的技術(shù)，諸如基因測序和減除雜交，可以為武器化的病毒的任何給定個體基因型確定這些序列?？梢詮幕颊咧谢驈募?xì)胞培養(yǎng)物中提取這樣的細(xì)胞用于這些研究。從這些獨特序列，可以簡單地反向工程改造檢測域?？梢栽谫|(zhì)粒上編碼檢測域(2)和激活域(3a，3b)，正如在圖7所示的一個實施方案。所述質(zhì)粒可以含有增強(qiáng)向目標(biāo)細(xì)胞中的攝入的序列。所述質(zhì)?？梢跃幋a圖8A所示的檢測域(2a，2b)和激活域(3)。在該人工實施方案中，激活域可以包含核糖核蛋白亞單位(17a，b)和胱天蛋白酶原-9亞單位的融合體。檢測域可以包含對在激活域中存在的核糖核蛋白亞單位特異性的結(jié)合核糖核蛋白的鏈(16a，b)與一個或多個反義核苷酸鏈的融合體，所述反義核苷酸鏈識別在靶細(xì)胞中的上面討論的核苷酸序列。在該人工實施方案中，含有質(zhì)粒的細(xì)胞生成域，所述域通過檢測域的結(jié)合核糖核蛋白的核苷酸部分(16a，b)與激活域的核糖核蛋白亞單位部分(17a，b)的相互作用，如圖8B所示地自裝配。在該人工實施方案中，反義鏈(2a，2b)與核苷酸鏈的鄰近部分(4)的結(jié)合，可以使激活域(3a, 3b)發(fā)生接觸，使得它們可以二聚化。當(dāng)這以足夠的數(shù)目發(fā)生時，細(xì)胞可以凋亡。在突變會造成靶生物體對IMP的任何特定實施方案的抗性的情況下，使用簡單的技術(shù)可以容易地調(diào)節(jié)檢測域，以繞過所述抗性。
J.實施例實施方案的總結(jié)
盡管上面的描述包括許多具體用途，這些不應(yīng)視作限制性的。不同的技術(shù)可以用于不同的背景下，且不同的背景可以受益于不同的技術(shù)和實施方案。例如，盡管已經(jīng)在可以幫助治療衣原體感染的一個實施方案的一個實施例中提及了圖4中的基于袋的實施方案，基于袋的實施方案也可以用于對抗諸如瘧疾等疾病的個體基因型攜帶者媒介。類似地，盡管已經(jīng)在可以幫助治療HIV感染的一個實施方案的一個實施例中提及了具有用于檢測域(2)的核苷酸序列的一個實施方案，具有用于檢測域(2)的核苷酸序列的一個實施方案可以用于治療癌癥，所述癌癥具有在細(xì)胞中的特征性的或富集的核苷酸序列(4)。因而，可以做出許多變化，而不脫離本公開內(nèi)容的范圍。另外，并非所有應(yīng)用都是這里提呈的實施方案的一部分。因而，應(yīng)當(dāng)根據(jù)所附權(quán)利要求書評價本發(fā)明的范圍。
應(yīng)該理解，眾所周知的方法沒有進(jìn)行詳細(xì)描述，并且為了簡潔而省略。盡管可能已經(jīng)描述了具體的步驟、結(jié)構(gòu)和材料，本公開內(nèi)容可以不限于這些具體細(xì)節(jié)，并且可以如本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知地替換 其它具體細(xì)節(jié)，各個步驟可以不一定按照顯示的次序執(zhí)行。
僅僅作為一個實施例，IMP向細(xì)胞群體中的引入可以是體內(nèi)(intra-body)。例如，在具體實施方案中，首先將生產(chǎn)頂P的指令引入體內(nèi)。然后，當(dāng)體內(nèi)的細(xì)胞生產(chǎn)這樣的MP時，可以將所述頂P引入體內(nèi)的細(xì)胞群體中?？商鎿Q地，可以在體外生產(chǎn)MP，并引入體內(nèi)。例如，可以將IMP引入培養(yǎng)的細(xì)胞群體中。
盡管本公開內(nèi)容已經(jīng)描述了某些實施方案和通常相關(guān)的方法，這些實施方案和方法的改變和變換將是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的。因此，實施例實施方案的上述描述沒有限定或約束本公開內(nèi)容。其它變化、置換和改變也是可能的，且不脫離由下述權(quán)利要求限定的本公開內(nèi)容的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.一種方法，該方法包括: 向細(xì)胞群體中引入生產(chǎn)多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物αΜΡ)的指令，多個生產(chǎn)的MP中的每一個包含: 檢測域，其具有對表位的親和力，和 激活域，其與檢測域偶聯(lián)； 其中多個生產(chǎn)的MP的亞群中的每個MP的檢測域被構(gòu)造以結(jié)合一個或更多個表位；和 其中多個生產(chǎn)的MP的該亞群中的每個頂P的激活域被構(gòu)造以在細(xì)胞群體中激活和引起下游效應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中指令被編碼于質(zhì)粒上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中細(xì)胞群體包含血流。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中細(xì)胞群體包含組織培養(yǎng)物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中檢測域具有對在目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)部或表面上存在的表位的親和力。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中激活域包含胱天蛋白酶原_9。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中激活域的激活包括:使多個MP的亞群與鄰近表位結(jié)合，多個MP的亞群的結(jié)合引起多個MP的亞群的激活域彼此相互作用。
8.一種方法，該方法包括: 將多個經(jīng)過工程改造的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物αΜΡ)引入細(xì)胞群體，每個IMP包含: 檢測域，其具有對表位的親和力，和 激活域，其與檢測域偶聯(lián)； 使多個MP的亞群的每個MP的檢測域與一個或更多個表位結(jié)合；和激活多個頂P的該亞群的每個頂P的激活域，該激活在細(xì)胞群體的至少一個亞群的每個細(xì)胞中引起下游效應(yīng)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中下游效應(yīng)包括多個細(xì)胞的該亞群中的每個細(xì)胞的終結(jié)。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中細(xì)胞群體包含血流。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中細(xì)胞群體包含組織培養(yǎng)物。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，該方法另外包括:使用接頭分子使檢測域與激活域綴合。
13.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中激活域的激活包括:使多個MP的亞群與鄰近表位結(jié)合，多個MP的亞群的結(jié)合引起多個MP的亞群的激活域彼此相互作用。
14.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中激活域包含: 多孔的聚合物袋，其含有效應(yīng)分子；和 支持分子，其將多個IMP的檢測域局限在袋的孔中；和 其中多個MP的亞群的每個MP的檢測域與一個或更多個表位的結(jié)合進(jìn)一步包括: 解離支持分子，和釋放效應(yīng)分子。
15.一種用于個體基因型-特異性的治療的系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括: 多個經(jīng)過工程改造的、非天然存在的個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(MP)，每個MP包含: 檢測域，其具有對表位的親和力，和 激活域，其與檢測域偶聯(lián)，激活域被構(gòu)造以當(dāng)被激活時在細(xì)胞群體中引起下游效應(yīng)。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，該系統(tǒng)另外包括接頭分子，該接頭分子使檢測域和激活域綴合。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中每個IMP的檢測域包含抗體片段。
18.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中每個IMP的檢測域包含核苷酸序列。
19.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中每個MP的檢測域包含抗原，細(xì)胞克隆亞群的抗原受體對抗原是特異性的。
20.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中每個IMP的激活域包含無活性胱天蛋白酶-9單體。
21.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中每個MP的激活域包含生物活性分子的亞單位。
22.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng),其中每個MP的激活域包含原毒素或毒素-轉(zhuǎn)換酶。
23.根據(jù)權(quán)利要求15的系統(tǒng)，其中激活域的激活包括:使多個MP的亞群與鄰近表位結(jié)合，多個MP的亞群的結(jié)合引起多個頂P的亞群的激活域彼此相互作用。
24.一種用于個體基因型-特異性的治療的系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括: 用于生產(chǎn)多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(MP)的指令，多個生產(chǎn)的MP中的每一個包含: 檢測域，其具有對表位的親和力，和 激活域，其與檢測域偶聯(lián)； 其中多個生產(chǎn)的MP亞群中的每個MP的檢測域被構(gòu)造以結(jié)合一個或更多個表位；和 其中多個生產(chǎn)的MP該亞群中的每個MP的激活域被構(gòu)造以在細(xì)胞群體中激活和引起下游效應(yīng)。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的系統(tǒng)，其中指令被編碼于質(zhì)粒上。
26.根據(jù)權(quán)利要求24的系統(tǒng)，其中檢測域和激活域自裝配以生成功能性的ΜΡ。
27.根據(jù)權(quán)利要求24的系統(tǒng)，其中MP的自裝配通過核糖核蛋白亞單位對特異性核苷酸序列的親和力而實現(xiàn)。
28.根據(jù)權(quán)利要求24的系統(tǒng)，其中激活域的激活包括:使多個MP的亞群與鄰近表位結(jié)合，多個MP的亞群的結(jié)合引起多個MP的亞群的激活域彼此相互作用。
29.根據(jù)權(quán)利要求24的系統(tǒng)，其中檢測域的親和力可以被改變，使得生產(chǎn)的MP能用于對抗突變的靶標(biāo)。
全文摘要
在一個方法實施方案中，一種方法包括將多個個體基因型地調(diào)控的藥物效應(yīng)物(IMP)(1,1a,1b)引入細(xì)胞群體中。每個IMP(1,1a,1b)可以包括檢測域(2,2a,2b)和激活域(3,3a,3b)。一個或更多個表位被檢測域(2,2a,2b)結(jié)合。激活域(3,3a,3b)響應(yīng)于所述結(jié)合而被激活。應(yīng)用可以包括但不限于病毒感染、其它細(xì)胞內(nèi)感染、癌癥、媒介傳播的疾病、自身免疫疾病、細(xì)胞疾病、細(xì)胞增強(qiáng)和研究。
文檔編號C12N15/00GK103210083SQ201180037520
公開日2013年7月17日 申請日期2011年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月31日
發(fā)明者雅各布·奧姆 申請人:雅各布·奧姆