專利名稱：乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑的制作方法
乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑相關(guān)申請的參照本申請基于在先的日本專利申請?zhí)卦?010-184086號(申請日:2010年8月19日)并主張其優(yōu)先權(quán)的利益,其公開內(nèi)容全部通過參照而被并入本申請中。本發(fā)明的背景_4] 發(fā)明的領(lǐng)域本發(fā)明涉及以氨基酸為有效成分的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑。另外本發(fā)明涉及包含這樣的存活能力提高劑、和乳酸菌和/或雙歧桿菌的食品組合物以及食品組合物的制造方法。進(jìn)而本發(fā)明還涉及包括將該存活能力提高劑添加到含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的食品組合物中的、提高乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力的方法。
_6] 相關(guān)技術(shù)能夠帶來改善消化道內(nèi)的菌群等對宿主有益的作用的有用微生物被稱為益生菌(或者益生細(xì)菌)。作為這樣的有用微生物，有乳酸菌和/或雙歧桿菌。如益生菌那樣的具有功能性的乳酸菌和/或雙歧桿菌，經(jīng)常以各種食品和/或藥品的形態(tài)經(jīng)口被攝取。此時，例如在發(fā)酵奶等發(fā)酵食品中，在攝取前已經(jīng)成為低pH值的環(huán)境，這樣的環(huán)境大多數(shù)情況下不適合乳酸菌和/或雙歧桿菌等的存活(生存)。此外，即使在攝取后，胃內(nèi)部等PH值低的活體內(nèi)也成為不適合乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活的環(huán)境。如果食品中和/或活體內(nèi)的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力被提高，就可以期待伴隨著益生菌的功能的效果提高，這一點可以說從預(yù)防醫(yī)學(xué)的觀點來看也是重要的。到目前為止，對于提高食`品中的乳酸菌的存活能力，提出了幾種方案。例如Int.Dairy Journal7, 435-443 (1997) > R.1.Dave 等(Rajiv 1.Dave andNegendra P.Shah)( “Effectiveness of Ascorbic Acid as an Oxygen Scavenger inImproving Viability of Probiotic bacteria in Yoghurts Made with CommercialStarter Cultures”)報告了通過添加抗氧化活性物質(zhì)抗壞血酸(維生素C)可改善發(fā)酵奶中的乳酸菌(益生菌)的存活能力。然而，抗氧化活性物質(zhì)等的添加對酸乳酪和/或發(fā)酵奶的風(fēng)味和/或物性的影響較大，其使用有限制。另外，由于抗氧化活性物質(zhì)通過自身氧化來發(fā)揮作用，因而如果不使用相當(dāng)量，就無法期待其效果的持續(xù)性。日本特開2002-017254號公報中報告了，通過選自半胱氨酸、維生素C、楊梅提取物、蘆丁和果汁中的化合物，在過度光照射的條件下保存的發(fā)酵奶中的乳酸菌的存活能力提高了。然而，這里關(guān)于在酸性這樣的低PH值環(huán)境中的存活能力的提高沒有特別公開。日本特開2010-505390號公報(W02008/040872)記載了將阿拉伯樹膠根據(jù)需要與含硫氨基酸(例如，半胱氨酸)組合使用來提高發(fā)酵奶制品中的雙歧桿菌的存活能力。然而，必須使用阿拉伯樹膠，含硫氨基酸只不過被作為附加成分使用。另外，日本特開平10-327751號公報中記載了通過添加規(guī)定濃度的規(guī)定氨基酸的混合成分(谷氨酸、亮氨酸、丙氨酸、絲氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、以及甲硫氨酸)可改善發(fā)酵奶的風(fēng)味。但是，這里關(guān)于通過氨基酸可以提高發(fā)酵奶中的乳酸菌等的存活能力沒有任何記載或啟示。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明者們?nèi)缃裢ㄟ^對處于酸性(pH值低)環(huán)境的作為益生菌的乳酸菌和雙歧桿菌使用氨基酸，而成功地大幅改善了這些益生菌在保存中的存活能力(生存能力)。另外，本發(fā)明者們對于Zn、葉酸、MgCO3等無機(jī)鹽類也同樣地進(jìn)行了研究，結(jié)果這些物質(zhì)也和氨基酸一樣，可以通過對作為益生菌的乳酸菌和雙歧桿菌的使用而改善它們的存活能力。本發(fā)明是基于這些見解而做出的。所以，本發(fā)明的目的是提供能夠提高處于酸性(pH值低)環(huán)境中的作為益生菌的乳酸菌和雙歧桿菌的存活能力的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑、使用該乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑的食品組合物及其制造方法。根據(jù)本發(fā)明，提供以下發(fā)明。(1)乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑，其以氨基酸為有效成分；(2)根據(jù)上述(·1)所述的存活能力提高劑，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸；(3)根據(jù)上述⑴或(2)所述的存活能力提高劑，其中，乳酸菌和雙歧桿菌是益生菌；(4)根據(jù)上述⑴ (3)的任一項所述的存活能力提高劑，其提高pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力；(5)根據(jù)上述(I) (4)的任一項所述的存活能力提高劑，其提高酸乳酪或發(fā)酵奶中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力；(6)根據(jù)上述(I) (5)的任一項所述的存活能力提高劑，其中，乳酸菌是乳桿菌屬乳酸菌；(7)根據(jù)上述(I) ￠)的任一項所述的存活能力提高劑，其中，進(jìn)一步包含選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類；(8)組合物，其包含上述⑴ (7)的任一項所述的存活能力提高劑、以及乳酸菌和/或雙歧桿菌；(9)根據(jù)上述⑶所述的食品組合物，其是酸乳酪或發(fā)酵奶；(10)根據(jù)上述⑶或(9)所述的食品組合物，其中，以相對于組合物IOOg為50mg以上含有作為存活能力提聞劑而被加入的氣基酸；(11)食品組合物的制造方法，其包括將氨基酸添加到pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中；(12)根據(jù)上述(11)所述的方法，其進(jìn)一步包括在向上述組合物中添加氨基酸之后，進(jìn)行組合物的發(fā)酵；(13)根據(jù)上述(11)或(12)所述的方法，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸；(14)根據(jù)上述(11) (13)的任一項所述的方法，其中，乳酸菌和雙歧桿菌是益生菌；(15)根據(jù)上述(11) (14)的任一項所述的方法，其中，食品組合物是酸乳酪或發(fā)酵奶；
(16)根據(jù)上述(11) (15)的任一項所述的方法，其中，乳酸菌是乳桿菌屬乳酸菌；
(17)根據(jù)上述(11) (16)的任一項所述的方法，其進(jìn)一步包括將選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類與氨基酸一起添加；(18)根據(jù)上述(11) (17)的任一項所述的方法，其中，氨基酸的添加量相對于組合物IOOg為50mg以上；(19)提高食品組合物中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力的方法，其包括將氨基酸添加到含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中。(20)根據(jù)上述(19)所述的方法，其中，添加氨基酸的組合物處于pH值為2.0
6.5的范圍的低pH值環(huán)境下；(21)根據(jù)上述(19)或(20)所述的方法，其包括在所述組合物的發(fā)酵之前，將所述氨基酸添加到所述組合物中；(22)根據(jù)上述(19) (21)的任一項所述的方法，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸；(23)氨基酸的用途，用于提高pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力；(24)根據(jù)上述(23)所述的用途，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸。根據(jù)本發(fā)明，可以大幅提高酸性環(huán)境中的作為益生菌的乳酸菌和/或雙歧桿菌在(冷藏)保存中的存活能力。因此，可以使這些菌體的活性長時間持續(xù)。通過在食品組合物中使用本發(fā)明的存活能力提高劑，可以在不影響食品組合物的風(fēng)味和/或物性的條件下提高菌體的存活能力。進(jìn)而根據(jù)本發(fā)明，可以使菌體的活性長期且較高地持續(xù)，因而可以減少使用的菌體的使用量(向發(fā)酵奶等食品組合物中的添加量)，其結(jié)果是，除了成本降低之夕卜，還可以期待發(fā)酵奶等食品組合物的風(fēng)味和/或物性的改善(或品質(zhì)下降抑制)。已知乳酸菌在發(fā)酵奶中的存活能力，根據(jù)每種菌株針對溶存氧、過氧化氫、低pH值等的耐受力不同而有較大差異。如果能夠通過本發(fā)明來提高益生菌乳酸菌在制品中的存活能力，則可以減少雖然生理效果優(yōu)異但由于在發(fā)酵乳中的存活能力較低而不能使用菌株的情況，還可期待益生菌商品的保質(zhì)期(保鮮期)的延長。
具體實施例方式存活能力提1 劑本發(fā)明的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑以氨基酸為有效成分。這里，“乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑”是指提高乳酸菌和雙歧桿菌兩者或者至少任一者的存活能力的藥劑(包含食品添加劑等)的含義。此外在該含義下，存活能力提高劑也可以替代地表述成存活能力提高用組合物或者存活能力提高用添加劑。另外，這里“存活能力提高”是指乳酸菌和/或雙歧桿菌處于它們的菌體能夠成長或維持的環(huán)境中時，通過作用于菌體而抑制其死亡，維持、增加殘存菌體的數(shù)量。因此，存活能力提高這樣的表達(dá)，典型地是抑制菌體數(shù)減少的含義，此外也可以以包含菌體數(shù)的維持、增殖促進(jìn)的概念使用。
在本發(fā)明中，存活能力提高劑是能夠提高乳酸菌和/或雙歧桿菌在酸性(低pH值)環(huán)境下保存中的存活能力的藥劑。在以發(fā)酵奶等為代表的含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的食品組合物中，通常形成酸性(低PH值)環(huán)境，大多不適合的乳酸菌的增殖或生存。本發(fā)明的存活能力提高劑即使在這樣的酸性(低PH值)環(huán)境里也能發(fā)揮提高菌體的存活能力的功能，因此在提高像發(fā)酵奶等這樣的食品組合物中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力方面是有用的。因此，本發(fā)明的存活能力提高劑，在酸性(低PH值)環(huán)境里能更加有效地發(fā)揮功能。這里所說的酸性(低pH值)環(huán)境，用pH值表示，典型地pH值為2.0 6.5的范圍，優(yōu)選pH值為2.5 6.0的范圍，更優(yōu)選pH值為3.0 5.5的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選pH值為
3.5 5.0的范圍，進(jìn)一步更優(yōu)選pH值為3.8 4.8的范圍?；蛘?，如果將酸性(低pH值)的環(huán)境用酸度表示，則在食品組合物為發(fā)酵奶等的情況下，作為乳酸的酸度，例如為0.1 1.3的范圍，優(yōu)選為0.3 1.2的范圍，更優(yōu)選為0.5 1.1的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選為0.7
1.1的范圍。此外，這樣的酸度可以通過已知公開的方法對食品組合物中的乳酸進(jìn)行定量，從而求得。另外，本發(fā)明的存活能力提高劑如上所述，可以提高在酸性(低pH值)環(huán)境中保存的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力。這里，“保存”是指在適于乳酸菌和/或雙歧桿菌生長或維持的溫度條件下保存。作為保存條件，優(yōu)選為冷藏保存條件，如果列舉具體例，則在I 10°C、優(yōu)選為I 5°C、更優(yōu)選為約4°C左右的溫度條件下保存。此外，可期待存活能力的提高的保存時間例如為一個月以內(nèi)，優(yōu)選為I 4周，更優(yōu)選為I 3周，進(jìn)一步優(yōu)選為2 3周的時間。這里，氨基酸只要是可作為使用攝取、且可以改善乳酸菌或雙歧桿菌的存活能力即可，并沒有特別限制，作為可以使用的氨基酸的優(yōu)選例，可列舉酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸，也可使用將它們兩種以上組合而得的混合物。更優(yōu)選氨基酸為酪氨酸、色氨酸、組氨酸、半胱氨酸或它們的混合物。進(jìn)一步優(yōu)選氨基酸為酪氨酸、色氨酸、組氨酸或它們的混合物。此外，使用半胱氨酸時，雖然提高乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力的效果高，但有時可能對食品的風(fēng)味影響較大。另一方面，作為可以使用的氨基酸，優(yōu)選ORAC值(Oxygen Radical Absorpotion Capacity (活性氧清除能力))值大的氨基酸。
在將本發(fā)明的存活能力提高劑向食品組合物中添加時，如果作為有效成分的氨基酸難溶于食品組合物，則可以根據(jù)需要預(yù)先單獨或多種組合使用水和/或食物領(lǐng)域所常用的溶劑例如醇類、烴類、有機(jī)酸、有機(jī)堿、無機(jī)酸、無機(jī)堿、超臨界流體等，使其溶解而使用。即，可列舉氨基酸為疏水性、食物組合物為親水性的情況等。本發(fā)明的存活能力提高劑優(yōu)選應(yīng)用于作為益生菌的乳酸菌和/或雙歧桿菌。即，在發(fā)酵奶等食品組合物中，作為乳酸菌和/或雙歧桿菌，有:用作發(fā)酵劑(starter)的、和用作賦予食品組合物以功能性的益生菌的，本發(fā)明的存活能力提高劑主要是以提高后者的益生菌的存活能力為目的的。這里，雙歧桿菌和/或乳酸菌可以使用市售品，還可以從普通的或者公共的菌的保藏機(jī)構(gòu)獲得，也可使用培養(yǎng)從腸內(nèi)等得到的樣品而得的菌。
可以應(yīng)用本發(fā)明的存活能力提高劑的乳酸菌優(yōu)選為乳桿菌屬(Lactobacillus)的乳酸菌，如果列舉更具體的例子，可列舉加氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri)、曬淀粉乳桿菌(Lactobacillus amylovorus)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)、乳酸乳球菌(Lactobacillus lactis)，粘膜乳桿菌(Lactobacillus mucosae)、唾液乳桿菌(Lactobacillus salivarius)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、高加索乳桿菌(Lactobacillus caucasicus)、嗜熱乳桿菌(Lactobacillus themophilus)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)、卷曲乳桿菌(Lactobacillus crispatus)、短乳桿菌(Lactobacillus brevis)、干酷乳桿菌(Lactobacillus casei)、詹氏乳桿菌(Lactobacillus jensenii)、 口乳桿菌(Lactobacillus oris)、植物乳桿菌(Lactobacillus pi ant arum)、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、瘤胃乳桿菌(Lactobacillus ruminis)、戊糖乳桿菌(Lactobacillus pentosus)等。其中，作為優(yōu)選的例子，可列舉加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)、嗷淀粉乳桿菌(Lactobacillus amylovorus)等。此外，作為除乳桿菌屬以外的乳酸菌，包含屬于鏈球菌屬(Streptococcus)、明串珠菌屬(Leuconostoc)、片球菌屬(Pediococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、和乳球菌屬(Lactococcus)的乳酸菌，作為這些乳酸菌的具體例，可列舉嗜熱鏈球菌(Streptococcusthemophilus)、腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)、戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)、糞腸球菌(Enterococcus faecalis)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、乳明串珠菌(Leuconostoc lactis)、乳脂乳球菌(Lactococcus cremoris)等?？梢詰?yīng)用本發(fā)明的存活能力提高劑的雙歧桿菌是指屬于雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)的菌，如果列舉具體例，則可列舉乳雙岐桿菌(Bifidobacteriumlactis)、兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)、短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)、嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)、青春雙岐桿菌(Bifidobacteriumadolescentis)、長雙岐桿菌(Bifidobacterium longum)、動物雙歧桿菌(Bifidobacterium animalis)、鏈狀雙歧桿菌(Bifidobacterium catenulatum)、齒雙岐桿菌(Bifidobacterium dentium)等。其中，作為優(yōu)選的例子，可列舉乳雙岐桿菌(Bifidobacterium lactis)。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu) 選方式，可提供乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑，其中，除了作為有效成分的氨基酸，還進(jìn)一步含有選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類。作為這樣的添加成分，進(jìn)一步可列舉抗壞血酸。根據(jù)本發(fā)明的其他方式，可提供以選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類為有效成分的、乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑。一般認(rèn)為乳酸菌具有對酸和/或氧氣的防御機(jī)制，根據(jù)其強(qiáng)弱不同而存在對酸和/或氧氣耐受性強(qiáng)的菌、耐受性弱的菌株。認(rèn)為通過能夠輔助細(xì)胞內(nèi)的酶反應(yīng)那樣的無機(jī)鹽類，細(xì)胞活性增加，從而存活能力提高。當(dāng)然，這些是理論，并不限定本發(fā)明。這樣，可以說在氨基酸中進(jìn)一步添加這些無機(jī)鹽類，在提高存活能力方面是更加有益的。食品組合物、和提高存活能力的方法根據(jù)本發(fā)明的另外其他方式，可提供含有本發(fā)明的存活能力提高劑、以及乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物。這些組合物優(yōu)選為食品組合物，作為具體例，可列舉清涼飲料、乳飲料、發(fā)酵奶、酸乳酪、乳酸菌飲料等。含有本發(fā)明的存活能力提高劑、以及乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物可以直接使用，也可以進(jìn)一步與其他食品和/或其他成分混合，像普通的食品組合物那樣按照常規(guī)處理方法使用。此外，對于其性狀，也可以是通常使用的飲食品的狀態(tài)和/或形態(tài)，例如固體(粉末、顆粒、其他)、糊狀、液體或懸浮液的任一種。
根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選方式，可提供制造食品組合物的制造方法，其包括將氨基酸添加到pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中。所得的食品組合物具有本發(fā)明中的存活能力提高功能。這里，關(guān)于添加氨基酸的時間和食品組合物的發(fā)酵時間之間的關(guān)系，可以將氨基酸添加在該組合物的發(fā)酵之前、發(fā)酵之中、發(fā)酵之后的任一時間進(jìn)行，從容易在制品整體中均勻地管理效果和/或作用等的方面出發(fā)，優(yōu)選為該組合物的發(fā)酵之前，從容易衛(wèi)生地管理添加的氨基酸等的方面出發(fā)，更優(yōu)選為該組合物的滅菌之前。S卩，根據(jù)本發(fā)明的更優(yōu)選的方式，食品組合物的制造方法進(jìn)一步包括在向上述組合物中添加氨基酸之后，進(jìn)行組合物的發(fā)酵。根據(jù)本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選的方式，食品組合物的制造方法進(jìn)一步包括將選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類與氨基酸一起添加。作為可以在本發(fā)明的組合物中加入的其他成分，可以列舉例如，水、蛋白質(zhì)、糖質(zhì)、脂質(zhì)、維生素類、礦物類、有機(jī)酸、有機(jī)堿、果汁和香料等。此外，還可列舉膠凝劑、穩(wěn)定劑等添加成分。這些成分也可以兩種以上組合使用。在本發(fā)明的組合物中，如下使用存活能力提高劑:作為存活能力提高劑加入的氨基酸，優(yōu)選以相對于組合物IOOg為50mg以上含有，更優(yōu)選以相對于組合物IOOg為50mg 300mg含有，進(jìn)一步優(yōu)選以相對于組合物IOOg為50mg 200mg含有。該組合物中的氨基酸含量在上述范圍內(nèi)，在充分發(fā)揮氨基酸的存活能力提高效果的方面是有益的，并且在避免氨基酸的大量使用對組合物的風(fēng)味和/或物性帶來不良影響的方面是有效的。在本發(fā)明的組合物(優(yōu)選為食品組合物)中，乳酸菌優(yōu)選以105CFU/g以上、更優(yōu)選以IO6 109CFU/g的范圍、進(jìn)一步優(yōu)選以IO7 108CFU/g的范圍含有，此外雙歧桿菌優(yōu)選以105CFU/g以上、更優(yōu)選以IO6 109CFU/g的范圍、更優(yōu)選以IO7 108CFU/g的范圍含有。根據(jù)本發(fā)明的其他方式，可提供提高食品組合物中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力的方法，其包括將本發(fā)明的存活能力提高劑添加到含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中。這里，存活能力提高劑的添加時間可以是該組合物的發(fā)酵之前、發(fā)酵之中、發(fā)酵之后的任一時間，從容易在制品整體中均勻地管理效果和/或作用等的方面出發(fā)，優(yōu)選為該組合物的發(fā)酵之前，從容易衛(wèi)生地管理添加的氨基酸等的方面出發(fā)，更優(yōu)選為該組合物的滅菌之前。此外，在本說明書中，使用“約”和/或“左右”的值的表達(dá)，是包含在實現(xiàn)設(shè)定該值的目的方面只要是本領(lǐng)域技術(shù)人員就可以允許的值的變動的含義。實施例通過以下的例子詳細(xì)說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于這些。(I)供試菌株和培養(yǎng)方法作為乳酸菌，使用低pH值環(huán)境下(例如，發(fā)酵奶中)的存活能力不同的菌株:加氏乳桿菌 0LL203195(L.gasseri 0LL203195) (FERM BP-11005)、加氏乳桿菌 MEP22040001 (L.gasseri MEP22040001)、加氏乳桿菌 MEP22040002 (L.gasseri MEP22040002)、加氏乳桿菌JCM1131T(L.gasseri JCM1131T)和噬淀粉乳桿菌 0LL2880 (L.amylovorus 0LL2880) (FERMBP-11006)。此時，使用L.gasseri 0LL203195作為低pH值環(huán)境下的存活能力較低的菌體的代表，使用L.gasseri MEP22040001作為低pH值環(huán)境下的存活能力中等程度的菌體的代表，使用L.gasseri MEP22040002作為低pH值環(huán)境下的存活能力較高的菌體的代表，使用L.gasseri JCM1131T作為乳桿菌屬(Lactobacillus)的乳酸菌的代表或者加氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri)的代表。此外，L.gasseri 0LL203195 (Lactobacillus gasseri 0LL203195)于 2008 年 9月2日委托獨立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心保藏，本微生物以保藏號FERM BP-11005 被保藏。此外，L.amylovorus 0LL2880 (Lactobacillus amylovorus 0LL2880)于 2008 年 9月2日委托獨立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心保藏，本微生物以保藏號FERM BP-11006 被保藏。而且，JCM是指理化學(xué)研究所微生物系統(tǒng)保存設(shè)施(Japan Collection ofMicroorganisms)，現(xiàn)在成為獨立行政法人理化學(xué)研究所生物資源中心(RIKEN BRC)微生物材料開發(fā)室。將各菌株在MRS培養(yǎng)基中使用厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)(7木口 ”々(商品名、三菱力' ^化學(xué)株式會社制)進(jìn)行厭氧培養(yǎng)( 37°C、24小時)。之后將所得的培養(yǎng)液濃縮至10倍，使用
0.85%的生理鹽水懸浮，制成菌體濃縮液(菌體濃度:約101(lCFU/g)。(2)工作發(fā)酵劑的制備將脫脂奶粉的10重量％水溶液在95°C滅菌10分鐘，然后向其中接種0.15重量％的發(fā)酵劑(從明治十勝酸乳酪中分離出的混合發(fā)酵劑)，在37°C下發(fā)酵至其酸度達(dá)到0.75后，冷卻至4°C,作為工作發(fā)酵劑(bulk starter)。(3)發(fā)酵奶中的存活能力的測定將酸乳酪混合物(yogurt mix)(原料奶)(表I)在95°C的最高溫度條件下滅菌后，在其中接種上述工作發(fā)酵劑3重量％和各乳酸菌I重量％，在43 V發(fā)酵至酸度達(dá)到0.75。作為存活能力提高劑或其比較例,分別使用氨基酸(酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸)(各 100mg/100g)、維生素 C(100mg/100g) >MgCO3 (200mg/100g)、葉酸(200μ g/100g)、鋅(Zn) (lmg/100g)。原則上，這些存活能力提高劑和比較例在上述發(fā)酵之前且滅菌之前以規(guī)定量加入(其中，維生素C和葉酸因為對熱耐受力差，因而在滅菌后添加)。發(fā)酵結(jié)束后，將各樣品放入半阻杯擋容器，冷卻至4°C，然后使用熱封機(jī)蓋上鋁蓋。將得到的蓋有鋁蓋的各樣品的發(fā)酵奶在4°C下保存。在保存開始I天后和16天后分別通過BL (+)培養(yǎng)基需氧培養(yǎng)(在添加了 5%的脫纖維馬血的BL培養(yǎng)基中，在需氧條件下培養(yǎng))、和LBS厭氧培養(yǎng)(在LBS培養(yǎng)基中，使用厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)(7彳、口(商品名、三菱if 7化學(xué)株式會社制)在厭氧條件下培養(yǎng))，以72小時確認(rèn)發(fā)酵奶中的存活能力(保存溫度:4°C )。具體地，求出各樣品中的活菌數(shù)，存活率用16天后的菌數(shù)除以I天的菌數(shù)，以％換算求得。這里的菌數(shù)，使用所使用的培養(yǎng)基中菌數(shù)最高的培養(yǎng)基中的平均值。表1.酸乳酪混合物的簡易配合(不需要均質(zhì)化處理)
權(quán)利要求
1.乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑，其以氨基酸為有效成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的存活能力提高劑，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的存活能力提高劑，其中，乳酸菌和雙歧桿菌是益生菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 3的任一項所述的存活能力提高劑，其提高pH值為2.0 6.5的范圍的低PH值環(huán)境下的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 4的任一項所述的存活能力提高劑，其提高酸乳酪或發(fā)酵奶中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力。
6.根據(jù)權(quán)利要求1 5的任一項所述的存活能力提高劑，其中，乳酸菌是乳桿菌屬乳酸菌。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 6的任一項所述的存活能力提高劑，其中，進(jìn)一步包含選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類。
8.一種組合物，其包含權(quán)利要求1 7的任一項所述的存活能力提高劑、以及乳酸菌和/或雙歧桿菌。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的食品組合物，其是酸乳酪或發(fā)酵奶。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的食品組合物，其中，以相對于組合物IOOg為50mg以上含有作為存活能力提高劑而被加 入的氨基酸。
11.食品組合物的制造方法，其包括將氨基酸添加到PH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其進(jìn)一步包括在向上述組合物中添加氨基酸之后，進(jìn)行組合物的發(fā)酵。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求11 13的任一項所述的方法，其中，乳酸菌和雙歧桿菌是益生菌。
15.根據(jù)權(quán)利要求11 14的任一項所述的方法，其中，食品組合物是酸乳酪或發(fā)酵奶。
16.根據(jù)權(quán)利要求11 15的任一項所述的方法，其中，乳酸菌是乳桿菌屬乳酸菌。
17.根據(jù)權(quán)利要求11 16的任一項所述的方法，其進(jìn)一步包括將選自Zn、葉酸、MgCO3和它們的混合物中的無機(jī)鹽類與氨基酸一起添加。
18.根據(jù)權(quán)利要求11 17的任一項所述的方法，其中，氨基酸的添加量相對于組合物IOOg為50mg以上。
19.提高食品組合物中的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力的方法，其包括將氨基酸添加到含有乳酸菌和/或雙歧桿菌的組合物中。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中，添加氨基酸的組合物處于pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下。
21.根據(jù)權(quán)利要求19或20所述的方法，其包括在所述組合物的發(fā)酵之前，將所述氨基酸添加到所述組合物中。
22.根據(jù)權(quán)利要求19 21的任一項所述的方法，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合物中的氨基酸。
23.氨基酸的用途，用于提高pH值為2.0 6.5的范圍的低pH值環(huán)境下的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的用途，其中，氨基酸是選自酪氨酸、色氨酸、組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和它們的混合 物中的氨基酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及以氨基酸為有效成分的乳酸菌和/或雙歧桿菌的存活能力提高劑。根據(jù)本發(fā)明，可以提高作為益生菌的乳酸菌和雙歧桿菌在酸性(pH值低)環(huán)境中的存活能力。
文檔編號A23C9/13GK103189499SQ201180050220
公開日2013年7月3日 申請日期2011年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月19日
發(fā)明者越智大輔, 木村勝紀(jì) 申請人:株式會社明治