專利名稱：尸胺的制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及使用具有尸胺生產(chǎn)能力的棒狀菌群來制造尸胺的方法。
背景技術(shù)：
尸胺具有二胺結(jié)構(gòu)，別名稱為1，5_戊二胺或戊二胺等。近來，尸胺作為聚酰胺的單體原料而受到關(guān)注，因此期待大量生產(chǎn)。作為尸胺的制造方法，已知利用棒狀菌群的發(fā)酵法，具體而言，已知有:通過下述棒狀菌群的發(fā)酵來制造尸胺的方法，所述棒狀菌群具有尸胺生產(chǎn)能力、并且作為尸胺前體物質(zhì)的賴氨酸的合成能力得到強(qiáng)化(參考專利文獻(xiàn)I 4、非專利文獻(xiàn)I);或者通過下述棒狀菌群的發(fā)酵來制造尸胺的方法，所述棒狀菌群由于賴氨酸脫羧酶基因的拷貝數(shù)增加而使得賴氨酸脫羧酶活性得到強(qiáng)化(參考專利文獻(xiàn)5)?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1:日本特開2004-222569號公報專利文獻(xiàn)2:日本特開2002-223770號公報專利文獻(xiàn)3:W02007/113127 號專利文獻(xiàn)4:W02008/101850 號專利文獻(xiàn)5:W02008/092720 號非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)1:Stefaine Kind, Metabolic engineering.(代謝工程)12，341-351，(2010)

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的問題本發(fā)明的課題為開發(fā)出比利用傳統(tǒng)的發(fā)酵法制造尸胺的方法更有效且產(chǎn)率更高的尸胺制造工藝。解決問題的手段

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，具有生產(chǎn)尸胺的能力、且在pH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群可用作尸胺生產(chǎn)菌，從而導(dǎo)致本發(fā)明的完成。gp，本發(fā)明提供了以下(I) (4)。(I) 一種尸胺的制造方法，包括培養(yǎng)具有生產(chǎn)尸胺的能力、且在pH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群。(2)根據(jù)(I)所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群具有賴氨酸脫羧酶活性。(3)根據(jù)(I)或(2)所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群選自由棒狀桿菌屬和短桿菌屬構(gòu)成的組。(4)根據(jù)(I)至(3)中任一項(xiàng)所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群具有高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性和/或S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸抗性。
發(fā)明的效果根據(jù)本發(fā)明，與利用傳統(tǒng)的發(fā)酵法制造尸胺的方法相比，能夠更有效且更高產(chǎn)率地制造尸胺。
具體實(shí)施例方式如上所述，在本發(fā)明的方法中，使用了棒狀菌群。棒狀菌群為好氧性革蘭氏陽性桿菌，傳統(tǒng)上被分類為短桿菌屬，但是現(xiàn)在也被包括在統(tǒng)一為棒狀桿菌屬的細(xì)菌中(Int.J.Syst.,Bacteriol., (1981) 41，p.225)。另外，包括與棒狀桿菌屬非常接近的短桿菌屬細(xì)菌。作為這樣的棒狀菌群的例子，可以列舉出:嗜乙酰乙酸棒桿菌(Corynebacteriumacetoacidophylum)、醋谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium acetoglutamicum)、解燒棒狀桿菌(Corynebacterium alkanolyticum)、帚石南棒狀桿菌(Corynebacteriumcallunae)、谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)、百合花棒桿菌(Corynebacterium lilium)、棲糖蜜棒桿菌(Corynebacterium mellassecola)、熱產(chǎn)氨棒狀桿菌(Corynebacterium thermoaminogenes)、有效棒桿菌(Corynebacteriumefficiens)、力士棒桿菌(Corynebacterium herculis)、叉開短桿菌(Brevivacteriumdivaricatum)、黃色短桿菌(Brevivacterium flavum)、7' L- ' /s' ^ r 1J 々 Λ.-1 'y
丨J 才 7 〗9 A (Brevivacterium immariophilum)、乳糖發(fā)酵短桿菌(Brevivacteriumlactofermentum)、玫瑰色短桿菌(Brevivacterium roseum)、解糖短桿菌(BrevivacteriumsaccharoIyticum)> 生硫短桿菌(Brevivacterium thiogenitalis)、產(chǎn) 氨棒桿菌(Corynebacterium ammoniagenes)、白短桿菌(Brevivacterium album)、寸 > 匕' ；s'
(Brevivacterium cerinum)、嗜氨微桿菌(Microbacterium
ammoniaphilum)。另外，作為各棒狀菌群的具體菌株，可以舉出:嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC13870，醋谷氨酸棒狀桿菌ATCC15806，解烷棒狀桿菌ATCC21511，帚石南棒狀桿菌ATCC15991，谷氨酸棒桿菌ATCC13020、ATCC13020、ATCC13060，百合花棒桿菌ATCC15990，棲糖蜜棒桿菌ATCC17965，有效棒桿菌AJ12340 (保藏編號:FERMBP_1539)，力士棒桿菌ATCC13868，叉開短桿菌 ATCC14020，黃色短桿菌 ATCC13826、ATCC14067、AJ12418 (保藏編號:FERMBP_2205)，I
匕' K々f丨J々Λ.^ 丨J才7 4 9 A ATCC14068，乳糖發(fā)酵短桿菌ATCC13869，玫瑰色短桿菌ATCC13825，解糖短桿菌ATCC14066，生硫短桿菌ATCC19240，產(chǎn)氨棒桿菌ATCC6871、ATCC6872,白短桿菌 ATCC15111，7"r V ^ ^ ^ V ^ ^ ATCC15112，嗜氨微桿菌
ATCC15354。上述棒狀菌群可以從(例如)美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)處購買獲得。在ATCC中，每個菌株都附帶有對應(yīng)的登記號，該登記號記載在ATCC的目錄中，可以參考該登記號購買獲得各菌株。在本發(fā)明中，作為具有生產(chǎn)尸胺的能力的棒狀菌群，優(yōu)選使用通過從外部導(dǎo)入編碼賴氨酸脫羧酶的多核苷酸而具有賴氨酸脫羧酶活性的棒狀菌群。只要具有賴氨酸脫羧酶活性，即能夠以賴氨酸為原料，通過對其進(jìn)行脫羧而生產(chǎn)尸胺。賴氨酸脫羧酶優(yōu)選為L-賴氨酸脫羧酶。另外，關(guān)于賴氨酸脫羧酶的來源也沒有特別限制，但是優(yōu)選使用來源于(例如)耐鹽芽孢桿菌(Bacillus halodurans)、枯草芽孢桿菌(bacillus subtilis)、大腸埃希氏菌(Escherichia coli ;大腸桿菌)、反會月形單胞菌(Selenomonas ruminamtium)、霍亂弧菌(Vibrio cholerae)、副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)、天藍(lán)色鏈霉菌(Streptomyces coelicolor)、毛鏈霉菌(Streptomycespilosus)、侵蝕艾肯菌(Eikenella corrodens)、卩遼氨基酸真桿菌(Eubacteriumacidaminophilum)、鼠傷寒沙門菌(Salmonella typhimurium)、蜂房哈夫尼菌(Hafniaalvei)、腦膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)、嗜酸熱原體(Thermoplasmaacidophilum)、或者深海熱球菌(Pyrococcus abyssi )的賴氨酸脫羧酶,更優(yōu)選使用來源于安全性得到確認(rèn)的大腸桿菌的賴氨酸脫羧酶。這些賴氨酸脫羧酶(有時被稱為“LDC”)的氨基酸序列以及對其進(jìn)行編碼的堿基序列登記在數(shù)據(jù)庫(GenBank)中。例如，在本發(fā)明中可優(yōu)選使用的來源于大腸桿菌的LDC基因的堿基序列登記為GenBank Accession N0.M76411。本發(fā)明中使用的編碼賴氨酸脫羧酶的基因可以根據(jù)所使用的棒狀菌群的密碼子使用頻率對核酸序列進(jìn)行再設(shè)計(jì)。需要說明的是，如上所述，來源于上述各生物的賴氨酸脫羧酶基因登記在數(shù)據(jù)庫(GenBank)中，以生物名稱和賴氨酸脫羧酶作為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索即可以容易地得知各LDC基因的喊基序列。作為編碼賴氨酸脫羧酶的基因，在具有其功能的范圍內(nèi)，除了上述各生物種類的天然LDC基因之外，還包括在這些LDC基因的各堿基序列中，發(fā)生I個或多個堿基的置換、缺失、插入或添加后的多核苷酸。這里，“多個”通常為I至40個的程度，優(yōu)選I至30個，更優(yōu)選I至20個，特別優(yōu)選I至10個，最優(yōu)選I至5個。另外，作為上述編碼賴氨酸脫羧酶的基因，在具有其功能的范圍內(nèi)，可以列舉出與構(gòu)成該基因的多核苷酸或者其互補(bǔ)鏈的全體或一部分在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸。這里，“在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸”是指(例如)將選自原來的堿基序列中任意至少20個、優(yōu)選為25個、更優(yōu)選為至少30個連續(xù)序列中的I個或多個核酸序列作為探針，使用公知的雜交技術(shù)(Current Protocols I MolecularBiology edit.Ausbel et al., (1987)Publish.John ffily&Sons Section 6.3-6.4)等進(jìn)行雜交的核酸序列。此處作為嚴(yán)格條件，例如在50%甲酰胺的存在下，在雜交溫度為37°C、作為更加嚴(yán)格的條件為42°C、作為進(jìn)一步更嚴(yán)格的條件為65°C時，通過用0.1至2倍濃度的SSC溶液(I倍濃度的 SSC溶液的組成:150mM氯化鈉、15mM檸檬酸鈉)洗滌，由此可實(shí)現(xiàn)雜交。另外，作為上述編碼賴氨酸脫羧酶的多核苷酸，在具有其功能的范圍內(nèi)，也可以為序列一致性通常在85%以上、優(yōu)選為90%以上、更優(yōu)選為95%以上、進(jìn)一步優(yōu)選為99%以上的多核苷酸。此處，“序列一致性”是指將進(jìn)行序列比較的2個堿基序列排列以使兩個序列的堿基盡可能多地一致(根據(jù)需要插入間隙)，用一致的堿基數(shù)除以全部堿基數(shù)并以百分率表示的數(shù)值。當(dāng)2個序列的堿基數(shù)不同時，除以序列長的一方的堿基數(shù)。計(jì)算序列一致性的軟件是眾所周知的，在互聯(lián)網(wǎng)上免費(fèi)公開。這樣的編碼賴氨酸脫羧酶的基因也可以從本來的宿主以外而取得，還可以通過對從本來的宿主得到的基因進(jìn)行本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的體外突變處理、或者部位特異性突變處理而取得。向棒狀菌群導(dǎo)入編碼賴氨酸脫羧酶的基因(下面有時也稱為“賴氨酸脫羧酶基因”或“LDC基因”，然而如上所述，其并不限于天然的基因)時，賴氨酸脫羧酶基因可以在維持于棒狀菌群染色體外的質(zhì)粒等中得到保持，也可以整合到棒狀菌群的染色體中而得到保持。向棒狀菌群的染色體中整合賴氨酸脫羧酶基因時，可以利用轉(zhuǎn)座子，通過同源重組或其自身的轉(zhuǎn)移能力而將賴氨酸脫羧酶基因?qū)氚魻罹旱娜旧w中。需要說明的是，所導(dǎo)入的基因序列的構(gòu)建或其確認(rèn)方法可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的分子生物學(xué)技術(shù)完成，例如可以參考 Sambrook 等的 Molecular Cloning:A Laboratory Manual, SecondEdition(1989)Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork ；DNA Cloning:A Practical Approach, Volumes I and II(D.N.Glovered.1985)；F.M.Ausubel 等(eds), Current Protocols in Molecular Biology (1994)JohnWilley&Sons, Inc.；PCR Technology: Principles and Application for DNAAmplication, H.Erlich, ed., Stockton Press,等。對上述基因構(gòu)建體向棒狀菌群中的導(dǎo)入方法沒有特別限定，例如，可以通過原生質(zhì)體法(Gene, (1985)，39，ρ.281-286)、電穿孔法(Bio/Technology, (1989)，7，1067-1070)
等導(dǎo)入。需要說明的是，導(dǎo)入外來的LDC基因并具有尸胺產(chǎn)生能力的棒狀菌群如(例如)專利文獻(xiàn)I所述的那樣是公知的(參照下述參考例)。接下來，具體說明在pH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群。棒狀菌群的野生型菌株在pH 5.5以下的BHI瓊脂培養(yǎng)基中無法形成菌落，但是對于培養(yǎng)3天后形成菌落的菌株而言，能夠判斷其為在pH 5.5以下具有抗性的抗性株。需要說明的是，在本發(fā)明中，可以優(yōu)選使用在PH 5.2以下具有抗性的抗性株。作為向棒狀菌群賦予pH 5.5以下的抗性的方法，沒有特別的限制，例如，只要使母株的染色體產(chǎn)生某種突變即可。向染色體中導(dǎo)入突變的技術(shù)有:通過UV、激光等的照射而產(chǎn)生突變的方法；以及使用乙磺酸甲酯(EMS)、亞硝基胍(NTG)、4-二甲氨基苯重氮磺酸鈉(DAPA)等誘變劑的方法等。另外，也可以利用在培養(yǎng)棒狀菌群時產(chǎn)生的自然突變。需要說明的是，作為提供具有生產(chǎn)尸胺的能力、且在PH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群的方法，可以向具有生產(chǎn)尸胺的能力的棒狀菌群賦予所述抗性，另外，也可以向已賦予了此抗性的棒狀菌群以上述方式賦予 生產(chǎn)尸胺的能力。需要說明的是，上述突變誘發(fā)處理在微生物的突變誘發(fā)處理中所采用的公知條件下進(jìn)行即可，例如，UV照射時，照射量取決于與光源的距離，然而通常進(jìn)行10秒 30分鐘的照射。另外，在用上述NTG等各種誘變劑進(jìn)行處理時，處理濃度為(例如)100 μ g/ml 2 μ g/ml,優(yōu)選為300 μ g/ml 1.3 μ g/ml,可以通過(例如)在此濃度的培養(yǎng)液中培養(yǎng)12小時 48小時來進(jìn)行處理。在這種突變誘發(fā)處理后，在pH 5.5以下的BHI瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，并通過對形成了菌落的菌株進(jìn)行篩選，由此能夠獲得在PH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群。需要說明的是，如以下實(shí)施例中具體描述的那樣，由通過NTG處理而得到多個已獲得了在pH 5.5以下的抗性的菌株可以得知，通過突變誘發(fā)處理，可以再現(xiàn)性地制作出在PH 5.5以下具有抗性的抗性株。另外，本發(fā)明中使用的棒狀菌群優(yōu)選為賴氨酸合成能力得到提高的突變株。作為賴氨酸合成能力得到提高的突變株，例如，可以利用解除了因L-賴氨酸或L-蘇氨酸引起的反饋抑制的突變株。作為這些突變株的獲得方法，例如，可以列舉如下方法:對野生型菌株實(shí)施與上述例子相同的突變操作后，以S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸(AEC)抗性為指標(biāo)進(jìn)行選擇，從成為具有L-賴氨酸生產(chǎn)性的突變株而獲得的方法(參考專利文獻(xiàn)I)。需要說明的是，如專利文獻(xiàn)I所述，是否具有AEC抗性可以通過在含有50 μ g/ml AEC的基本瓊脂培養(yǎng)基上于30°C培養(yǎng)24小時后是否發(fā)生增殖來進(jìn)行判斷。
或者，作為向野生型菌株賦予AEC抗性的更優(yōu)選方法，有使用了基因工程技術(shù)的方法。對使用了基因工程技術(shù)的方法沒有特別的限制，有(例如)使用了在棒狀菌群中可以復(fù)制的重組DNA的方法，或者通過同源重組使染色體中的靶基因重組的方法。例如，可以通過具有突變型天冬氨酸激酶基因(有時被稱為“脫敏型AK基因”)而獲得S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸抗性，該突變型天冬氨酸激酶基因是序列號14中所記載的氨基酸序列中的第311位的氨基酸殘基被Thr以外的氨基酸置換而得到的。更優(yōu)選的基因工程技術(shù)為通過將棒狀菌群的染色體中的AK基因同源重組為脫敏型AK基因而重組的方法。另外，關(guān)于脫敏型AK基因，可以利用向AK基因中導(dǎo)入所需突變的眾所周知的技術(shù)方法(例如定點(diǎn)突變)，相應(yīng)的試劑盒也在市場上有售。另外，作為賴氨酸合成能力得到提高的突變株，除了 AEC抗性突變株之外，還可列舉高絲氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株。野生型菌株不具有高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性，但是作為獲得高絲氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株的方法，可以列舉這樣的方法:與上述例子相同，例如，對野生型菌株實(shí)施突變操作后，以高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性為指標(biāo)進(jìn)行選擇，由成為具有L-賴氨酸生產(chǎn)性的突變株而獲得的方法；或者通過基因工程技術(shù)使棒狀菌群的高絲氨酸脫氫酶活性喪失的方法(專利文獻(xiàn)I)。另外，作為向野生型菌株賦予高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性的更優(yōu)選方法，可以列舉通過同源重組向染色體中的高絲氨酸脫氫酶基因(以下簡稱為HOM基因)中插入其它基因的方法等，由此使高絲氨酸脫氫酶活性喪失的方法。對所述其它基因沒有特別的限制。優(yōu)選為LDC基因，更優(yōu)選在野生型菌株中LDC基因能夠組成性表達(dá)的啟動子和基因盒。在本發(fā)明中，通過對所述具有尸胺生產(chǎn)能力、且對2，2_硫代雙(乙胺)具有抗性的棒狀菌群進(jìn)行培養(yǎng)來制造尸胺。作為培養(yǎng)方法，可以使用分批培養(yǎng)、流加培養(yǎng)或連續(xù)培養(yǎng)。在連續(xù)培養(yǎng)時，優(yōu)選通過(例如)日本特開2008-104453號公報中所記載的公知方法進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)。作為用于制造尸胺的培養(yǎng)用培養(yǎng)基，可以使用含有可同化的碳源和氮源及無機(jī)鹽類等的普通的營養(yǎng)培養(yǎng)基·。作為碳源，可以使用例如葡萄糖、果糖、蔗糖、麥芽糖、淀粉水解產(chǎn)物等糖類，乙醇等醇類，醋酸、乳酸、琥珀酸等有機(jī)酸類。作為氮源，可以使用氨，氯化銨、硫酸銨、碳酸銨、醋酸銨等各種無機(jī)和有機(jī)銨鹽類，尿素，其它含氮化合物，以及肉類提取物、酵母提取物、玉米漿、大豆水解產(chǎn)物等含氮有機(jī)物。作為無機(jī)鹽，可以使用磷酸一氫鉀、磷酸二氫鉀、硫酸銨、氯化鈉、硫酸鎂、碳酸鈣等。此外，根據(jù)需要，可以添加生物素、硫胺素、維生素B6等微量營養(yǎng)源。這些微量營養(yǎng)源也可以用肉類提取物、酵母提取物、玉米漿、酪蛋白氨基酸等培養(yǎng)基添加物來替代。另外，也可以向培養(yǎng)用培養(yǎng)基中預(yù)先添加作為尸胺前體的賴氨酸。若向培養(yǎng)用培養(yǎng)基中預(yù)先添加賴氨酸，則棒狀菌群將賴氨酸攝入菌體內(nèi)，賴氨酸脫羧酶以賴氨酸為基質(zhì)將其轉(zhuǎn)變?yōu)槭?，因此能夠提高尸胺的制造效率。向培養(yǎng)用培養(yǎng)基中預(yù)先添加賴氨酸時，作為培養(yǎng)用培養(yǎng)基中的賴氨酸濃度，并沒有特別的限制，但是優(yōu)選不會對棒狀菌群的增殖造成惡劣影響、且不會對賴氨酸脫羧酶造成阻礙的濃度，具體而言優(yōu)選為0.0lM至2M。所添加的賴氨酸優(yōu)選為L-賴氨酸。另外，所添加的賴氨酸可以為游離體，也可以為賴氨酸鹽，但優(yōu)選賴氨酸鹽，作為賴氨酸鹽，優(yōu)選賴氨酸鹽酸鹽或來源于下述二羧酸的賴氨酸.二羧酸鹽，作為更優(yōu)選的具體例子，可以舉出賴氨酸.己二酸鹽、賴氨酸.癸二酸鹽、賴氨酸.1，12-十二烷二羧酸鹽、賴氨酸 琥珀酸鹽、賴氨酸.間苯二甲酸鹽、賴氨酸 對苯二甲酸鹽，作為更優(yōu)選的具體例子，可以舉出賴氨酸.己二酸鹽。對培養(yǎng)條件沒有特別的限制，在振蕩培養(yǎng)、深部通氣攪拌培養(yǎng)等好氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度一般為25°C至42°C，優(yōu)選為28°C至38°C。培養(yǎng)時間通常為I天至6天。對于培養(yǎng)pH的調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)為堿性時優(yōu)選使用氨，調(diào)節(jié)為酸性時優(yōu)選使用鹽酸或二羧酸，更優(yōu)選使用二羧酸。使用這些中和劑將培養(yǎng)PH調(diào)節(jié)到5至8，優(yōu)選最好控制在pH 6.5至7.5。此外，對中和劑的狀態(tài)并沒有限制，以氣體、液體、固體或水溶液形式使用。特別優(yōu)選水溶液。對優(yōu)選用作中和劑的二羧酸沒有特別限定，但是優(yōu)選的是，除了上述2個羧基以夕卜，實(shí)質(zhì)上不存在其它官能團(tuán)的二羧酸。這里所說的官能團(tuán)為在聚酰胺聚合反應(yīng)(作為反應(yīng)條件，例如，反應(yīng)溫度250至270°C，壓力10至20kg/cm2，反應(yīng)時間I至5小時)時，與氨基或羧基等反應(yīng)，造成聚合物的分支、或使聚合物的結(jié)晶度下降(結(jié)晶度80%以下)的反應(yīng)基團(tuán)，例如，氨基或羧基就符合該官能團(tuán)，除此以外，酸性基團(tuán)(磺酸基、磷酸基、酚羥基等)、堿性基團(tuán)(肼基等)、質(zhì)子極性基(羥基等)、具有斷裂性的基團(tuán)(環(huán)氧基、過氧化基等)或者其它反應(yīng)性高的基團(tuán)(異氰酸根基)也符合該官能團(tuán)。另一方面，鹵素取代基、芳香性取代基、醚基、酯基、酰胺基等反應(yīng)性低，不符合這里所說的官能團(tuán)。作為二羧酸，更優(yōu)選的是由下列通式(I)、(2)或(3)所表示的二羧酸。 HOOC- (CH2) m-C00H (I)(通式(I)中，m=0至 16)。[化學(xué)式I]`
權(quán)利要求
1.一種尸胺的制造方法，包括培養(yǎng)具有生產(chǎn)尸胺的能力、且在pH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群具有賴氨酸脫羧酶活性。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群選自由棒狀桿菌屬和短桿菌屬構(gòu)成的組。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的尸胺的制造方法，所述棒狀菌群具有高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性和/或S-(2-氨乙基)-L`-半胱氨酸抗性。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種與利用傳統(tǒng)的發(fā)酵法的制造方法相比，可以更有效且產(chǎn)率更高地制造尸胺的新型尸胺制造方法。所述尸胺的制造方法包括培養(yǎng)具有生產(chǎn)尸胺的能力、且在pH 5.5以下具有抗性的棒狀菌群。優(yōu)選所述棒狀菌群具有賴氨酸脫羧酶活性，另外，優(yōu)選所述棒狀菌群具有高絲氨酸營養(yǎng)缺陷性和/或S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸抗性。
文檔編號C12N15/09GK103249839SQ201180059401
公開日2013年8月14日 申請日期2011年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月8日
發(fā)明者佐佐木七生, 耳塚孝, 澤井秀樹, 澤井健司 申請人:東麗株式會社