專利名稱：基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種測試方法，具體的涉及一種基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法。
背景技術(shù)：
人類的生活環(huán)境中存在著大量肉眼看不見的微生物，包括各種各樣的細菌和真菌。在一般情況下，人們皮膚上的一些常駐菌起著保護皮膚免受致病菌危害的作用，但一旦機體免疫力下降，加上脫落的皮屑、分泌的汗液以及適宜的溫濕度又能為細菌的繁殖提供良好的環(huán)境，它們中的少量致病菌就會大量繁殖，造成皮膚上菌群生態(tài)平衡的失調(diào)，侵入皮膚引起疾病。皮革制品作為消費量最大的革制品，由于汗和灰塵等原因，更利于真菌的滋生，因此，皮革制品像紡織品和公用設(shè)施等一樣，在使用過程中也需要賦予抗菌性，以抑制細菌等的生長，阻斷疾病的傳播。目前，皮革制品的抗菌性能研究較少，同時缺少較好的抑菌效果檢測方法。但隨著人們生活水平的提高，對皮革產(chǎn)品不僅要求防水、防污、耐光可洗，也像纖維制品一樣，要求賦予皮革抗菌功能。

發(fā)明內(nèi)容
為克服現(xiàn)有技術(shù)中不足，本發(fā)明的目的在于提供一種基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，該檢測方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，具有較高應(yīng)用價值。為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，達到上述技術(shù)效果，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其包括以下步驟步驟I)制備試樣將樣品剪成圓形，正反兩面均在紫外下照射30min滅菌；步驟2)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養(yǎng)基用常規(guī)培養(yǎng)基配制方法配制固體培養(yǎng)基，按2/100000加入2，3，5_氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121 °C，滅菌20min ；步驟3)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑半固體培養(yǎng)基用常規(guī)培養(yǎng)基配制方法配制半固體培養(yǎng)基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121 °C，滅菌20min ；步驟4)制備接種菌懸液取培養(yǎng)好的菌懸液各O. 5ml加入4. 5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至KT1的濃度，充分混勻后取 ο—1濃度的菌懸液O. 5ml加入另一只4. 5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至10_2的濃度，依次類推，直至稀釋至10_5的濃度的接種菌懸液；步驟5)檢測操作5.1)向已滅好菌的平皿中倒入2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑固體培養(yǎng)基60 80ml,待凝固時，無菌鑷子放入無菌玻璃杯，放入試樣，功能面朝下，用鑷子輕壓試樣，使其緊貼于培養(yǎng)基表面；每樣均做4 6個平行；5. 2)取制備好的接種菌懸液O. Iml加到試樣表面，37°C ±1°C培養(yǎng)Ih ；5. 3)取O. 3ml O. 6ml半固體2，3，5_氯化三苯基四氮唑培養(yǎng)基加入試樣表面，將
試樣均勻覆蓋，蓋上皿蓋；5.4)倒置平皿,于生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌37 °C ± 1°C培養(yǎng)18 24h ;白色念珠菌28± 1°C培養(yǎng)24 48h ；5. 5)于體式顯微鏡或顯微鏡下觀察菌落生長情況；步驟6)評價與報告試樣抑菌率按下式(I)計算
權(quán)利要求
1.基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其特征在于，包括以下步驟步驟I)制備試樣將樣品剪成圓形，正反兩面均在紫外下照射30min滅菌；步驟2)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養(yǎng)基用常規(guī)培養(yǎng)基配制方法配制固體培養(yǎng)基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑， 后塞上棉塞，121 °C，滅菌20min ；步驟3)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑半固體培養(yǎng)基用常規(guī)培養(yǎng)基配制方法配制半固體培養(yǎng)基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121 °C，滅菌20min ；步驟4)制備接種菌懸液取培養(yǎng)好的菌懸液各O. 5ml加入4. 5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至KT1的濃度， 充分混勻后取KT1濃度的菌懸液O. 5ml加入另一只4. 5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至10_2的濃度，依次類推，直至稀釋至10_5的濃度的接種菌懸液；步驟5)檢測操作5.I)向已滅好菌的平皿中倒入2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養(yǎng)基60 80ml，待凝固時，無菌鑷子放入無菌玻璃杯，放入試樣，功能面朝下，用鑷子輕壓試樣，使其緊貼于培養(yǎng)基表面；每樣均做4 6個平行；5.2)取制備好的接種菌懸液O. Iml加到試樣表面，37°C ±1°C培養(yǎng)Ih ；5.3)取O. 3ml O. 6ml半固體2，3，5-氯化三苯基四氮唑培養(yǎng)基加入試樣表面，將試樣均勻覆蓋，蓋上皿蓋；5.4)倒置平皿,于生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌 37 0C ± 1°C培養(yǎng)18 24h ;白色念珠菌28± 1°C培養(yǎng)24 48h ；5.5)于體式顯微鏡或顯微鏡下觀察菌落生長情況；步驟6)評價與報告試樣抑菌率按下式(I)計算Xa-XbY=-X 100%Xa X(I)式中=Y為抑菌率，100% ；Xa為未經(jīng)抗菌處理試樣菌落數(shù)平均值，單位為cfu ；Xb為抗菌處理試樣菌落數(shù)平均值,單位為cfu。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其特征在于， 所述菌懸液的制備方法如下從保存于4°C冰箱的菌種斜面中取一接種環(huán)菌，在平板培養(yǎng)基上劃線，37°C ±1°C，培養(yǎng)18 24h ;取液體培養(yǎng)基20ml放入IOOml三角瓶中；用接種環(huán)從已培養(yǎng)18 24h的平皿中挑取一個典型的菌落，接種到液體培養(yǎng)基中，37°C ± 1°C，130r/ m振蕩培養(yǎng)18 20h，即為菌懸液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其包括以下步驟1)制備試樣；2)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養(yǎng)基；3)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑半固體培養(yǎng)基；4)制備接種菌懸液；5)檢測操作；6)評價與報告。本發(fā)明的基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法解決了菌落較小、樣品不透明、不易觀察和記錄的缺點；檢測方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，具有較高應(yīng)用價值。
文檔編號C12Q1/18GK102586396SQ20121005632
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月6日
發(fā)明者任信, 朱小衛(wèi), 朱建華 申請人:中華人民共和國吳江出入境檢驗檢疫局