專利名稱：蠶蛹生產(chǎn)α-亞麻酸、蠶蛹蛋白和蠶蛹多肽的生產(chǎn)技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于動(dòng)物有效成分提取領(lǐng)域，涉及一種蠶蛹α -亞麻酸和蠶蛹蛋白的提取方法以及蠶蛹蛋白水解物的制備方法。
背景技術(shù)：
α -亞麻酸(Linolenic acid)，學(xué)名為全順式-9,12,15-十八碳三烯酸(cis9,12, 15-octadecatrienoic acid),分子式為C18H3tlO2,是一種保持人體健康的必需脂肪酸。α -亞麻酸在體內(nèi)參與磷脂的合成代謝，可轉(zhuǎn)化為人體必需的生命活性因子DHA與ΕΡΑ。大量基礎(chǔ)研究、流行病調(diào)查、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、人體實(shí)驗(yàn)及臨床觀察表明，α -亞麻酸具有多方面的生理作用，為國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界及營(yíng)養(yǎng)學(xué)界所公認(rèn)。其功能包括增長(zhǎng)智力，保護(hù)視力，降低血脂、膽固醇，延緩衰老，抗過(guò)敏，抑制癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移等。Ct -亞麻酸在人體內(nèi)不能合成,必需從體外攝取。人體一旦長(zhǎng)期缺乏α-亞麻酸，將會(huì)導(dǎo)致腦器官、視覺器官的功能衰老，并引起高血壓、高血脂及癌癥的發(fā)生。對(duì)α-亞麻酸的特需人群主要包括高血脂人群、青少年兒童及嬰兒、孕婦及哺乳期婦女。目前，α-亞麻酸尚未實(shí)現(xiàn)大規(guī)模人工合成，其主要的生產(chǎn)方式是從富含α-亞麻酸的植物中提取，這類植物包括唇形科(Labi, atae)、亞麻科(Linceae)、胡桃科 (Juglandaceae)、十字花科(Cruciferae)等的部分植物,具有代表性的植物有亞麻和紫蘇等。歐洲人在80年代發(fā)現(xiàn)月見草油中含有7. 8%的α-亞麻酸.使月見草油身價(jià)陡增。90 年代初.黑加侖油被發(fā)現(xiàn)含有13%的α-亞麻酸，也成為醫(yī)藥行業(yè)的極受歡迎的產(chǎn)品。美國(guó)巴林公司經(jīng)反復(fù)提純，獲得57%的α-亞麻酸制品，主要用途為降血脂和抗血栓。日本油脂公司開發(fā)的α-亞麻酸制品主要用于抗癌、抗過(guò)敏、控制糖尿病及并發(fā)癥。韓國(guó)以α-亞麻酸為主進(jìn)行防治循環(huán)系統(tǒng)病癥的藥物研究也剛剛興起。事實(shí)上，部分動(dòng)物中也含有豐富的α -亞麻酸，如以蠶蛹為原料提煉的蠶蛹油中含有75%的不飽和脂肪酸，其中α-亞麻酸占30%以上。因此，蠶蛹也可以作為提取α -亞麻酸的好原料。國(guó)內(nèi)的蠶蛹α-亞麻酸產(chǎn)品普遍存在含量偏低的缺點(diǎn)，影響了 α-亞麻酸功效的發(fā)揮，因此國(guó)內(nèi)的研究方向重點(diǎn)集中在提高α-亞麻酸含量上。如何在生產(chǎn)規(guī)模上制備出純度高達(dá)85%以上的蠶蛹α-亞麻酸產(chǎn)品，是目前的研究重點(diǎn)之一。此外，蠶蛹的蛋白質(zhì)含量十分豐富，脫脂蛹中粗蛋白含量可達(dá)77%。蠶蛹蛋白含磷量高，且主要為球蛋白，可部分溶解于水，人體吸收利用率高。蠶蛹蛋白經(jīng)水解制成蠶蛹蛋白水解物，含有活性多肽和人體生長(zhǎng)發(fā)育所需的十八種氨基酸， 八種必需氨基酸占總氨基酸40%以上，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與雞蛋、牛奶媲美，十八種氨基酸的配比和必需氨基酸的含量均符合WH0/FA0所規(guī)定的理想蛋白質(zhì)模式。蠶蛹蛋白及其水解物可作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、保健品原料和食品原料，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一套充分利用蠶蛹原料、制作成本低、綠色環(huán)保的制備工藝，內(nèi)容包括采用尿素包埋法和分子蒸餾技術(shù)制備含量在85%以上的α -亞麻酸，經(jīng)脫色、除臭工藝精制蠶蛹蛋白，并將蠶蛹蛋白水解制取小分子蠶蛹多肽。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的本技術(shù)以新鮮蠶蛹、干燥蠶蛹或繅絲后蠶蛹為原料，采用溶劑提取出蠶蛹毛油，經(jīng)過(guò)除雜后采用尿素包埋法和分子蒸餾技術(shù)制取含量在85%以上的α -亞麻酸以脫脂的蠶蛹粉為原料精制出蠶蛹蛋白，再經(jīng)過(guò)酶水解后制成蠶蛹多肽，其特征在α-亞麻酸提取、蠶蛹蛋白提取和蠶蛹多肽制取工序，具體操作如下La-亞麻酸提取工序4)原材料預(yù)處理當(dāng)原料為新鮮蠶蛹、繅絲后含水蠶蛹時(shí)，首先將蠶蛹在80°C的烘箱中干燥，除去其中可見雜物后，用粉碎機(jī)粉碎，制成蠶蛹粉，過(guò)40目篩備用。5)蠶蛹毛油浸提將預(yù)處理后的蠶蛹粉置于提取罐中，加入4 10倍量的有機(jī)溶劑，在溫度為50 80°C的情況下，浸提時(shí)間為I 3小時(shí)，浸提次數(shù)為2 4次。6)蠶蛹毛油精制浸提步驟結(jié)束后，過(guò)濾收集、合并濾液，回收溶劑，得到蠶蛹毛油。 將蠶蛹毛油放入分離罐中，加入I 3倍量的稀堿溶液，常溫?cái)嚢鐸 3小時(shí)，靜置，待油水分離后從分離罐下方放出稀堿溶液，得到精制蠶蛹油。4)蠶蛹脂肪酸的制備稱取精制蠶蛹油I份，加入4.0%氫氧化鈉乙醇溶液5份，置于反應(yīng)罐中，于60 75°C攪拌反應(yīng)I 3小時(shí)，靜置至室溫，加水至溶液澄清透明，用鹽酸調(diào)pH為2 3，于分離罐中用3份正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性。油層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后于40 50°C回收正己烷，即得混合脂肪酸。5)尿素包埋將3 5尿素加入8 12份甲醇中，65°C水浴中攪拌使溶解，加入一份脂肪酸，攪拌60分鐘混勻，取出冷至室溫。在-10 _25°C靜置包合16 36小時(shí)，取出后迅速減壓抽濾，濾液用10%鹽酸調(diào)至pH3.0，轉(zhuǎn)移至分離罐中，用2 3倍量正己烷萃取， 棄水層，水洗油層至中性，油層用無(wú)水硫酸鈉脫水后，于40 50°C回收正己烷，即得純度達(dá) 70%以上的a-亞麻酸。6)分子蒸餾使用刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度95°C 110°C，操作壓力O. 3Pa 2. OPa，進(jìn)料溫度60°C，進(jìn)料速率85mL/h 95mL/h，刮膜器轉(zhuǎn)速 150r/min。經(jīng)過(guò)四級(jí)分子蒸懼,可以將α -亞麻酸的純度由原來(lái)的70 75%提純至85 95%。2.蠶蛹蛋白提純工序取一份脫脂后的蠶蛹粉，加入10份pH值為8. 5的堿性溶液，在65 75°C加熱攪拌5 10h。提取結(jié)束后，過(guò)濾，得蠶蛹蛋白溶液。用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4. 5，此時(shí)立即出現(xiàn)絮狀沉淀，置于4 10°C中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀，加入2倍量pH6. O的緩沖液，加入雙氧水，在60 70°C攪拌2 4小時(shí)后，加熱煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用稀鹽酸調(diào)節(jié)至PH 4.5，置于4 101中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀、干燥，得精制脫臭蠶蛹蛋白。3.蠶蛹蛋白水解工序取一份精制脫臭蠶蛹蛋白，加入10份緩沖液，攪拌均勻后再加入蛋白水解酶，在 40 55°C保溫?cái)嚢? 6小時(shí)。水解反應(yīng)結(jié)束后加熱煮沸10分鐘，冷卻到室溫后過(guò)濾、濃縮、干燥，得水溶性蠶蛹多肽粉。以上所述的原材料，是新鮮蠶蛹、干燥蠶蛹以及繅絲后的蠶蛹。
以上所述的蠶蛹毛油浸提工藝中使用的有機(jī)溶劑，是石油醚和丙酮的混合物。以上所述的蠶蛹毛油精制步驟中，所用的稀堿溶液為濃度為O. I O. 3mol/L的氫氧化鈉、碳酸鈉和碳酸氫鈉溶液。以上所述的分子蒸餾步驟中，使用的是刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式， 蒸餾溫度95°C 110°C，操作壓力O. 3Pa 2. OPa，進(jìn)料速率85mL/h 95mL/h。以上所述的蠶蛹蛋白提純工序中，使用的pH8. 5的溶液包括Tris-鹽酸緩沖液、 Tris-甘氨酸緩沖液、Tris-醋酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液。以上所述的蠶蛹蛋白提純工序中，雙氧水的終濃度為2. O 10. 0%。以上所述的蠶蛹蛋白水解工序中，使用的蛋白酶包括胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶。以上所述的提取罐，包括搪瓷提取罐、不銹鋼提取罐、搪玻璃反應(yīng)罐。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果本發(fā)明采用了尿素包埋法和分子蒸餾法相結(jié)合提純蠶蛹α -亞麻酸的辦法，工藝流程易于掌握，提取得率高，蠶蛹α -亞麻酸的純度能達(dá)到85 95%，產(chǎn)品色澤淺，無(wú)特殊異味。以脫脂后的蠶蛹粉為原料，用簡(jiǎn)單的工藝提取、精制蠶蛹蛋白，并進(jìn)一步將其水解成小分子蠶蛹多肽。本發(fā)明提供了一種充分的、全面的利用蠶蛹原料的方法，非常適合于大規(guī)模生產(chǎn)，產(chǎn)品包括蠶蛹α-亞麻酸、蠶蛹蛋白和蠶蛹多肽，可作為食品、保健品、營(yíng)養(yǎng)添加劑的原料。


圖I :為本發(fā)明工藝流程示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，具體實(shí)施例僅是對(duì)本發(fā)明作出更清楚的說(shuō)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例I取干燥后的蠶蛹，除去其中可見雜物后，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40目篩。取10份重量的蠶蛹粉于不銹鋼提取罐中，加入60份重量的石油醚，迅速加熱升溫，將溫度控制在65 70°C，攪拌2小時(shí)。提取結(jié)束后過(guò)濾取濾液，重復(fù)一次浸提步驟，合并兩次濾液。濾液在溶劑回收器中回收溶劑，得到蠶蛹毛油；濾渣在50°C烘箱中烘干、備用。將蠶蛹毛油放入分離罐中，加入2倍量的O. lmol/L氫氧化鈉溶液，常溫?cái)嚢?小時(shí)，靜置待油水分離后從分離罐下方放出稀堿溶液，得到精制蠶蛹油。稱取精制蠶蛹油I份，加入4. O %氫氧化鈉乙醇溶液5份，置于反應(yīng)罐中，于70 75°C攪拌反應(yīng)2小時(shí)，靜置至室溫，加水至溶液澄清透明，用鹽酸調(diào)pH為2 3，于分離罐中用3份正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性。油層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后于40 50°C回收正己烷，即得混合脂肪酸。將3尿素加入10份甲醇中，65°C水浴中攪拌使溶解，加入一份混合脂肪酸，攪拌60 分鐘混勻，取出冷至室溫。在_20°C靜置包合24小時(shí)，取出后迅速減壓抽濾，濾液用10%鹽酸調(diào)至PH3.0，轉(zhuǎn)移至分離罐中，用2倍量正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性，油層用無(wú)水硫酸鈉脫水后，于40 50°C回收正己烷，即得純度達(dá)70%以上的α -亞麻酸。使用刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度105°C，操作壓力
0.8Pa I. 5Pa，進(jìn)料溫度60°C，進(jìn)料速率95mL/h，刮膜器轉(zhuǎn)速150r/min。經(jīng)過(guò)四級(jí)分子蒸餾，得到純度在85%以上的α-亞麻酸。取一份脫脂蠶蛹粉，加入10份pH值為8. 5的Tris-鹽酸溶液，在70 75°C加熱攪拌6h。提取結(jié)束后，過(guò)濾，得蠶蛹蛋白溶液。用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4.5，置于4 101中冰箱冷藏室靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀，加入2倍量pH6. O的磷酸緩沖液，再加入雙氧水，使之終濃度為3. 0%，在65 70°C攪拌4小時(shí)后，加熱煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用稀鹽酸調(diào)節(jié)至PH 4. 5，置于4 10°C冰箱冷藏室中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀、干燥，得精制脫臭蠶蛹蛋白。取一份精制脫臭蠶蛹蛋白，加入10份pH8. O的磷酸緩沖液，攪拌均勻后再加入
1.0%胰蛋白酶(活力大于2000U/mg)，在45 50°C保溫?cái)嚢?小時(shí)。水解反應(yīng)結(jié)束后加熱煮沸10分鐘，冷卻到室溫后過(guò)濾，取濾液濃縮、干燥，得水溶性蠶蛹多肽粉。實(shí)施例2取新鮮蠶蛹，在80°C的烘箱中烘干，除去其中可見雜物后，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40目篩。取10份重量的蠶蛹粉于不銹鋼提取罐中，加入60份重量的提取溶劑(石油醚丙酮 =I I)，迅速加熱升溫，將溫度控制在65 70°C，攪拌2小時(shí)。提取結(jié)束后過(guò)濾取濾液， 重復(fù)一次浸提步驟，合并兩次濾液。濾液在溶劑回收器中回收溶劑，得到蠶蛹毛油；濾渣在 50°C烘箱中烘干、備用。將蠶蛹毛油放入分離罐中，加入2倍量的O. lmol/L碳酸鈉溶液，常溫?cái)嚢?小時(shí)，靜置待油水分離后從分離罐下方放出稀堿溶液，得到精制蠶蛹油。稱取精制蠶蛹油I份，加入4. O %氫氧化鈉乙醇溶液5份，置于反應(yīng)罐中，于70 75°C攪拌反應(yīng)2小時(shí)，靜置至室溫，加水至溶液澄清透明，用鹽酸調(diào)pH為2 3，于分離罐中用3份正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性。油層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后于40 50°C回收正己烷，即得混合脂肪酸。將4尿素加入10份甲醇中，65°C水浴中攪拌使溶解，加入一份混合脂肪酸，攪拌60 分鐘混勻，取出冷至室溫。在_20°C靜置包合24小時(shí)，取出后迅速減壓抽濾，濾液用10%鹽酸調(diào)至PH3.0，轉(zhuǎn)移至分離罐中，用2倍量正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性，油層用無(wú)水硫酸鈉脫水后，于40 50°C回收正己烷，即得純度達(dá)70%以上的α -亞麻酸。使用刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度105°C，操作壓力
0.5Pa I. 8Pa，進(jìn)料溫度60°C，進(jìn)料速率90mL/h，刮膜器轉(zhuǎn)速150r/min。經(jīng)過(guò)四級(jí)分子蒸餾，得到純度在85%以上的α-亞麻酸。取一份脫脂蠶蛹粉，加入10份pH值為8. 5的Tris-甘氨酸溶液，在70 75°C加熱攪拌6h。提取結(jié)束后，過(guò)濾，得蠶蛹蛋白溶液。用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4.5，置于4 10°〇中冰箱冷藏室靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀，加入2倍量pH6. O的磷酸緩沖液，再加入雙氧水，使之終濃度為4. 0%，在65 70°C攪拌4小時(shí)后，加熱煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用稀鹽酸調(diào)節(jié)至PH 4. 5，置于4 10°C冰箱冷藏室中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀、干燥，得精制脫臭蠶蛹蛋白。取一份精制脫臭蠶蛹蛋白，加入10份pH8. O的磷酸緩沖液，攪拌均勻后再加入
1.5%菠蘿蛋白酶(活力大于2000U/mg)，在45 50°C保溫?cái)嚢?小時(shí)。水解反應(yīng)結(jié)束后加熱煮沸10分鐘，冷卻到室溫后過(guò)濾，取濾液濃縮、干燥，得水溶性蠶蛹多肽粉。實(shí)施例3取繅絲后蠶蛹，在80°C的烘箱中烘干，除去其中可見雜物后，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)40 目篩。取10份重量的蠶蛹粉于不銹鋼提取罐中，加入60份重量的提取溶劑(丙酮乙醇 =I I)，迅速加熱升溫，將溫度控制在65 70°C，攪拌2小時(shí)。提取結(jié)束后過(guò)濾取濾液， 重復(fù)一次浸提步驟，合并兩次濾液。濾液在溶劑回收器中回收溶劑，得到蠶蛹毛油；濾渣在 50°C烘箱中烘干、備用。將蠶蛹毛油放入分離罐中，加入2倍量的O. lmol/L碳酸鈉-氫氧化鈉溶液，常溫?cái)嚢?小時(shí)，靜置待油水分離后從分離罐下方放出稀堿溶液，得到精制蠶蛹油。稱取精制蠶蛹油I份，加入4. O %氫氧化鈉乙醇溶液5份，置于反應(yīng)罐中，于70 75°C攪拌反應(yīng)2小時(shí)，靜置至室溫，加水至溶液澄清透明，用鹽酸調(diào)pH為2 3，于分離罐中用3份正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性。油層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后于40 50°C回收正己烷，即得混合脂肪酸。將4尿素加入12份甲醇中，65°C水浴中攪拌使溶解，加入一份混合脂肪酸，攪拌60 分鐘混勻，取出冷至室溫。在_20°C靜置包合36小時(shí)，取出后迅速減壓抽濾，濾液用10%鹽酸調(diào)至PH3.0，轉(zhuǎn)移至分離罐中，用2倍量正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性，油層用無(wú)水硫酸鈉脫水后，于40 50°C回收正己烷，即得純度達(dá)70%以上的α -亞麻酸。使用刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度110°C，操作壓力
O.3Pa I. OPa,進(jìn)料溫度60°C，進(jìn)料速率85mL/h，刮膜器轉(zhuǎn)速150r/min。經(jīng)過(guò)四級(jí)分子蒸餾，得到純度在85%以上的α-亞麻酸。取一份脫脂蠶蛹粉，加入10份pH值為8. 5的硼酸鹽緩沖液，在70 75°C加熱攪拌6h。提取結(jié)束后，過(guò)濾，得蠶蛹蛋白溶液。用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4.5，置于4 101中冰箱冷藏室靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀，加入2倍量pH6. O的磷酸緩沖液，再加入雙氧水，使之終濃度為5. 0%，在65 70°C攪拌4小時(shí)后，加熱煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4. 5，置于4 10°C冰箱冷藏室中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀、 干燥，得精制脫臭蠶蛹蛋白。取一份精制脫臭蠶蛹蛋白，加入10份pH8. O的磷酸緩沖液，攪拌均勻后再加入3% 胰酶(活力大于2000U/g)，在45 50°C保溫?cái)嚢?小時(shí)。水解反應(yīng)結(jié)束后加熱煮沸10分鐘，冷卻到室溫后過(guò)濾，取濾液濃縮、干燥，得水溶性蠶蛹多肽粉。 實(shí)施例制備產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)
權(quán)利要求
1.一種蠶蛹的綜合利用方法，以蠶蛹為原料，使用有機(jī)溶劑提取出蠶蛹毛油，精制后采用尿素包埋和分子蒸餾相結(jié)合的技術(shù)，提取出純度達(dá)到85%以上的蠶蛹α -亞麻酸，再以脫脂蠶蛹粉為原料制取蠶蛹蛋白并進(jìn)一步加工成蠶蛹多肽。其特征在α-亞麻酸提取、蠶蛹蛋白提取和水解工序，具體操作如下.1)原材料預(yù)處理當(dāng)原料為新鮮蠶蛹、繅絲后含水蠶蛹時(shí)，首先將蠶蛹在80°C的烘箱中干燥，除去其中可見雜物后，用粉碎機(jī)粉碎，制成蠶蛹粉，過(guò)40目篩備用。.2)蠶蛹毛油浸提將預(yù)處理后的蠶蛹粉置于提取罐中，加入4 10倍量的有機(jī)溶劑，在溫度為50 80°C的情況下，浸提時(shí)間為I 3小時(shí)，浸提次數(shù)為2 4次。.3)蠶蛹毛油精制浸提步驟結(jié)束后，過(guò)濾收集、合并濾液，回收溶劑，得到蠶蛹毛油。將蠶蛹毛油放入分離罐中，加入I 3倍量的稀堿溶液，常溫?cái)嚢鐸 3小時(shí)，靜置，待油水分離后從分離罐下方放出稀堿溶液，得到精制蠶蛹油。.4)蠶蛹脂肪酸的制備稱取精制蠶蛹油I份，加入4.0%氫氧化鈉乙醇溶液5份，置于反應(yīng)罐中，于60 75°C攪拌反應(yīng)I 3小時(shí)，靜置至室溫，加水至溶液澄清透明，用鹽酸調(diào)pH 為2 3，于分離罐中用3份正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性。油層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后于40 50°C回收正己烷，即得混合脂肪酸。.5)尿素包埋將3 5尿素加入8 12份甲醇中，65°C水浴中攪拌使溶解，加入一份脂肪酸，攪拌60分鐘混勻，取出冷至室溫。在-10 -25°C靜置包合16 364時(shí)，取出后迅速減壓抽濾，濾液用10%鹽酸調(diào)至pH3. 0，轉(zhuǎn)移至分離罐中，用2 3倍量正己烷萃取，棄水層，水洗油層至中性，油層用無(wú)水硫酸鈉脫水后，于.40 50°C回收正己烷，即得純度達(dá)70% 以上的α-亞麻酸。.6)分子蒸餾使用刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度95°C 110°C，操作壓力O. 3Pa 2. OPa,進(jìn)料溫度60°C，進(jìn)料速率.85mL/h .95mL/h，刮膜器轉(zhuǎn)速150r/min。 經(jīng)過(guò)四級(jí)分子蒸餾，可以將α -亞麻酸的純度由原來(lái)的70 75%提純至85 95%。.7)蠶蛹蛋白提純?nèi)∫环菝撝蟮男Q蛹粉，加入10份pH值為8.5的堿性溶液，在65 75°C加熱攪拌5 10h。提取結(jié)束后，過(guò)濾，得蠶蛹蛋白溶液。用稀鹽酸調(diào)節(jié)至pH 4. 5，此時(shí)立即出現(xiàn)絮狀沉淀，置于4 10°C中靜置12小時(shí)后，用濾布過(guò)濾，收集沉淀，加入2倍量 PH6. O的緩沖液，加入雙氧水，在60 70°C攪拌.2 4小時(shí)后，加熱煮沸10分鐘，重復(fù)上述調(diào)節(jié)pH、靜置、過(guò)濾、收集沉淀步驟，干燥后得精制脫臭蠶蛹蛋白。.8)蠶蛹蛋白水解取一份精制脫臭蠶蛹蛋白，加入10份緩沖液，攪拌均勻后再加入蛋白水解酶，在40 55°C保溫?cái)嚢? 6小時(shí)。水解反應(yīng)結(jié)束后加熱煮沸10分鐘，冷卻到室溫后過(guò)濾、濃縮、干燥，得水溶性蠶蛹多肽粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，其特征在于原材料是新鮮蠶蛹、干燥蠶蛹以及繅絲后的蠶蛹。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，蠶蛹毛油浸提工藝中使用的有機(jī)溶劑，是乙醇、石油醚、丙酮及其混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，蠶蛹毛油精制步驟中，所用的稀堿溶液為濃度為O. I O. 3mol/L的氫氧化鈉、碳酸鈉和碳酸氫鈉溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，分子蒸餾步驟中，使用的是刮膜式分子蒸餾設(shè)備，采用多級(jí)操作方式，蒸餾溫度95°C 110°C，操作壓力.O. 3Pa 2. OPa，進(jìn)料速率 85mL/h 95mL/h。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，蠶蛹蛋白提純工序中，使用的pH8.5的溶液包括Tris-鹽酸緩沖液、Tris-甘氨酸緩沖液、Tris-醋酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，蠶蛹蛋白提純工序中，雙氧水的終濃度為2. O 10. 0%。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，蠶蛹蛋白水解工序中，使用的蛋白酶包括胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蠶蛹的綜合利用方法，提取罐包括搪瓷提取罐、不銹鋼提取罐、搪玻璃反應(yīng)罐。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蠶蛹的綜合利用方法，以新鮮蠶蛹、干燥蠶蛹、繅絲后蠶蛹為原料，使用有機(jī)溶劑提取出蠶蛹毛油，精制后采用尿素包埋和分子蒸餾相結(jié)合的技術(shù)，提取出純度達(dá)到85％以上的蠶蛹α-亞麻酸，再以脫脂蠶蛹粉為原料制取蠶蛹蛋白并進(jìn)一步加工成水溶性蠶蛹多肽。本制備方法生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，對(duì)原料和能源的利用率高，生產(chǎn)成本低，適合于大規(guī)模生產(chǎn)。產(chǎn)品可以滿足日化品、食品、保健品、藥品等行業(yè)的需求，具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A23J1/00GK102604747SQ201210062890
公開日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月12日
發(fā)明者王玉海, 秦志喧, 蔣全英, 邱英華 申請(qǐng)人:南寧創(chuàng)新科技醫(yī)藥技術(shù)有限公司