專利名稱：一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，具體涉及一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法。
背景技術(shù)：
普魯蘭多糖是微生物胞外多糖中具有重要應(yīng)用價值的一類多糖，具有很好的成膜、成纖維、阻氣粘接性而且五毒，易加工。已被廣泛的應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、輕工、化工、和石油領(lǐng)域。 淀粉廢水是生產(chǎn)重要工業(yè)原料淀粉時不可避免的副產(chǎn)物，這些廢水中主要有溶解性淀粉，少量蛋白質(zhì)，有機酸，礦物質(zhì)及少量的油脂。若將這些廢水直接廢棄排放，不僅帶來嚴重環(huán)境問題，也是自然資源的巨大浪費。目前文獻報道的發(fā)酵方法發(fā)酵液組成物較多并且均需要用酶將淀粉水解，水解步驟有一步或兩步，才可得到較高轉(zhuǎn)化率。此外目前高產(chǎn)率的菌株在合成胞外多糖同時會產(chǎn)生色素污染多糖，后期需采用多步脫色及過濾手段除色素，這些因素都促使產(chǎn)品成本上升。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，原料易得，培養(yǎng)基組分優(yōu)化簡單，即減少多糖生產(chǎn)成本，又可解決由于廢棄淀粉廢水而帶來得環(huán)境問題。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，包括有以下步驟一、取 10 25g/L 的淀粉廢水，加入 2 8g/LKH2P04、0. I 0. 3g/L(NH4)2S04、I 3g/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液；二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫25 30°C轉(zhuǎn)速100 160r/min，培養(yǎng)40 80h得種子菌液；三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫25 30°C轉(zhuǎn)速100 150r/min，培養(yǎng)90 130h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物；四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在2 6°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。本發(fā)明與以往技術(shù)相比具有以下優(yōu)點本發(fā)明由于首先取一定量的淀粉廢水，加入適量氯化鈉等經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液，與現(xiàn)有技術(shù)相比，此步驟省去用酶水解淀粉的工藝；其次由于菌株產(chǎn)色素能力低，用乙醇從發(fā)酵液中沉淀得到的粗糖再純化時不需要過多除色素的步驟。經(jīng)本發(fā)明培養(yǎng)獲得一株天然產(chǎn)色素能力低且產(chǎn)率高的菌株，它減少產(chǎn)品的脫色步驟使得成本降低。本發(fā)明中碳源利用土豆淀粉廢水，由于其自身的特點將培養(yǎng)液組成優(yōu)化仍可達到60%以上的產(chǎn)率，如此節(jié)約 了產(chǎn)品成本，同時也解決由于廢棄而帶來的環(huán)境問題。此發(fā)酵方法無需酶水解淀粉，使生產(chǎn)的工藝簡單化。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。實施例一一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，包括有以下步驟一、取 18g/L 的淀粉廢水，加入 4g/LKH2P04、0. 2g/L (NH4) 2S04、2g/LNaCL 經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液；二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫28°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)60h得種子菌液；三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫28°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)120h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物；四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在4°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。實施例二一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，包括有以下步驟一、取 25g/L 的淀粉廢水，加入 7g/LKH2P04、0. 3g/L (NH4) 2S04、3g/LNaCL 經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液；二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫25°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)80h得種子菌液；三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫30°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)130h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物；四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在6°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。實施例三一、取 10g/L 的淀粉廢水，加入 2g/LKH2P04、0. lg/L (NH4) 2S04、lg/LNaCL 經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液；二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫30°C轉(zhuǎn)速100r/min，培養(yǎng)40h得種子菌液；三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫25°C轉(zhuǎn)速100r/min，培養(yǎng)90h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物；四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在2°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。
權(quán)利要求
1.一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，其特征在于，包括有以下步驟 一、取10 25g/L 的淀粉廢水，加入 2 8g/LKH3P04、0. I 0. 3g/L(NH4)2S04、I 3g/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液； 二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫25 30°C轉(zhuǎn)速100 160r/min，培養(yǎng)40 80h得種子菌液； 三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫25 30°C轉(zhuǎn)速100 150r/min，培養(yǎng)90 130h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物； 四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在2 6°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，其特征在于，包括以下步驟 一、取18g/L的淀粉廢水，加入4g/LKH2P04、0.2g/L (NH4) 2S04、2g/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液； 二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫28°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)60h得種子菌液； 三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫28°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)120h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物； 四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在4°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，其特征在于，包括以下步驟 一、取25g/L的淀粉廢水，加入7g/LKH2P04、0.3g/L (NH4) 2S04、3g/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液； 二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫25°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)80h得種子菌液； 三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫30°C轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)130h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物； 四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在6°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，其特征在于，包括以下步驟 一、取10g/L的淀粉廢水，加入2g/LKH2P04、0.lg/L(NH4)2S04、lg/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液； 二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其叢瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫30°C轉(zhuǎn)速100r/min，培養(yǎng)40h得種子菌液； 三、以30%體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫25°C轉(zhuǎn)速100r/min，培養(yǎng)90h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物； 四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，在2°C條件下靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物， 干燥可得白色或淡黃色多糖粗品(無蛋白質(zhì))。
全文摘要
一種利用土豆淀粉廢水發(fā)酵普魯蘭多糖的方法，其特征在于，包括有以下步驟一、取10～25g/L的淀粉廢水，加入2～8g/LKH2PO4、0.1～0.3g/L(NH4)2SO4、1～3g/LNaCL經(jīng)高溫滅菌成為培養(yǎng)液；二、培養(yǎng)獲得一株天然色素能力低的菌株，將其從瓊脂斜面上轉(zhuǎn)接到250ml的錐形瓶中，錐形瓶中裝液量為100ml，在恒溫25～30℃轉(zhuǎn)速100～160r/min，培養(yǎng)40～80h得種子菌液；三、以30％體積比將種子菌液轉(zhuǎn)接到500ml錐形瓶中，錐形瓶裝液量為250ml，在恒溫25～30℃轉(zhuǎn)速100～150r/min，培養(yǎng)90～130h后，取發(fā)酵液離心去除菌絲體和不溶物；四、在上層多糖清夜中加入四倍體積的無水乙醇，靜置過夜，使其充分沉淀，沉淀后經(jīng)過離心得到沉淀物，干燥可得白色或淡黃色多糖粗品，產(chǎn)率可達60％以上，具有成本降低、工藝簡單、產(chǎn)率高和環(huán)保的特點。
文檔編號C12P19/04GK102634556SQ201210087288
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月29日
發(fā)明者呂亞娟, 張建, 白林, 陳潔 申請人:陳潔