專利名稱：一種用于結(jié)核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種生物檢測試劑的研發(fā)，更具體涉及ー種用于結(jié)核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒，屬于分子生物學技術(shù)領(lǐng)域。。
背景技術(shù)：
結(jié)核病(Tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的ー種慢性人畜共患病，能夠感染人和多種哺乳動物以及禽類。其中導致人類感染的結(jié)核菌大多數(shù)是人結(jié)核分枝桿菌，也有10%以上是由牛分枝桿菌引起的。各個器官都可被侵犯，但以肺器官被侵染為多見。其病理特征是在多種組織器官中形成肉芽腫和干酪樣、鈣化結(jié)節(jié)病變。
據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報告，目前全球已有20億人感染結(jié)核菌，現(xiàn)有活動性肺結(jié)核患者約2000萬，毎年新發(fā)病800-1000萬，每年約有300萬人死于結(jié)核病，毎年死于結(jié)核病的成年人多于艾滋病，瘧疾和熱帶病死亡人數(shù)的總和。據(jù)WHO估算，到2005年全球結(jié)核病新病例將達1020萬例。全球90%的結(jié)核病在發(fā)展中國家，中國結(jié)核病患者數(shù)居世界第ニ，僅次于印度。結(jié)核桿菌不僅感染人，也感染許多動物(見表I)尤其是奶牛。這對以奶牛業(yè)為主的發(fā)達國家造成嚴重經(jīng)濟損失。盡管ー些國家已有效地控制或消滅了此病，但在有些國家和地區(qū)仍呈地區(qū)性散發(fā)和流行。我國結(jié)核病疫情嚴重，且分布較廣。表I各種不同結(jié)核桿菌對人和動物的致病性
權(quán)利要求
1.用于結(jié)核桿菌目視檢測引物組，引物針對結(jié)核分支桿菌的FadB4基因設(shè)計，共包括4條，引物序列如下 引物名稱引物序列(5’-3 )F3TTCCCGGACGCACTGCB3GCTCGGGCGACAATACCGFIPTCGAACCACTCCGGCGATCTC-TAACCCGTGGCCGTTACCBIPCCGGATAACAGCCAAGTGCGT-CGACTTCGGCCATGCC
2.包含權(quán)利要求I所述的用于結(jié)核桿菌目視檢測引物組的試劑盒，所述試劑盒中任選包括，dNTPs, Bst DNA 聚合酶，SYBR Green I 染料。
3.權(quán)利要求2所述的試劑盒在PCR擴增中的應用。
4.權(quán)利要求2所述的試劑盒在檢測人結(jié)核分枝桿菌標準株H37Rv、弱毒株H37Ra、卡介苗BCG、牛分枝桿菌、龜分枝桿菌、禽分枝桿菌基因組以及大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、棒狀桿菌、李氏桿菌和/或布魯氏菌S19中的應用。
5.權(quán)利要求2所述的試劑盒在食品檢測中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于結(jié)核桿菌目視檢測引物組及其試劑盒，本發(fā)明的結(jié)核桿菌引物組及其試劑盒可直接目視檢測結(jié)核桿菌基因組結(jié)果，可以用于從痰樣中鑒別診斷結(jié)核分支桿菌。適應于臨床結(jié)核樣本的檢測，為臨床結(jié)核病患者的診斷提供輔助。
文檔編號C12R1/32GK102776275SQ20121013311
公開日2012年11月14日 申請日期2012年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月3日
發(fā)明者喬軍, 孫志華, 張豫, 張輝, 曹旭東, 王勇, 陳創(chuàng)夫 申請人:石河子大學