專利名稱：一種具有ACE抑制活性的plastein反應(yīng)修飾肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及ー種具有ACE抑制活性的plastein反應(yīng)修飾肽的制備方法。
背景技術(shù)：
高血壓是引起心血管 疾病的主要因素，與心血管疾病發(fā)生的危險(xiǎn)性是正相關(guān)。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)在人體血壓調(diào)節(jié)過程中起重要作用，ACE抑制劑通過抑制血管緊張素I向血管緊張素II轉(zhuǎn)換，以及阻止ACE降解緩激肽而起到降血壓的作用。由于化學(xué)合成的ACE抑制劑對(duì)人體健康存在潛在危害，如引發(fā)蛋白尿、白細(xì)胞減少、停藥綜合癥等，其應(yīng)用必將受到越來越嚴(yán)格的限制，尋找安全高效的ACE抑制劑已成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)界面臨的主要課題。大分子的蛋白質(zhì)中存在著某些具有ACE抑制活性的肽片段，可以通過酶水解釋放出來。蛋白質(zhì)酶解制備出的ACE抑制肽，其活性相比于蛋白質(zhì)和氨基酸往往更為顯著。目前，利用不同來源蛋白質(zhì)酶解制備具有ACE抑制活性肽的研究已被廣泛開展，先后從日本清酒、沙丁魚、蛋黃、酸奶、鰹魚等食品原料中獲得ACE抑制活性肽。然而，研究表明絕大多數(shù)蛋白質(zhì)酶解肽的ACE抑制活性都較低，與同濃度化學(xué)合成的ACE抑制劑(卡托普利、依那普利等)的活性相差幾倍到幾百倍左右。因此，酶法制備ACE抑制肽的較低活性已成為其研究與開發(fā)的瓶頸。類蛋白(plastein)反應(yīng)是濃縮的蛋白水解物在合適條件下經(jīng)蛋白酶作用形成凝膠狀物質(zhì)的反應(yīng)，它通常被認(rèn)為是蛋白質(zhì)水解反應(yīng)的逆反應(yīng)。plastein反應(yīng)在改善多肽功能性和食物蛋白營(yíng)養(yǎng)性方面顯示出巨大的潛力，而且在plastein反應(yīng)中無需添加任何有機(jī)溶劑或化學(xué)試劑，一般具有較高的安全性，其必將成為食品エ業(yè)的研究熱點(diǎn)。plastein反應(yīng)修飾是改善多肽ACE抑制活性的新途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種具有ACE抑制活性的plastein反應(yīng)修飾肽的制備方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明的技術(shù)方案海參和蒸餾水按I : 8-10g/ml的比例勻漿，漿液在45_50°C的溫度下攪拌6-8小時(shí)，離心得蛋白溶液；將蛋白溶液的pH值調(diào)為7. O后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都為蛋白溶液中蛋白質(zhì)量的1%，在50°C的溫度下酶解3-4小時(shí)；將上述所得酶解液濃縮至質(zhì)量濃度為30% -40%后加入木瓜蛋白酶，加入量為酶解液中蛋白質(zhì)量的1%，在40-55°C的溫度下plastein反應(yīng)修飾1_2小時(shí)制得。本發(fā)明以低值海參(爺參)為原料，利用plastein反應(yīng)修飾制備ー種高活性的ACE抑制肽，所得活性肽安全、無毒，在食品和藥品領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式海參和蒸餾水按I : 8-10g/ml (最好是I : 10g/ml)的比例勻漿，漿液在45-500C (最好是45°C )的溫度下攪拌6-8小時(shí)(最好是7小時(shí))，離心得蛋白溶液；將蛋白溶液的PH值調(diào)為7. O后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都為蛋白溶液中蛋白質(zhì)量的I %，在50°C的溫度下酶解3-4小時(shí)(最好是4小吋)；將上述所得酶解液濃縮至質(zhì)量濃度為30% -40% (最好是35% )后加入木瓜蛋白酶，加入量為酶解液中蛋白質(zhì)量的1%，在40-550C (最好是45°C )的溫度下plastein反應(yīng) 修飾1_2小時(shí)(最好是I小時(shí))制得。
權(quán)利要求
1.ー種具有ACE抑制活性的plastein反應(yīng)修飾肽的制備方法，其特征在于海參和蒸餾水按I : 8-10g/ml的比例勻漿，漿液在45-50°C的溫度下攪拌6_8小時(shí)，離心得蛋白溶液；將蛋白溶液的pH值調(diào)為7. O后加入膜蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都為蛋白溶液中蛋白質(zhì)量的I %，在50°C的溫度下酶解3-4小時(shí)；將上述所得酶解液濃縮至質(zhì)量濃度為30% -40%后加入木瓜蛋白酶，加入量為酶解液中蛋白質(zhì)量的I %，在40-55°C的溫度下plastein反應(yīng)修飾1-2小時(shí)制得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有ACE抑制活性的plastein反應(yīng)修飾肽的制備方法，其特征在于以低值海參(茄參)為原料，利用plastein反應(yīng)修飾的方法制備一種高活性的ACE抑制肽，所得活性肽安全、無毒，在食品和藥品領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C12P21/06GK102690855SQ20121017901
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月24日
發(fā)明者劉偉航, 劉尊英, 曾名湧, 朱曉杰, 沈晴晴, 董士遠(yuǎn), 趙元暉 申請(qǐng)人:中國海洋大學(xué)