專利名稱：一種提高甜菊糖總甙的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領(lǐng)域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。
背景技術(shù)：
甜菊糖是從菊科草本植物甜葉菊中精提的新型天然甜味劑。它具有高甜度、低熱能的特點(diǎn)，其甜度是蔗糖的200— 350倍，熱值僅為蔗糖的I / 300。是繼甘蔗、甜菜之外第三種最具有開價(jià)值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被譽(yù)為“世界第三糖源”。甜菊糖在一般著色性，安全無毒，被廣泛應(yīng)用于食品、釀酒、醫(yī)藥、日用化工等行業(yè)。甜菊糖的九種甜味成分中，甜菊甙、萊鮑迪甙A(RA)和萊鮑迪甙C(RC)的相對含量較高，共占90%以上，是決定甜菊糖味質(zhì)的主要成分。RA甜度最高，相當(dāng)于蔗糖的450倍，甜味特性也與蔗糖相接近；甜菊甙甜味相當(dāng)于蔗糖的300倍，具有一定的苦味和不愉快的后 味，影響了甜菊糖的味質(zhì)，限制了其更為廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)在中國市場上的甜菊糖產(chǎn)品有相當(dāng)一部分產(chǎn)品的總甙含量較低，不能滿足客戶的需求，需要再次精制以提高產(chǎn)品總甙。本發(fā)明提供一種簡單易行的方法能將總甙含量較低的產(chǎn)品總甙提高到98%以上，同時(shí)將甜菊甙中的RA含量提高到60%以上。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種將總甙含量較低的產(chǎn)品總甙提高到98%以上的工藝。本發(fā)明提供一種利用下述工藝提高甜菊糖總甙含量，同時(shí)提高RA含量的方法。工藝流程為將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為10-35°C，保持2-8小時(shí)進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30-100rpm ;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，固體再次洗晶分離，烘干獲得精制甜菊糖；結(jié)晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的質(zhì)暈體積比為1:2-6 ;上述甜菊糖原料總甙含量不得低于70%。所述有機(jī)溶劑為乙醇、異丙醇、氯仿中的一種或其混合溶劑；有機(jī)溶劑優(yōu)選乙醇、異丙醇和氯仿的混合溶劑；所述乙醇純度為100%，異丙醇純度為100%，氯仿濃度為100% ；氯仿異丙醇乙醇的體積比為=1:2-5:5-10 ；異丙醇和乙醇的比例為1:2-6 ;氯仿和乙醇的比例為1: 5-10 ；異丙醇和乙醇的比例優(yōu)選1:3-5 ；
氯仿和乙醇的比例優(yōu)選1:6-8;所述洗晶溶劑為100%的乙醇；洗晶過程中固體濕重和乙醇溶劑的質(zhì)量體積比為1: 3 ;結(jié)晶時(shí)間優(yōu)選4-6小時(shí)；所述結(jié)晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速優(yōu)選40_60rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_80°C。有益效果
本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由70%提高至98%以上，可將甜菊糖原料的RA含量由30%提高至60%以上；本發(fā)明產(chǎn)品的收率較高，一般在35%_50%之間。
具體實(shí)施例方式下面通過具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對這些實(shí)施方案中的結(jié)晶條件進(jìn)行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明提高甜菊糖總甙含量的工藝如下將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為10-35°C，保持2-8小時(shí)進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30_100rpm ;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，固體再次洗晶分離，烘干獲得精制甜菊糖；結(jié)晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的質(zhì)量體積比為1:2-6;上述甜菊糖原料總式含量不得低于70%。所述有機(jī)溶劑為乙醇、異丙醇、氯仿中的一種或其混合溶劑；有機(jī)溶劑優(yōu)選乙醇、異丙醇和氯仿的混合溶劑；所述乙醇純度為100%，異丙醇純度為100%，氯仿濃度為100% ；異丙醇和乙醇的比例為1:2-6;氯仿和乙醇的比例為1: 5-10 ；異丙醇和乙醇的比例優(yōu)選1:3-5;氯仿和乙醇的比例優(yōu)選1:6-8;所述洗晶溶劑為100%的乙醇；洗晶過程中固體濕重和乙醇溶劑的質(zhì)量體積比為1: 3 ;所述結(jié)晶溫度優(yōu)選10_20°C，結(jié)晶時(shí)間優(yōu)選4-6小時(shí)；所述結(jié)晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速優(yōu)選40_60rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_80°C。甜菊糖總甙的測定法法如下HPLC定量測定方法(JECFA 2010會議標(biāo)準(zhǔn))檢測步驟按照以下液相色譜條件檢測每種糖甙的含量。試劑乙腈，在210nm下檢測透光度>95%.標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格
甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品干重純度>99%萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品干重純度>99%含有9種甜菊糖甙的基準(zhǔn)溶液鮑含甜菊甙、萊鮑迪甙A、萊鮑迪甙B、萊鮑迪甙C、萊鮑迪甙D、萊鮑迪甙F、杜爾克甙A、懸鉤子甙和甜菊雙糖甙。用7:3的水乙腈溶液將含有9種甜菊糖甙的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋，以便用來確定各個(gè)糖甙的出峰時(shí)間。標(biāo)準(zhǔn)品可在日本W(wǎng)ako公司和美國ChromaDex公司買到。標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制精確稱取50毫克甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品和50毫克萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品，分別放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水乙腈溶液進(jìn)行溶解至50毫升刻度。樣品溶液的配制精確稱取50 - 100毫克甜菊甙樣品，放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水乙腈溶液進(jìn)行溶解至50毫升刻度。檢測步驟 在以下條件下注入5 U I的樣品溶液。色譜柱Shiseido公司的 Capcell pak C18 MG II 型色譜柱或者 Phenomenex 公司的Luna5 u C18 (2) 100A型色譜柱或者相當(dāng)規(guī)格的色譜柱(長度250毫米；內(nèi)徑4. 6毫米，填料粒度5 ii m)。；流動相比例為32:68的乙腈和磷酸鈉緩沖液(規(guī)格10mmol/L，pH值2. 6)的混合液。磷酸鈉緩沖液的配置方法將2. 76克磷酸二氫鈉溶解到2升水中，加入磷酸將pH值調(diào)整到2. 6流速I毫升/每分鐘。檢測器210nm紫外檢測。色譜柱溫度40°C記錄大約30分鐘的檢測結(jié)果。峰值識別和計(jì)算將樣品溶液的出峰與含有9種甜菊糖甙的基準(zhǔn)溶液的出峰時(shí)間相對比，確定樣品溶液中各個(gè)出峰對應(yīng)的糖甙。算出樣品溶液中9種糖甙對應(yīng)的峰面積，算出甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液和萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積。按照以下公式，計(jì)算樣品中萊鮑迪甙A之外的8種糖甙中每一種糖甙的百分比%X= [ffs/ff] X [fxAx/As] xlOO按照以下公式，計(jì)算樣品中萊鮑迪甙A的百分比% 萊鮑迪式 A= [WR/ff] X [Ax/AR] xlOO公式中X代表每種糖甙Ws是甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液中甜菊甙的干重(mg)WR是萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液中萊鮑迪甙A的干重(mg)W是樣品溶液中樣品的干重(mg)As是甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積AR是萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積Ax是樣品溶液每種糖甙的峰面積
fx是每種糖甙的分子量與甜菊甙分子量的比值1. 00(甜菊甙)，I. 20(萊鮑迪甙A), 1.00(萊鮑迪甙B)，I. 18 (萊鮑迪甙C)，1.40(萊鮑迪甙D)，I. 16(萊鮑迪甙F)，0. 98(杜爾克甙A) ,0.80(懸鉤子甙),0.80(甜菊雙糖甙)。計(jì)算甜菊糖甙總量的百分比(將9種糖甙的百分比相加)實(shí)施例I取甜菊糖原料50g，加入IOOml溶劑，氯仿異丙醇乙醇=1:5:10，充分溶解后置于三口燒瓶中，水浴控制溫度35攝氏度，攪拌速度為90rpm，時(shí)間為8小時(shí)，將結(jié)晶混合液用布氏漏斗進(jìn)行抽濾，用100%純度乙醇洗晶，固液比為1:3 ;再次抽濾，50°C過夜烘干，得干樣18. 3g。液相測定結(jié)果為
權(quán)利要求
1.一種提高甜菊糖總甙的方法，步驟如下 將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為10-35°c，保持2-8小時(shí)進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30-100rpm;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，固體再次洗晶分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述甜菊糖原料質(zhì)量與溶劑的質(zhì)量體積比為1:2-6 ;有機(jī)溶劑為乙醇、異丙醇、氯仿中的一種或其混合溶劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述結(jié)晶溶液的固液分離為抽濾或離心分離。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為乙醇、異丙醇和氯仿的混合溶劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述乙醇純度為100%，異丙醇純度為100%，氯仿純度為100%。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述氯仿異丙醇乙醇的體積比為=1:2-5:5-10。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述異丙醇和乙醇的比例為1:2-6。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述氯仿和乙醇的比例為 1:5-10。
8.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述異丙醇和乙醇的比例為1:3-5。
9.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述洗晶溶劑為100%的乙醇。
10.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述一種提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述洗晶過程中固體濕重和乙醇溶劑的質(zhì)量體積比為1:3，所述結(jié)晶溫度為10-20°C，所述精制樣品的烘干溫度為50-80°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高甜菊糖總甙的方法，本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領(lǐng)域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。步驟如下將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為10-35℃，保持2-8小時(shí)進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30-100rpm；上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，固體再次洗晶分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述甜菊糖原料質(zhì)量與溶劑的體積比為1:2-6；有機(jī)溶劑為乙醇、異丙醇、氯仿中的一種或其混合溶劑。本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由70%提高至95%以上。
文檔編號A23L1/09GK102766175SQ20121018332
公開日2012年11月7日 申請日期2012年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月6日
發(fā)明者喬長晟, 李利寧, 李振海, 樓鵬, 王彥飛 申請人:天津北洋百川生物技術(shù)有限公司