專利名稱：用于檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列的引物組、試劑盒及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種用于檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列的引物組、試劑盒及方法。
背景技術(shù)：
隨著轉(zhuǎn)基因生物的迅速發(fā)展，其安全性在全球范圍內(nèi)引起激烈的爭(zhēng)論與普遍關(guān) 注。為保障消費(fèi)者的知情權(quán)和選擇權(quán)，世界上許多國(guó)家和地區(qū)都制定了相應(yīng)的法律和法規(guī)，加強(qiáng)對(duì)進(jìn)出口轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的管理，這給為轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管提供技術(shù)支撐的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)工作帶來(lái)更大的挑戰(zhàn)。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的方法有很多，主要分為針對(duì)外源蛋白質(zhì)的檢測(cè)與針對(duì)外源核酸的檢測(cè)兩大類。但轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，經(jīng)過(guò)多道程序加工處理，絕大部分蛋白質(zhì)已經(jīng)被變性、破壞，檢出率較低。所以針對(duì)外源核酸的檢測(cè)更為普遍。轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中轉(zhuǎn)入的外源核酸一般包括啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、目的基因和終止子，針對(duì)這些基因進(jìn)行擴(kuò)增分析可篩選檢測(cè)待檢樣品中的轉(zhuǎn)基因成分。根據(jù)檢測(cè)靶標(biāo)的不同，轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)方法分為篩查法、基因特異性檢測(cè)法、結(jié)構(gòu)特異性檢測(cè)法、轉(zhuǎn)化事件特異性檢測(cè)法4個(gè)層次，檢測(cè)的特異性由低到高。轉(zhuǎn)化事件特異性檢測(cè)法是針對(duì)插入的外源序列與植物基因組連接的邊界序列(即轉(zhuǎn)化體特異性序列)進(jìn)行檢測(cè)。由于插入位點(diǎn)的唯一性，轉(zhuǎn)化事件特異性檢測(cè)具有更高的特異性和準(zhǔn)確性，不僅可判斷待檢樣品中是否含有轉(zhuǎn)基因成分，而且還可具體鑒定待檢樣品含有何種轉(zhuǎn)基因品系，因此相比其它3種方法具有更好的特異性?？共莞熟⑥D(zhuǎn)基因大豆作為主要的轉(zhuǎn)基因作物，占據(jù)全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積的47%，且呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)。我國(guó)作為轉(zhuǎn)基因大豆的銷售大國(guó)，每年從美國(guó)大約進(jìn)口 1500萬(wàn)噸大豆(與我國(guó)自產(chǎn)的非轉(zhuǎn)基因大豆數(shù)量相當(dāng))，大多都含有轉(zhuǎn)基因成分，也就是說(shuō)，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上近一半的豆油、豆腐、豆奶及其它豆制品均是轉(zhuǎn)基因的。目前國(guó)內(nèi)外已建立了多種檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的普通PCR法和熒光定量PCR法，這些方法都需要特殊的試劑(如熒光探針)和復(fù)雜昂貴的儀器(如PCR儀、real-time PCR儀)，不適于現(xiàn)場(chǎng)的快速檢測(cè)和基層的普及使用。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)是由日本榮研化學(xué)株式會(huì)社Notomi T等于2000年開(kāi)發(fā)的一種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法。該技術(shù)利用一種具有鏈置換活性的fei DNA聚合酶在恒溫條件(65°C左右)保溫30-60分鐘，即可實(shí)現(xiàn)核酸的大量擴(kuò)增。其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、快速、特異性高、成本低廉，故被廣大研究者認(rèn)為是可能替代PCR的一種新核酸擴(kuò)增技術(shù)。2007年王永、蘭青闊等報(bào)道了一種針對(duì)cp4_印sps基因進(jìn)行抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)的LAMP法，該法屬于基因特異性檢測(cè)。但由于Cp4-epSpS基因作為一種造福人類的優(yōu)良抗性基因，已被轉(zhuǎn)入多種作物或同種作物的不同品系中形成不同品系的轉(zhuǎn)基因作物，該檢測(cè)法顯然不能有效地特異性區(qū)分具有相同抗草甘膦抗性的轉(zhuǎn)基因作物及其品系。2011年曹以誠(chéng)等也建立了一種檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆的LAMP檢測(cè)試劑盒，該試劑盒是針對(duì)外源EPSPS-NOS基因進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)，但EPSPS-N0S基因序列并不僅僅只存在于抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆中，不能特異地檢出抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆成分。因此針對(duì)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆建立一種特異、適于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)及大范圍推廣應(yīng)用的轉(zhuǎn)化事件特異性檢測(cè)方法具有非常重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)引物組。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)試劑 盒。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)方法。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是
抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)引物組，包括引物組I和引物組2，其中，引物組 I 包括外引物 Lectin_F3、Lectin_B3 和內(nèi)引物 Lectin-FIP、Lectin-ΒΙΡ,序列如下Lectin- F3 GCCGAAGCAACCAAACATG (SEQ ID N0:1)；
Lectin-B3 GGGGCATAGAAGGTGAAGTT (SEQ ID NO:2);
Lectin-FIP TGGGGTGCCGTTTTCGTCAACATCCTCCAAGGAGACGCTAT (SEQ ID NO:3);Lectin-BIP ACCCTCGTCTCTTGGTCGCG-GGCAACGCTACCGGTTTC (SEQ ID N0:4)；
引物組2包括外引物RR-F3、RR-B3和內(nèi)引物RR-FIP、RR-BIP，序列如下
RR-F3 ATAGGGAACCCAAATGGAA (SEQ ID N0:5)；
RR-B3 TTGTGCGTCATCCCTTAC (SEQ ID N0:6)；
RR-FIP GGCATCTTGAACGATAGCCTTTCAAGGAAGGTGGCTCCTAC (SEQ ID NO:7);
RR-BIP CACGAGGAGCATCGTGGAAATCAGTGGAGATATCACATCAA (SEQ ID NO:8)。抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)試劑盒，包括(1)上述的引物組I ;(2)引物組2 ; (3) Bst DNA聚合酶；(4) LAMP反應(yīng)液；(5)染色劑；(6)內(nèi)對(duì)照；(7)陽(yáng)性對(duì)照。弓丨物組I中外引物和內(nèi)引物的添加摩爾比為1:8;引物組2中外引物和內(nèi)引物的添加摩爾比為1:8。LAMP 反應(yīng)液，由 O. 2 mol/L Mg2SO4、25 mmol/L dNTPUOXBst buffer,5 mol/L甜菜堿按I :4 :10 20的比例配比而成。染色劑為SYBR Green。內(nèi)對(duì)照為含有大豆內(nèi)參照基因Lectin (SEQ ID N0:9)的重組質(zhì)粒；陽(yáng)性對(duì)照為含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列(SEQ ID NO: 10)的重組質(zhì)粒。內(nèi)對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照的重組質(zhì)粒所用的載體為PMD18-T載體。利用上述試劑盒檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的方法，包括如下步驟
(1)提取純化待檢樣品DNA；
(2)LAMP法檢測(cè)；
Φ LAMP法檢測(cè)大豆內(nèi)參照基因Lectin :設(shè)置樣品管(加樣品DNA)、內(nèi)對(duì)照(加含有Lectin基因的重組質(zhì)粒DNA)、空白對(duì)照(加滅菌去離子水)，25 μ L反應(yīng)體系含有引物組I外引物對(duì)O. 2ymol/L，內(nèi)引物對(duì)1.6ymol/L，Bst DNA聚合酶O. 32U/μ L，LAMP反應(yīng)液9 μ L，待檢樣品DNA50ng，用滅菌去離子水補(bǔ)齊到25 μ I。將配制好的反應(yīng)管混勻后離心，并于65°C反應(yīng)50min，并在80°C持續(xù)IOmin ;反應(yīng)完畢后，往反應(yīng)管中加入染色劑，混勻，根據(jù)顯色結(jié)果來(lái)判斷待檢樣品中是否含有Lectin基因；
:g: LAMP法檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列設(shè)置樣品管(樣品DNA)、陽(yáng)性
對(duì)照(含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列的重組質(zhì)粒DNA)、空白對(duì)照(滅菌去離子水)，25 μ L反應(yīng)體系含有引物組2外引物對(duì)O. 2 μ mol/L，內(nèi)引物對(duì)I. 6 μ mol/L ,Bst DNA聚合酶O. 32U/ μ L，反應(yīng)液9 μ L，待檢樣品DNA50ng，用滅菌去離子水補(bǔ)齊到25 μ I。將配制好的反應(yīng)管混勻后離心，并于65°C反應(yīng)50min，并在80°C持續(xù)IOmin ;反應(yīng)結(jié)束后，往反應(yīng)管中加入染色劑，混勻，根據(jù)顯色結(jié)果來(lái)判斷待檢樣品中是否含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列； (3)結(jié)果判斷如果步驟(2)中內(nèi)對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照呈陽(yáng)性，空白對(duì)照呈陰性，而樣品Lectin基因檢測(cè)呈陽(yáng)性、抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列檢測(cè)呈陽(yáng)性，則表明待檢樣品含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆成分。本發(fā)明的有益效果在于
I、本發(fā)明設(shè)計(jì)了 2組LAMP引物，引物組I檢測(cè)內(nèi)參照基因Lectin，可檢出樣品中的大豆成分，同時(shí)可排除假陰性結(jié)果；引物組2檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的轉(zhuǎn)化體特異性序列，該序列為插入的外源基因與植物基因組連接的邊界序列，具有高度特異性，可有效檢出抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆成分。2、本發(fā)明的試劑盒自行研制了陽(yáng)性對(duì)照物和內(nèi)對(duì)照物，用于樣品檢測(cè)分析時(shí)分別設(shè)置了陽(yáng)性對(duì)照、空白對(duì)照和內(nèi)對(duì)照，可避免假陽(yáng)性和假陰性的產(chǎn)生。3、本發(fā)明的檢測(cè)試劑盒是在恒溫下進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)，一臺(tái)恒溫水浴鍋就能滿足實(shí)驗(yàn)要求，不需要特殊的設(shè)備，檢測(cè)成本低；檢測(cè)結(jié)果通過(guò)反應(yīng)液的顏色變化通過(guò)肉眼觀察即可進(jìn)行判定，鑒定簡(jiǎn)便，結(jié)果可視化；適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)及基層大樣本量的篩查，易于大范圍的推廣應(yīng)用。


圖I是本發(fā)明檢測(cè)方法的顯色結(jié)果示意圖(1，綠色，陽(yáng)性；2，橙色，陰性)。圖2是轉(zhuǎn)化體特異性序列檢測(cè)的敏感性分析結(jié)果(I. 2000000copies/ μ I，2.200000copies/μ 1,3.20000copies/μ I,4.2000copies/μ 1,5.200copies/μ I,6.20copies/μ I,7. 2copies/μ 1,8. balnk。圖3是特異性分析結(jié)果(A引物組I檢測(cè)結(jié)果1.抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆，2.非轉(zhuǎn)基因大豆，3.轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1，4.轉(zhuǎn)基因油菜RT73，5.轉(zhuǎn)基因甜菜H7_l，6.轉(zhuǎn)基因玉米M0N810，7.轉(zhuǎn)基因玉米Btl76，8.內(nèi)對(duì)照，9.空白對(duì)照；B引物組2檢測(cè)結(jié)果1.抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆，2.非轉(zhuǎn)基因大豆，3.轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1，4.轉(zhuǎn)基因油菜RT73，5.轉(zhuǎn)基因甜菜H7-l,6.轉(zhuǎn)基因玉米M0N810，7.轉(zhuǎn)基因玉米Btl76，8.陽(yáng)性對(duì)照，9.空白對(duì)照)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件操作，例如Sambrook等編著的分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New York Cold Spring HarborLaboratory Press, 2001)中所述的條件,或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例I :抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)試劑盒的研制
本發(fā)明的抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)試劑盒由(I) Bst DNA聚合酶；(2 )引物組I ; (3 )弓I物組2 ；(4)反應(yīng)液；(5)染色劑(SYBR Green ); (6 )內(nèi)對(duì)照；(7 )陽(yáng)性對(duì)照組成，其中BstDNA聚合酶、反應(yīng)液、顯色液等可由相應(yīng)公司購(gòu)買，而檢測(cè)引物組、內(nèi)對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照物為自行研制。

一、實(shí)驗(yàn)材料
抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆 二、試劑
Bst DNA聚合酶、IOXifei buffer購(gòu)自美國(guó)New England Biolabs公司；甜菜喊購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；dNTP、MgS04分析純、Premix Taq DNA聚合酶、pMD18_T載體、DNA分子量Marker、轉(zhuǎn)基因基因組DNA提取試劑盒(GMO DetectionVer. 2. O)購(gòu)自寶生物工程(大連)有限公司；質(zhì)粒小提試劑盒購(gòu)自O(shè)MEGA公司；DH5a菌株為本實(shí)驗(yàn)室保存；引物由上海英濰捷基生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。三、主要儀器設(shè)備
ClOOO 型 PCR 儀(Bio-Rad Laboratories,Inc.)
Gel 型凝膠成像系統(tǒng)(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
Biophotometer plus 紫外分光光度計(jì)(Eppendorf, Inc.)
其他儀器包括恒溫水浴鍋，離心機(jī)，恒溫培養(yǎng)箱，電子天平，微量移液器等。四、實(shí)驗(yàn)方法和過(guò)程
I、引物組的設(shè)計(jì)
通過(guò)GenBank查詢和檢索相關(guān)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的內(nèi)參照基因Lectin (GenBank K00821)和轉(zhuǎn)化體特異性序列(GenBank GQ870263)。根據(jù)獲得的序列信息，利用在線 http://primerexplorer. jp/e/PrimerExploerV4 軟件分別設(shè)計(jì)了 2 組引物，分別用于擴(kuò)增Lectin基因和抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列。Lectin基因擴(kuò)增引物包括外引物L(fēng)ectin_F3、Lectin_B3和內(nèi)引物L(fēng)ectin-FIP、Lectin-BIP ;轉(zhuǎn)化體特異性序列擴(kuò)增引物由外引物RR-F3、RR-B3和內(nèi)引物RR-FIP、RR-BIP組成。引物序列見(jiàn)表I.
權(quán)利要求
1.抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)引物組，包括引物組I和引物組2，其中，弓丨物組I包括外引物L(fēng)ectin_F3、Lectin_B3和內(nèi)引物L(fēng)ectin_FIP、Lectin-ΒΙΡ,序列如下Lectin- F3 GCCGAAGCAACCAAACATG (SEQ ID N0:1)；Lectin-B3 GGGGCATAGAAGGTGAAGTT (SEQ ID NO:2);Lectin-FIP TGGGGTGCCGTTTTCGTCAACATCCTCCAAGGAGACGCTAT (SEQ ID NO:3);Lectin-BIP ACCCTCGTCTCTTGGTCGCG-GGCAACGCTACCGGTTTC (SEQ ID N0:4)； 弓丨物組2包括外引物RR-F3、RR-B3和內(nèi)引物RR-FIP、RR-BIP，序列如下RR-F3 ATAGGGAACCCAAATGGAA (SEQ ID N0:5)；RR-B3 TTGTGCGTCATCCCTTAC (SEQ ID N0:6)；RR-FIP GGCATCTTGAACGATAGCCTTTCAAGGAAGGTGGCTCCTAC (SEQ ID NO:7);RR-BIP CACGAGGAGCATCGTGGAAATCAGTGGAGATATCACATCAA (SEQ ID NO:8)。
2.抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的檢測(cè)試劑盒，包括(1)權(quán)利要求I所述的引物組I ; (2)權(quán)利要求I所述的引物組2 ; (3) Bst DNA聚合酶；(4) LAMP反應(yīng)液；(5)染色劑；(6)內(nèi)對(duì)照；(7)陽(yáng)性對(duì)照。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述引物組I中外引物和內(nèi)引物的添加摩爾比為1:8 ;所述引物組2中外引物和內(nèi)引物的添加摩爾比為1:8。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的LAMP反應(yīng)液，由O.2 mol/L Mg2SO4、25 mmol/L dNTPUOXBst buffer,5 mol/L 甜菜堿按 I :4 :10 :20 的比例配比而成。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述染色劑為SYBRGreen0
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的內(nèi)對(duì)照為含有大豆內(nèi)參照基因Lectin (SEQ ID N0:9)的重組質(zhì)粒；所述陽(yáng)性對(duì)照為含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列(SEQ ID NO: 10)的重組質(zhì)粒。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，內(nèi)對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照的重組質(zhì)粒所用的載體為PMD18-T載體。
8.利用權(quán)利要求2的試劑盒檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆及其加工品的方法，包括如下步驟 (1)提取純化待檢樣品DNA； (2)LAMP法檢測(cè)； 3 LAMP法檢測(cè)Lectin基因設(shè)置樣品管(加樣品DNA)、內(nèi)對(duì)照(加含有Lectin基因的重組質(zhì)粒DNA)、空白對(duì)照(加滅菌去離子水)，25 μ L反應(yīng)體系含有引物組I外引物對(duì).O.2ymol/L，內(nèi)引物對(duì) I. 6ymol/L，Bst DNA 聚合酶 O. 32U/μ L，LAMP 反應(yīng)液 9 μ L，待檢樣品DNA50ng，用滅菌去離子水補(bǔ)齊到25 μ I ;將配制好的反應(yīng)管混勻后離心，并于65°C反應(yīng)50min，并在80°C持續(xù)IOmin ;反應(yīng)完畢后，往反應(yīng)管中加入染色劑，混勻，根據(jù)顯色結(jié)果來(lái)判斷待檢樣品中是否含有Lectin基因； S LAMP法檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列設(shè)置樣品管(樣品DNA)、陽(yáng)性對(duì)照(含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列的重組質(zhì)粒DNA)、空白對(duì)照(滅菌去離子水)，25 μ L反應(yīng)體系含有引物組2外引物對(duì)O. 2 μ mol/L，內(nèi)引物對(duì)I. 6 μ mol/L ,Bst DNA聚合酶O. 32U/ μ L，反應(yīng)液9 μ L，待檢樣品DNA50ng，用滅菌去離子水補(bǔ)齊到25 μ I ;將配制好的反應(yīng)管混勻后離心，并于65°C反應(yīng)50min，并在80°C持續(xù)IOmin;反應(yīng)結(jié)束后，往反應(yīng)管中加入染色劑，混勻，根據(jù)顯色結(jié)果來(lái)判斷待檢樣品中是否含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列； (3)結(jié)果判斷如果步驟(2)中內(nèi)對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照呈陽(yáng)性，空白對(duì)照呈陰性，而樣品Lectin基因檢測(cè)呈陽(yáng)性、抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列檢測(cè)呈陽(yáng)性，則表明待檢樣品含有抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆成分。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了用于檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆轉(zhuǎn)化體特異性序列的引物組、試劑盒及方法。本發(fā)明設(shè)計(jì)了2組LAMP引物，引物組1檢測(cè)內(nèi)參照基因Lectin，可檢出樣品中的大豆成分，同時(shí)可排除假陰性結(jié)果；引物組2檢測(cè)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的轉(zhuǎn)化體特異性序列，該序列為插入的外源基因與植物基因組連接的邊界序列，具有高度特異性，可有效檢出抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆成分。本試劑盒用于樣品檢測(cè)分析時(shí)分別設(shè)置了陽(yáng)性對(duì)照、空白對(duì)照和內(nèi)對(duì)照，可避免假陽(yáng)性和假陰性的產(chǎn)生。檢測(cè)不需要特殊的設(shè)備，檢測(cè)成本低；檢測(cè)結(jié)果通過(guò)反應(yīng)液的顏色變化用肉眼觀察即可進(jìn)行判定，鑒定簡(jiǎn)便，結(jié)果可視化，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)及基層大樣本量的篩查，易于大范圍的推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK102766690SQ20121024240
公開(kāi)日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2012年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月12日
發(fā)明者佘之韻, 劉唐書(shū), 周琳華, 張寶, 梁宇斌, 肖維威 申請(qǐng)人:廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院