布朗葡萄藻及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了保藏號(hào)為CGMCC?No.5509的布朗葡萄藻(Botryococcus?braunii)ENN42。本發(fā)明的布朗葡萄藻ENN42具有生物量高、含烴量高、生長(zhǎng)速度快、培養(yǎng)密度高的優(yōu)勢(shì)，適合產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。本發(fā)明還公開(kāi)了布朗葡萄藻ENN42在生物燃料尤其是生物烴、生物柴油或生物煤油中的應(yīng)用；在廢水處理、廢氣處理、CO2減排中的應(yīng)用；以及在生產(chǎn)色素、食品、動(dòng)物飼料中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】布朗葡萄藻及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物工程領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種布朗葡萄藻及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著全球化石能源的短缺及其帶來(lái)的環(huán)境問(wèn)題，尋找新型可替代能源勢(shì)在必行，微藻具有生物量大、生長(zhǎng)周期短及含油脂類(lèi)物質(zhì)高等特點(diǎn)，在CO2減排和生物燃料利用上都有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。
[0003]目前利用微藻生產(chǎn)生物燃料主要有兩種研發(fā)思路，一種是利用微藻合成的脂肪酸通過(guò)酯化生產(chǎn)生物燃料，因大多數(shù)微藻通過(guò)脂肪酸合成途徑可積累大量油脂，目前開(kāi)展的微藻能源研究大多采用此類(lèi)研發(fā)思路來(lái)研發(fā)微藻生物燃料；另一種是利用微藻合成的烴類(lèi)物質(zhì)生產(chǎn)生物燃料，因烴類(lèi)物質(zhì)與石油性質(zhì)相似，故可代替石油生產(chǎn)新的可再生能源。迄今所發(fā)現(xiàn)具有產(chǎn)烴能力的藻類(lèi)有葡萄藻、鹽藻、小球藻、小環(huán)藻、灰色念珠藻、倒囊藻、網(wǎng)翼藻等，但產(chǎn)烴量最高、最有希望成為工業(yè)藻種的還是葡萄藻，故葡萄藻的研究受到世界的廣泛關(guān)注。
[0004]葡萄藻又名叢粒藻，屬綠藻門(mén)、四胞藻綱、葡萄藻科、葡萄藻屬，是一種世界性分布的淡水或微咸水綠藻。烴性質(zhì)也因藻株有所區(qū)別，基于合成烴的性質(zhì)，可將葡萄藻分為三個(gè)化學(xué)種:A、B和L。A品系主要產(chǎn)奇數(shù)碳直鏈二烯烴和三烯烴，最高含烴量達(dá)到細(xì)胞干重的61% ；B品系主要產(chǎn)三萜類(lèi)烴，由類(lèi)異戊二烯單位構(gòu)成，被稱(chēng)為“葡萄烴”和甲基化三十碳六烯(鯊烯)，其含烴量為細(xì)胞干重的27%~86%;L品系主要產(chǎn)存在苯環(huán)或雜環(huán)的四萜類(lèi)烯烴，其含烴量為細(xì)胞干重的2~8%。葡萄藻的含烴量大大高于其它微生物的含烴量，但其生長(zhǎng)緩慢，室外養(yǎng)殖容易污染，很難得到大規(guī)模的推廣應(yīng)用，因此具有高生長(zhǎng)速度的優(yōu)良葡萄藻藻種的獲得是葡萄藻工業(yè)應(yīng)用的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
[0005]葛亞明等在標(biāo)題為“Growth characteristics of Botryococcus braunii765under high CO2 concentration in photobioreactor，，的文獻(xiàn)中用 Botryococcusbraunii 765藻株在BGll培養(yǎng)基中，持續(xù)光照和20% CO2濃度下，培養(yǎng)第25天時(shí)，達(dá)到的最大生物量為2.31g/L，總烴含量最高僅為24.45%。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)中的葡萄藻具有生長(zhǎng)速度慢、生物量低、總烴含量低等缺點(diǎn)，限制了其在產(chǎn)業(yè)化中的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了克服上述技術(shù)問(wèn)題，一方面，本發(fā)明通過(guò)自然界藻種分離純化及篩選，提供了一株性能良好的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN42藻株,該藻株已于2011年11月30日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC N0.5509。
[0008]本發(fā)明提供的藻株布朗葡萄藻ENN42的18S序列(SEQ ID NO:1)如序列I所示。
[0009]序列I為:
[0010]GTATCTCGACTTCTCTTCCTCTAGGTGGGAGGGTTTAACGAACTTCTCAGCGCCAGCCAGCGGAGACCG
【權(quán)利要求】
1.一種保藏編號(hào)為 CGMCC N0.5509 的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN42。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42，其18S序列如SEQID NO:1所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42，其形態(tài)特征為:細(xì)胞形狀為橢圓形或楔形，呈串狀集落生；細(xì)胞大小:長(zhǎng)7μηι~ΙΟμπι,寬6μηι~8μηι,聚集群體達(dá)50 μ m以上；細(xì)胞顏色為綠色；細(xì)胞包被在不規(guī)則分枝或分葉的、半透明的膠群體膠被里；細(xì)胞分裂時(shí)常形成兩個(gè)似親孢子，群體常斷裂為小群體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42，其特征在于藻株的烴含量占藻株干重的30%~50%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42，其特征在于藻株中的脂肪酸含量占藻株干重的5%~12%。
6.—種培養(yǎng)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42的培養(yǎng)方法,其特征在于適合的培養(yǎng)條件為:溫度為20~35°C ;光照強(qiáng)度為50~500 μ mol/m2.s，pH值為7~9，C源為含0.5%~10% CO2的氣體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42在生產(chǎn)生物燃料中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所 述的應(yīng)用，其特征在于所述生物燃料為生物烴、生物柴油或生物煤油。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42在廢水處理、廢氣處理、CO2減排中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的布朗葡萄藻ENN42在生產(chǎn)色素、食品或動(dòng)物飼料中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12P23/00GK103571753SQ201210270358
【公開(kāi)日】2014年2月12日 申請(qǐng)日期:2012年7月30日 優(yōu)先權(quán)日:2012年7月30日
【發(fā)明者】陳傳紅, 吳洪, 尹順吉, 馬建源 申請(qǐng)人:新奧科技發(fā)展有限公司