大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，由蛋白胨20g、乳糖5g、膽汁酸鹽2g、磷酸二氫鉀1.5g、磷酸二氫鉀4g、氯化鈉5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.1g、4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.1g、天冬氨酸1g、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物1g和瓊脂20g溶于1000ml去離子水中組成。本發(fā)明不但作為平皿培養(yǎng)基，亦可作為試劑片形式，并且成本低，利于普及使用。
【專利說明】大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，具體涉及的是一種大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]大腸菌群分布較廣，在溫血動物糞便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明，大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血動物糞便、人類經(jīng)?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主，而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，目前已被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用于食品衛(wèi)生工作中，而大腸桿菌更是評價食品衛(wèi)生的重要指標(biāo)。目前同時檢測大腸菌群和大腸桿菌的試劑主要使用5-溴-4-氯-3-引哚半乳糖苷(X-Gal)和5-溴-4-氯-3-引哚-β -D-葡萄糖苷酸(X-Gluc)兩種酶底物，成本過高，不利于普及使用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述問題，本發(fā)明提出了一種大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，本發(fā)明不但作為平皿培養(yǎng)基，亦可作為試劑片形式，并且成本低，利于普及使用。
[0004]為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，由蛋白胨20g、乳糖5g、膽汁酸鹽2g、磷酸二氫鉀
1.5g、磷酸二氫鉀4g、氯化鈉5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和瓊脂20g溶于1000ml去離子水中組成。
[0005]進(jìn)一步的，所述5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷為β -半乳糖苷酶底物。
[0006]進(jìn)一步的，所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸為β -D-半乳糖苷酶底物。
[0007]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
本發(fā)明不但作為平板培養(yǎng)基，亦可作為試劑片形式，并且成本低，利于普及使用。
【具體實施方式】
[0008]大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，由蛋白胨20g、乳糖5g、膽汁酸鹽2g、磷酸二氫鉀1.5g、磷酸二氫鉀4g、氯化鈉5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和瓊脂20g溶于1000ml去離子水中組成。
[0009]進(jìn)一步的，所述5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷為β -半乳糖苷酶底物。
[0010]進(jìn)一步的，所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸為β-D-半乳糖苷酶底物。
`[0011]本發(fā)明的原理是:
1、由蛋白胨、乳糖、膽汁酸鹽等大腸菌群所需的基礎(chǔ)營養(yǎng)以及大腸菌群選擇性物質(zhì)組成，并添加β -半乳糖苷酶底物5-溴-4-氯-3- Π引哚基半乳糖苷(X-GAL)使大腸菌群顯色，同時添加β -D-半乳糖苷酶底物4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸(MUG)使大腸桿菌菌落在紫外線照射下顯示藍(lán)色熒光的選擇性顯色培養(yǎng)基。
[0012]2、具體實施方法:蛋白胨20g、乳糖5g、膽汁酸鹽2g、磷酸二氫鉀1.5g、磷酸二氫鉀4g、氯化鈉5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物lg、瓊脂20g溶于1000ml去離子，高溫高壓滅菌后制作大腸菌群及大腸桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基。
[0013]3、取臨床分離大腸桿菌菌株7株、大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC25922、臨床分離克雷伯氏菌3株、陰溝腸桿菌2株、金黃色葡萄球菌2株、草綠色鏈球菌3株、表皮葡萄球菌I株、頭皮葡萄球菌2株接種，37°C培養(yǎng)24小時。包括8株大腸桿菌的大腸菌群顯示淡青色菌落，照射偽幣鑒別用紫外線燈8株大腸桿菌均顯示藍(lán)色熒光，革蘭氏陽性菌生長不佳，菌落無色透明未顯色。[0014]4、該培養(yǎng)基不但作為平皿培養(yǎng)基，亦可作為試劑片形式。
【權(quán)利要求】
1.大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，其特征在于:由蛋白胨20g、乳糖5g、膽汁酸鹽2g、磷酸二氫鉀1.5g、磷酸二氫鉀4g、氯化鈉5g、5-溴-4-氯-3-吲哚基半乳糖苷0.lg、4_甲基扇型酮葡萄糖苷酸0.lg、天冬氨酸lg、酪蛋白氨基酸0.5g、酵母提取物Ig和瓊脂20g溶于1000ml去離子水中組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，其特征在于:所述5-溴-4-氯-3- Π引哚基半乳糖苷為β -半乳糖苷酶底物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸菌群及大腸桿菌檢測培養(yǎng)基，其特征在于:所述4-甲基扇型酮葡萄糖苷酸 為β-D-半乳糖苷酶底物。
【文檔編號】C12Q1/04GK103725746SQ201210380855
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2012年10月10日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月10日
【發(fā)明者】金京勛, 肖香, 吳小微 申請人:蘇州四同醫(yī)藥科技有限公司